1、1主要内容主要内容 AST(谷草转氨酶)(谷草转氨酶)、ALT(谷丙转氨酶)(谷丙转氨酶)D-BIL(直接胆红素)(直接胆红素)、T-BIL(总胆红素)总胆红素)TP(总蛋白)总蛋白)、ALB(白蛋白)(白蛋白)、GLOB (球蛋白)(球蛋白)ALP(碱性磷酸酶)(碱性磷酸酶)GGT(-谷氨酰基转移酶)谷氨酰基转移酶)CHE(胆碱酯酶)(胆碱酯酶)TBA(总胆汁酸)(总胆汁酸)PALB(前白蛋白)(前白蛋白)2肝脏的代谢功能肝脏的代谢功能 肝脏的生物转化功能肝脏的生物转化功能 肝脏的分泌与排泄功能肝脏的分泌与排泄功能3接受来自消化道的各种物质接受来自消化道的各种物质合成除合成除-球蛋白以外几乎
2、所有的血浆蛋白球蛋白以外几乎所有的血浆蛋白合成胆汁酸合成胆汁酸加工和处理体内产生或外界进入的非营养加工和处理体内产生或外界进入的非营养物质物质肝脏是多种激素在发挥调节作用后降解的肝脏是多种激素在发挥调节作用后降解的 主要部位主要部位4某些生物活性物质某些生物活性物质代谢终产物代谢终产物外界异物外界异物氧化、还原氧化、还原水解水解剩余物质剩余物质结合结合葡萄糖醛酸葡萄糖醛酸硫酸硫酸氨基酸氨基酸增加溶解度增加溶解度排出体外排出体外甲基化甲基化乙酰化乙酰化排出体外排出体外排出体外排出体外5胆固醇胆固醇合成合成初级胆汁酸初级胆汁酸胆酸鹅脱氧胆酸胆汁胆汁结合形式大部分小肠小肠回肠末端回肠末端门静脉95%
3、重吸收结合胆汁酸结合胆汁酸经细菌分解形成次级胆汁酸6是血清所含各种蛋白质的总和是血清所含各种蛋白质的总和可一定程度反映肝脏合成和储备功能可一定程度反映肝脏合成和储备功能测定方法测定方法:(推荐)双缩脲比色法:(推荐)双缩脲比色法 7测定原理:测定原理:在碱性条件下,蛋白质多肽链中的肽在碱性条件下,蛋白质多肽链中的肽键与铜离子(键与铜离子(Cu2+)络合形成紫红色化合)络合形成紫红色化合物物参考值参考值;6060 80g/L80g/L8生理性波动:生理性波动:由于体液分布原因,长久卧床者比直立活由于体液分布原因,长久卧床者比直立活动时约低动时约低45g/L;新生儿比成人低新生儿比成人低58g/L
4、;60岁以上的老年人比成人低岁以上的老年人比成人低2g/L增高:增高:血液浓缩血液浓缩:导致导致TP相对增高:如严重腹泻、相对增高:如严重腹泻、呕吐、高热时急剧失水、休克、慢性肾上呕吐、高热时急剧失水、休克、慢性肾上腺皮质功能减退腺皮质功能减退 血浆蛋白质合成增加:血浆蛋白质合成增加:主要见于球蛋主要见于球蛋白合成增加、多发性骨髓瘤患者白合成增加、多发性骨髓瘤患者9减低减低:血液稀释血液稀释:导致导致TP浓度相对减低:静浓度相对减低:静脉注射过多低渗溶液或各种原因引起的水、脉注射过多低渗溶液或各种原因引起的水、钠潴留钠潴留 摄入不足或消耗增加:摄入不足或消耗增加:如食物中长如食物中长期缺乏蛋白
5、质、长期消化不良或某些消耗期缺乏蛋白质、长期消化不良或某些消耗性疾病(结核、甲亢、恶性肿瘤等)性疾病(结核、甲亢、恶性肿瘤等)蛋白质丢失:蛋白质丢失:严重烧伤(血浆大量严重烧伤(血浆大量 丢失)、大量失血、肾病综合症时大丢失)、大量失血、肾病综合症时大量蛋白尿或溃疡性结肠炎(肠道长期丢失量蛋白尿或溃疡性结肠炎(肠道长期丢失蛋白质)蛋白质)10由肝实质合成,是血浆中含量最多的蛋白由肝实质合成,是血浆中含量最多的蛋白质,占质,占TP的的40%60%内源性氨基酸源的营养源,具有缓冲酸碱内源性氨基酸源的营养源,具有缓冲酸碱的能力的能力血浆中重要的载体(胆红素、胆汁酸盐、血浆中重要的载体(胆红素、胆汁酸
6、盐、前列腺素、类固醇激素,金属离子等)前列腺素、类固醇激素,金属离子等)维持血浆胶体渗透压,其在体液中的维持血浆胶体渗透压,其在体液中的 浓度浓度可作为各种膜屏障完好的指标可作为各种膜屏障完好的指标(分子量较小(分子量较小66400)11溴钾酚绿法溴钾酚绿法(BCG法法):):溴钾酚绿是一溴钾酚绿是一种阴离子染料,在种阴离子染料,在PH4.2的缓冲液中,的缓冲液中,在非离子去垢剂聚氧乙烯月桂醚存在在非离子去垢剂聚氧乙烯月桂醚存在时,可与白蛋白结合成蓝绿色复合物,时,可与白蛋白结合成蓝绿色复合物,溶液由黄色变成蓝绿色,在溶液由黄色变成蓝绿色,在660nm时比时比色色参考值:参考值:3550g/L
7、12受饮食中蛋白质的摄入量影响,可在一定程度受饮食中蛋白质的摄入量影响,可在一定程度上作为个体营养状态的评价指标上作为个体营养状态的评价指标增高:增高:严重脱水严重脱水减低:减低:合成降低:急、慢性肝病合成降低:急、慢性肝病 营养或吸收不良营养或吸收不良 分解或代谢增加:大面积组织损伤或分解或代谢增加:大面积组织损伤或 炎症炎症 消耗性疾病:严重感染、恶性肿瘤等消耗性疾病:严重感染、恶性肿瘤等 异常丢失:肾病综合症、慢性肾炎异常丢失:肾病综合症、慢性肾炎 分布异常:门静脉高压腹水分布异常:门静脉高压腹水13球蛋白增高:球蛋白增高:多见于炎症、免疫系统疾病多见于炎症、免疫系统疾病 和肿瘤和肿瘤
8、细菌、病毒、寄生虫引起的急慢性细菌、病毒、寄生虫引起的急慢性 感染,如结核、麻风病、血吸虫病、病毒感染,如结核、麻风病、血吸虫病、病毒性肝炎等性肝炎等 自身免疫性疾病:系统性红斑疮、风自身免疫性疾病:系统性红斑疮、风湿、类风湿等湿、类风湿等 多发性骨髓瘤和淋巴瘤多发性骨髓瘤和淋巴瘤14球蛋白降低:球蛋白降低:见于血液稀释、严重营见于血液稀释、严重营养不良、胃肠道疾病养不良、胃肠道疾病白蛋白与球蛋白比值白蛋白与球蛋白比值(A/G)参考值:参考值:12:1 临床上常用来衡量肝脏疾病的临床上常用来衡量肝脏疾病的严重程度严重程度 比值倒置比值倒置:A/G1时,是时,是慢性慢性 肝炎或肝硬化的特征之一肝
9、炎或肝硬化的特征之一15 各器官中按含量多少依次为:各器官中按含量多少依次为:肝脏、肾脏、心脏、肝脏、肾脏、心脏、骨骼肌骨骼肌等。等。在肝细胞中主要存在于细胞质中在肝细胞中主要存在于细胞质中,只有少量,只有少量在线粒体中,肝细胞中在线粒体中,肝细胞中ALT活性比血清高活性比血清高2850倍倍。各器官中按含量多少依次为:各器官中按含量多少依次为:心脏、肝脏、骨骼肌、心脏、肝脏、骨骼肌、肾脏肾脏等。等。在肝细胞中约在肝细胞中约80%存在于线粒体中存在于线粒体中,约,约20%存存在于胞质中,血清中在于胞质中,血清中AST和和ALT的活性比值约为的活性比值约为1.15 AST 40U/L(37)(酶速
10、率法酶速率法)ALT 40U/L(37)(酶速率法酶速率法)AST/ALT 1.15左右16检测原理检测原理ALT+L-丙氨酸丙氨酸+-酮戊二酸酮戊二酸 丙酮酸丙酮酸+L-谷氨酸谷氨酸 丙酮酸丙酮酸+NADH L-乳酸乳酸+NAD+在在340nm处检测处检测NADH的吸收峰来推算血的吸收峰来推算血清中清中ALT的浓度的浓度LDH17检测原理检测原理AST 天门冬氨酸天门冬氨酸 -酮戊二酸酮戊二酸 草酰乙酸草酰乙酸L-谷氨酸谷氨酸草酰乙酸草酰乙酸+NADH L-苹果酸苹果酸+NAD+在在340nm处处检测检测NADH的吸收峰来推算的吸收峰来推算血清中血清中AST的浓度的浓度MDH181 1、急性
11、病毒性肝炎急性病毒性肝炎 ALT、AST均升高均升高,急性肝炎早期急性肝炎早期,AST/ALT60%30附注:应空腹采血,避免脂血引起反应液浑浊,应空腹采血,避免脂血引起反应液浑浊,轻度溶血对本法无影响,但是明显溶血可轻度溶血对本法无影响,但是明显溶血可使测定结果偏低。使测定结果偏低。血液标本和标准液应避血液标本和标准液应避免阳光直照,防止胆红素的光氧化。免阳光直照,防止胆红素的光氧化。胆红胆红素对光的敏感度与温度有关,血标本应避素对光的敏感度与温度有关,血标本应避光置冰箱保存。标本保存冰箱可稳定光置冰箱保存。标本保存冰箱可稳定3 3天,天,-7070暗处保存可稳定暗处保存可稳定3 3个月。个
12、月。31由肝细胞合成,在电泳分离中(由肝细胞合成,在电泳分离中(PH8.6)移速)移速比白蛋白快,半寿期很短,仅比白蛋白快,半寿期很短,仅12小时。除可作小时。除可作为组织修补的材料为组织修补的材料,还是一种运载蛋白,可以还是一种运载蛋白,可以和和T3、T4结合,还可以和视黄醇结合而具有结合,还可以和视黄醇结合而具有运载维生素运载维生素A A的作用。的作用。32检测原理:检测原理:血清中的血清中的PA与抗与抗PA抗体在液抗体在液相中反应成抗原抗体复合物,使反应液呈相中反应成抗原抗体复合物,使反应液呈现浊度。当一定量抗体存在时,浊度与血现浊度。当一定量抗体存在时,浊度与血清中清中PA(抗原)的含
13、量成正比,利用散射(抗原)的含量成正比,利用散射比浊或透射比浊技术,与同样处理的比浊或透射比浊技术,与同样处理的PA标标准比较,求得样品中准比较,求得样品中PA 含量。含量。参考值:散射比浊法:散射比浊法:22 40 mg/dL33临床意义临床意义:诊断和监测营养不良:诊断和监测营养不良:血清血清P-ALBP-ALB在无感在无感染的情况下,是染的情况下,是儿童营养不良的灵敏指标。儿童营养不良的灵敏指标。诊断肝病:在肝炎早期,诊断肝病:在肝炎早期,其浓度下降往其浓度下降往往早于其他血清蛋白成分的改变。往早于其他血清蛋白成分的改变。有研究表明,有研究表明,动态随访测定血清动态随访测定血清P-ALB
14、P-ALB对重型肝炎预后有较大的对重型肝炎预后有较大的参考价值。参考价值。P-ALBP-ALB明显上升,往往预后良好,明显上升,往往预后良好,P-P-ALBALB持久下降,预后险恶。持久下降,预后险恶。是一种负性急性时相反应蛋白,急性时是一种负性急性时相反应蛋白,急性时相反应时下降。相反应时下降。有研究表明,有研究表明,P-ALBP-ALB可以作为癌症的筛可以作为癌症的筛 选指标。选指标。34附注:血清蛋白质的浓度用血清蛋白质的浓度用“g/L”表示,因为血清表示,因为血清中各种蛋白质的相对分子质量不同,所以中各种蛋白质的相对分子质量不同,所以不能用不能用mol/L 表示。表示。本法属浊度反应,
15、试剂有任何可见的混浊,本法属浊度反应,试剂有任何可见的混浊,应弃去不用,否则对结果有较大影响。应弃去不用,否则对结果有较大影响。血清标本如不能及时测定,应置血清标本如不能及时测定,应置28 冰箱冰箱保存,可稳定保存,可稳定2天。天。35碱性磷酸酶(碱性磷酸酶(ALP)的测定)的测定一组在一组在pH 910.5的碱性环境中能催化有的碱性环境中能催化有机磷酸酯水解的酶。血清机磷酸酯水解的酶。血清ALP主要来源主要来源于于肝脏、骨骼肝脏、骨骼,少部分来自小肠和妊娠,少部分来自小肠和妊娠期胎盘组织。肝细胞产生的期胎盘组织。肝细胞产生的ALP一般从一般从胆道排入小肠。胆道排入小肠。36测定方法测定方法(
16、酶动力法):(酶动力法):以磷酸对硝基以磷酸对硝基酚为底物,酚为底物,2-氨基氨基-2-甲基丙醇为缓冲液甲基丙醇为缓冲液对硝基酚磷酸盐在对硝基酚磷酸盐在ALP的作用下产对硝的作用下产对硝基酚和磷酸盐,在基酚和磷酸盐,在405nm除检测对硝基除检测对硝基酚的吸收峰,计算出血清中的浓度。酚的吸收峰,计算出血清中的浓度。参考值:参考值:1 12 岁岁 500 U/L;12 15 岁岁 750 U/L;25 岁以上岁以上 40 150 U/L。37临床意义:临床意义:生理性增高生理性增高:妊娠妊娠3个月个月 即可产生即可产生ALP 9个月个月 到达高峰到达高峰(可为同龄妇女的(可为同龄妇女的3-4倍)
17、倍)分娩后分娩后1个月个月 恢复正常恢复正常 新生儿、儿童、青少年骨骼生长期比成人要高新生儿、儿童、青少年骨骼生长期比成人要高 15岁岁 (第一个高峰)是成人的(第一个高峰)是成人的23倍倍 1018岁岁 (第二个高峰)是成人的(第二个高峰)是成人的45倍倍 肝胆管梗阻:肝胆管梗阻:ALP升高升高。(ALP分布在肝细胞的血窦侧和毛细胆分布在肝细胞的血窦侧和毛细胆 管侧的微绒管侧的微绒 毛上,经胆汁排入小肠。毛上,经胆汁排入小肠。梗阻性黄疸时,由于肝内、外梗阻胆梗阻性黄疸时,由于肝内、外梗阻胆 汁排出不畅,再加上胆汁具有表面活汁排出不畅,再加上胆汁具有表面活 性剂作用可洗脱性剂作用可洗脱ALP返
18、流入血,使血返流入血,使血 中浓度升高)中浓度升高)38 肝炎或肝硬化:可轻度升高,但很少超肝炎或肝硬化:可轻度升高,但很少超 过上过上 限限3倍倍 原发或继发性肝癌:明显升高原发或继发性肝癌:明显升高。(肿瘤组织或炎症刺激肝细胞产生(肿瘤组织或炎症刺激肝细胞产生ALP)骨骼系统疾病:可有不同程度的升高骨骼系统疾病:可有不同程度的升高 (骨折恢复(骨折恢复 期、佝偻病转移性骨肿瘤)期、佝偻病转移性骨肿瘤)其他疾病:甲亢、肢端肥大症等可轻度其他疾病:甲亢、肢端肥大症等可轻度 升高升高39附注:血清置室温血清置室温(25 )ALP活性显示轻度升高。例如活性显示轻度升高。例如室温室温6 h,酶活性约
19、增高,酶活性约增高1%,置,置1-4天,酶活性天,酶活性增高增高3%-6%。血清贮存冰箱。血清贮存冰箱(4)酶活性亦出现酶活性亦出现缓慢地升高。冰冻血清缓慢地升高。冰冻血清ALP 活性降低,但当血清活性降低,但当血清复温后,酶活性会慢慢恢复。质控血清或冻干质复温后,酶活性会慢慢恢复。质控血清或冻干质控血清亦呈现类似的控血清亦呈现类似的ALP 活性升高现象活性升高现象一般用血清或肝素抗凝血浆测定一般用血清或肝素抗凝血浆测定 ALP 活性。活性。抗凝抗凝剂如草酸盐、柠檬酸盐和剂如草酸盐、柠檬酸盐和EDTANa2 能抑制能抑制ALP 的活性,不能使用这类抗凝剂的血浆做的活性,不能使用这类抗凝剂的血浆
20、做ALP的活的活性测定性测定ALP 活性与血清在反应液中所占体积分数有关。活性与血清在反应液中所占体积分数有关。已发现当血清体积分数从已发现当血清体积分数从1/26 降低到降低到1/51时,所时,所 测出的酶活性随之增高测出的酶活性随之增高;但低于但低于1/51 后,后,酶酶 活性没有进一步增加。这一效应的原因还活性没有进一步增加。这一效应的原因还 不清楚,可能是因为在高稀释度下不清楚,可能是因为在高稀释度下ALP 多多 聚体解聚所致聚体解聚所致40-谷氨酰转肽酶的测定谷氨酰转肽酶的测定-谷氨酰转肽酶是在氨基酸吸收中,参与谷氨酰转肽酶是在氨基酸吸收中,参与-谷氨基循环的一个重要的酶。血清中谷氨
21、基循环的一个重要的酶。血清中GGT主要来自主要来自肝脏肝脏,少量来自肾脏、胰,少量来自肾脏、胰腺。腺。GGT在肝脏中主要由肝细胞的线粒在肝脏中主要由肝细胞的线粒体产生,体产生,90%为膜结合型为膜结合型。41测定原理:测定原理:以以-谷氨酸谷氨酸-3 3-羧基羧基-4 4-对硝基苯胺和双甘肽对硝基苯胺和双甘肽为底物,为底物,GGTGGT作用于作用于-谷氨酸谷氨酸-3-3-羧基羧基-4 4-对硝基苯对硝基苯胺和双甘肽产生胺和双甘肽产生-谷氨酸双甘肽和谷氨酸双甘肽和5 5-氨基氨基-2 2-硝酸硝酸苯甲酸盐,在苯甲酸盐,在450nm450nm处检测吸收峰,计算处检测吸收峰,计算GGTGGT的浓度。
22、的浓度。-谷氨酸谷氨酸-3 3-羧基羧基-4 4-对硝基苯胺对硝基苯胺 +双甘肽双甘肽 -谷氨酸双甘肽谷氨酸双甘肽 +5+5-氨基氨基-2 2-硝酸苯甲酸盐硝酸苯甲酸盐参考范围:参考范围:男性:男性:11U/L11U/L 50U/L50U/L 女性:女性:7U/L7U/L 32U/L32U/LGGT42临床意义:临床意义:生理性变化:新生儿至生理性变化:新生儿至6个月以内的小个月以内的小婴儿明显高于成人婴儿明显高于成人35倍。倍。病毒性肝炎:急性肝炎肝细胞可合成病毒性肝炎:急性肝炎肝细胞可合成和释放和释放GGT,是其在血清中的浓度轻,是其在血清中的浓度轻度升高,变化一般与度升高,变化一般与AL
23、T平行,但是平行,但是幅度较低幅度较低。(若在恢复期其他肝功能指标都已正常,。(若在恢复期其他肝功能指标都已正常,但但GGT仍未复原,提示肝炎尚未痊愈,若反复波动或长期仍未复原,提示肝炎尚未痊愈,若反复波动或长期维持较高水平,则应考虑肝炎有慢性化趋势)维持较高水平,则应考虑肝炎有慢性化趋势)43原发性或转移性肝癌:增高原发性或转移性肝癌:增高。GGT和和AFP同样具有癌胚抗原的性质,特别同样具有癌胚抗原的性质,特别是在结节性增生时出现强活性,能够是在结节性增生时出现强活性,能够反映肝内占位性病变。监测血中的反映肝内占位性病变。监测血中的GGT浓度可浓度可观察肿瘤疗效和预后观察肿瘤疗效和预后。梗
24、阻性黄疸:血中梗阻性黄疸:血中GGT升高明显,可升高明显,可达正达正 常的常的530倍。是倍。是胆汁淤积、胆道胆汁淤积、胆道梗阻最敏感的酶梗阻最敏感的酶。(梗阻时间越长、程度越重,(梗阻时间越长、程度越重,GGT上升幅度越大)上升幅度越大)44急、慢性酒精性肝炎:急、慢性酒精性肝炎:血清浓度升高,血清浓度升高,但是但是GGT升高幅度跟饮酒量没有明显升高幅度跟饮酒量没有明显的相关性。的相关性。肝硬化:肝硬化:代偿期正常,若失代偿期或代偿期正常,若失代偿期或伴有炎症、进行性纤维化则伴有炎症、进行性纤维化则GGT升高,升高,其升高程度与纤维化成正比。其升高程度与纤维化成正比。45其他:如系统性红斑狼
25、疮(其他:如系统性红斑狼疮(SLE)、单核)、单核细胞增多症等可使细胞增多症等可使GGT轻度升高。轻度升高。注:测定ALP、GGT有助于鉴别ALP的来源:GTT与ALP同时增高常源于肝脏疾病,而GGT正常,ALP升高常源于肝外疾病,如骨骼疾病。46附注:红细胞中红细胞中L-谷氨酰基移移酶含量低,溶血谷氨酰基移移酶含量低,溶血标本对测定结果影响不大标本对测定结果影响不大血清中血清中GGT 的活力,在室温或的活力,在室温或4 可稳定可稳定7d;在冷冻状态下可稳定在冷冻状态下可稳定2 个月个月47胆碱酯酶(胆碱酯酶(CHE)的测定)的测定胆碱酯酶分为两大类:真性胆碱酯酶,也胆碱酯酶分为两大类:真性胆
26、碱酯酶,也叫乙酰胆碱酯酶(叫乙酰胆碱酯酶(ACHE),存在于),存在于红细胞、红细胞、肺、脑组织、交感神经节肺、脑组织、交感神经节等处。主要是水等处。主要是水解乙酰胆碱。假性乙酰胆碱(解乙酰胆碱。假性乙酰胆碱(PCHE)存在)存在于于血清或血浆血清或血浆中,除可作用于乙酰胆碱,中,除可作用于乙酰胆碱,还可作用于其他胆碱类化合物。还可作用于其他胆碱类化合物。PCHE是一种糖蛋白,由是一种糖蛋白,由肝脏肝脏合成。含有机合成。含有机 磷的杀虫剂能抑制红细胞内的真性胆磷的杀虫剂能抑制红细胞内的真性胆 碱酯酶和血清中的假性胆碱酯酶。碱酯酶和血清中的假性胆碱酯酶。48测定原理测定原理:CHE作用于硫代丁酰
27、胆碱,最后生成作用于硫代丁酰胆碱,最后生成5,5-二硫双二硫双2-硝基苯甲酸是黄色化合物,硝基苯甲酸是黄色化合物,动态检测动态检测410nm除的最大吸收峰,计算出除的最大吸收峰,计算出血清胆碱酯酶的浓度血清胆碱酯酶的浓度硫代丁酰胆碱硫代丁酰胆碱+CHE 硫代胆碱硫代胆碱+丁酸丁酸硫代胆碱硫代胆碱+二硫代双硝基苯甲酸二硫代双硝基苯甲酸5-巯基巯基-2-硝基苯甲酸硝基苯甲酸+2-硝基苯甲酸硝基苯甲酸-5-硫基硫代硫基硫代胆碱胆碱 参考范围:参考范围:4000 12600U/L49临床意义:临床意义:肝脏疾病:在病情严重的肝炎患者中,肝脏疾病:在病情严重的肝炎患者中,PCHE降低与肝病变程度成正比。
28、慢性肝炎、降低与肝病变程度成正比。慢性肝炎、肝硬化、肝癌时如肝硬化、肝癌时如PCHE持续降低则提示预持续降低则提示预后不良。后不良。口服避孕药或雌激素时,血清口服避孕药或雌激素时,血清PCHE会降会降低低营养不良、有机磷中毒血清营养不良、有机磷中毒血清PCHE会降低会降低肥胖、脂肪肝、甲亢等血清肥胖、脂肪肝、甲亢等血清PCHE会升高会升高50附注:附注:用血清或肝素血浆。轻度溶血不干扰,但用血清或肝素血浆。轻度溶血不干扰,但必须离心去除红细胞及影细胞。标本如无必须离心去除红细胞及影细胞。标本如无菌,菌,PCHE 在室温可稳定数十天在室温可稳定数十天,-20稳定稳定3 年年血清经稀释后,血清经稀
29、释后,PCHE 易失活,如需稀释易失活,如需稀释必须在用前进行。必须在用前进行。51总胆汁酸(总胆汁酸(TBA)的测定)的测定胆汁酸在肝内合成、分泌、加工、转化。胆汁酸在肝内合成、分泌、加工、转化。是胆汁的主要成分,当肝细胞损伤或胆道是胆汁的主要成分,当肝细胞损伤或胆道阻塞时,会引起胆汁酸代谢障碍,出现血阻塞时,会引起胆汁酸代谢障碍,出现血清胆汁酸增高清胆汁酸增高 。测定血清中总胆汁酸可以作为测定血清中总胆汁酸可以作为判断肝胆系判断肝胆系统正常与否的重要信息统正常与否的重要信息。血清中。血清中TBATBA的诊断的诊断价值已得到广泛重视,它不仅用于临床诊价值已得到广泛重视,它不仅用于临床诊 断,
30、而且还能反映病情和估计疾病预后。断,而且还能反映病情和估计疾病预后。52测定原理:循环酶法测定原理:循环酶法(第五代)(第五代)胆汁酸被胆汁酸被3-羟基类固醇脱氢酶及羟基类固醇脱氢酶及-硫代烟酰胺嘌呤二核苷酸氧化型特硫代烟酰胺嘌呤二核苷酸氧化型特异性的氧化,生成的异性的氧化,生成的3-酮类固醇在酮类固醇在3羟基类固醇脱氢酶及羟基类固醇脱氢酶及-硫代烟酰胺嘌硫代烟酰胺嘌呤二核苷酸还原型存在下,生成胆汁呤二核苷酸还原型存在下,生成胆汁酸及酸及-硫代烟酰胺嘌呤二核苷酸氧化硫代烟酰胺嘌呤二核苷酸氧化型型。参考值参考值:015mol/L53临床意义:临床意义:急性肝炎:在肝实质细胞病变时,患急性肝炎:在
31、肝实质细胞病变时,患者的胆汁酸水平升高者的胆汁酸水平升高慢性活动性肝炎:血清胆汁酸水平升慢性活动性肝炎:血清胆汁酸水平升高高(由于门由于门-腔静脉旁路的形成,胆汁酸不再局限于肝肠腔静脉旁路的形成,胆汁酸不再局限于肝肠循环中循环中,胆汁酸可以直接进入腔静脉导致分布异常。)胆汁酸可以直接进入腔静脉导致分布异常。)胆汁淤积综合症:血清胆汁酸升高胆汁淤积综合症:血清胆汁酸升高 (肝内外胆汁淤积,胆汁分泌障碍,不能有效的排出胆汁(肝内外胆汁淤积,胆汁分泌障碍,不能有效的排出胆汁酸)酸)54附注:由于血清中由于血清中TBA 含量低,样品中存在干扰含量低,样品中存在干扰物质的影响相对较大,其中主要为乳酸脱物
32、质的影响相对较大,其中主要为乳酸脱氢酶氢酶(LDH)。由由LDH 生成的生成的NADH 往往比往往比TBA 生成的量要大得多。生成的量要大得多。因此,测定前除因此,测定前除去血清中去血清中LDH 的影响至关重要。方法有的影响至关重要。方法有血清血清67 加温加温30 min加草氨酸作为加草氨酸作为LDH 封闭剂封闭剂碱或酸处理碱或酸处理用丙酮酸钠抑制用丙酮酸钠抑制LDH 活性。上述四类方法中,以活性。上述四类方法中,以丙酮酸钠丙酮酸钠抑制法抑制法最好,可免去前处理步骤,直接加最好,可免去前处理步骤,直接加入反应体系,不影响体系的入反应体系,不影响体系的pH,且对反应,且对反应无干扰无干扰5556