1、免疫学检验的质量保证免疫学检验的质量保证1.基本概念基本概念 2.标准品的分类标准品的分类 3.定量、半定量和定性实验的质量控制方定量、半定量和定性实验的质量控制方法检测试剂法检测试剂 4.免疫学检测试剂的批间差异和稳定性免疫学检测试剂的批间差异和稳定性 5.免疫学实验常用评价指标免疫学实验常用评价指标 学学 习习 要要 点点3一、一、免疫检验质量控制的概念免疫检验质量控制的概念 质量保证（质量保证（，），）质量保证是临床实验室为了证明给患质量保证是临床实验室为了证明给患者做提供实验数据的有效性，而采取的一者做提供实验数据的有效性，而采取的一系列措施，涵盖实验室进行检测前后的所系列措施，涵盖实
2、验室进行检测前后的所用活动。用活动。（一）基本概念（一）基本概念准确度（）准确度（）待测物的测定值与其真值的一致性程待测物的测定值与其真值的一致性程度。度。精密度（）精密度（）在一定条件下进行多次测定，所得结在一定条件下进行多次测定，所得结果之间的符合程度。果之间的符合程度。误差（）误差（）待测物的测定值与客观存在的真值之间待测物的测定值与客观存在的真值之间的差异。包括系统误差和随机误差两类。的差异。包括系统误差和随机误差两类。偏差（）偏差（）待测物的测定值与多次测量平均值之间待测物的测定值与多次测量平均值之间的差异。的差异。重复性条件（重复性条件（）在同一实验室内，由相同的操作者使用在同一实
3、验室内，由相同的操作者使用同一仪器设备，在短的间隔时间内对相同同一仪器设备，在短的间隔时间内对相同的测试项目使用同一方法相互独立进行的的测试项目使用同一方法相互独立进行的测试条件。测试条件。批（）批（）在相同条件下所获得的一组测定。在相同条件下所获得的一组测定。均值（）均值（）一组测定值中所有值的平均值，也称均数。一组测定值中所有值的平均值，也称均数。标准差（标准差（，或，或S S）用于表示一组测定数据的分布情况。用于表示一组测定数据的分布情况。nxxi）均值（222)(1111)(iiixnxnSDnxxSD或 变异系数（变异系数（，），）标准差与平均值之比用百分数表示。是标准差与平均值之比
4、用百分数表示。是相对比，没有单位，更便于资料间的分析相对比，没有单位，更便于资料间的分析比较。比较。%100 xSDCV 正态分布正态分布()（二）质量保证的有关概念（二）质量保证的有关概念 室内质量控制室内质量控制（，），）室间质量评价（，）质控品（物）质控品（物）（）二、二、免疫检验质量控制的特殊性免疫检验质量控制的特殊性 免疫检验质量控制包括对定量实验、免疫检验质量控制包括对定量实验、半定量实验和定性实验三个方面的监控。半定量实验和定性实验三个方面的监控。标准品（）标准品（）指性质纯的处于一定基质中已知含量或指性质纯的处于一定基质中已知含量或成分且特性明确的物质，通常用于比较检成分且特性
5、明确的物质，通常用于比较检测未知的物质或成分。测未知的物质或成分。标准品质量的优劣直接影响样品的测定结标准品质量的优劣直接影响样品的测定结果。果。（一）标准品及其分类（一）标准品及其分类 根据标准品性质的差异，可分为三级：一级标准品一级标准品二级标准品二级标准品 三级标准品三级标准品 为冻干品，内含为冻干品，内含载体蛋白，数量载体蛋白，数量有限，可使用有限，可使用10201020年。通常年。通常为国际标准品，为国际标准品，由指定的实验室由指定的实验室制备制备 即国家标准品，即国家标准品，是由国家的有关是由国家的有关权威机构制备，权威机构制备，供国家内部使用，供国家内部使用，其效价单位与国其效价
6、单位与国际标准品一致际标准品一致 由二级标准品由二级标准品的比对而来的，的比对而来的，通常由实验室通常由实验室自己或试剂生自己或试剂生产厂家制备。产厂家制备。标准品 /支 建立年份 /类风湿关节炎血清 100 1965 0.1710 抗核抗体血清(均质型)100 1970 0.1860 人血清 、100 1970 0.1847 人血清 100 1971 0.8100 人血清 11500 1973 0.06562 人 100000 1975 0.001399 人 100 1975 0.0236 绵羊抗人 100 1976 0.0594 绵羊抗人 链 100 1978 0.0447 血清蛋白(白蛋
7、白、1-抗胰蛋白酶、C3 铜蓝蛋白、转铁蛋白)100 1978 1.1140 人补体成分(C4、C5、B 因子)100 1980 1.1070 绵羊抗人 链 100 1981 0.0923 过氧化物酶标记绵羊抗人 100 1982 0.0316 抗 抗体-1983-平滑肌抗体-1983-线粒体抗体-1983-免疫学检验质控常用国际标准品免疫学检验质控常用国际标准品标准品的特性标准品的特性 与被测物具有相同的特性，活性稳定与被测物具有相同的特性，活性稳定 所用基质对测定结果无明显影响，通所用基质对测定结果无明显影响，通常为含蛋白质的缓冲液。常为含蛋白质的缓冲液。无已知传染危险性，物理性能均一，无
8、已知传染危险性，物理性能均一，能准确重溶为澄清液体。能准确重溶为澄清液体。定量免疫实验通常需要使用全自动免疫分析仪，在测定时须用校准品对仪器进行校准。（二）（二）定量、半定量和定性实验定量、半定量和定性实验1.1.定量实验定量实验 质控图质控图 半定量实验在免疫检验中比较少用，此类半定量实验在免疫检验中比较少用，此类实验主要有酶免疫试验、荧光免疫试验等，实验主要有酶免疫试验、荧光免疫试验等，测定结果通常以抗体的滴度、效价等表示。测定结果通常以抗体的滴度、效价等表示。2.2.半定量实验半定量实验 定性实验是免疫学检验的重点，其测定方定性实验是免疫学检验的重点，其测定方法有很多，常以法有很多，常以
9、“有有”或或“无无”也即也即“阳性阳性”或或“阴性阴性”来表达测定结果。来表达测定结果。3.3.定性实验定性实验 (三三)检测试剂的批间差异检测试剂的批间差异 质量质量控制控制要求要求较高较高 每批原材每批原材料的纯度料的纯度和活性都和活性都有所差别有所差别 引起试剂引起试剂盒批间变盒批间变异原因是异原因是多方面的多方面的 试剂盒抗体储存容器应由不吸附蛋白质的材试剂盒抗体储存容器应由不吸附蛋白质的材料制成料制成 抗体浓度越高（浓度大于抗体浓度越高（浓度大于10），越稳定，易），越稳定，易保存；浓度低时，应加保存；浓度低时，应加0.11.5%的牛血清白的牛血清白蛋白作保护剂。蛋白作保护剂。酶标记
10、抗体在应用防腐剂时要注意不能用酶标记抗体在应用防腐剂时要注意不能用3。抗体浓缩液应在抗体浓缩液应在-20保存，避免反复冻融。保存，避免反复冻融。(四四)检测试剂的稳定性及影响因素检测试剂的稳定性及影响因素 24三、三、免疫学检验和诊断常用的评价指标免疫学检验和诊断常用的评价指标 诊断灵敏度（诊断灵敏度（）反映一项试验能将实际有病的人判定为反映一项试验能将实际有病的人判定为患病的百分率，其值越大，则漏诊的可能患病的百分率，其值越大，则漏诊的可能性愈小。性愈小。（一）诊断灵敏度、特异度和正确诊断指数（一）诊断灵敏度、特异度和正确诊断指数 本指标可用于评价测定方法的临床应用价本指标可用于评价测定方法
11、的临床应用价值，理想测定方法的诊断敏感度应为值，理想测定方法的诊断敏感度应为100%。诊断特异度（诊断特异度（）又称真阴性，是指一项试验能将实际上又称真阴性，是指一项试验能将实际上未患某病的人正确地判定为未患某病的能未患某病的人正确地判定为未患某病的能力。其值越大，则误诊的可能性愈小。力。其值越大，则误诊的可能性愈小。本指标是用于评价测定方法的临床应用价本指标是用于评价测定方法的临床应用价值，理想测定方法的诊断特异度应为值，理想测定方法的诊断特异度应为100%。正确诊断指数（正确诊断指数（s）又称约登指数，指将灵敏度和特异度又称约登指数，指将灵敏度和特异度结合的评价某种免疫学实验的综合指标。结
12、合的评价某种免疫学实验的综合指标。其值是灵敏度与特异度之和减去其值是灵敏度与特异度之和减去1，大小范，大小范围从围从0到到1。正确诊断指数愈大，实验的真实性亦愈好。正确诊断指数愈大，实验的真实性亦愈好。理想实验方法的正确诊断指数为理想实验方法的正确诊断指数为1。大多数免疫分析，来自感染和非感染人群大多数免疫分析，来自感染和非感染人群的标本之间有一个检测结果的重叠区，即的标本之间有一个检测结果的重叠区，即“灰区灰区”（二）正确选择值（二）正确选择值思思 考考 题题1.概念：准确度与精密度概念：准确度与精密度2.免疫检验质量控制包括免疫检验质量控制包括 实验、实验、实实验和验和 实验三个方面。实验三个方面。3.简要回答标准品的概念与分类。简要回答标准品的概念与分类。4.概念：诊断的灵敏度与特异度概念：诊断的灵敏度与特异度。5.何为何为正确诊断指数正确诊断指数?
