1、LOGO促肝细胞生长素实训促肝细胞生长素实训修复修复再生再生养护养护肝损伤肝损伤1生生化药物生产QA、无菌注射剂质量管理药物制剂课程定位课程定位药品生产QC本课程是生物技术及应用专业的一门综合生产实训课程,支撑专业核心能力生化药物生产的一门实训课程。无菌粉注射剂 无菌粉注射剂 2课程内容生产、质控、制剂相融合生产、质控、制剂相融合 促肝细胞生长素生产 超滤液超滤液取样检验取样检验半成品半成品取样检验取样检验取样 品 样告报 检验 质量管理 QA岗位 QC岗位 生产过程监控文件管理供应商审核验证成品放行取样 品样告报检验 取样 品样告报检验 产品制剂 稀配稀配 冻干冻干灌装灌装3课程定位课程定位
2、1.课程定位促肝细胞促肝细胞生长素生长素生化药物生产人才培养目标人才培养目标 综合药品生产综合药品生产能力能力专业核心课程药物制剂药品质量管理毕业论文顶岗实习前导课前导课后续课后续课其他基础课4教学方法 教学方法宏观：任务驱动教学法微观：角色扮演法、小组讨论法、案例教学法、讲授法、演示法等角色扮演法班组长员工QA、QC5总评成绩出勤情况课堂表现 工作态度 基本操作 技能 设备操作 技能终产品质量 生产报告实操成绩产品测试平时成绩以体现岗位职业能力为主的过程考核为主考核模式678肝炎发病原因及发展阶段肝炎发病原因及发展阶段重型肝炎：各种肝炎中比较严重的一种，可分为急性重型肝炎、亚急重型肝炎：各种
3、肝炎中比较严重的一种，可分为急性重型肝炎、亚急性重型肝炎、慢性重型肝炎性重型肝炎、慢性重型肝炎。凡出现重型肝炎患者，都需得到及时治疗，否则后果严重！凡出现重型肝炎患者，都需得到及时治疗，否则后果严重！其死亡率可高达其死亡率可高达70%70%以上！以上！9肝炎市场调查报告肝炎市场调查报告1 1、目前乙型肝炎己被世界卫生组织列为全球第九大致死疾病，在世界范围内尤其是东亚、东目前乙型肝炎己被世界卫生组织列为全球第九大致死疾病，在世界范围内尤其是东亚、东南亚地区的发病率很高，我国官方南亚地区的发病率很高，我国官方3535种法定报告传染病总例数中，病毒性肝炎占了种法定报告传染病总例数中，病毒性肝炎占了1
4、/31/3以上以上2 2、我国是肝炎病的高发区，、我国是肝炎病的高发区，1979-1980 1979-1980 年我国的病毒性肝炎流行病学调查发现，年我国的病毒性肝炎流行病学调查发现，肝炎病毒总阳性率己高达肝炎病毒总阳性率己高达8.83%8.83%。3 3、19911991年肝炎监测报告表明，我国居民肝炎病毒阳性率超过年肝炎监测报告表明，我国居民肝炎病毒阳性率超过9%9%4 4、20052005年我国仅乙型肝炎病毒携带者就达到了年我国仅乙型肝炎病毒携带者就达到了1.21.2亿人，占全国总人口的近亿人，占全国总人口的近10%10%5 5、在这、在这1.21.2亿人中，有慢性肝炎病人亿人中，有慢性
5、肝炎病人30003000万万 6 6、专家估计，去年我国病毒性肝炎新增人数至少在、专家估计，去年我国病毒性肝炎新增人数至少在320320万例万例 7 7、肝炎发病率的年龄分布：主要有两个高峰区，即肝炎发病率的年龄分布：主要有两个高峰区，即1010岁前和岁前和30304040岁岁，6060岁以上岁以上的老年肝病患者只占总量的的老年肝病患者只占总量的2 23%3%。8 8、肝炎发病率的地区分布：农村高于城市、南方高于北方肝炎发病率的地区分布：农村高于城市、南方高于北方，广东目前乙肝病毒阳，广东目前乙肝病毒阳性率高达性率高达17.8%17.8%，差不多，差不多5 5个人就有一个乙肝携带者，为全国肝炎
6、患病率之最。个人就有一个乙肝携带者，为全国肝炎患病率之最。9 9、肝炎发病率的性别分布：男性高于女性肝炎发病率的性别分布：男性高于女性 1010、肝炎发病率的时间分布：夏季是高发季节肝炎发病率的时间分布：夏季是高发季节，一般集中在，一般集中在5-85-8月。月。2009年肝病市场调查报告10解毒类解毒类谷胱甘肽谷胱甘肽硫普罗宁硫普罗宁门冬氨酸鸟氨酸门冬氨酸鸟氨酸利胆类利胆类熊去氧胆酸熊去氧胆酸腺苷蛋氨酸腺苷蛋氨酸促进能量代谢类促进能量代谢类维生素类维生素类辅酶类辅酶类促进蛋白质合成促进蛋白质合成人血白蛋白人血白蛋白支链氨基酸支链氨基酸复合氨基酸复合氨基酸中药制剂中药制剂抗炎类：甘草酸系抗炎类：
7、甘草酸系列列降酶类：五味子降酶类：五味子促进肝细胞再生促进肝细胞再生促肝细胞生长素促肝细胞生长素多烯磷脂酰胆碱多烯磷脂酰胆碱保肝药11肝损伤靶细胞细胞损伤细胞坏死肝病有害因子12用于治疗各种原因所致用于治疗各种原因所致肝损伤肝损伤还原型谷胱甘肽多烯磷脂酰胆碱甘草甜素制剂促肝细胞生长素注射液解毒、抗氧自由基解毒、抗氧自由基稳定细胞膜稳定细胞膜增加膜流动性增加膜流动性抗炎性介质抗炎性介质促肝细胞促肝细胞DNADNA合成合成13促进肝细胞促进肝细胞再生再生受损肝细胞受损肝细胞修复修复正常肝细胞正常肝细胞养护养护三效合一三效合一效力直指肝细胞效力直指肝细胞作用三作用三作用二作用二作用一作用一用于治疗各
8、种原因所致用于治疗各种原因所致肝损伤肝损伤14生产思路生产思路这样的物质存在于哪里？这样的物质存在于哪里？这种物质具备什么性质？这种物质具备什么性质？如何利用物质的独特性质来获得产品？如何利用物质的独特性质来获得产品？15经检疫生长期不超过经检疫生长期不超过4040天的健康小牛天的健康小牛健康新鲜肝脏健康新鲜肝脏小分子多肽类生物活性物质小分子多肽类生物活性物质存在存在16性质性质n 主要成分：促肝细胞生长因子（HGF）n小分子多肽类生物活性物质，n由80个氨基酸组成n8000Da左右的水溶性蛋白n90度不变性活性分子大小热稳定性n可促进细胞进行有丝分裂和生长、促进器官再生、创伤愈合。17生产思
9、路生产思路 小牛肝脏小牛肝脏细胞破碎细胞破碎物理法物理法机械法机械法化学法化学法分离纯化分离纯化n90度不变性：热变性n8000Da蛋白：合适的超滤膜截留18生产工艺路线生产工艺路线 新鲜的小牛肝脏新鲜的小牛肝脏 匀浆液匀浆液 提取液提取液 上清液上清液 冻存冻存 取样检验、冷冻保存取样检验、冷冻保存 促肝细胞生促肝细胞生长素原液长素原液 稀配加右旋糖酐稀配加右旋糖酐 注射用促肝细注射用促肝细胞生长素溶液胞生长素溶液 灌装半加塞灌装半加塞 冻干冻干 轧轧盖盖 灯检灯检 贴标贴标 包装包装 入库匀浆胶体磨反复冻融离心加热变性超滤10000道尔顿 超滤8000道尔顿1920生产工艺规程生产工艺规程
10、 1 取符合内控标准的小牛肝，于投料前一天取出，用纯水自然化冻。2 去掉结缔组织，剪成小块，用纯水洗涤两次。3 用胶体磨匀浆四次，使成匀浆液。4 把磨好的匀浆液装入小桶中，放入冰柜中冻存。冻存48小时后，取出放在室温化冻，进行两次冻融。21 5 第二次融化后，把药液倒入绑好的滤布中进行粗滤。6 粗滤后的残液进行离心，设置离心转速5000rpm，每次离心15分钟。7 离心后的药液合并粗滤液，用10000道尔顿的中空柱进行超滤。再冻存。化冻后用8000道尔顿进行超滤。22 8取样检验，然后放冷库保存。9将计量好的促肝细胞生长素溶液注入配液桶中,再慢慢加入辅料、灭菌注射用水，按指令用灭菌注射用水稀释
11、至规定量，搅拌5分钟，用2%氢氧化钠调节PH值：6.1-6.9。然后由检查员取样，做中间产品检验。经检验合格后，开启通向灌封间的泵经二个0.22m滤芯进行终端过滤后送至灌封间,进行灌装。232425二别：有效成份分子量不同二别：有效成份分子量不同采用采用SDS-PAGESDS-PAGE蛋白电泳分析国内市场上常见的蛋白电泳分析国内市场上常见的pHGFpHGF类产品类产品威佳威佳-蛋白质电泳图谱蛋白质电泳图谱注射用促肝细胞生长素注射用促肝细胞生长素-蛋白质电泳图谱蛋白质电泳图谱本文发表于肝脏2004年6月第9卷第2期威佳主要成份威佳主要成份相对分子量相对分子量威佳在相对分子质量为威佳在相对分子质量
12、为202010103 3处可见蛋白条带。处可见蛋白条带。其余产品仅在小于其余产品仅在小于101010103 3区域见弥散区带，未见明确蛋白肽段条带区域见弥散区带，未见明确蛋白肽段条带。用于治疗各种原因所致用于治疗各种原因所致肝损伤肝损伤26一别：生产工艺不同一别：生产工艺不同以配備特異配體Purebred裝柱靶蛋白配體特異配體其他蛋白及雜質威佳采用独家生产工艺，使用威佳采用独家生产工艺，使用“离离子交换层析子交换层析”技术，去除初级提取技术，去除初级提取物中的绝大部分杂质蛋白。物中的绝大部分杂质蛋白。注射用促肝细胞生长素的提纯工艺注射用促肝细胞生长素的提纯工艺是普通的是普通的“超虑法超虑法”。用于治疗各种原因所致用于治疗各种原因所致肝损伤肝损伤27
