1、生物学实验生物学实验动物学动物学 实验一实验一 组织、胚层、体腔的演化组织、胚层、体腔的演化 通过观察四大组织、腔肠动物（水螅）、扁形动物（涡虫）、环节动物（蚯蚓）的玻片标本，了解动物组织、胚层和体腔的演化过程。第一部分第一部分 动物的四类基本组织动物的四类基本组织一、教学目的一、教学目的 了解动物体四类基本组织的形态结构及其功能。二、试剂与器材二、试剂与器材 显微镜，四种组织的玻片标本（小肠、食道、膀胱、甲状腺、皮肤、心肌、骨骼肌、肌腱、疏松结缔组织、软骨、硬骨、脊髓、小脑皮质、大脑皮质等组织切片）。三、步骤三、步骤（一）上皮组织观察（一）上皮组织观察1被覆上皮：被覆上皮：（1）单层柱状上皮
2、：小肠上皮 由一层较高的棱柱形细胞并行排列组成，细胞核椭圆形，位于细胞基部。柱形细胞之间，可见细胞游离端染色很浅，细胞核位于基部的杯状细胞，且杯状细胞常因生理变化而有形态改变。小肠上皮细胞的游离端有明显的纹状缘。（2）单层立方上皮 甲状腺切片标本 在显微镜下观察，其滤泡上皮细胞，大致呈正方形，细胞核呈圆形，位于细胞中央，或略偏基部。（3）复层扁平上皮 食道切片标本 食道腔周围的细胞由数层组成，游离面的细胞为扁平状，中间部分呈多角形，底部细胞近短柱状。再取皮肤玻片标本观察，它与食道的复层扁平上皮又有何区别？（4）变移上皮 膀胱玻片标本 可见其表面的细胞体积大、呈扁平或梨形等多种形态，部分细胞有2
3、个核。深层细胞多呈多角形，且较小，底层细胞呈矮柱状。这种上皮的细胞层数与细胞形态，可随膀胱的生理状态的改变而改变。（二）结缔组织观察（二）结缔组织观察 结缔组织是动物体中种类多，结构复杂，分布最广的组织。1疏松结缔组织 疏松结缔组织的铺片标本 胶原纤维 被染成浅红色，呈束状，且波纹状分散于基质内，交互排列;弹性纤维 混杂在胶原纤维之间，染成深紫色，不成束，彼此交叉的细纤维;组织中还有细胞质着色很浅，细胞核染成兰色，形态难于区分的各类细胞:成纤维细胞 紧贴于胶原纤维束，细胞呈多突起，扁平状，细胞核大而卵圆形的细胞;巨噬细胞 或称组织细胞,染色质颗粒较粗，着色较深，胞核较小的,这种细胞具有吞噬能力
4、，因此有防卸功能。2致密结缔组织：腱的纵切标本 可见大量平行排列的胶原纤维束，成纤维细胞成行排列在纤维束之间，细胞体成长方形，细胞核近圆形。3软骨组织：透明软骨玻片标本 大部分的底质染成相同的均匀颜色，这是软骨的基质，基质中有许多圆形或卵圆形的陷窝，称为胞窝。常常可见2个或4个胞窝并列在一起，胞窝内有软骨细胞，胞核染色较深，呈椭圆形，细胞质染色浅。标本固定后，细胞收缩，胞窝可见到空隙。组成软骨的纤维是胶原纤维，但在基质中未见到，因为透明软骨的胶原纤维的折光率与基质相同，因而活体时透明，固定染色后不能看到。4骨组织 长骨横切磨片标本 许多不规则圆形或椭圆形的同心环状结构哈弗氏系统（Haversi
5、an system），中间的空腔哈弗氏管（Haversian canal），为神经、血管的通道。在哈弗氏系统之间为不规则的骨间板（interstital lamellae）。哈弗氏管之间及内、外环骨板之间斜行的，没有骨板环绕的导管浮克曼氏管（Volkmanns canal），即横向的血管。哈弗氏系统骨板间的梭形裂隙为骨陷窝（lacuna），骨细胞存在其中。骨陷窝之间有大量的骨小管，多数的骨小管与骨板垂直。骨细胞，借着骨小管，与哈弗氏管内的血管进行营养物质和代谢产物的交换。（三）肌肉组织观察（三）肌肉组织观察 肌肉组织是由特殊的肌细胞（muscle cell）构成。肌细胞细而长，呈纤维状，故亦称
6、肌纤维（muscle fiber）。根据肌纤维的形态和功能，可将肌肉组织分为：平滑肌（smooth muscle）、横纹肌（skeletal muscle）和心肌（cardiac muscle）。1平滑肌小肠横切标本小肠横切标本低倍镜：找到肌层（以苏木素 伊红染色，肌层为深红色）。肌层由内环行和外纵行的平滑肌纤维组成。高倍镜：内层肌纤维呈长梭形，彼此镶嵌排列成环行。胞核兰紫色，呈椭圆或棒状。外层的纵肌，因平滑肌纤维是镶嵌排列的，所以在横切面上切到的肌纤维并不都在一个平面上，故有的有核，有的无核，且大小也各不相同。2骨骼肌 骨骼肌玻片标本骨骼肌玻片标本 低倍镜：骨骼肌的肌纤维集合成束，每束肌纤维
7、由结缔组织膜分隔，这个膜称为肌束膜肌束膜（perimysium）。如标本切得较完整，还可看见肌内肌内膜膜（endomysium）和肌外膜肌外膜（epimysium），前者为分隔每条肌纤维的结缔组织膜，后者是包围整个肌肉组织的结缔组织。高倍物镜：骨骼肌纤维呈长圆柱形，有许多核，位于肌纤维的周边，呈卵圆形。将视野光强度调暗些，可见每条纤维上有明暗相同的横纹，这就是明带明带（Light band）和暗带暗带（dark band）。油镜：明带中有一条极细的黑线把明带均分为二，这就是Z盘盘（Z-band），在暗带中也有一条明暗的线条，这就是H盘盘（H-band）。3.心肌心肌的单位是单核与分支的纤维，在
8、生理上的特点是具有节律性的收缩，而且这种收缩运动，不受意识控制，所以，心肌是不随意肌。心肌纤维的胞核呈圆形或椭圆形，位于纤维中央，一般为1-2个。肌原纤维较骨骼肌少，故肌质较多，因而纵纹较骨骼肌明显，而横纹较弱。心肌纤维彼此衔接处，具有强折光性的阶梯状横线，称为闰盘闰盘（intercalated disk）它比明暗带宽得多。取心肌的切片标本，在显微镜下详细观察，并比较心肌与骨骼肌和平滑肌在形态结构方面的异同点。（四）神经组织（四）神经组织1.脊髓切片标本脊髓切片标本低倍物镜：中央染色较深的部分是灰质灰质（grey matter），蝴蝶状，中间的小孔是中央管中央管（central canal）。
9、蝴蝶形区域比较狭窄的突起为后角后角（posterior horn）（即背角），较宽的突起为前角前角（anterior horn）（即腹角）。包围在灰质周围，染色较浅的部分为白质白质（white matter）。高倍镜：灰质前角可见形态不同，大小不一的神经细胞，有一个囊泡状的大核。胞体向外突的部分，为胞突。如何分树突与轴突？2.小脑切片标本小脑切片标本表面的皮质皮质（灰质）、中间的髓质髓质（白质）。皮质部分明显分为三层：最表面一层为细胞少的分子层分子层（molecular layer），中间为蒲金野氏细蒲金野氏细胞层胞层（Purkingjes cell layer），内层为颗粒层颗粒层（gran
10、nular layer）。蒲金野氏细胞层，由梨形的大细胞组成。其细胞有粗大的树突，分枝繁多，伸向分子层。在蒲金野氏细胞的底面有一条细胞的轴突，它经过颗粒层伸入髓质部。3.大脑切片标本大脑切片标本大脑皮质部分 着色最浅的一边。皮质的细胞分为锥体细胞锥体细胞（pyramidal cell）、颗颗粒细胞粒细胞（grannular cell）和梭形细胞梭形细胞三大类。锥形细胞最多，分为大、中、小三型：在切片中，细胞体呈圆锥形（切面呈三角形）的细胞为锥形细胞，从胞体顶端伸出，向皮质表面伸展的为顶树突；胞体基部两侧伸出较细的树突，即基树突；胞体基底发出一条细而或长或短且伸向髓质的为轴突。四、注意事项四、注
11、意事项1.观察标本时，应按照不同组织循序观察，并注意比较不同组织类型的差异；2.观察时，需注意辨别因标本染色、保存等环节造成的人为假象。五、结果表述五、结果表述1.对实验中所观察的每一种组织类型都需要掌握；2.观察时，结合课件中所提问题，进行认真思考，达到举一反三的效果；3.熟练使用显微镜观察不同形式、不同染色效果的标本，并达到良好的观察效果。六、作业与思考题六、作业与思考题1绘一段小肠上皮。2总结四类基本组织的结构特点与主要功能。一、教学目的一、教学目的 通过观察腔肠动物、扁形动物、环节动物的代表种类的内部结构，从而了解动物胚层、体腔的演化过程。第二部分第二部分 水螅、涡虫、蚯蚓形态结构观察
12、水螅、涡虫、蚯蚓形态结构观察二、试剂与器材二、试剂与器材水螅带芽整体装片、水螅横切面和纵切面玻片标本、水螅过精巢和过卵巢横切面玻片标本；涡虫示神经系统整体装片和涡虫示生殖系统整体装片玻片标本、涡虫横切面玻片标本。环毛蚓横切面玻片标本。三、步骤三、步骤（一）水螅玻片标本的观察（一）水螅玻片标本的观察1水螅带芽整体装片、水螅具精巢和卵巢的水螅带芽整体装片、水螅具精巢和卵巢的整体装片的观察整体装片的观察低倍镜：芽体、精巢和卵巢在体壁上的生长低倍镜：芽体、精巢和卵巢在体壁上的生长位置。位置。水螅的无性生殖和有性生殖会同时进行吗？水螅的无性生殖和有性生殖会同时进行吗？2水螅纵切片和横切片的观察（1）外胚
13、层（皮层）外皮肌细胞：体壁外侧见到的较大且细胞核清晰、数目最多的柱状细胞。间细胞：在皮肌细胞之间靠近中胶层处，有些小型的且数个堆在一起的细胞。它们有何功用？刺细胞：中央包含有染色较深的圆形或椭圆形囊的细胞，其囊叫刺丝囊。感觉细胞：它们与神经细胞相联。神经细胞在外胚层基部，紧贴中胶层，因较为稀疏，需仔细寻找。（2）中胶层薄而透明，夹在内外胚层之间是由内外胚层细胞分泌的一层非细胞结构的胶状物质。（3）内胚层（胃层）内皮肌细胞：数目最多、细胞大、核清晰，细胞内常含有许多染色较深的食物泡。腺细胞：数目较多的，散布在皮肌细胞间，长形，游离端常膨大并含有细小的深色分泌颗粒。感觉细胞和间细胞：少数。3水螅过
14、精巢和卵巢横切片的观察成熟水螅精巢的横切片，切面上精巢近似圆锥形，由内向外依次是精母细胞、精细胞和成熟的精子。成熟水螅卵巢的横切片观察，卵巢为卵圆形，成熟的卵巢里一般只有1个卵细胞，其余是营养细胞。但处在不同发育期的精巢和卵巢，其内部生殖细胞发育程度亦有不同。精巢和卵巢是从哪个胚层分化出来的？（二）涡虫整体装片玻片标本的观察（二）涡虫整体装片玻片标本的观察1示神经系统的涡虫整体装片示神经系统的涡虫整体装片低倍镜：可见体前端有低倍镜：可见体前端有1对神经节组成的对神经节组成的“脑脑”，由此沿身体两侧后行有，由此沿身体两侧后行有2条纵神经条纵神经索，索间有许多横神经连接，似梯形，索，索间有许多横神
15、经连接，似梯形，“脑脑”发出神经到眼、耳突各部。发出神经到眼、耳突各部。涡虫神经系统和感觉器官比较集中和发达，涡虫神经系统和感觉器官比较集中和发达，与其生活方式及两侧对称体型有何相关性？与其生活方式及两侧对称体型有何相关性？2生殖系统雌雄同体。雌性生殖器官：虫体前端两眼点后方有1对卵巢，深色，圆形。两卵巢各有1条输卵管沿身体两侧向后行，在咽后方汇合通入生殖腔。生殖腔前方有一椭圆形的受精囊也通入生殖腔。两输卵管外侧还有许多颗粒状的卵黄腺。雄性生殖器官：虫体两侧与输卵管平行有许多圆球形精巢，每精巢由一输精小管（不易看清）通入1对输精管，输精管在咽两侧膨大贮精囊；贮精囊在生殖腔前方汇合成阴茎，阴茎通
16、入生殖腔。生殖腔有生殖孔通体外。固定生殖腺和生殖导管的形成有何进化意义？（三）涡虫横切面玻片标本的观察（三）涡虫横切面玻片标本的观察涡虫横切面背面隆起，腹面扁平，为三胚层无体腔动物。1外胚层为体壁最外一层排列紧密的柱状上皮细胞，其间夹有的色深、条状结构为杆状体，杆状体有何功用？还可看到一些向里层（中胚层）深入的囊状、含深色颗粒的单细胞腺及其通向体表的部分管道。高倍镜：腹面表皮细胞具纤毛，表皮细胞的基底为一薄层基膜。2中胚层中胚层形成肌肉组织和实质组织。镜下可见紧贴基膜内侧的环肌，环肌内侧为纵肌，它们与表皮共同构成体壁即皮肌囊。皮肌囊有何功能意义？此外，在横切面的背腹体壁间还可见到背腹肌纤维。在
17、体壁与消化管之间充满呈网状、含有许多黄色小泡的结构，为中胚层实质组织，无体腔。实质组织有何功能？中胚层的出现有何意义？3内胚层切片中间可见到几个小空腔，即为肠腔；肠壁为单层柱状上皮细胞，是内胚层形成的消化管。根据横切面上所见到的肠断面的数目，能否确定所观察的涡虫横切面取材于身体的何部位？说明理由。（四）环毛蚓横切面玻片标本的观察1体壁 体表为一薄层非细胞构造的角质膜，其内侧为表皮层，主要由单层柱状上皮细胞组成。表皮之内是体壁肌肉层，可分为外层较薄的环肌和内层较厚的纵肌。紧贴于纵肌层之内的是由扁平细胞构成的壁体腔膜。有时可见到刚毛自体壁伸出体表。蚯蚓身体能如何运动？为什么？2肠 位于横切面中央。
18、肠壁最内层由单层柱状上皮组成，紧贴于肠上皮外的是肠壁肌肉层，可分为内环肌和外纵肌。肠壁最外层是一层脏体腔膜（黄色细胞）。肠壁结构与消化方式和消化效率有何联系？若切片标本是环毛蚓自盲肠以后横切面，则可见肠壁背面下凹形成一槽，称盲道。盲道的出现有何意义？3真体腔 为体壁和肠壁之间的腔，壁体腔膜和脏体腔膜即为真体腔膜。体腔内，在肠的背面有一背血管，腹面有一腹血管，腹血管之下有一神经索，神经索下有一神经下血管。真体腔的形成有何意义？四、注意事项 观察时，需注意按照讲义步骤循序观察；注意辨别玻片标本中的人工假象等。五、结果表述五、结果表述1.通过对水螅形态结构及生命活动的观察，了解腔肠动物门的主要特征，
19、认识腔肠动物在动物进化过程中的重要地位。2.通过对涡虫的观察，学习对低等蠕形动物进行活体观察和实验的一般方法，了解扁形动物的基本特征、进步性特征及其生物学意义。3.通过对环毛蚓的内部结构观察，了解环节动物门的基本特征、进步性特性。4.总结比较动物器官系统结构与机能逐渐演化发展和完善的进化过程。六、作业与思考六、作业与思考1绘水螅纵切或横切面（局部）图，示各部分结 构。2与腔肠动物比较，扁形动物具有哪些进步性特 征？这些特征有何进步性意义？3为什么说环节动物是高等无脊椎动物？一、教学目的一、教学目的1通过眼虫、变形虫及其他鞭毛虫、肉足虫的观 察，了解鞭毛虫纲与肉足虫纲的主要特点，并 认识一些有经
20、济价值或常见的种类。2认识原生质具有应激性；了解草履虫的科学研究 价值。3学习对运动活泼的微型动物的观察和实验方法。4通过实验，进一步认识和理解原生动物的单个细 胞是一个完整的能独立生活的动物有机体。实验二实验二 原生动物的培养、制片和观察原生动物的培养、制片和观察二、试剂与器材二、试剂与器材利什曼原虫、锥虫、团藻和痢疾内变形虫的玻片标本，表壳虫和砂壳虫，有孔虫和放射虫装片，大草履虫培养液，草履虫横分裂及接合生殖的装片。三、步骤三、步骤（一）眼虫的观察（一）眼虫的观察：高倍镜：辨认眼虫的前、后端。前端钝圆，后端尖削；在前端有一个略呈长圆形无色透明的部分，称储蓄泡；前端的一侧有一红色的眼点。眼点
21、的功用是什么？对眼虫的生活有何意义？细胞内有许多绿色的椭圆形小体 叶绿体；在身体中央稍靠后方有一个圆形透明的结构即细胞核；将光线调暗些，可看到虫体的前端有一根鞭毛；副淀粉粒及收缩泡不易看到；有时在视野内可看到圆形不动的个体，外面形成一层较厚的包囊。眼虫形成包囊有何意义？（二）变形虫的观察（二）变形虫的观察变形虫体的最外面为质膜，其内为细胞质。变形虫的细胞质明显的分为两部分：外边一层透明的为外质；外质里面颜色较暗、含有颗粒的部分叫做内质。在内质的中央有一个呈扁圆形、较内质略为稠密的结构即为细胞核。在内质中还可看到一些大小不同的食物泡和伸缩泡。伸缩泡是一个清晰透明的圆形的泡，时隐时现。伸缩泡的功用
22、如何？（三）草履虫的形态结构与运动（三）草履虫的形态结构与运动1草履虫临时装片的制备为限制草履虫的迅速游动以便观察，先将少许棉花纤维撕松放在载玻片中部；再用滴管吸取草履虫培养液滴1滴在棉花纤维之间，盖上盖玻片，在低倍镜下观察。如果草履虫游动仍很快，则用吸水纸在盖玻片的一侧吸去部分水（注意不要吸干），再进行观察。2草履虫的外形与运动草履虫形似倒置草鞋底，前端钝圆，后端稍尖，体表密布纤毛，体末端纤毛较长。从虫体前端开始，体表有一斜向后行直达体中部的凹沟称口沟，口沟处有较长而强的纤毛。游泳时，草履虫全身纤毛有节奏地呈波状依次快速摆动，由于口沟的存在和该处纤毛摆动有力，而使虫体绕其中轴向左旋转，沿螺旋
23、状路径前进。当遇到阻挡物时，虫体如何游动？3内部构造当草履虫穿过棉花纤维时，其体形可否改变，为什么？紧贴表膜的1层细胞质透明无颗粒，称外质，外质内有许多与表膜垂直排列的折光性较强的椭圆形刺丝泡；外质以内的细胞质多颗粒，称为内质。虫体腹面口沟末端有一胞口，胞口后连一深入内质的弯曲短管，称胞咽，胞咽壁上生有由长纤毛联合形成的波动膜。注意观察口沟纤毛和胞咽波动膜的波动，其波动有何功用？内质内大小不同的圆形泡，多为食物泡。在虫体的前、后端各有一透明的圆形泡，可以伸缩，为伸缩泡。当伸缩泡主泡缩小时，可见其周围有67个放射状排列的长形透明小管，即收集管。注意前后2个伸缩泡之间及伸缩泡的主泡与收集管之间在收
24、缩上有何规律？大草履虫有大、小2个细胞核，位于内质中央，生活时小核不易观察到。在盖玻片一侧滴1滴5%冰醋酸，另一侧用吸水纸吸引，使盖玻片下的草履虫浸在冰醋酸中。将光线适当调亮，12min后，草履虫被杀死。在低倍镜下可见到虫体中部被染成浅黄褐色、呈肾形的大核；转高倍镜调焦后，可见大核凹处有一点状的小核。（四）草履虫食物泡的形成及变化（四）草履虫食物泡的形成及变化取1滴草履虫培养液于另一载玻片中央，用牙签蘸取少许洋红粉末掺入草履虫液滴中，混匀，再加少量棉花纤维并加盖玻片；立即在低倍镜下寻找一被棉花纤维阻拦而不易游动，但口沟未受压迫的草履虫；转高倍镜仔细观察食物泡的形成、大小变化及在虫体内环流的过程
25、。（五）草履虫的应激性实验（五）草履虫的应激性实验刺丝泡的发射制备草履虫临时装片。在盖玻片的一侧滴1滴用蒸馏水稀释20倍的蓝黑墨水，另一侧用吸水纸吸引，使蓝黑墨水浸过草履虫。在高倍镜下观察，可见刺丝已射出，在草履虫体周围呈乱丝状。刺丝泡有何功用？（六）草履虫的生殖（六）草履虫的生殖 取草履虫分裂生殖和接合生殖装片，于低倍显微镜下观察。1草履虫分裂生殖装片观察草履虫的无性生殖是横裂还是纵裂。2草履虫接合生殖装片观察2虫体在何处接合。接合生殖有何生物学意义？（七）示范（七）示范1锥虫（Trypanosoma）：锥虫在血液内寄生，体呈纺锤形，体一侧具波动膜，前端有鞭毛。核位于体中央。2表壳虫（Arc
26、ella）：虫体具浅褐色半圆形的壳，其腹面中央有一圆孔，伪足由此伸出。3砂壳虫（Difflugia）：具有椭圆形的壳，壳面附 有许多细沙、常可看到伪足自壳口伸出。4有孔虫（Foraminifera）（各种壳的装片）：虫 体具多室的石灰质壳。5放射虫（Radiolaria）（各种壳的装片）：虫体 具矽质壳，均属海产。四、注意事项四、注意事项1.制作草履虫临时装片时，应注意棉花纤维的使用量；观察时，避免长时间观察同一虫体。2.观察食物泡、刺丝放散时，要注意试剂的添加量。五、结果表述五、结果表述1.掌握原生动物代表种类的形态结构；2.掌握运动性强的微型动物的观察、实验方法。六、作业和思考题六、作业和思考题1绘制变形虫的放大图，表示出所见到的各 种结构。2通过所观察的代表动物总结鞭毛纲与肉足 纲的主要特征。
