1、（一）基本概念（一）基本概念中药生物利用度和生物等效性的研究中药生物利用度和生物等效性的研究1、生物利用度、生物利用度l 评价制剂的生物利用度评价制剂的生物利用度/三项基本参数三项基本参数AUC、tmax、Cmaxl 绝对生物利用度与静脉注射比较绝对生物利用度与静脉注射比较l 相对生物利用度同一药物不同制剂比较相对生物利用度同一药物不同制剂比较2、生物等效性、生物等效性l 是指同一种药物的不同制剂在相同实验条件下，给予相同剂量，是指同一种药物的不同制剂在相同实验条件下，给予相同剂量，其吸收速度和程度没有明显的差异。它是通过相对生物利用度的其吸收速度和程度没有明显的差异。它是通过相对生物利用度的
2、研究，来评价同种药物不同制剂的内在质量是否相等。研究，来评价同种药物不同制剂的内在质量是否相等。生物利用度（bioavailability，BA）是指药物或制剂服用后，药物活性成分被吸收进入血液循环的相对数量和速度。是探讨剂型因素和生物因素对药物疗效影响的主要工具。生物利用度研究的应用范围目的：评价同一药物的两种制剂目的：评价同一药物的两种制剂（或多种制剂）体内质量的一致性。（或多种制剂）体内质量的一致性。%100)(AUC)(AUC00静注试F%100)(AUC)(AUC0000试静注静注试XXF%100)(AUC)(AUC00静注静注试试kkF%100)(AUC)(AUC2/102/10试
3、静注静注试ttF%100)()(uu静注试XXF%100)(AUC)(AUC00rel标试F%100)()(uurel标试XXF生物利用度的测定方法生物利用度的测定方法血药血药浓度法浓度法尿药浓度法尿药浓度法药理效应法药理效应法血药血药浓度法浓度法%100)(AUC)(AUC00静注试F%100)(AUC)(AUC0000试静注静注试XXF%100)(AUC)(AUC2/102/10试试静注静注静注试tXtXF 前提条件为给予试验制剂和参比制剂之后机体的清除前提条件为给予试验制剂和参比制剂之后机体的清除率不变。应用公式的条件为：率不变。应用公式的条件为：1、药物在体内符合线性动、药物在体内符合
4、线性动力学；力学；2、受试者服用参比制剂和试验制剂的消除速率常、受试者服用参比制剂和试验制剂的消除速率常数相同；数相同；3、参比制剂和试验制剂剂量可以不同，但均应、参比制剂和试验制剂剂量可以不同，但均应在线性范围内。若消除速率常数不同则采用下式计算。在线性范围内。若消除速率常数不同则采用下式计算。00AUCAUC尿药浓度法尿药浓度法药理效应法药理效应法药理效应法在中药药动学中的应用药理效应法在中药药动学中的应用1、研究方法、研究方法l 血药浓度法血药浓度法l 尿药速率法尿药速率法l 药理效应法药理效应法无合适定量分析方法，无法采用血药浓无合适定量分析方法，无法采用血药浓度或尿药度或尿药 速率法
5、，可用药理作用作为中药制剂生物利用度研速率法，可用药理作用作为中药制剂生物利用度研究的指标究的指标具体方法具体方法：（1 1）测定剂量效应曲线；（）测定剂量效应曲线；（2 2）测定时间）测定时间效应曲线；（效应曲线；（3 3）由剂量效应曲线将药理效应转换成药物量，）由剂量效应曲线将药理效应转换成药物量，绘制药量时间曲线，比较试验制剂和参比制剂的曲线，估算绘制药量时间曲线，比较试验制剂和参比制剂的曲线，估算生物利用度生物利用度（二）生物利用度研究方法与实验设计（二）生物利用度研究方法与实验设计（二）生物利用度研究方法与实验设计（二）生物利用度研究方法与实验设计2、实验设计、实验设计 受试者选择条
6、件：年龄、性别、体重、健康检查等受试者选择条件：年龄、性别、体重、健康检查等 标准参比制剂药品安全性与有效性已被证明合格者标准参比制剂药品安全性与有效性已被证明合格者 给药剂量的确定（包括标准参比制剂与被试制剂）给药剂量的确定（包括标准参比制剂与被试制剂）l 生生物样品中药物浓度的定量分析方法的建立要进行特异性、物样品中药物浓度的定量分析方法的建立要进行特异性、灵敏度、精密度、准确度、标准曲线、稳定性等考察灵敏度、精密度、准确度、标准曲线、稳定性等考察2、实验设计、实验设计u 试验方案设计试验方案设计：通常采用：通常采用双周期交叉试验设计双周期交叉试验设计，将受试者分成两，将受试者分成两 组，
7、一组先用试验制剂，后用参比制剂，另一组相反；两个试验组，一组先用试验制剂，后用参比制剂，另一组相反；两个试验周期之间时间间隔为周期之间时间间隔为洗净期洗净期，应大于药物的，应大于药物的710个半衰期个半衰期l 试验数据的处理试验数据的处理Cmax和和tmax可用试验数据直接表示，可用试验数据直接表示，AUC由由梯形面积法直接计算梯形面积法直接计算u 生物利用度计算生物利用度计算u 多剂量试验多剂量试验当药物吸收速率不影响疗效，单剂量给药后药物当药物吸收速率不影响疗效，单剂量给药后药物或其代谢产物浓度很低，不能用相应分析方法测定，可用多剂量或其代谢产物浓度很低，不能用相应分析方法测定，可用多剂量
8、给药，使药物达到稳态后用稳态血药浓度估算生物利用度。多剂给药，使药物达到稳态后用稳态血药浓度估算生物利用度。多剂量给药的依据是：达到稳态后一个间隔内的血药浓度曲线下面量给药的依据是：达到稳态后一个间隔内的血药浓度曲线下面积等于单剂量给药的血药浓度曲线下面积。积等于单剂量给药的血药浓度曲线下面积。（二）生物利用度研究方法与实验设计（二）生物利用度研究方法与实验设计n 血药浓度法研究双黄连制剂血药浓度法研究双黄连制剂的生物利用度的生物利用度u双黄连中的双花、黄芩的主要有双黄连中的双花、黄芩的主要有效成分绿原酸和黄芩苷均有紫外效成分绿原酸和黄芩苷均有紫外吸收（吸收（324nm和和276nm），作），
9、作为测定指标为测定指标u采用静脉滴注、栓剂、微型灌肠采用静脉滴注、栓剂、微型灌肠剂（给药剂量相同）剂（给药剂量相同）u血样处理与测定血样处理与测定u血清浓度测定结果（略）血清浓度测定结果（略）举例举例计算药物浓度曲线下面积（计算药物浓度曲线下面积（AUC）、）、峰值峰值（Cp）和达峰时（和达峰时（tp）n 计算绝对生物利用度（计算绝对生物利用度（EBA绝对绝对）和相对生物利）和相对生物利用度（用度（EBA相对相对）结果显示：结果显示：l 双黄连栓剂释放、吸收较慢，但吸收量较大，可双黄连栓剂释放、吸收较慢，但吸收量较大，可作为白天滴注用药的追加剂量使用，并可在白天作为白天滴注用药的追加剂量使用，
10、并可在白天用药后给予，以保证夜间病人的血药浓度在一定用药后给予，以保证夜间病人的血药浓度在一定水平上水平上l 微型灌肠剂吸收慢，吸收量小，主要由于药物浓微型灌肠剂吸收慢，吸收量小，主要由于药物浓度过大，剂型粘稠，使药物在肠内释放困难度过大，剂型粘稠，使药物在肠内释放困难中药药物动力学研究中药药物动力学研究u血药浓度法（有效单体与复方）血药浓度法（有效单体与复方）u生物效应法（药理效应法与药物蓄积法）生物效应法（药理效应法与药物蓄积法）举例举例1、毛冬青甲素药动学研究、毛冬青甲素药动学研究u毛冬青甲素为中药毛冬青提取经琥珀酰化得到的毛冬青甲素为中药毛冬青提取经琥珀酰化得到的五环三萜类化合物五环三
11、萜类化合物u单剂量静脉注射或口服单剂量静脉注射或口服uHPLC-UV测定血药浓度测定血药浓度u符合二房室模型符合二房室模型l口服毛冬青甲素血药浓度时间曲线口服毛冬青甲素血药浓度时间曲线l静脉注射毛冬青甲素血药浓度时间曲线静脉注射毛冬青甲素血药浓度时间曲线l 毛冬青甲素胶囊生物利用度低，这与毛冬青甲素水溶性较低有关毛冬青甲素胶囊生物利用度低，这与毛冬青甲素水溶性较低有关2、秦皮煎剂的药动学研究、秦皮煎剂的药动学研究l 中药秦皮主要有效成分为秦皮甲素和秦皮乙素中药秦皮主要有效成分为秦皮甲素和秦皮乙素l 采用荧光测定法测定药物浓度采用荧光测定法测定药物浓度l 符合二房室模型符合二房室模型l 秦皮甲素
12、和秦皮乙素具有协同作用秦皮甲素和秦皮乙素具有协同作用l 两者体内药动学参数有较大差异两者体内药动学参数有较大差异具体步骤：具体步骤：（1）绘制时间效应曲线）绘制时间效应曲线（以不同剂量给药，在一定时间测（以不同剂量给药，在一定时间测定效应强度；定效应强度；（2）绘制剂量效应曲线）绘制剂量效应曲线（以各时间效应曲线中相同时间（以各时间效应曲线中相同时间点的剂量与效应，绘出曲线，建立量效方程，求出剂量（浓度）与点的剂量与效应，绘出曲线，建立量效方程，求出剂量（浓度）与效应的关系；效应的关系；（3）绘制药量时间曲线）绘制药量时间曲线（将各时间的效应强度代入量效（将各时间的效应强度代入量效方程，推算出
13、相应的表观浓度，绘出浓度时间曲线，进行药物动力方程，推算出相应的表观浓度，绘出浓度时间曲线，进行药物动力学分析学分析3、药理效应法药理效应法麻黄汤的药动学研究麻黄汤的药动学研究3、药理效应法药理效应法对中药的药动学研究对中药的药动学研究l 以大鼠足趾汗腺分泌和二甲苯致小鼠毛细血管通透以大鼠足趾汗腺分泌和二甲苯致小鼠毛细血管通透性增高的抑制作用为药效指标，探讨麻黄汤、桂枝性增高的抑制作用为药效指标，探讨麻黄汤、桂枝汤、银翘散、桑菊饮的药物动力学，比较相应的参汤、银翘散、桑菊饮的药物动力学，比较相应的参数。数。4、药物蓄积法药物蓄积法附子、川乌、四逆汤的药附子、川乌、四逆汤的药动学研究动学研究l
14、药物蓄积法是以动物急性死亡率测定药物体内累积量，再以时间对药物蓄积法是以动物急性死亡率测定药物体内累积量，再以时间对药物体存百分率的变化进行数据拟合和药动学计算药物体存百分率的变化进行数据拟合和药动学计算l 具体步骤：具体步骤：（1）测定测定LD50，绘制对数剂量几率单位直线（，绘制对数剂量几率单位直线（DP直线）；直线）；（2）依依DP直线斜率确定用药剂量和两次给药的时间间隔；直线斜率确定用药剂量和两次给药的时间间隔；（3）查表求出查表求出2次给药死亡率的几率单位，并在次给药死亡率的几率单位，并在DP直线上找出直线上找出相应的剂量，再求算出药物体存的百分率；相应的剂量，再求算出药物体存的百分
15、率；（4）以时间对体存百分率作图，得一次用药后体存百分率的动态以时间对体存百分率作图，得一次用药后体存百分率的动态变化，按药动学原则进行参数计算。变化，按药动学原则进行参数计算。l 附子、川乌、四逆汤的附子、川乌、四逆汤的LD50、给药剂量、给药剂量、LD50(t)及首次及首次给药后其体存量的变化给药后其体存量的变化l 将首次给药后间隔时间对体存量或体存量对数作图，得将首次给药后间隔时间对体存量或体存量对数作图，得药物体存量随时间延长而衰减得药时曲线药物体存量随时间延长而衰减得药时曲线l 药动学参数计算结果，附子、川乌的表观半衰期较长，有一定蓄积药动学参数计算结果，附子、川乌的表观半衰期较长，
16、有一定蓄积性，使用时应注意掌握剂量及用药间隔性，使用时应注意掌握剂量及用药间隔/四逆汤表观半衰期较附子四逆汤表观半衰期较附子短，能否解释为附子加干姜、甘草后不易中毒，尚需进一步研究短，能否解释为附子加干姜、甘草后不易中毒，尚需进一步研究l 生物效应法研究小结：生物效应法研究小结：（1）以药理效应法进行中药药动学研究，理论上是可行的，测得以药理效应法进行中药药动学研究，理论上是可行的，测得的参数称为的参数称为“表观动力学参数表观动力学参数”；（2）药物蓄积法具有非特异、通用的性质，能使动物急性致死的药物蓄积法具有非特异、通用的性质，能使动物急性致死的药物一般可用此法估计其药动学参数；药物一般可用
17、此法估计其药动学参数；（3）药物蓄积法对含毒性药物的中药（复方）有较好的适应性；药物蓄积法对含毒性药物的中药（复方）有较好的适应性；（4）药理效应法与毒性法结合，可估算出安全有效的治疗窗带，药理效应法与毒性法结合，可估算出安全有效的治疗窗带，并可了解药物的有效成分和毒性成分是否一致；并可了解药物的有效成分和毒性成分是否一致；（5）同一方剂不同的药理效应具有不同的作用物质基础，同一方同一方剂不同的药理效应具有不同的作用物质基础，同一方剂其药理效应指标不同，所得相应表观动力学参数也不同；剂其药理效应指标不同，所得相应表观动力学参数也不同；（6）以某一药效作用求得的药动学参数，不一定能代表或完全代以某一药效作用求得的药动学参数，不一定能代表或完全代表该药（中药制剂）药物动力学的特点。表该药（中药制剂）药物动力学的特点。
