实验五-金黄色葡萄球菌检测概述-课件.ppt

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1、生物学特性-生物学特性-生物学特性-流行耐A.1 10%氯氯化化植物蛋白胨(或大豆蛋白胨)3.0 g 氯化钠100.0 g 磷酸氢二钾2.5 g 丙酮酸钠10.0 g 葡萄糖2.5 g 蒸馏水1 000 mLpH 7.30.2A.1.2 制法将上述成分混合,加热,轻轻搅拌并溶解,调节pH,分装,每瓶225 mL,121 高压灭菌15 min。A.2 7.5%膏5.0 g 氯化钠75 g 蒸馏水1 000 mL pH 7.4A.2.2 制法将上述成分加热溶解,调节pH,分装,每瓶225 mL,121 高压灭菌15 min。A.3 血血L脱纤维羊血(或兔血)5 mL10 mLA.3.2 制法:加热

2、溶化琼脂,冷却至50,以无菌操作加入脱纤维羊血,摇匀,倾注平板。血琼脂平板:蛋白胨10g 牛肉膏5g 氯化钠5g 琼脂1020g 蒸馏水1000ml 煮沸至充分溶解,高压灭菌1520min 待冷却至50左右时加入50ml抗凝羊血(除去纤维)或兔血。摇匀或搅匀倒平板或试管斜面。温度过高,培养基呈棕褐色;温度过低则不利于血液与培养基混匀。A.4 BairdP1支加入金黄色葡萄球菌的营养肉汤培养液或菌悬液0.5ml作阳性对照,另1支加入营养肉汤或0.9无菌氯化钠溶液0.5ml作阴性对照。阳性和阴性对照阳性和阴性对照mL金黄色葡萄球菌肉浸液肉汤24小时培养物充分混匀,置361C培养,每隔半小时观察一次,连续观察6小时,出现凝固,即将小试管倾斜或倒置时,内容物不流动,判为阳性。同时做阴阳性对照。耐热核酸酶试验:将24小时肉汤培养物沸水浴处理15min,用接种环划线刺种于甲苯胺兰-DNA平板,361C培养24小时,在刺种线周围出现淡粉色者为阳性。本试验金黄色葡萄球菌为阳性。

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