1、红细胞计数（优选）红细胞计数（优选）红细胞计数思考思考r 出生后造血，红细胞生成部位出生后造血，红细胞生成部位 ，红细胞破坏部位红细胞破坏部位 。r 正常情况下，成人外周血中是否存在有核正常情况下，成人外周血中是否存在有核红细胞？红细胞？r 网织红细胞只存在于骨髓中。网织红细胞只存在于骨髓中。r 成熟红细胞只存在于外周血中。成熟红细胞只存在于外周血中。正常情况下，红细胞生成与破坏保持动态平衡正常情况下，红细胞生成与破坏保持动态平衡，血液中红细胞数量保持在相对恒定的范围。，血液中红细胞数量保持在相对恒定的范围。如何获得血液中如何获得血液中红细胞数量？红细胞数量？红细胞计数红细胞计数（red bl
2、ood cell count,RBCred blood cell count,RBC）n测定单位体积血液中红细胞的数量测定单位体积血液中红细胞的数量n诊断贫血及红细胞增多的指标之一诊断贫血及红细胞增多的指标之一n红细胞计数的方法红细胞计数的方法 n显微镜计数法显微镜计数法 n血液分析仪法血液分析仪法n稀释血液稀释血液n计数红细胞计数红细胞n数据换算数据换算显微镜计数法显微镜计数法 r计数红细胞时，为何使用等渗稀释液？计数红细胞时，为何使用等渗稀释液？r在计数红细胞时，还能看到哪些细胞？在计数红细胞时，还能看到哪些细胞？r这些细胞是否会对红细胞计数结果产生这些细胞是否会对红细胞计数结果产生影响？
3、影响？思考题思考题显微镜计数法显微镜计数法n 红细胞保持其形态特征红细胞保持其形态特征，依据形态特点计数，依据形态特点计数，计数准确性高。计数准确性高。n未破坏白细胞，未排除白细胞数量的影未破坏白细胞，未排除白细胞数量的影响。响。n人工操作，影响环节多，误差大，精密人工操作，影响环节多，误差大，精密度低。度低。Hb与O2可逆性结合：血气分析法人工操作，影响环节多，误差大，精密度低。优点：操作简单，反应速度快，产物稳定，便于质控。Hb与O2可逆性结合：血气分析法这些细胞是否会对红细胞计数结果产生影响？废弃物：妥善处理废液。仪器法计数红细胞时，是否真正认识红细胞而计数？直接计算（符合WHO标准的分
4、光光度计）血红蛋白（hemoglobin，Hb）标本：引起血清浊度增加的因素致Hb假性增高。红细胞计数（red blood cell count,RBC）红细胞保持其形态特征，依据形态特点计数，计数准确性高。成熟红细胞只存在于外周血中。造血物质缺乏或利用障碍：肾性贫血、缺铁性贫血，巨幼细胞性贫血。显微镜法红细胞计数误差来源有三个采用电阻抗法或激光散射法血液分析仪法血液分析仪法n采用电阻抗法或激光散射法采用电阻抗法或激光散射法r仪器法计数红细胞时，是否真正认识仪器法计数红细胞时，是否真正认识红细胞而计数？红细胞而计数？思考思考 小红细胞导致仪器法红细胞计数结果假性降低小红细胞导致仪器法红细胞计数
5、结果假性降低方法学评价方法学评价方法方法 优点优点 缺点缺点 适用范围适用范围 显微镜显微镜计数法计数法 传统方法，设传统方法，设备简单，廉价备简单，廉价 费时费力，费时费力，精密度低精密度低 参考方法；分析参考方法；分析仪异常结果复核仪异常结果复核 血液分血液分析仪法析仪法操作便捷，操作便捷，易于标准化，易于标准化，精密度高精密度高 价贵；环境价贵；环境要求较高要求较高 健康人群普查；健康人群普查；大批量标本筛检大批量标本筛检 质量保证（显微镜法）质量保证（显微镜法）n技术误差技术误差n仪器误差仪器误差n分布误差分布误差n显微镜法红细胞计数误差来源有三个显微镜法红细胞计数误差来源有三个Hb与
6、O2可逆性结合：血气分析法细胞内在缺陷（遗传性缺陷）废弃物：妥善处理废液。RBC参考区间上限，RBC增多废弃物：妥善处理废液。Hb测定即测定血液中各种血红蛋白的总浓度。血红蛋白（hemoglobin，Hb）681012/L，是否贫血？是红细胞内与氧气结合的运输蛋白。成年女性：110 150 g/LSDS-Hb测定法（HiCN替代方法）这些细胞是否会对红细胞计数结果产生影响？仪器法计数红细胞时，是否真正认识红细胞而计数？细胞内在缺陷（遗传性缺陷）仪器法计数红细胞时，是否真正认识红细胞而计数？计数红细胞时，为何使用等渗稀释液？RBC参考区间下限，即贫血红细胞保持其形态特征，依据形态特点计数，计数准
7、确性高。仪器法计数红细胞时，是否真正认识红细胞而计数？皮肤采血皮肤采血 静脉采血静脉采血 静脉采血静脉采血 参考区间参考区间n 成年男性成年男性：（：（4.05.5）1012/Ln 成年女性：（成年女性：（3.55.0）1012/Ln 新生儿：（新生儿：（6.07.0）1012/LRBC存在年龄存在年龄与性别的差异与性别的差异李某，李某，RBC 3.681012/L，是否贫血？，是否贫血？临床意义临床意义RBC参考区间上限，参考区间上限，RBC增增多多 RBC参考区间下限，即贫血参考区间下限，即贫血生理性生理性变化变化病理性病理性变化变化生理性增多生理性增多 生理性缺氧引起生理性缺氧引起6个月
8、-2岁婴儿n相对性增多相对性增多：见于呕吐、高热等引起暂时性：见于呕吐、高热等引起暂时性血液浓缩。血液浓缩。通过补液，血容量恢复正常，红细胞通过补液，血容量恢复正常，红细胞增多即消失。增多即消失。n绝对性增多绝对性增多：继发性增多，由继发性增多，由EPOEPO代偿性代偿性或或非代偿性增高非代偿性增高引起。引起。原发性增多，红细胞系统异常增殖性疾病。原发性增多，红细胞系统异常增殖性疾病。病理性增多病理性增多 SDS-Hb测定法（HiCN替代方法）标本：引起血清浊度增加的因素致Hb假性增高。SDS-Hb测定法（HiCN替代方法）Hb与O2可逆性结合：血气分析法概念：红细胞计数、血红蛋白测定或血细胞
9、比容低于相同性别、相同年龄组参考区间下限。Hb在成熟红细胞内分布特点（近胞膜处多，中心部少）决定了红细胞的双凹圆盘形状。细胞外在异常（获得性因素）继发性增多，由EPO代偿性或非代偿性增高引起。细胞外在异常（获得性因素）RBC参考区间下限，即贫血质量保证（比色法）SDS-Hb测定法（HiCN替代方法）细胞内在缺陷（遗传性缺陷）仪器法计数红细胞时，是否真正认识红细胞而计数？血液中血红蛋白的存在形式SDS-Hb测定法（HiCN替代方法）这些细胞是否会对红细胞计数结果产生影响？出生后造血，红细胞生成部位 ，红细胞破坏部位 。原发性增多，红细胞系统异常增殖性疾病。Hb A6445844000251A36
10、7.存在形式 所占比例3 13 23 3生成减少生成减少 破坏过多破坏过多 血管丢失血管丢失 概念：红细胞计数、血红蛋白测定或血细胞比容概念：红细胞计数、血红蛋白测定或血细胞比容低于相同性别、相同年龄组参考区间下限。低于相同性别、相同年龄组参考区间下限。病因学分类病因学分类 红细胞生成减少红细胞生成减少 n骨髓造血功能减退或衰竭：再生障碍骨髓造血功能减退或衰竭：再生障碍性贫血。性贫血。n造血物质缺乏或利用障碍：肾性贫血、造血物质缺乏或利用障碍：肾性贫血、缺铁性贫血，巨幼细胞性贫血。缺铁性贫血，巨幼细胞性贫血。n 细胞内在缺陷（遗传性缺陷）细胞内在缺陷（遗传性缺陷）膜缺陷、酶缺陷、血红蛋白异常致
11、红细胞寿膜缺陷、酶缺陷、血红蛋白异常致红细胞寿命缩短。命缩短。n 细胞外在异常（获得性因素）细胞外在异常（获得性因素）免疫性因素：输血血型不合、新生儿溶血病免疫性因素：输血血型不合、新生儿溶血病等。等。非免疫性因素：机械损伤、寄生虫、细菌及非免疫性因素：机械损伤、寄生虫、细菌及脾亢等。脾亢等。红细胞破坏过多红细胞破坏过多 血液丢失：血液丢失：急性或慢性失血引发急性或慢性失血引发的贫血的贫血血红蛋白（血红蛋白（hemoglobinhemoglobin，Hb Hb）n 在有核红细胞及网织红细胞内合成的。在有核红细胞及网织红细胞内合成的。n 是红细胞内与氧气结合的运输蛋白。是红细胞内与氧气结合的运输
12、蛋白。n HbHb在成熟红细胞内分布特点（近胞膜处在成熟红细胞内分布特点（近胞膜处多，中心部少）决定了红细胞的双凹圆多，中心部少）决定了红细胞的双凹圆盘形状。盘形状。n 合成速度受促红细胞生成素（合成速度受促红细胞生成素（EPOEPO）与雄）与雄激素调节。激素调节。RBC与与Hb测定用于贫血诊断测定用于贫血诊断红细胞红细胞A红细胞红细胞B Hb（四聚体）（四聚体）珠蛋白珠蛋白血红素血红素2条条链链2条非条非链链原原卟啉卟啉铁原子铁原子血红蛋白组成血红蛋白组成 血液中血红蛋白的存在形式血液中血红蛋白的存在形式 存在形式存在形式 所占比例所占比例还原血红蛋白（还原血红蛋白（FeFe2+2+）正常成
13、人正常成人99%99%氧合血红蛋白氧合血红蛋白碳氧血红蛋白碳氧血红蛋白硫化血红蛋白硫化血红蛋白高铁血红蛋白（高铁血红蛋白（FeFe3+3+）1%1%HbHb测定即测定血液中各种血红蛋白的总浓度。测定即测定血液中各种血红蛋白的总浓度。n 血液的物理特性：比重法，折射仪法血液的物理特性：比重法，折射仪法n HbHb的分子组成：全血铁法的分子组成：全血铁法n HbHb与与O O2 2可逆性结合：血气分析法可逆性结合：血气分析法n HbHb衍生物光谱特点：衍生物光谱特点：HiCNHiCN，SDS-SDS-HbHb等等HbHb检测原理检测原理 HiCN法检测原理法检测原理Hb(Fe2+)K3Fe(CN)
14、6Hi(Fe3+)CN-HiCN HiCN测定测定法法n计算计算n直接计算（符合直接计算（符合WHOWHO标准的分光光度计）标准的分光光度计）HbHb A A64458644584400044000251251A A367.7367.7n以以 HiCNHiCN参考液绘制标准曲线，利用吸光参考液绘制标准曲线，利用吸光 度度A A在标准曲线上查出在标准曲线上查出HbHb浓度浓度方法学评价方法学评价n缺点：缺点：试剂有毒、高试剂有毒、高WBCWBC造成试剂混浊、造成试剂混浊、HbCOHbCO 转化慢、不能测转化慢、不能测SHbSHb。HiCN测定法测定法（参考方法）（参考方法）n优点：操作简单，反应
15、速度快，产物稳优点：操作简单，反应速度快，产物稳定，便于质控。定，便于质控。方法学评价方法学评价n优点：操作简单，优点：操作简单，试剂无毒试剂无毒，结果准确，结果准确，重复性好。重复性好。n缺点：缺点：SDSSDS质量差异大；消光系数未定，质量差异大；消光系数未定，不能直接计算不能直接计算HbHb浓度浓度；不能测定；不能测定SHbSHb；SDSSDS破坏白细胞破坏白细胞。SDS-SDS-HbHb测定法测定法（HiCNHiCN替代方法）替代方法）质量保证（比色法）质量保证（比色法）n 标本：引起血清浊度增加的因素致标本：引起血清浊度增加的因素致HbHb假性假性增高。增高。n 器材及试剂：定期校准
16、仪器，选用合格的器材及试剂：定期校准仪器，选用合格的微量采血管和刻度吸管，保证试剂质量。微量采血管和刻度吸管，保证试剂质量。n 技术操作：控制技术误差。技术操作：控制技术误差。n 废弃物：妥善处理废液。废弃物：妥善处理废液。SDS-Hb测定法（HiCN替代方法）成年男性：120160 g/L造血物质缺乏或利用障碍：肾性贫血、缺铁性贫血，巨幼细胞性贫血。成年女性：110 150 g/LHb与O2可逆性结合：血气分析法血红蛋白（hemoglobin，Hb）Hb A6445844000251A367.正常情况下，成人外周血中是否存在有核红细胞？造血物质缺乏或利用障碍：肾性贫血、缺铁性贫血，巨幼细胞性
17、贫血。标本：引起血清浊度增加的因素致Hb假性增高。出生后造血，红细胞生成部位 ，红细胞破坏部位 。SDS-Hb测定法（HiCN替代方法）计数红细胞时，为何使用等渗稀释液？681012/L，是否贫血？RBC参考区间上限，RBC增多是红细胞内与氧气结合的运输蛋白。成熟红细胞只存在于外周血中。直接计算（符合WHO标准的分光光度计）存在形式 所占比例红细胞保持其形态特征，依据形态特点计数，计数准确性高。质量保证（比色法）SDS-Hb测定法（HiCN替代方法）计数红细胞时，为何使用等渗稀释液？未破坏白细胞，未排除白细胞数量的影响。概念：红细胞计数、血红蛋白测定或血细胞比容低于相同性别、相同年龄组参考区间
18、下限。细胞外在异常（获得性因素）造血物质缺乏或利用障碍：肾性贫血、缺铁性贫血，巨幼细胞性贫血。器材及试剂：定期校准仪器，选用合格的微量采血管和刻度吸管，保证试剂质量。在计数红细胞时，还能看到哪些细胞？测定单位体积血液中红细胞的数量成年女性：110 150 g/L病理性减少（贫血）血红蛋白（hemoglobin，Hb）以 HiCN参考液绘制标准曲线，利用吸光 度A在标准曲线上查出Hb浓度优点：操作简单，反应速度快，产物稳定，便于质控。红细胞保持其形态特征，依据形态特点计数，计数准确性高。红细胞保持其形态特征，依据形态特点计数，计数准确性高。出生后造血，红细胞生成部位 ，红细胞破坏部位 。传统方法
19、，设备简单，廉价显微镜法红细胞计数误差来源有三个RBC参考区间上限，RBC增多消光系数未定，不能直接计算Hb浓度；技术操作：控制技术误差。这些细胞是否会对红细胞计数结果产生影响？废弃物：妥善处理废液。正常情况下，红细胞生成与破坏保持动态平衡，血液中红细胞数量保持在相对恒定的范围。原发性增多，红细胞系统异常增殖性疾病。是红细胞内与氧气结合的运输蛋白。RBC参考区间下限，即贫血SDS-Hb测定法（HiCN替代方法）细胞内在缺陷（遗传性缺陷）成年女性：110 150 g/LHb的分子组成：全血铁法易于标准化，精密度高以 HiCN参考液绘制标准曲线，利用吸光 度A在标准曲线上查出Hb浓度测定单位体积血液中红细胞的数量RBC参考区间上限，RBC增多病理性减少（贫血）细胞内在缺陷（遗传性缺陷）成年男性：120160 g/L参考区间参考区间n 成年男性：成年男性：120120160 g/L160 g/Ln 成年女性：成年女性：110 110 150 g/L150 g/Ln 新生儿：新生儿：170170200 g/L200 g/LHb存在年龄存在年龄与性别的差异与性别的差异
