1、肿瘤免疫学肿瘤免疫学1一 肿瘤相关的抑制分子n抑制性细胞因子；IL-10,TGF-b,n抑制性膜分子；B7-H1,B7-H4,HLA-G,n其他小分子抑制物 No2二 肿瘤相关的抑制细胞nCD4+CD25+Foxp3+Treg;n髓性来源的抑制细胞（myeloid-derived suppressor cell,MDSC）;n肿瘤相关的巨噬细胞（tumor-associated macrophage,TAM）;345Molecular pathways of macrophage polarization and their role in tumor progression6TAMs ori
2、ginate from blood monocytes recruited at the tumor site by molecules produced by neoplastic and by stromal cells7三抑制抗肿瘤效应细胞n抑制NK细胞杀伤活性；1.肿瘤细胞上表达KAR 配体MICA/MICB 下降；2 肿瘤灶局部MMP可将MICA、MICB降解为可溶分子，封闭 NKG2D（KAR）；3肿瘤微环境中IL-10、TGF-b可抑制NK细胞杀伤活性；n抑制T细胞激活和功能；1.肿瘤细胞表面共刺激分子（B7-1,B7-2）、MHCII分子和Fas等表达下降；2.肿瘤细胞分泌IL
3、-10、TGF-b抑制性细胞因子；3.肿瘤灶局部侵润Treg、MDSC、iDC等具有负性调节作用的细胞；4.肿瘤细胞合成与分泌多种具有负性调节作用的活性分子，如NO、IDO等8四肿瘤细胞直接逃逸免疫监视9（一）肿瘤细胞缺乏激发免疫应答所必需的成分n肿瘤抗原的免疫原性弱及抗原调变；nMHC抗原表达异常；n肿瘤细胞表面抗原覆盖或被封闭；n肿瘤抗原的加工、提呈障碍；n共刺激分子及粘附分子表达下降。10HLA expression pattern of cancer cellsHLA negativeHLA positiveHLA heterogenous11（二）肿瘤细胞逃逸肿瘤发生早期其细胞数量少
4、，不足以刺激机体产生足够强的应答。肿瘤生长至一定程度并形成细胞集团后，肿瘤抗原编码基因可能发生突变，从而干扰或逃避机体的免疫识别，这种现象称为肿瘤细胞逃逸（sneaking through）12(三)肿瘤抗原诱导免疫耐受n肿瘤细胞在宿主体内长期存在和不断增长的过程中，其肿瘤抗原可作用于处在不同分化阶段的特异性淋巴细胞，其中处于幼稚阶段的淋巴细胞接触肿瘤抗原后即可被诱发免疫耐受。13（四）肿瘤细胞诱导免疫细胞凋亡或自身抵抗凋亡近年发现，多种肿瘤细胞（如肝癌、肺癌、乳腺癌、胃肠道肿瘤等）高表达FasL 。在机体抗肿瘤免疫应答过程中，活化的肿瘤特异性T细胞Fas表达增高，肿瘤细胞可通过FasL/Fa
5、s途径介导肿瘤特异性T细胞凋亡。另一方面，肿瘤细胞内某些Fas信号传导分子可发生获得性缺陷，从而抵制FasL介导的细胞凋亡，并逃逸免疫攻击。14肿瘤细胞诱导免疫细胞凋亡或抵抗凋亡肿瘤细胞诱导免疫细胞凋亡或抵抗凋亡凋亡相关治疗：修饰肿瘤细胞促进其凋亡，修饰免疫凋亡相关治疗：修饰肿瘤细胞促进其凋亡，修饰免疫细胞使其抗凋亡细胞使其抗凋亡 15（五）肿瘤的免疫抑制作用n机体免疫系统功能障碍；化疗与放疗、肾上腺皮质激素、抗淋巴细胞球蛋白处理可抑制机体免疫功能状态；n恶性肿瘤直接或间接抑制机体免疫功能。恶性肿瘤可直接侵犯免疫器官，也可释放免疫抑制因子（TGF-b、CSF、PGE等）或激活体内抑制细胞。16
6、Schematic representation of the impact of the PD-1/PD-L1 axis on T and NK cell cytotoxic functions Multiple myeloma is a cancer of the blood,characterized by accumulation of a plasma cell clone in the bone marrow.Lenalidomide is one of the novel drug agents used to treat multiple myeloma.It is a mor
7、e potent molecular analog of thalidomide,which inhibits tumor angiogenesis,tumor secreted cytokines and tumor proliferation through the induction of apoptosis.17Schematic representation of the impact of Lenalidomide on MM cell survival and immune escape 18细胞内织网应急(Endoplasmic Reticulum Stress)与肿瘤细胞逃逸
8、19Tumor Microenvironmental Factorsand Conditions Perturbing ER Homeostasis20Consequences of ER Stress in Cancer Cells21Effects of ER Stress in Cancer-Associated Myeloid Cells22Therapeutic Strategies to ControlER Stress Responses in Cancer23肿瘤细胞对负性刺激信号阻断治疗的抵抗机制Rationally combining immunotherapies to
9、improve efficacy of immunecheckpoint blockade in solid tumors24Progression-free survival curves for chemotherapy,anti-PD-1-and anti-CTLA-4-checkpoint blockers 25Different processes underlying primary and/or secondary resistance to checkpoint blocking antibodies in solid tumors 26Therapeutic options
10、to target immune resistance 27Immune effects of molecular alterations within the tumor microenvironment are illustrated28Adaptive clinical trial design allows improved therapeutic decisions29肿瘤细胞表观遗传改变与逃逸30Crosstalk between cancer cells and the milieu of immune and stromal cells within the tumour mi
11、croenvironment31The Janus-faced roles of DNMT and HDAC inhibition in tumour immune surveillance and escape mechanisms32 影响影响T细胞识别肿瘤抗原细胞识别肿瘤抗原 （如唾液粘多糖或封闭因子）（如唾液粘多糖或封闭因子）（LMP、TAP表达表达）肿瘤抗原特异性肿瘤抗原特异性T细胞无能细胞无能33 肿瘤早期瘤细胞量少、肿瘤抗原编码基因突变肿瘤早期瘤细胞量少、肿瘤抗原编码基因突变 干扰或逃避机体对肿瘤抗原的免疫识别干扰或逃避机体对肿瘤抗原的免疫识别 *幼稚淋巴细胞接触肿瘤抗原幼稚淋巴
12、细胞接触肿瘤抗原诱发免疫耐受诱发免疫耐受 *瘤细胞高表达瘤细胞高表达FasL 活化的肿瘤特异性活化的肿瘤特异性T细胞（高表达细胞（高表达Fas）凋亡）凋亡 *瘤细胞内瘤细胞内Fas信号传导分子获得性缺陷信号传导分子获得性缺陷 抵制抵制FasL介导的细胞凋亡介导的细胞凋亡34 *机体免疫系统功能障碍（机体免疫系统功能障碍（CTL、NK、DC）*恶性肿瘤直接或间接抑制机体免疫功能恶性肿瘤直接或间接抑制机体免疫功能 *细胞因子及其受体表达异常细胞因子及其受体表达异常 生长因子效应生长因子效应 细胞恶性增殖细胞恶性增殖 *某些粘附分子表达异常某些粘附分子表达异常 肿瘤细胞浸润和转移肿瘤细胞浸润和转移
13、*T细胞的抑制性功能亚群细胞的抑制性功能亚群 抑制抑制CD4+和和CD8+T细胞增殖与功能细胞增殖与功能35免疫抑制免疫抑制调节性树突状细胞（调节性树突状细胞（regDC）肿瘤相关的巨噬细胞肿瘤相关的巨噬细胞（TAM）髓样前体抑制细胞（髓样前体抑制细胞（MDSC）调节性调节性T细胞（细胞（Treg）调节性调节性B细胞细胞36肿瘤微环境中的肿瘤微环境中的DC免疫抑制免疫抑制37 肿瘤相关的巨噬细胞肿瘤相关的巨噬细胞（Tumor Associated Macrophage,TAM）巨噬细胞不是均一的细胞群，其表型和功能表现巨噬细胞不是均一的细胞群，其表型和功能表现出高度的异质性和可塑性。出高度的异
14、质性和可塑性。38肿瘤微环境诱导肿瘤微环境诱导M1M1细胞向细胞向M2M2细胞极化（分化）细胞极化（分化）39MDSC 的免疫抑制功能的免疫抑制功能MDSC既能抑制适应性免疫又能抑制固有免疫既能抑制适应性免疫又能抑制固有免疫 抑制抑制CD4CD4+T T细胞和细胞和CD8CD8+T T细胞细胞增殖增殖和和归巢归巢；促进促进M M 就向促进肿瘤生长的就向促进肿瘤生长的M2M2转化转化；阻断阻断NKNK细胞分泌细胞分泌IFN-IFN-而抑制其胞毒活性。而抑制其胞毒活性。40肿瘤局部肿瘤局部Treg的产生机制的产生机制COX-2、CD70、Galectin-1、IDO414243（六）（六）肿瘤编辑
15、肿瘤编辑（cancer immunoediting）*自然选择（自然选择（natural selection）441.1.肿瘤发生的阶段（从监视肿瘤发生的阶段（从监视逃逸）逃逸）(1)(1)肿瘤清除阶段肿瘤清除阶段 固有固有/适应性免疫机制清除部分肿瘤细胞。适应性免疫机制清除部分肿瘤细胞。(2)(2)肿瘤平衡阶段肿瘤平衡阶段 在多种肿瘤监视压力下，某些肿瘤细胞发生在多种肿瘤监视压力下，某些肿瘤细胞发生突变并逃逸而生存下来，即突变并逃逸而生存下来，即“适者生存适者生存”。(3)(3)肿瘤逃逸阶段肿瘤逃逸阶段 逃逸的肿瘤细胞无控制生长。逃逸的肿瘤细胞无控制生长。45肿瘤抑制作用肿瘤抑制作用肿瘤促进
16、作用肿瘤促进作用炎性细胞炎性细胞的存在的存在意味意味着着良好的预后良好的预后结肠癌中的嗜酸性粒细胞；乳腺癌、胰腺癌中的巨噬细胞合适激活巨噬细胞杀伤癌细胞，诱发癌症血管壁破坏炎性细胞炎性因子炎性因子炎性微环境炎性微环境炎性细胞杀伤肿瘤细胞炎性细胞杀伤肿瘤细胞、抑制肿瘤发生发展抑制肿瘤发生发展炎症与基因稳定性炎症与基因稳定性46针对肿瘤免疫逃逸的治疗对策针对肿瘤免疫逃逸的治疗对策47肿瘤特异性主动免疫肿瘤特异性主动免疫治疗治疗增强肿瘤细胞增强肿瘤细胞TAA/TSATAA/TSA的表的表达；增强肿瘤细胞达；增强肿瘤细胞MHCMHC分子分子的表达的表达 1)1)基因修饰的肿瘤细胞疫苗基因修饰的肿瘤细胞
17、疫苗 *基因修饰基因修饰(肿瘤抗原，肿瘤抗原，MHCMHC分子分子，协同刺激分子，协同刺激分子，CK/CKRCK/CKR，AM)AM)瘤细胞致瘤性瘤细胞致瘤性免疫免疫原性原性48肿瘤特异性主动免肿瘤特异性主动免疫治疗疫治疗增强肿瘤细胞增强肿瘤细胞TAA/TSATAA/TSA的的表达；增强肿瘤细胞表达；增强肿瘤细胞MHCMHC分子的表达分子的表达 1)1)基因修饰的肿瘤细胞疫基因修饰的肿瘤细胞疫苗苗 *基因修饰基因修饰(肿瘤抗原，肿瘤抗原，MHCMHC分子，分子，协同刺激分子，协同刺激分子，CK/CKRCK/CKR，AM)AM)瘤细胞致瘤性瘤细胞致瘤性免疫原性免疫原性基因修饰树突状细胞基因修饰树
18、突状细胞49肿瘤特异性主动免疫治疗肿瘤特异性主动免疫治疗增强肿瘤细胞增强肿瘤细胞TAA/TSATAA/TSA的表达；增强肿瘤细胞的表达；增强肿瘤细胞MHCMHC分子的表达分子的表达 1)1)基因修饰的肿瘤细胞疫苗基因修饰的肿瘤细胞疫苗 *基因修饰基因修饰(肿瘤抗原，肿瘤抗原，MHCMHC分子，分子，协同刺激分子，协同刺激分子，CK/CKRCK/CKR，AMAM)瘤细胞致瘤性瘤细胞致瘤性免疫原性免疫原性50肿瘤抗原肽或基因修饰的肿瘤抗原肽或基因修饰的APCAPC疫苗疫苗 *肿瘤抗原肿瘤抗原(肽肽)刺激刺激APCAPC *肿瘤抗原肿瘤抗原mRNAmRNA导入导入APCAPC *肿瘤抗原肿瘤抗原cD
19、NAcDNA转染转染APCAPC *DC-DC-瘤细胞嵌合体瘤细胞嵌合体51肿瘤特异性主动免疫治疗肿瘤特异性主动免疫治疗增强肿瘤细胞增强肿瘤细胞TAA/TSATAA/TSA的表达；增强肿瘤细胞的表达；增强肿瘤细胞MHCMHC分子的表达分子的表达 1)1)基因修饰的肿瘤细胞疫苗；基因修饰的肿瘤细胞疫苗；2 2）基因修饰的树突状细胞）基因修饰的树突状细胞 *基因修饰基因修饰(肿瘤抗原，肿瘤抗原，MHCMHC分子，协同刺激分子，分子，协同刺激分子，CK/CKRCK/CKR，AM)AM)瘤细胞致瘤性瘤细胞致瘤性免疫原性免疫原性52 （1 1）肿瘤相关的病毒疫苗）肿瘤相关的病毒疫苗 *重组病毒疫苗（肿瘤
20、抗原肽重组病毒疫苗（肿瘤抗原肽+灭活病毒）灭活病毒）增强肿瘤抗原的免疫原性增强肿瘤抗原的免疫原性（2 2）癌基因产物分子疫苗）癌基因产物分子疫苗*癌基因点突变癌基因点突变(如如p21ras)或易位或易位(p210BCR-ABL)编码产物具有较强免疫原性编码产物具有较强免疫原性（3 3）HSP-HSP-肽复合物肿瘤疫苗肽复合物肿瘤疫苗（4 4）抗独特型抗体疫苗）抗独特型抗体疫苗 *某些抗独特型抗体（作为抗原内影像）某些抗独特型抗体（作为抗原内影像）模拟抗原模拟抗原 作为疫苗作为疫苗（5 5）人工合成的肿瘤多肽疫苗）人工合成的肿瘤多肽疫苗 *人工合成人工合成TAA多肽多肽 或构建表达或构建表达TA
21、A的重组病毒的重组病毒 作为疫苗作为疫苗（6 6）基因工程疫苗）基因工程疫苗 *将外源基因将外源基因(肿瘤肿瘤Ag、MHC抗原、抗原、AM、CK、CKR)靶向导入肿瘤细胞靶向导入肿瘤细胞 直接直接/间接增强肿瘤细胞免疫原性间接增强肿瘤细胞免疫原性 刺激机体产生较强抗瘤免疫应答刺激机体产生较强抗瘤免疫应答 *肿瘤核酸疫苗（裸肿瘤核酸疫苗（裸DNA疫苗）疫苗）编码肿瘤抗原的编码肿瘤抗原的DNA(或或RNA)质粒直接肌肉注射。质粒直接肌肉注射。5354555657治疗型疫苗开创未来治疗型疫苗开创未来57应用针对肿瘤细胞表面或胞内分子应用针对肿瘤细胞表面或胞内分子（如肿瘤抗原、（如肿瘤抗原、CKR、癌
22、基因产物等）的抗体、癌基因产物等）的抗体或其他相应配体，定向地将抗瘤效应分子（药或其他相应配体，定向地将抗瘤效应分子（药物、放射性核素、酶、毒素、超抗原或其他肿物、放射性核素、酶、毒素、超抗原或其他肿瘤毒性物质）携带至肿瘤灶局部发挥治疗作用。瘤毒性物质）携带至肿瘤灶局部发挥治疗作用。抗瘤抗体抗瘤抗体/杀瘤效应分子、抗瘤抗杀瘤效应分子、抗瘤抗体体/超抗原、抗超抗原、抗CKR抗体抗体/杀瘤效应分子、杀瘤效应分子、CK/杀瘤效应分子、双特异性抗体等。杀瘤效应分子、双特异性抗体等。基于抗体的靶向治疗基于抗体的靶向治疗58ImmunotherapyAntibody-based:Naked antibod
23、y,bi-,tri-,specific antibodyAntibody-drug conjugate(ADC)Antibody-cytokine conjugate(ACC)Immune cell based:Immune cell based:Cytokine induced killer cell(CIK)Antibody-directed,cytokine boosted,cell therapy:CAR-T,CAR-NK59606162Nature Medicine 2012Nature Medicine 2012年报道，根据年报道，根据Thomson Reuters PharmaT
24、homson Reuters Pharma的预测，的预测，20122012年年销售前十位的药物中抗体占销售前十位的药物中抗体占7 7个。个。抗体开创未来抗体开创未来6263抗体开创未来抗体开创未来63 63第二代抗体：抗肿瘤单克隆抗体第二代抗体：抗肿瘤单克隆抗体(CTLA-4 mAb；PD-1/PD-L1 mAb)6465666768细胞因子治疗细胞因子治疗 *外源性细胞因子治疗、细胞因子导向疗法、外源性细胞因子治疗、细胞因子导向疗法、细胞因子基因治疗。细胞因子基因治疗。过继性细胞免疫治疗过继性细胞免疫治疗 (adoptive cellular immunotherapy，AIT)向肿瘤患者转
25、输抗瘤效应细胞，向肿瘤患者转输抗瘤效应细胞，直接杀伤瘤细胞或增强机体抗瘤免疫应答，达到直接杀伤瘤细胞或增强机体抗瘤免疫应答，达到治疗肿瘤的目的。治疗肿瘤的目的。TIL、LAK、CIK、抗、抗CD3抗体抗体激活的激活的CTL、经肿瘤抗原刺激的、经肿瘤抗原刺激的DC等。等。6970基因治疗基因治疗 *导入正常或野生型基因导入正常或野生型基因 诱发机体产生有效抗瘤免疫效应诱发机体产生有效抗瘤免疫效应 增强对肿瘤的特异性识别增强对肿瘤的特异性识别 抑制或阻断肿瘤相关基因的表达抑制或阻断肿瘤相关基因的表达 增强肿瘤对药物的敏感性增强肿瘤对药物的敏感性71（1 1）调控癌基因与抑癌基因表达和功能）调控癌基
26、因与抑癌基因表达和功能 *反义反义DNA、反义、反义RNA、RNAi、核酶、核酶 抑制癌基因表达抑制癌基因表达 *克隆或表达野生型抑癌基因克隆或表达野生型抑癌基因 恢复或增强其抑瘤效应恢复或增强其抑瘤效应72 内源内源dsRNA or 外源外源dsRNA 21-23nt dsRNA(19-25)RNAi核酸酶核酸酶(Dicer)+RNAi核酸酶核酸酶dsRNA mRNA-RNAi核酸酶核酸酶mRNAmRNA降解降解同源同源 gene DNA甲基化甲基化73（2 2）增强宿主抗肿瘤免疫功能）增强宿主抗肿瘤免疫功能 *外源外源CK基因导入效应细胞基因导入效应细胞 增强杀瘤效应增强杀瘤效应 *外源外
27、源CK或共刺激分子基因导入肿瘤细胞或共刺激分子基因导入肿瘤细胞 增强宿主抗瘤免疫应答增强宿主抗瘤免疫应答 *肿瘤抗原基因导入肿瘤细胞肿瘤抗原基因导入肿瘤细胞 增强肿瘤细胞免疫原性增强肿瘤细胞免疫原性74A：转入：转入HLA基因基因AD：转入：转入IL-2基因基因B：转入肿瘤抗原基因：转入肿瘤抗原基因C：转入：转入B7基因基因BCD75（3 3）提高化疗的疗效）提高化疗的疗效 1 1）自杀）自杀(suicide)(suicide)基因疗法基因疗法 酶解前药酶解前药(prodrug)提高肿瘤灶局部抗瘤药物浓度提高肿瘤灶局部抗瘤药物浓度 2 2）多药抗性基因）多药抗性基因(multi-drug re
28、sisitance gene,MDRmulti-drug resisitance gene,MDR)控制化疗副作用控制化疗副作用 （MDR：肿瘤细胞接触某一化疗药物后，不仅产生对：肿瘤细胞接触某一化疗药物后，不仅产生对该药的耐受，而且对其他结构、作用机制不同的药物该药的耐受，而且对其他结构、作用机制不同的药物也产生耐药性。）也产生耐药性。）3)3)肿瘤药物增敏基因肿瘤药物增敏基因 钙调素导入钙调素导入 癌细胞对抗癌药物（长春新碱）通透性、敏感性癌细胞对抗癌药物（长春新碱）通透性、敏感性 76（4 4）诱导细胞凋亡）诱导细胞凋亡（5 5）抑制端粒酶活性）抑制端粒酶活性77 (1)(1)细胞因子基
29、因治疗细胞因子基因治疗 1)将具有杀瘤效应的将具有杀瘤效应的CK基因导入免疫效应细胞基因导入免疫效应细胞 增强免疫细胞的杀瘤效应增强免疫细胞的杀瘤效应 2)将具有免疫调节作用的将具有免疫调节作用的CK基因转入肿瘤细胞中基因转入肿瘤细胞中 制备免疫原性更强的新型瘤苗制备免疫原性更强的新型瘤苗 3)将将CK基因转入基因转入APC 增强增强APC对肿瘤抗原的提呈功能或杀瘤活性对肿瘤抗原的提呈功能或杀瘤活性 4)将将CK基因转入成纤维细胞、内皮细胞、骨髓细胞中基因转入成纤维细胞、内皮细胞、骨髓细胞中 过继入体内持续表达细胞因子过继入体内持续表达细胞因子 5)裸露的裸露的CK基因表达质粒、脂质体包裹的基
30、因表达质粒、脂质体包裹的CK表达质粒表达质粒体、携带体、携带CK基因的痘苗病毒和腺病毒体内直接注射基因的痘苗病毒和腺病毒体内直接注射78(2)MHC(2)MHC基因治疗基因治疗 *肿瘤细胞的肿瘤细胞的MHC抗原表达低下或缺失抗原表达低下或缺失 *MHC基因转入肿瘤细胞基因转入肿瘤细胞制备瘤苗制备瘤苗(3)(3)协同刺激分子协同刺激分子(如如B7)B7)基因治疗基因治疗 *肿瘤细胞表达协同刺激分子水平下降肿瘤细胞表达协同刺激分子水平下降 T细胞激活的协同刺激信号减弱细胞激活的协同刺激信号减弱 机体抗瘤免疫应答受阻机体抗瘤免疫应答受阻(4)(4)抗体的基因治疗抗体的基因治疗 *构建抗肿瘤抗原单链抗
31、体构建抗肿瘤抗原单链抗体/膜抗原融合蛋白的基因膜抗原融合蛋白的基因 转入杀瘤效应细胞转入杀瘤效应细胞 表达于效应细胞膜表面的单链抗体具导向作用表达于效应细胞膜表面的单链抗体具导向作用 *构建胞内抗体构建胞内抗体(intrabody)基因基因 在胞内拮抗致瘤活性分子（如端粒酶）的作用在胞内拮抗致瘤活性分子（如端粒酶）的作用7980(5)(5)肿瘤抗原基因治疗肿瘤抗原基因治疗 *构建构建TAA或或TSA的免疫原性多肽基因的免疫原性多肽基因 导入细胞制成瘤苗导入细胞制成瘤苗 增强机体的抗瘤免疫应答增强机体的抗瘤免疫应答(6)(6)凋亡基因治疗凋亡基因治疗 *野生型抑癌基因（野生型抑癌基因（P53）导
32、入肿瘤细胞）导入肿瘤细胞 *Fas基因导入肿瘤细胞基因导入肿瘤细胞81(7)(7)自杀基因自杀基因(suicide gene)(suicide gene)治疗治疗 *病毒导向的酶解前药疗法病毒导向的酶解前药疗法(virus directed enzyme prodrug therapy,VDEPT)HSVtk基因定向导入肿瘤细胞基因定向导入肿瘤细胞 释放释放tk 使无毒性的前药使无毒性的前药(GCV)转变为毒性转变为毒性(磷酸化磷酸化GCV)在肿瘤灶局部维持高浓度的抗瘤药物在肿瘤灶局部维持高浓度的抗瘤药物(8)(8)与化疗有关的基因治疗与化疗有关的基因治疗 1）耐药基因疗法）耐药基因疗法*将多
33、耐药基因（将多耐药基因（MDR）转入造血干细胞）转入造血干细胞 提高机体对化疗药物所致骨髓损伤的耐受性提高机体对化疗药物所致骨髓损伤的耐受性 2）肿瘤药物增敏基因治疗）肿瘤药物增敏基因治疗 提高瘤细胞对药物的敏感性提高瘤细胞对药物的敏感性82(9)(9)综合性基因治疗综合性基因治疗 *联合基因治疗联合基因治疗 CK基因基因/CK基因、基因、CK基因基因/协同刺激分子基因协同刺激分子基因(IFN-/B7-1)、CK基因基因/MHC基因、基因、CK基因基因/肿瘤抗原基因、肿瘤抗原基因、CK基因基因/自杀基因联合治疗（自杀基因联合治疗（IL-2/TK）*基因治疗与其它疗法联合基因治疗与其它疗法联合
34、CK基因基因/化疗、化疗、CK基因基因/CK注射、注射、CK基因基因/过继细胞过继细胞(10)(10)抑癌基因的导入或修饰抑癌基因的导入或修饰83（1111）反义寡核苷酸技术，）反义寡核苷酸技术，siRNAsiRNA，核酶等，核酶等*抑制肿瘤相关蛋白表达抑制肿瘤相关蛋白表达 1)抑制血管新生相关分子抑制血管新生相关分子(如血管生成素如血管生成素)2)抑制促进血管内皮细胞生长的因子（抑制促进血管内皮细胞生长的因子（FGF、VEGF）3)抑制端粒酶活性抑制端粒酶活性 4)抑制癌基因产物表达抑制癌基因产物表达 5)抑制凋亡抑制分子抑制凋亡抑制分子(bcl-2)6)抑制效应性抑制效应性T细胞表达细胞表
35、达Fas84858687肿瘤患者的免疫治疗肿瘤患者的免疫治疗 主动免疫治疗主动免疫治疗细胞疫苗细胞疫苗分子疫苗分子疫苗DNA疫苗疫苗被动免疫治疗被动免疫治疗细胞因子治疗细胞因子治疗免疫相关基因治疗免疫相关基因治疗细胞因子基因细胞因子基因MHC分子基因分子基因抗体基因（胞内抗体）抗体基因（胞内抗体）88导向治疗导向治疗l 放射免疫治疗放射免疫治疗l抗体靶向疗法抗体靶向疗法l抗体导向酶解前药疗法抗体导向酶解前药疗法l靶向免疫毒素疗法靶向免疫毒素疗法l双功能抗体靶向疗法双功能抗体靶向疗法89靶向治疗90过继免疫疗法过继免疫疗法 取对肿瘤有免疫力的供者的淋巴细胞转输给取对肿瘤有免疫力的供者的淋巴细胞转
36、输给肿瘤患者，或取患者自身的免疫细胞在体外活化、肿瘤患者，或取患者自身的免疫细胞在体外活化、增殖后再转入患者体内，使其在患者体内发挥抗增殖后再转入患者体内，使其在患者体内发挥抗肿瘤作用。肿瘤作用。外周血淋巴细胞经外周血淋巴细胞经IL-2IL-2激活激活 LAK LAK 实体瘤中分离淋巴细胞经实体瘤中分离淋巴细胞经IL-2IL-2激活激活 TILTIL91细胞疫苗细胞疫苗基因修饰的肿瘤细胞基因修饰的肿瘤细胞 细胞因子的基因或细胞因子的基因或MHCIMHCI分子的基因，分子的基因，B7B7基基因等转移入肿瘤细胞，降低致瘤性，增强免疫因等转移入肿瘤细胞，降低致瘤性，增强免疫原性原性基因修饰的树突状细
37、胞（基因修饰的树突状细胞（DCDC）抗原肽负载DC 92分子疫苗分子疫苗1 1胚胎抗原疫苗胚胎抗原疫苗2 2与肿瘤发生有关的病毒疫苗与肿瘤发生有关的病毒疫苗3 3癌基因产物的分子疫苗癌基因产物的分子疫苗4 4抗独特型抗体疫苗抗独特型抗体疫苗5 5人工合成肽疫苗人工合成肽疫苗核酸疫苗核酸疫苗93待解决的重点与难点待解决的重点与难点肿瘤发生和逃逸机制的新观点肿瘤发生和逃逸机制的新观点肿瘤抗原肿瘤抗原免疫效应免疫效应肿瘤干细胞肿瘤干细胞94l 肿瘤本身具有不稳定性和异质性肿瘤本身具有不稳定性和异质性 逃逸；逃逸；l 肿瘤生存环境中的多种因素（如生长因子、营肿瘤生存环境中的多种因素（如生长因子、营 养
38、供给和免疫压力等）形成外界选择压力，使瘤细养供给和免疫压力等）形成外界选择压力，使瘤细胞发生突变，获得某种有利其生存的基因而得以存胞发生突变，获得某种有利其生存的基因而得以存活活。l肿瘤微环境有利于肿瘤微环境有利于TAMTAM、MDSCMDSC、TregTreg和和regDCregDC等免疫等免疫抑制性细胞产生抑制性细胞产生 逃逸逃逸。自然选择自然选择95待揭的谜团待揭的谜团 目前的抗肿瘤治疗方法之所以不能对肿瘤细胞斩目前的抗肿瘤治疗方法之所以不能对肿瘤细胞斩草除根，很有可能是因为这些方法主要针对的是草除根，很有可能是因为这些方法主要针对的是绝大多数已经分化的肿瘤细胞，而不能影响到肿绝大多数已
39、经分化的肿瘤细胞，而不能影响到肿瘤干细胞，因此治标不治本。肿瘤干细胞往往在瘤干细胞，因此治标不治本。肿瘤干细胞往往在药物治疗后处于休眠状态，即停止于细胞周期中药物治疗后处于休眠状态，即停止于细胞周期中的的G0/G1G0/G1期，从而得以存活，并在药物治疗后继期，从而得以存活，并在药物治疗后继续产生新的肿瘤细胞，使癌症复发；续产生新的肿瘤细胞，使癌症复发；只有治疗方法直接针对肿瘤干细胞时，才能彻底只有治疗方法直接针对肿瘤干细胞时，才能彻底根除患者体内的肿瘤。根除患者体内的肿瘤。肿瘤干细胞为癌症治疗带来新曙光肿瘤干细胞为癌症治疗带来新曙光 肿瘤干细胞研究的前沿应该在于如何分离出肿瘤肿瘤干细胞研究的
40、前沿应该在于如何分离出肿瘤干细胞，对分离出的肿瘤干细胞基因表达谱之类干细胞，对分离出的肿瘤干细胞基因表达谱之类的研究，确定其特定标记，才能用特异性的药物的研究，确定其特定标记，才能用特异性的药物杀灭肿瘤干细胞。杀灭肿瘤干细胞。亦可从干细胞特性入手，诱导其分化，使其丧失亦可从干细胞特性入手，诱导其分化，使其丧失自我更新的能力，如通过维甲酸诱导分化来治疗自我更新的能力，如通过维甲酸诱导分化来治疗AMLAML；如果想更有效的诱导其它肿瘤干细胞的分化，需如果想更有效的诱导其它肿瘤干细胞的分化，需要进一步了解调控干细胞由全能性转向分化的分要进一步了解调控干细胞由全能性转向分化的分子机制和信号途径。子机制
41、和信号途径。肿瘤干细胞为癌症治疗带来新曙光肿瘤干细胞为癌症治疗带来新曙光 正因为肿瘤干细胞是肿瘤发生过程中的最原始细胞，如正因为肿瘤干细胞是肿瘤发生过程中的最原始细胞，如果可以及早地识别并分离出肿瘤干细胞，就有可能依据果可以及早地识别并分离出肿瘤干细胞，就有可能依据其分子标志来对患者进行早期诊断。肿瘤干细胞具有能其分子标志来对患者进行早期诊断。肿瘤干细胞具有能自我更新、增殖的特征，因此对其增殖功能的检测可能自我更新、增殖的特征，因此对其增殖功能的检测可能成为肿瘤最早期诊断的标准。成为肿瘤最早期诊断的标准。此外，肿瘤干细胞的发现还为研发新一代高效的抗肿瘤此外，肿瘤干细胞的发现还为研发新一代高效的
42、抗肿瘤药物提供了新的靶点。药物提供了新的靶点。发现和阐明肿瘤干细胞增殖过程中的基因调控机理，将发现和阐明肿瘤干细胞增殖过程中的基因调控机理，将为抗肿瘤药物的研发提供新的理论基础，针对肿瘤干细为抗肿瘤药物的研发提供新的理论基础，针对肿瘤干细胞的新一代抗肿瘤药物有望极大地提高肿瘤的治疗效果。胞的新一代抗肿瘤药物有望极大地提高肿瘤的治疗效果。三大难关需要攻克三大难关需要攻克 当前肿瘤干细胞研究中还有很多科学问题有待解决：当前肿瘤干细胞研究中还有很多科学问题有待解决：肿瘤干细胞是如何产生的？虽然一些肿瘤干细胞的存肿瘤干细胞是如何产生的？虽然一些肿瘤干细胞的存在已经得到了实验性证实，但是否所有的肿瘤都起
43、源在已经得到了实验性证实，但是否所有的肿瘤都起源于肿瘤干细胞还不清楚；于肿瘤干细胞还不清楚；如何识别和分离肿瘤干细胞？这是利用肿瘤干细胞来如何识别和分离肿瘤干细胞？这是利用肿瘤干细胞来进行癌症治疗的一个关键环节。根据细胞表面标记的进行癌症治疗的一个关键环节。根据细胞表面标记的特征，科研人员已经识别和分离出几种肿瘤干细胞；特征，科研人员已经识别和分离出几种肿瘤干细胞；如何对其他肿瘤干细胞进行分子或形态上的鉴定，仍如何对其他肿瘤干细胞进行分子或形态上的鉴定，仍然是一项非常艰巨的任务。然是一项非常艰巨的任务。个体化综合治疗个体化综合治疗 Personalized medicine and combined modality therapy1818世纪世纪 1919世纪世纪 2121世纪世纪肿瘤是局部病变肿瘤是局部病变治疗治疗：手术切除手术切除癌是细胞疾病癌是细胞疾病治疗：局部放、化疗治疗：局部放、化疗全身疾病的局部表现全身疾病的局部表现治疗治疗：个体化综合治疗个体化综合治疗100肿瘤的个体化综合治疗肿瘤的个体化综合治疗101再次挑战治疗肿瘤的目标再次挑战治疗肿瘤的目标 102谢谢！谢谢！103
