hpv-基因分型检测项目介绍(检验科)课件.ppt

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1、HPV HPV 基因分型检测项目介绍基因分型检测项目介绍市场部市场部 周周 然然2021/7/131目目 录录一、一、HPVHPV检测检测宫颈癌筛查的趋势宫颈癌筛查的趋势二、二、HPVHPV基因分型检测有何优势?基因分型检测有何优势?三、亚能三、亚能HPVHPV分型检测分型检测最佳选择最佳选择检验科版HPVHPV检测检测宫颈癌筛查的趋势宫颈癌筛查的趋势2021/7/133高高 发发我国宫颈癌发病现状我国宫颈癌发病现状3535岁的宫颈癌患者所占比例岁的宫颈癌患者所占比例:80 80年代:年代:4.8%4.8%2000 2000年:年:34.1%34.1%趋年趋年轻化轻化高死高死亡率亡率 我国目前

2、宫颈癌患者约我国目前宫颈癌患者约4040万万 每年新增患者约每年新增患者约1515万万 居女性生殖道肿瘤首位居女性生殖道肿瘤首位 我国宫颈癌死亡率为我国宫颈癌死亡率为11.34%11.34%西部地区,宫颈癌居女性癌症死亡率之首西部地区,宫颈癌居女性癌症死亡率之首Harald zur HausenHarald zur Hausen楚尓楚尓豪森豪森HPVHPV是导致宫颈癌的主要病因是导致宫颈癌的主要病因1995年国际癌症研究协会(IARC)认定HPV感染是宫颈癌的主要病因楚尓豪森经过大量科学研究,提出假设HPV感染与宫颈癌发病有关英国、香港 发展中国家英国及香港等发达国家或地区,其宫颈癌发病率仅为

3、发展中国家的1/6,这很大程度归因于宫颈癌早期筛查。宫颈癌筛查能显著降低宫颈癌的发生宫颈癌筛查能显著降低宫颈癌的发生世界卫生组织常见宫颈癌筛查方法常见宫颈癌筛查方法 液基细胞学检查(TCT)HPV 检测分型不分型 液基细胞学检查有局限性液基细胞学检查有局限性细胞学检查,无论是敏感性还是特异性都存在很大的差异。筛查仅靠细胞学有一定的问题郎景和 院士还需要将HPV检测纳入宫颈癌筛查项目,现在已成为趋势。HPVHPV检测检测宫颈癌筛查临床优势宫颈癌筛查临床优势 筛查:HPV检测比液基细胞学检查具有更高的灵敏度被推为筛查首选 ASCUS分流:HPV检测可对细胞学检查为ASCUS的不明确结果进行分流 随

4、访:HPV检测在治疗后的随访过程中可提示治疗效果HPVHPV检测灵敏度明显高于细胞学检查检测灵敏度明显高于细胞学检查对经组织学诊断为CIN2及以上病变检测的灵敏度:细胞学检查仅为55%55%,HPV检测的高达96%96%。2006 consensus guidelines for management of women with abnormal cervical cancer screening tests www.AJOG.ORGEuropean guidelines for quality assurance in cervical cancer screening:recommenda

5、tions for clinical management of abnormal cervical cytology,part 1.Cytopathology 2008,19,342354HPVHPV检测检测ASCUSASCUS的分流处理首选的分流处理首选 HPVHPV检测检测治疗后随访推荐治疗后随访推荐无瘤生存率可理解为:身体或组织中不含癌细胞随访结果随访结果无瘤生存率无瘤生存率治疗效果治疗效果HPVHPV(-)100%治疗成功HPVHPV(+)56%提示有残留或是重复感染治疗后,HPV检测有助于明确病情复发的情况。郎景和.宫颈病变的诊治J.现代妇产科进展,2005,14(5):341-3

6、52.HPVHPV基因分型检测的优势何在?基因分型检测的优势何在?2021/7/1313HPVHPV按致病性分为两类:按致病性分为两类:高危型:高危型:是引起高级别宫颈上皮内瘤变和宫颈癌的主要因素低危型:低危型:往往引起外生殖器湿疣或宫颈低度病变明确明确HPVHPV基因型意义重大基因型意义重大30妇女,细胞学未见上皮内病变和恶性细胞,HPV16,18建议行阴道镜20092009年年ASCCPASCCP建议:建议:2006 consensus guidelines for management of women with abnormal cervical cancer screening te

7、sts www.AJOG.ORG 有助于明确致癌风险、指导临床处理 有助于提示治疗后的复发风险 可以明确区分持续感染和反复感染HPVHPV基因分型检测的优势:基因分型检测的优势:HPV16HPV18其他高危HPV(一)分型检测有助于(一)分型检测有助于明确致癌风险、指导临床处理明确致癌风险、指导临床处理致癌风险不同致癌风险不同J Natl Cancer Inst,2005;97:1072 9处理方法也不同处理方法也不同HPVHPV基因型基因型慢性宫颈炎慢性宫颈炎CIN 1CIN 1CIN2/CIN3CIN2/CIN3宫颈癌宫颈癌1646(7.68)56(12.81)408(45.03)363(

8、79.61)5862(10.35)54(12.36)201(22.19)25(5.48)3320(3.34)21(4.81)84(9.27)18(3.95)1813(2.17)20(4.58)45(4.97)47(10.31)5223(3.84)32(7.32)58(6.40)9(1.97)唐霄.人乳头瘤病毒基因亚型分布及与宫颈病变关系分析.实用妇产科杂志2013年4月第29卷第4期仅区分仅区分1616、1818型,仍不足够型,仍不足够宫颈病变患者中感染率较高的HPV基因型(二)分型检测有助于提示治疗后(二)分型检测有助于提示治疗后复发风险复发风险研究表明:21岁的高危型HPV持续感染者中,大

9、约有44.6%会在LEEP刀手术后出现复发病情。复发患者中单一HPV感染者比例高达94.6%,各基因型感染率如下表:HPVHPV基因型基因型1616型型1818型型3131型型5858型型复发占比复发占比54.1%16.2%8.1%8.1%American Journal of Obstetrics&Gynecology JULY 2010 72.e216、18型HPV持续感染手术后更易复发!Kjaer SK,van den Brule AJ,Paull G,et al.BMJ 2002;325:572.(三)持续感染致癌风险是反复感染的(三)持续感染致癌风险是反复感染的4 4倍倍亚能亚能HP

10、V HPV 分型检测分型检测最佳选择最佳选择2021/7/1320亚能亚能HPVHPV基因分型检测试剂盒基因分型检测试剂盒国食药监械(准)字 2012第3400059号组成成分组成成分保存条件保存条件有效期有效期试剂盒试剂盒PCR反应液-18-186 6个月个月试剂盒试剂盒膜条2-82-8POD母液TMB裂解液30%双氧水 高灵敏度:PCR技术 高特异性:核酸分子杂交技术 高通量:反向点杂交 能实现对HPV 进行分型HPV HPV 基因分型检测流程基因分型检测流程 结果判读结果判读HPV18HPV18HPV35,59,66HPV35,59,66阴性样本阴性样本单一感染单一感染多重感染多重感染N

11、oImageNoImageHPV HPV 基因分型检测主要仪器设备基因分型检测主要仪器设备试剂准备区试剂准备区 标本制备区标本制备区 PCRPCR扩增区扩增区 产物分析区产物分析区 冰箱冰箱冰箱冰箱离心机离心机微量加样器微量加样器生物安全柜生物安全柜(或超净工作台(或超净工作台)电磁炉(水浴锅电磁炉(水浴锅或干式恒温器)或干式恒温器)旋涡混合器旋涡混合器PCRPCR仪仪冰箱冰箱分子杂交仪分子杂交仪微量加样器微量加样器电磁炉(或水浴锅)电磁炉(或水浴锅)脱色摇床脱色摇床亚能亚能HPV HPV 基因分型优势基因分型优势优势(优势(AdvantageAdvantage)利益利益(Benefit)(Benefit)u精确分型明确致癌风险,临床处理不同。u检测23型HPV,18高危和5低危对常见的致病性HPV基因型覆盖全面u准确性、特异性、重复性:98%临床结果更可靠u真正的内部质控有效避免假阴性带来的漏检u单次检测标本量可达96份效率高u所需仪器设备简单、通用性好投入低,各级实验室均适宜u技术平台通用该技术平台除了可以开展HPV基因分型外,还可以开展HBV分型与耐药检测,结核分枝杆菌耐药检测等分子诊断项目,提供医院整体诊断水平业界肯定业界肯定NoImageNoImage问题?问题?

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