1、临床常用免疫学检查临床常用免疫学检查免疫功能检查免疫功能检查 *血清免疫球蛋白检测 *血清补体检测 *细胞免疫检测病毒肝炎血清标志物检查病毒肝炎血清标志物检查感染免疫检查感染免疫检查 细菌感染免疫检测 病毒感染免疫检测 其它(寄生虫 感染、性病等)肿瘤标志物检查肿瘤标志物检查 蛋白质类肿瘤标志物 糖脂类肿瘤标志物 酶类肿瘤 标志物自身抗体检查自身抗体检查 *抗核抗体检测 *类风湿因子测定 *抗心磷脂抗体测定 *抗中性粒细胞胞浆抗体测定 抗某种组织/细胞的抗体检测 移植免疫检查移植免疫检查 细胞因子检查细胞因子检查 *I L-2、6、8、10 *TNF IFN *血清免疫球蛋白检测 *血清补体检
2、测 *细胞免疫检测 (一)免疫球蛋白(一)免疫球蛋白 (Immunoglobulin,Ig)免疫球蛋白指具有活免疫球蛋白指具有活性的抗体活性和抗体样结性的抗体活性和抗体样结构的球蛋白,由浆细胞产构的球蛋白,由浆细胞产生,存在于体液,血液,生,存在于体液,血液,外分泌液和一些细胞膜上。外分泌液和一些细胞膜上。用超速离心、免疫电泳方法可将免疫球蛋白分为五类:IgG最多、占70%80%抗体活性 IgA血清型和分泌型两种 IgM是有效的凝聚和溶解细胞的因子 IgD功能尚不完全清楚 IgE与变态反应有关 正常值:单向免疫扩散法 IgG 7.016.6 g/L IgA 0.73.5g/L IgM 0.52
3、.6 g/L ELISA法 IgE 0.10.9mg/L 多克隆增高:IgG IgA IgM均增高 单克隆增高:仅某一种Ig增高而其他种不增高 临床意义临床意义 增高增高:多克隆性增高慢性感染、慢性肝病、自身免疫性疾病 单克隆性增高免疫增殖性疾病 临床意义临床意义 减低减低:先天性先天性无(低)丙种球蛋白血症、重链病、轻链病 后天性肾病综合征、病毒感染、免疫抑制剂应用 IgEIgE测定测定 IgE为亲细胞抗体,在型变态反应性疾病的发病中起重要作用。临床意义:临床意义:IgE增高最多见于型变态反应性疾病,如支气管哮喘、过敏性鼻炎、特应性皮炎、荨麻疹等;非过敏性疾病如寄生虫病、肝炎、SLE、类风湿
4、关节炎及多发性骨髓瘤(IgE 型)等。M蛋白(蛋白(Monocolonal protein):M蛋白是一种单克隆B淋巴细胞(浆细胞)异常增殖时产生的免疫球蛋白分子或其片段(如轻链、重链等),它们与正常免疫球蛋白相同结构和电泳迁移速度,但不具有抗体活性。临床意义临床意义 多发性骨髓瘤(multiple myeloma,MM)巨球蛋白血症(Waldenstrom症)重链病、轻链病、半分子病 其它:恶性淋巴瘤(lymphoma)、良性M蛋白血症(二)血清补体(complement,C)参与灭活病原体的免疫反应 也可破坏自身组织或自身细胞造成免疫损伤 总补体溶血活性检测总补体溶血活性检测 (total
5、 hemolytic complement activity,CH50)正常值:正常值:50100 ku/L 临床意义临床意义:减低减低 肾小球肾炎、自身免疫性疾病 (如系统性红斑狼疮 Systemic lupus erythematosis,SLE)、感染性心内膜炎(subacute infecitive endocarditis,SBE)、肝病等 增高增高急性炎症、组织损伤、肿瘤等补体补体C3检测检测:C3在补体系统各成分中含量最多,是传统途径和旁路途径被激活的关键物质 正常值正常值:0.81.5 g/L 补体补体C C4 4检测:检测:C4代表补体传统活化途径,在补体活化、促进吞噬、防止
6、免疫复合物沉着和中和病毒等方面发挥作用 正常值正常值:0.20.6 g/L临床意义:临床意义:参见参见CH50减低和增高的临床意义减低和增高的临床意义 C3增高在急性炎性反应更敏感增高在急性炎性反应更敏感 C C4 4对判断免疫复合物形成时补体消耗性减低对判断免疫复合物形成时补体消耗性减低 更有意义更有意义细胞免疫检测细胞免疫检测T T细胞免疫检测细胞免疫检测B B细胞免疫检测细胞免疫检测自然杀伤细胞检测自然杀伤细胞检测中性粒细胞吞噬、杀菌功能检测中性粒细胞吞噬、杀菌功能检测 T T细胞分化抗原测定细胞分化抗原测定 (免疫荧光法)免疫荧光法)CD3总T细胞 正常值:61%8585%CD4T辅助
7、细胞(TH)正常值:28%5858%CD8T抑制细胞(TS)正常值:19%4848%CD4/CD8 1.660.330.33 (1)临床意义:临床意义:CDCD3 3 降低降低自身免疫性疾病(自身免疫性疾病(SLESLE、类风湿关节炎)、类风湿关节炎)CDCD4 4/CD/CD8 8增高增高自身免疫性疾病(如自身免疫性疾病(如SLESLE、类风湿关节炎、多、类风湿关节炎、多发性硬化症等)及器官移植后排异反应发性硬化症等)及器官移植后排异反应 CDCD4 4/CD/CD8 8减低减低见于艾滋病、恶性肿瘤、传染性单核细胞增多见于艾滋病、恶性肿瘤、传染性单核细胞增多症、巨细胞病毒感染、血吸虫病等。症
8、、巨细胞病毒感染、血吸虫病等。CDCD3 3 CD CD4 4 CD CD8 8均增高均增高T T细胞型淋巴细胞恶性疾病细胞型淋巴细胞恶性疾病 B B细胞分化抗原测定:细胞分化抗原测定:应用CD19、CD20、CD21、CD22 和CD40等单克隆抗体标记单个核细胞B细胞,通过免疫荧光或流式细胞术进行检测。CD19 为全部 B细胞共有的表面标志,B细胞活化后不消失,是最重要的 B细胞标记分子。参考值:参考值:CD19 11.743.73%临床意义临床意义 升高升高B细胞型急性淋巴细胞性白血病、慢性淋巴细 胞白血病、Burkitt淋巴瘤等 减低减低无丙种球蛋白血症、长期免疫抑制剂应用后 自然杀伤
9、细胞免疫检测自然杀伤细胞免疫检测它不依赖抗体和补体即能杀伤靶细胞 自然杀伤细胞(NK)介导天然免疫应答,自然杀伤细胞(NK)活性可作为判断机体抗肿瘤和抗病毒感染的指标之一 参考值参考值:NK细胞活性(自然杀伤)47.6%76.8%临床意义临床意义:升高:升高:常见于病毒感染早期,Down综合症,器官移植后,使用免疫增强剂(如干扰素)治疗后。减低:减低:常见于恶性肿瘤,重症联合免疫缺陷病,AIDS和免疫抑制剂使用者等。蛋白质类肿瘤标志物、糖脂类肿瘤标志物、酶类肿瘤标志物AFP胎儿早期肝脏合成的糖蛋白,当干细胞或生殖腺胚胎细胞恶变,基因激活,细胞合成AFP增加。参考值:25ug/l意义:1:原发性
10、肝癌,300 ug/l;10%阴性。2:生殖腺胚胎癌、胃癌、胰腺癌可升高。3:慢性肝炎、肝硬化可升高(200ug/l)。4:孕妇可升高CEA胎儿早期消化管和一些组织合成,孕6月后减少,出生后极低。参考值:15ug/l意义:1:90%胰腺癌、74%结肠癌、60%乳腺癌常超 过60ug/l。2:胰腺炎、结肠炎、肝脏疾病、哮喘可升高。3:慢性肝炎、肝硬化可升高(200ug/l)。4:动态观察,疾病活动好转类风湿因子(类风湿因子(rheumatoid factor,RF)RF是变性IgG刺激机体产生的一种自身抗体,主要存在于类风湿关节炎患者的血清和关节液内。RF可分为IgM型、IgG型、IgA型等,用
11、胶乳凝集法测出的主要是IgM型,用ELISA法可进一步检出其它型RF-IgG RF-IgA RF-IgM参考值:参考值:阴性 1:40为阳性 临床意义临床意义:ANA阳性最多见于未治疗的SLE,阳性率达80%100%(活动期几乎100%阳性)ANA阳性是结缔组织病的标志,如:混合性结缔组织病(mixed connective tissue disease,MCTD)100%阳性 系统性硬化病(systemic sclerosis,SSc)85%95%阳性、多发性肌炎(polymyositis,PM)30%50%阳性,此外,类风湿性关节炎(rheumatoid arthritis,RA)、干燥综
12、合症(Sjogren Syndrom,SS)等可出现阳性 其它疾病,如原发性胆汁性肝硬化、慢性肝病、慢性感染、肿瘤等也可出现阳性2.2.抗脱氧核糖核酸抗体抗脱氧核糖核酸抗体 (anti-DNA antibodyanti-DNA antibody,抗,抗DNADNA)其中抗双链DNA(double stranded-DNA,ds-DNA)抗体的靶抗原是细胞核中的DNA双螺旋结构,它的检测有临床的重要性 正常结果正常结果:阴性 临床意义临床意义:抗ds-DNA抗体阳性见于活动期SLE,阳性率70%90%,为SLE特异性抗体,特别在并发狼疮性肾炎时起重要作用,其它风湿病中抗ds-DNA抗体也可阳性
13、3.3.可提取性核抗原多肽抗体谱可提取性核抗原多肽抗体谱 ENA(extractable antinuclear antigen)由多种相对分子质量不同的多肽构成,利用免疫印迹试验可对这些抗原的自身抗体进行检测 ENA多肽 7项是目前临床最多应用于风湿病检查的项目 抗心磷脂抗体抗心磷脂抗体(anticardiolipin antibody,ACA)抗磷脂抗体是一组针对各种带负电荷磷脂的自身抗体,其中以ACA可作为代表。正常参考:正常参考:阴性 ELISA法测定2.1为阳性 临床意义:临床意义:ACA阳性见于SLE、类风湿关节炎、干燥综合症等风湿病,抗磷脂综合症,以及 肿瘤、感染等。抗中性粒细胞
14、胞浆抗体抗中性粒细胞胞浆抗体(ANCA)(anti-neutrophil cytoplasmic antibody)ANCA是存在于系统性血管炎患者血清中的一是存在于系统性血管炎患者血清中的一种自身抗体,可分为胞浆型(种自身抗体,可分为胞浆型(C-ANCA)和核周)和核周型(型(P-ANCA)临床意义:C-ANCA(+)-韦格纳肉芽肿(WG)P-ANCA(+)-血管炎性肾炎 多动脉炎 变应性肉芽肿血管炎 (Churg-Strauss 综合症)自身免疫性肝病 抗组织和细胞抗体检测抗组织和细胞抗体检测 抗线粒体抗体抗线粒体抗体(anti-mitochondria antibody,AMA)抗甲状腺
15、球蛋白抗体抗甲状腺球蛋白抗体(anti-thyroglobulin antibody,TG)抗甲状腺微粒体抗体抗甲状腺微粒体抗体(anti-thyroid mivrosome ntibody,TM)抗平滑肌抗体抗平滑肌抗体(antismooth muscle antibody,ASMA)如AMA、ASMA在原发性胆汁性肝硬化、慢性肝病、自身免疫性肝炎中常为阳性 细胞因子(cytokine)是由活化的免疫细胞和某些基质细胞分泌的,介导和调节免疫、炎症反应的小分子多肽。IL-2、IL-6、IL-8、IL-10和TNF、IFNp免疫功能检查免疫功能检查 p肿瘤标志物检测肿瘤标志物检测p自身免疫检测自
16、身免疫检测p器官与骨髓移植的检测器官与骨髓移植的检测 p感染免疫检测感染免疫检测 p病毒肝炎血清标志物病毒肝炎血清标志物p其它其它 循环免疫复合物检测、冷球蛋白检测、丙种反应性蛋白检测(一)循环免疫复合物(一)循环免疫复合物 (circulating imunocomplex,CIC)体内游离抗原与相应的抗体形成抗原抗体复合物,其中分子量小的复合物(19S)可在血循环中被检测 CIC增高见于自身免疫病、感染、肿瘤、移植、变态反应等(二)丙种反应性蛋白(二)丙种反应性蛋白(C-reactive protein,CRP)CRP是一种由肝脏合成的,能与肺炎双球菌C多糖体起反应的急性时相反应蛋白,它能结合多种细菌、真菌、原虫以及核酸、磷脂酰胆碱等,有激活补体、促进吞噬和调节免疫的作用 参考值参考值:8mg/L 临床意义临床意义:CRP升高见于化脓性感染、组织坏死、恶性肿瘤、结缔组织病、急性排斥反应等,可鉴别细菌性和非细菌性感染(细菌性感染升高,非细菌性感染不升高),并常用作为鉴别风湿热活动期和稳定期的敏感指标