1、第二节、中胚层与器官形成第二节、中胚层与器官形成(1)脊索：处于中线，诱导神经脊索：处于中线，诱导神经管形成和建立前后体轴管形成和建立前后体轴(2)轴旁中胚层：变为体节，头轴旁中胚层：变为体节，头部结缔组织和面部肌肉部结缔组织和面部肌肉（4）侧板中胚层：被体腔）侧板中胚层：被体腔分隔为分隔为:外体中胚层（形成外体中胚层（形成肋骨）、内脏中胚层（形成肋骨）、内脏中胚层（形成肠系膜和心脏）肠系膜和心脏）(3)中间中胚层：形成性腺、中间中胚层：形成性腺、肾脏和肾上腺肾脏和肾上腺脊椎动物中胚层分为脊椎动物中胚层分为4部分部分12 34脏壁中胚层脏壁中胚层体腔体腔体壁中胚层体壁中胚层体节体节中间中胚层中
2、间中胚层分节机制分节机制 决定体节形成的一个关键因素是决定体节形成的一个关键因素是Notch信号信号途径（包括途径（包括Notch及其配体及其配体Dll1和和Dll3)。Delta-like3基因突变导致小鼠骨骼发育异常基因突变导致小鼠骨骼发育异常（左，对照；右：突变体，一排有数个骨化中心（白色点（左，对照；右：突变体，一排有数个骨化中心（白色点处），而不是像对照一样每排一个呈一纵列排，肋骨发育处），而不是像对照一样每排一个呈一纵列排，肋骨发育也呈畸形）也呈畸形）生骨节生骨节 脊椎和肋骨的软骨；脊椎和肋骨的软骨；胸腔、肢体、腹壁、背部和舌头的肌肉；胸腔、肢体、腹壁、背部和舌头的肌肉；连接骨和肌
3、肉的连接骨和肌肉的肌腱肌腱；背部皮肤的真皮；背部皮肤的真皮；血管细胞，将来形成主动脉以及椎间血管。血管细胞，将来形成主动脉以及椎间血管。体节将发育为：体节将发育为：生骨节（下面）可被区生骨节（下面）可被区分出来：最终形成分出来：最终形成脊椎脊椎的软骨和肋骨的软骨和肋骨原本球状的体节细胞慢慢原本球状的体节细胞慢慢扁平化扁平化,变成间质细胞。细变成间质细胞。细胞失去附着力，迁移近神胞失去附着力，迁移近神经管经管生骨节生骨节生骨节生骨节2-4d的鸡胚躯干横切面，示体节的分化的鸡胚躯干横切面，示体节的分化两侧的细胞将组成两侧的细胞将组成肌肉生成区，即肌肌肉生成区，即肌节。节。生骨节细胞生骨节细胞远轴生
4、皮肌远轴生皮肌节唇节唇背根神经节背根神经节 生皮节：将生皮节：将产生产生真皮真皮近轴生皮肌近轴生皮肌节唇节唇中央生皮肌中央生皮肌节区节区远轴肌：将分化为体壁、肢体和舌头的肌肉远轴肌：将分化为体壁、肢体和舌头的肌肉生骨节生骨节近轴生皮肌近轴生皮肌节唇节唇成肌细胞成肌细胞体节的腹中细胞（近脊索处）分裂后，形成体节的腹中细胞（近脊索处）分裂后，形成生骨节，最终形成生骨节，最终形成脊椎的软骨和肋骨脊椎的软骨和肋骨。体节的侧面部分形成体节的侧面部分形成真皮肌节真皮肌节，又分为近轴，又分为近轴生皮肌节和远轴生皮肌节。生皮肌节和远轴生皮肌节。离神经管最近的区域的成肌细胞将发育为离神经管最近的区域的成肌细胞将
5、发育为近近轴肌轴肌，包括肋骨之间的肌肉以及背部深层，包括肋骨之间的肌肉以及背部深层肌肉。肌肉。离神经管最远的离神经管最远的远轴肌远轴肌将分化为体壁、肢体将分化为体壁、肢体和舌头的肌肉。和舌头的肌肉。生生骨骨节节远轴肌远轴肌近轴肌近轴肌 由脊索和神经管底板而来的因子由脊索和神经管底板而来的因子SHH 诱导诱导生骨节生骨节细胞表达一种转录因子细胞表达一种转录因子Pax1。Pax1能够激活软骨特异性基因表达，它对能够激活软骨特异性基因表达，它对于脊椎的形成是必要的。于脊椎的形成是必要的。生骨节细胞表达的生骨节细胞表达的I-mf抑制肌肉形成。抑制肌肉形成。远轴肌远轴肌近轴肌近轴肌 近轴肌近轴肌细胞，由
6、背部神经管分泌的因子细胞，由背部神经管分泌的因子（Wnt家族成员家族成员）诱导形成。）诱导形成。产生四肢和体壁肌肉的产生四肢和体壁肌肉的远轴肌远轴肌可能由可能由来自来自表皮的表皮的Wnt蛋白和来自侧板中胚层的蛋白和来自侧板中胚层的BMP-4联合诱导联合诱导形成。这些因子诱导肌细胞表达形成。这些因子诱导肌细胞表达特殊的转录因子特殊的转录因子MyoD和和Myf5，激活肌肉，激活肌肉特异性基因的表达。特异性基因的表达。生皮节生皮节在神经管分泌的神经营养蛋白在神经管分泌的神经营养蛋白3（NT-3）诱导下发生分化。）诱导下发生分化。生骨生骨节节远轴肌远轴肌近轴肌近轴肌生生皮皮节节生骨节：生骨节：脊椎和脊
7、椎和肋骨的肋骨的软骨软骨远轴肌远轴肌近轴肌近轴肌生皮节：形成真皮生皮节：形成真皮远轴肌：远轴肌：体壁、体壁、肢体和肢体和舌头的舌头的肌肉肌肉近轴肌：肋骨近轴肌：肋骨之间的肌肉、之间的肌肉、背部深层肌肉背部深层肌肉2、肌肉发生、肌肉发生 肌肉细胞来源于体节的两个细胞系：近轴肌肌肉细胞来源于体节的两个细胞系：近轴肌和远轴肌。和远轴肌。在这两种细胞系中，旁分泌因子诱导它们合在这两种细胞系中，旁分泌因子诱导它们合成成MyoD蛋白，从而指导它们形成肌肉。蛋白，从而指导它们形成肌肉。生肌的生肌的bHLH（碱性的螺旋（碱性的螺旋-环环-螺旋）转录因螺旋）转录因子蛋白家族都结合子蛋白家族都结合DNA上的相同位
8、点，激活上的相同位点，激活肌肉特异的基因。肌肉特异的基因。任何产生生肌的任何产生生肌的bHLH转录因子（如：转录因子（如：MyoD或或Myf5）的细胞都将发育为肌肉细胞。）的细胞都将发育为肌肉细胞。MyoD的作用：的作用：MyoD直接直接与基因（包括它本身）的一定的与基因（包括它本身）的一定的调节区直接结合，激活这些基因表达。调节区直接结合，激活这些基因表达。MyoD也能激活其他一些基因（如也能激活其他一些基因（如p38），），这些基因产物能够辅助这些基因产物能够辅助MyoD结合到后续的结合到后续的一组基因的增强子上，从而激活后续的肌一组基因的增强子上，从而激活后续的肌肉特异性基因。肉特异性基
9、因。肌肉形成过程：肌肉形成过程：产生生肌的产生生肌的bHLH蛋白的生肌节细胞是蛋白的生肌节细胞是成肌成肌细胞细胞。成肌细胞能排列在一起并相互融合形成肌成肌细胞能排列在一起并相互融合形成肌肉组织的多核肉组织的多核生肌小管生肌小管。新形成的肌小管新形成的肌小管分泌旁分泌因子分泌旁分泌因子-白细胞白细胞介素介素4（IL4），召集其他的成肌细胞与肌），召集其他的成肌细胞与肌小管融合，从而形成小管融合，从而形成成熟的肌小管成熟的肌小管。旁旁分分泌泌因因子子肌肌节节细细胞胞成成肌肌细细胞胞细胞细胞排成排成链状链状肌小管肌小管开始形开始形成成肌小肌小管成管成熟熟肌纤维肌纤维和干细和干细胞胞决定决定增殖增殖停
10、止增殖停止增殖融合、分化融合、分化进一步融合进一步融合成熟成熟决定决定开始收缩开始收缩成肌细胞在培养时变成肌肉的过程成肌细胞在培养时变成肌肉的过程3、骨骼发生 骨骼有骨骼有3个来源：个来源：体节产生中轴（脊椎）骨；体节产生中轴（脊椎）骨；侧板中胚层形成肢体的骨；侧板中胚层形成肢体的骨；头部头部神经嵴神经嵴形成腮弓、颅面骨和软骨。形成腮弓、颅面骨和软骨。骨骼发生的2种主要模式：由间充质直接转变为骨的方式叫做由间充质直接转变为骨的方式叫做膜内成膜内成骨骨。由间充质细胞先分化为软骨，再由骨代替由间充质细胞先分化为软骨，再由骨代替软骨的方式称为软骨的方式称为软骨内成骨软骨内成骨。成骨细胞成骨细胞 骨细
11、胞骨细胞骨针间充质3.1 膜内成骨膜内成骨 Cbfa1基因敲除基因敲除的新生小鼠，软的新生小鼠，软骨可以发育，但骨可以发育，但缺乏骨缺乏骨 神经嵴神经嵴来源的间充质细胞增殖，压缩变形，来源的间充质细胞增殖，压缩变形，形成形成成骨细胞成骨细胞（osteoblast）。）。成骨细胞分泌胶原成骨细胞分泌胶原-蛋白聚糖骨基质，与蛋白聚糖骨基质，与钙结合，使基质钙化，陷入钙化的基质中钙结合，使基质钙化，陷入钙化的基质中的成骨细胞就会变成的成骨细胞就会变成骨细胞骨细胞。从骨发生开始的位置逐渐呈放射状伸出许从骨发生开始的位置逐渐呈放射状伸出许多骨针，骨针区域被致密的间充质细胞所多骨针，骨针区域被致密的间充质
12、细胞所包围，形成包围，形成骨膜骨膜（periosteum）。）。在骨膜内面的细胞也变成成骨细胞，可形在骨膜内面的细胞也变成成骨细胞，可形成新的骨基质加在骨针上，形成骨的多层成新的骨基质加在骨针上，形成骨的多层结构。结构。CBFA1能激活基因表达成骨素能激活基因表达成骨素（osteocalcin）、骨桥蛋白）、骨桥蛋白（osteopontin）以及其他的）以及其他的骨特异性的细骨特异性的细胞外基质蛋白胞外基质蛋白。Cbfa1基因敲除的纯合突变小鼠，骨架系统基因敲除的纯合突变小鼠，骨架系统完全缺乏骨。完全缺乏骨。3.2软骨内成骨 由间充质细胞聚集形成软骨，再由骨取代由间充质细胞聚集形成软骨，再由骨
13、取代软骨。软骨。它是脊椎、肋骨和肢体骨形成的方式。它是脊椎、肋骨和肢体骨形成的方式。脊椎和肋骨从体节发育而来，肢体的骨从脊椎和肋骨从体节发育而来，肢体的骨从侧板中胚层发育而来。侧板中胚层发育而来。Shh诱导临近的生骨节细胞表达诱导临近的生骨节细胞表达Pax1转录转录因子因子 间充质细胞压缩成致密的结节，变为软骨间充质细胞压缩成致密的结节，变为软骨细胞。细胞。BMPs在这个阶段起关键性作用。在这个阶段起关键性作用。软骨细胞快速增殖，形成骨的软骨模型软骨细胞快速增殖，形成骨的软骨模型 间充质间充质 压缩成结节压缩成结节软骨细软骨细胞增殖胞增殖肥大软肥大软骨细胞骨细胞成骨成骨细胞细胞血管血管 软骨细
14、胞软骨细胞骺软骨骺软骨生长板生长板骨髓骨髓骨骨生长板生长板次级成骨中次级成骨中心心软骨内成骨软骨内成骨 软骨细胞停止分裂，体积迅速增大，形成肥大软软骨细胞停止分裂，体积迅速增大，形成肥大软骨细胞。这一步由转录因子骨细胞。这一步由转录因子Runx2（也叫（也叫Cbfa1）调节。调节。肥大软骨细胞分泌的血管发生因子肥大软骨细胞分泌的血管发生因子VEGF诱导产诱导产生血管，侵入软骨模型生血管，侵入软骨模型 肥大软骨细胞凋亡时，围绕着软骨模型的细胞分肥大软骨细胞凋亡时，围绕着软骨模型的细胞分化为成骨细胞化为成骨细胞 成骨细胞开始在部分降解的基质上形成骨基质。成骨细胞开始在部分降解的基质上形成骨基质。成
15、骨细胞对成骨细胞对Wnt信号信号产生反应，上调转录因子产生反应，上调转录因子Osterix，激活骨特异性蛋白，激活骨特异性蛋白，指导细胞变成骨，指导细胞变成骨 新的骨质从骨膜的内表面沿周边加入，同时破骨新的骨质从骨膜的内表面沿周边加入，同时破骨细胞使骨的内部区域变空成为骨髓腔。细胞使骨的内部区域变空成为骨髓腔。间充质细胞间充质细胞 前软骨前软骨 软骨软骨 软骨增殖软骨增殖 前肥大软骨细胞前肥大软骨细胞 肥大软骨细胞肥大软骨细胞前成骨细胞前成骨细胞 成骨细胞成骨细胞 Osterix骨细胞骨细胞前肥大软骨细胞分泌的前肥大软骨细胞分泌的Ihh阻遏阻遏Runx2的抑制子的抑制子Twist,进而使未成熟
16、的细胞产生进而使未成熟的细胞产生Runx2，Runx2允许细胞产允许细胞产生骨基质，但是保持这些细胞呈不完全分化的状态。生骨基质，但是保持这些细胞呈不完全分化的状态。鸡胚两个心原基区域鸡胚两个心原基区域心脏发育的主要阶段：心脏发育的主要阶段：建立心脏区域需建立心脏区域需3种分子信号：种分子信号：（1）原肠作用过程中从组织者而来的未知促进信号；）原肠作用过程中从组织者而来的未知促进信号；（2）原肠作用之后从）原肠作用之后从前部内胚层前部内胚层来的来的促进信号（促进信号（BMPs,FGFs）;（3）原肠作用之后从脊索和神经管来的）原肠作用之后从脊索和神经管来的抑制信号（抑制信号（Noggin,Ch
17、ordin,Wnts）心脏中胚层心脏中胚层原条原条细胞将变成脊索细胞将变成脊索细胞将变成细胞将变成心脏心脏心脏中胚层心脏中胚层心内膜原基心内膜原基心内管心内管心外肌膜心外肌膜心内管心内管如果心脏原基不能融合就会产生两个心脏如果心脏原基不能融合就会产生两个心脏 心原性中胚层细胞的特化是由临近心脏的心原性中胚层细胞的特化是由临近心脏的内胚层内胚层通过通过BMP和和FGF信号途径诱导的。信号途径诱导的。从内胚层而来的从内胚层而来的BMPs促进心脏和血液的发育促进心脏和血液的发育，BMPs也能诱导心原性中胚层之下的内胚层合成也能诱导心原性中胚层之下的内胚层合成Fgf8，它对于心脏蛋白的表达起关键作用。
18、，它对于心脏蛋白的表达起关键作用。脊索分泌脊索分泌Noggin和和chordin，在胚胎中央阻止，在胚胎中央阻止BMP的信号。的信号。从神经管而来的从神经管而来的Wnt蛋白，特别是蛋白，特别是Wnt3a和和Wnt8，抑制心脏形成。抑制心脏形成。然而，前部的内胚层产生然而，前部的内胚层产生Wnt抑制子，如：抑制子，如：Cerberus，它们阻止，它们阻止Wnts与其受体结合。与其受体结合。因此心脏前体细胞只能在因此心脏前体细胞只能在BMPs和和Wnt拮抗子共拮抗子共同存在的地方同存在的地方形成。形成。鸡胚心脏形成的细胞及分子途径鸡胚心脏形成的细胞及分子途径 侧板中侧板中胚层胚层前前端端后后端端心
19、 原心 原性 中性 中胚层胚层(心脏心脏)成血成血管中管中胚层胚层(血 细血 细胞、胞、血管血管)心脏前体一旦形成，细胞就会进入不同的发心脏前体一旦形成，细胞就会进入不同的发育途径育途径心内膜内皮细胞心内膜内皮细胞内膜垫细胞内膜垫细胞心房肌心房肌细胞细胞心室肌心室肌细胞细胞心脏回路形成 在在28d的人胚中，心脏回路开始形成，将预的人胚中，心脏回路开始形成，将预定心房至于预定的心室的前面。定心房至于预定的心室的前面。心脏环路的形成依赖左右轴特化蛋白心脏环路的形成依赖左右轴特化蛋白（Nodal和和Lefty-2）。）。在心脏原基处，在心脏原基处，Nkx2-5调节调节Hand1和和Hand2转录因子
20、。当心脏环路开始形成时，转录因子。当心脏环路开始形成时，Hand1仅限于未来的左心室，仅限于未来的左心室，而而Hand2则则被限定在右心室被限定在右心室。人类心脏发生的示意图人类心脏发生的示意图 卵黄卵黄静脉静脉动脉球囊动脉球囊动脉干动脉干静脉窦静脉窦右心房右心房 左心房左心房房房室室瓣瓣主动脉主动脉肺 动肺 动脉脉21d 28d 新生儿新生儿细胞外基质细胞外基质也在回路形成的过程也在回路形成的过程中起重要作用：中起重要作用：细胞外基质细胞外基质flectin调节心脏组织不同部位调节心脏组织不同部位的物理张力的物理张力 转录因子转录因子Nkx2-5和和Mef2C能够激活能够激活Xin（心）（心
21、）基因，其产物可调节细胞骨架的改变，促基因，其产物可调节细胞骨架的改变，促进形成心脏回路进形成心脏回路 金属蛋白酶，特别是金属蛋白酶，特别是MMP2对于细胞骨架对于细胞骨架的重组起关键作用。的重组起关键作用。4.2 血管的形成血管的形成 血管发生有两种方式：血管形成血管发生有两种方式：血管形成（vasculogenesis）和血管新生）和血管新生（angiogenesis）。）。在血管形成过程中，血管网络在血管形成过程中，血管网络由侧板中胚层开始发由侧板中胚层开始发育育形成，内皮细胞相互连接，在原位形成血管，主形成，内皮细胞相互连接，在原位形成血管，主要发生在要发生在胚胎发育的早期胚胎发育的早
22、期；血管新生血管新生是指内皮细胞是指内皮细胞从已经存在的初级血管从已经存在的初级血管以向以向外出芽、迁移的方式形成不同的毛细血管网、动脉外出芽、迁移的方式形成不同的毛细血管网、动脉和静脉。和静脉。体内绝大部分的血管是以血管新生的方式形成的。体内绝大部分的血管是以血管新生的方式形成的。在羊膜动物中，初级血管网络在两个区域在羊膜动物中，初级血管网络在两个区域产生：产生：（1）胚外血管形成是在）胚外血管形成是在卵黄囊的血岛卵黄囊的血岛处发处发生的。首先，由未分化的间充质细胞聚集生的。首先，由未分化的间充质细胞聚集形成血管的细胞簇，即血岛。血岛的中央形成血管的细胞簇，即血岛。血岛的中央再形成血细胞，外
23、周细胞形成血管内皮细再形成血细胞，外周细胞形成血管内皮细胞。胞。（2）胚胎内的血管形成主要在每个器官内）胚胎内的血管形成主要在每个器官内进行。进行。卵黄囊的血管形成卵黄囊的血管形成 血管形成需要三种生长因子：（1）碱性成纤维细胞生长因子（）碱性成纤维细胞生长因子（Fgf2），），它负责造血血管母细胞的产生。它负责造血血管母细胞的产生。（2）血管内皮生长因子（）血管内皮生长因子（VEGF），它能），它能使得成血管细胞发生分化，并且使成血管使得成血管细胞发生分化，并且使成血管细胞倍增形成内皮管。细胞倍增形成内皮管。（3）血管生成素（）血管生成素（angiopoietins），它），它主要负责介导内
24、皮细胞和覆盖内皮细胞的主要负责介导内皮细胞和覆盖内皮细胞的外膜细胞之间的相互作用。外膜细胞之间的相互作用。血管形成血管形成初级毛细血管初级毛细血管丛中的成熟血丛中的成熟血管管血管新生血管新生成熟的循成熟的循环系统环系统血造血血管母细胞内皮内皮细胞细胞基膜内皮细胞之间相互作用，形成管状内皮外细胞维持血管完整维持血管完整和相对稳定和相对稳定动脉静脉出芽重组形成新出芽重组形成新的幼小血管系统的幼小血管系统成熟重组成为成成熟重组成为成熟的血管系统熟的血管系统动脉静脉静脉 在血管形成的启动阶段之后，血管新生在血管形成的启动阶段之后，血管新生（angiogenesis）就开始了。）就开始了。通过血管新生，
25、形成动脉、静脉，初级毛通过血管新生，形成动脉、静脉，初级毛细血管网络得以重新组建。细血管网络得以重新组建。细胞外基质对血管新生起特别重要细胞外基质对血管新生起特别重要的作用：的作用：首先，在新形成的毛细血管处，首先，在新形成的毛细血管处，VEGF单独发挥单独发挥作用，使得细胞与细胞之间的接触放松，细胞外作用，使得细胞与细胞之间的接触放松，细胞外基质在一定位点降解。基质在一定位点降解。然后，接触然后，接触VEGF的内皮细胞增殖，并从这些区的内皮细胞增殖，并从这些区域长出新芽，最终形成新的血管。域长出新芽，最终形成新的血管。已有的血管也已有的血管也能够一分为二，形成新的血管。细胞与细胞之间能够一分
26、为二，形成新的血管。细胞与细胞之间比较松散的状态能允许毛细血管融合从而产生大比较松散的状态能允许毛细血管融合从而产生大的血管，如动脉和静脉。的血管，如动脉和静脉。最后，成熟的毛细血管网形成，最后，成熟的毛细血管网形成，TGF-和血小板和血小板来源的生长因子（来源的生长因子（PDGF）使其保持稳定，使毛）使其保持稳定，使毛细血管壁保持弹性。细血管壁保持弹性。胚胎期的造血作用与卵黄囊附近的腹面中胚胎期的造血作用与卵黄囊附近的腹面中胚层的胚层的血岛血岛有关。小鼠的卵黄囊产生了第有关。小鼠的卵黄囊产生了第一批血细胞。一批血细胞。这些血岛的造血干细胞通常只产生红细胞。这些血岛的造血干细胞通常只产生红细胞
27、。维持机体一生的维持机体一生的造血干细胞（造血干细胞（HSC）来自于围绕来自于围绕主动脉的中胚层区主动脉的中胚层区。HSC能产生能产生血细胞的前体（血细胞的前体（CMP）或或淋巴干细胞淋巴干细胞（CLP）,这些细胞也是干细胞这些细胞也是干细胞.CMP将产生巨核细胞将产生巨核细胞/红细胞的前体细胞，它们将红细胞的前体细胞，它们将进一步发育为红细胞系或血小板系。进一步发育为红细胞系或血小板系。CMP也能产生粒细胞也能产生粒细胞/单核细胞的前体细胞，它们单核细胞的前体细胞，它们将发育为碱性粒细胞、酸性粒细胞、中性粒细胞将发育为碱性粒细胞、酸性粒细胞、中性粒细胞以及单核细胞等。以及单核细胞等。最终这些
28、细胞产生能分裂但仅能产生一种细胞类最终这些细胞产生能分裂但仅能产生一种细胞类型（还有自我更新）的祖细胞（型（还有自我更新）的祖细胞（progenitor cell）内胚层：形成消化道（包括肝、胆囊内胚层：形成消化道（包括肝、胆囊和胰腺）和呼吸道的和胰腺）和呼吸道的内表皮内表皮。第三节、内胚层与器官形成第三节、内胚层与器官形成人类消化系统的形成人类消化系统的形成中肠中肠胰腺胰腺胃胃肺芽肺芽背部肠背部肠系膜系膜背部背部胰腺胰腺腹面肠系腹面肠系膜膜结肠结肠直肠直肠妊娠第妊娠第3周到第周到第4周人类胚胎食道和呼吸道周人类胚胎食道和呼吸道气管气管肺芽肺芽食道食道作业作业 骨骼形成的分子调控机制骨骼形成的分子调控机制 变态的调控机制变态的调控机制-第八组：廖彬第八组：廖彬 曾满曾满 曾曾玉洁玉洁 杨舒杨舒 郭晓梅郭晓梅 自然条件下，人为什么会衰老死亡？自然条件下，人为什么会衰老死亡？-第第九组：张亚丽九组：张亚丽 望佳望佳 孙栋孙栋 严洪艳严洪艳 梅剑琳梅剑琳
