1、传染病四项规范导则讨论深圳市第二人民医院检验科佘吉佳2017年10月13日精1HBV乙肝HCV丙肝Syphilis梅毒HIV艾滋急诊术前四项急诊术前四项：人类免疫缺陷病毒抗体(HIV)梅毒螺旋体抗体(SYPH)丙型肝炎病毒抗体(aHCV)乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)常规术前八项常规术前八项：人类免疫缺陷病毒抗体(HIV)梅毒螺旋体抗体(SYPH)丙型肝炎病毒抗体(aHCV)乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)乙型肝炎病毒表面抗体(aHBS)乙型肝炎病毒e抗原(HBeAg)乙型肝炎病毒e抗体(aHBe)乙型肝炎病毒核心抗体(HBcT)精23乙型肝炎血清学检测指标Anti-HBeAnti-HB
2、ctotalHBeAgAnti-HBeAnti-HBsHBsAg抗原检测抗体检测精3乙肝两对半的临床意义分析（9种常见模式）中华医学会肝病分会、感染病分会 HBsAgHBsAbHBeAgHBeAbHBcAb乙肝两对半常见结果分析俗称序号123451-过去和现在未感染过HBV。乙肝两对半全阴2-+1.既往感染未能测出抗-HBs；2.恢复期HBsAg已消，抗-HBs尚未出现；3.无症状HBsAg携带着。乙肝两对半5阳性3-+1.既往感染过HBV；2.急性HBV感染恢复期；3.少数标本仍有传染性。乙肝两对半45阳性4-+-1.注射过乙肝苗有免疫；2.既往感染；3.假阳性 乙肝两对半2阳性5-+-+急
3、性HBV感后康复。乙肝两对半245阳性6+-+1.急性HBV感染；2.慢性HBsAg携带者；3.传染性弱。乙肝两对半15阳性7-+-+1.既往感染，仍有免疫力。2.HBV感染，恢复期。乙肝两对半25阳性8+-+1.急性HBV感染趋向恢复；2.慢性HBsAg携带者；3.传染性相对较弱。乙肝两对半145阳性；俗称“小三阳”9+-+-+急性或慢性乙肝感染。提示HBV复制，传染强。乙肝两对半135阳性 俗称“大三阳”精4乙肝两对半的临床意义分析（16种少见模式）中华医学会肝病分会、感染病分会 HBsAgHBsAgHBsAbHBsAbHBeAgHBeAgHBeAbHBeAbHBcAbHBcAb乙肝两对半
4、常见结果分析乙肝两对半常见结果分析俗称俗称序号1 12 23 34 45 510+-1.急性HBV感染早期，急性HBV感染潜伏期；2.慢性HBV携带者，传染性弱。乙肝两对半1阳性11+-+-1.慢性HBsAg携带者易转阴；2.急性HBV感染趋向恢复。乙肝两对半14阳性12+-+-急性HBV感染早期或慢性携带者，传染性强。乙肝两对半13阳性13+-+1.急性HBV感染趋向恢复；2.慢性携带者。乙肝两对半1345阳性14+-1.亚临床型HBV感染早期；2.不同亚型HBV二次感染。乙肝两对半12阳性15+-+1.亚临床型HBV感染早期；2.不同亚型HBV二次感染。乙肝两对半125阳性16+-+-亚临
5、床型或非典型性感染。乙肝两对半124阳性17+-+亚临床型或非典型性感染。18+-+亚临床型或非典型性感染早期。HBsAg免疫复合物，新的不同亚型感染。19-+-1.非典型性急性感染；2.见于抗-HBc 出现之前的感染早期，HBsAg滴度低而呈阴性，或呈假阳性。乙肝两对半3阳性20-+-+非典型性急性感染。21-+急性HBV感染中期。22-+-+-HBV感染后已恢复。23-+-非典型性或亚临床型HBV感染。24-+-+非典型性或亚临床型HBV感染。25-+-急性HBV感染趋向恢复。精5丙肝筛查、诊断流程丙肝防治指南中华医学会肝病分会、感染病分会丙肝防治指鉴别患者鉴别患者基线特征基线特征制定治疗
6、制定治疗方案方案治疗过程治疗过程抗抗HCV检测检测 评价病评价病毒学应毒学应答答筛查筛查诊断诊断评估病评估病变程度变程度评估预评估预后后HCV RNA定性检测定性检测肝活检肝活检HCV RNA定量检测定量检测HCV基因型检测基因型检测HCV RNA定量检测定量检测HCV RNA检测（+）HCV RNA检测（）HCV的基因型检测已经自愈基因型1型基因型2/3型 Anti-HCV（+）精6抗-HCV和HCV RNA结果不一致并不矛盾，需要联合解读*参考2014版中国卫计委发布的丙型病毒型肝炎筛查及管理精7高S/Co值可以直接报告anti-HCV抗体阳性，仅VITROS有适合中国人群的S/Co值8S
7、creening TestKit NameManufacturerAssay FormatS/Co predictive of a true positive 95%of the time中国中国S/CoVITROS Anti-HCVOrthoCIA 8.0 8.8Architect Anti-HCVAbbottCMIA 5.0NAAxSYM Anti-HCVAbbottMEIA 10.0NAAdvia Centaur HCVSiemensCIA 11.0NAhttps:/www.cdc.gov/hepatitis/hcv/labtesting.htm精8丙型肝炎抗体检查策略及结果报告（一）9
8、n临床诊断相关的检测策略及结果报告临床诊断相关的检测策略及结果报告丙型肝炎病毒实验室检测技术规范（试行）中国疾病控制中心二O一一年九月二十日 血清丙肝抗体初步筛查精9丙型肝炎抗体检查策略及结果报告（二）10n临床诊断相关的检测策略及结果报告：临床诊断相关的检测策略及结果报告：补充实验进一步验证抗体是否为真阳性VITROS Anti-HCV 8.8精10丙型肝炎抗体检查策略及结果报告（三）11 补充实验进一步验证抗体是否为真阳性丙型肝炎病毒实验室检测技术规范（试行）中国疾病控制中心二O一一年九月二十日精11FAQ1 1.VITROS 抗-HCV阳性，而RNA检测阴性如何解释？该患者曾经患有丙肝且
9、已经自愈，体内仍存在保护性抗体。2 2.VITROS 抗-HCV初筛阳性后的处理流程？12VITROS Anti-HCV 8.8李伯安 解放军302医院临床检验中心精12Syphilis13中国政府梅毒控制相关文件l卫生部于2010年6月3日下发了关于中国预防与控制梅毒规划（2010-2020年）l卫生部2011年2月12日下发预防艾滋病、梅毒和乙肝母婴传播工作实施方案l国务院2012年1月13日中国预防控制艾滋病五年行动计划（21011-2015年）l2013年1月实施性病防治管理办法梅毒控制主要措施：梅毒控制主要措施：提高梅毒实验室检测质量提高梅毒实验室检测质量加强梅毒筛查力度加强梅毒筛查
10、力度精13Syphilis14梅毒血清学检测方法 非梅毒螺旋体抗原血清试验1)VDRL(性病研究实验室试验)：需灭活2)USR（不加热血清反应素试验）3)RPR(加速血浆反应素环状卡片试验)4)TRUST(甲苯胺红不加热血清试验)梅毒螺旋体抗原血清试验1)FTA-ABS（荧光梅毒螺旋体吸收试验，IgG）2)TPPA/TPHA（梅毒螺旋体血球凝集试验，IgG）3)TP-ELISA4)发光法（CIA）5)胶体金法6)WB（免疫印迹法）IgMIgGB cell非特异性抗体：抗心磷脂抗体抗梅毒螺旋体抗体Specific IgMSpecific IgGB cell精14传统梅毒实验室诊断流程15Ratm
11、an S.Can J Infec Dis Med Microbiol.2005 Jan/Feb;16:(1):45-51.Chancreskin lesionMicroscopy(dark-field/direct fluorescence)YesPositiveNon-treponemal test(RPR)Consistent with infection.Repeat in 1-12 weeks if indicated NoTreonemal test(TP-PA)NegativePositiveRequest repeat testing if indicated NegativeP
12、erform additional confirmatory testConsistent with infectionNegativePositiveRequest follow-up serology to confirm.精15反转梅毒实验室诊断流程16MMWR Morb Mortal Wkly Rep.2011 Feb 11;60(5):133-7.美国CDC指南推荐EIA/CIA阴性定量RPR或其他非梅毒螺旋体检测梅毒梅毒(曾曾经经或或现现在感染在感染)阳性Treonemal test(TP-PA)阳性阳性阴性阴性阴性阴性不太可能为梅毒不太可能为梅毒梅毒梅毒(曾曾经经或或现现在感染在
13、感染)阳性阳性CDCCDC推荐梅毒检测时应先使用推荐梅毒检测时应先使用EIA/CIA EIA/CIA 检测，再结合其他梅毒非检测，再结合其他梅毒非特异性抗体检测综合进行诊断。特异性抗体检测综合进行诊断。精16Syphilis17梅毒血清学检测结果非梅毒螺旋体抗原血清试验梅毒螺旋体抗原血清试验临床意义+梅毒感染+非特异性反应或假阳性+晚期梅毒或梅毒既往感染排除梅毒或初期感染潜伏期Ratman S.Can J Infec Dis Med Microbiol.2005 Jan/Feb;16:(1):45-51.CDC.Available from:http:/www.cdc.gov/std/syph
14、ilis/treponemalalgorithm.pdf精17 艾滋病18推荐使用艾滋抗体进行筛查感染分期感染分期临床分期临床分期维持时间维持时间感染标志物感染标志物传染性传染性原发感染原发感染潜伏期潜伏期潜伏期潜伏期传染传染危险性高危险性高原发感染原发感染症状期症状期急性急性HIVHIV感染感染传染传染危险性高危险性高慢性感染慢性感染潜伏期潜伏期无症状无症状HIVHIV感染感染有传染性有传染性临床临床发病期发病期艾滋病艾滋病传染性强传染性强精18艾滋病19艾滋病实验诊断方法检验标志物检验标志物检验目的检验目的检检 验验 方方 法法HIV(1+2)HIV(1+2)抗体抗体筛查试验筛查试验金标法
15、、硒标法金标法、硒标法 快速诊断试验快速诊断试验明胶颗粒凝集试验明胶颗粒凝集试验(PA)(PA)微孔板法微孔板法酶联免疫试验（酶联免疫试验（ELISAELISA）&化学发光法（化学发光法（CLIACLIA）第三代：双抗原夹心法第三代：双抗原夹心法HIV1/O/2HIV1/O/2 第四代：增加检测第四代：增加检测P24P24抗原抗原确证试验确证试验蛋白印迹法蛋白印迹法(WB)(WB)手工手工/仪器仪器病毒抗原病毒抗原早期诊断早期诊断酶联免疫试验酶联免疫试验 检测检测P24P24抗原抗原病毒核酸病毒核酸临床诊断临床诊断治疗评价治疗评价定性试验定性试验 检测检测DNADNA定量试验定量试验 即病毒载
16、量，检测即病毒载量，检测RNARNACD4CD4流式细胞仪法流式细胞仪法 检测检测CD4+TCD4+T淋巴细胞淋巴细胞精19四代窗口期提前有限，但假阳性增加患者心理负担，三代是成熟的筛查方法20诊断试剂窗口期特 点金标法、硒标法5周35天敏感性低，容易漏检明胶颗粒凝集试验(PA)5周35天特异性较好，敏感性不足ELISA（国产第三代）3周多2025天普及，稳定性欠佳ELISA&CLIA（进口第三代）3周1822天较为成熟，稳定性好ELISA&CLIA（进口第四代）2周多1617天假阳性率偏高核酸检测1周多1012天不用于常规诊断精20艾滋病21HIV检测试剂进展精21艾滋病22HIV筛查流程全
17、国艾滋病检测技术规范（2015年修订版）推荐临床诊断的三种可行策略：1.使用抗体检测试剂的检测流程2.用不能区分抗原抗体的检测流程3.用可区分抗原抗体的检测流程CDC规范的三种策略初筛 试剂有反应性的复测试剂补充实验策略评论策略1：使用抗体检测试剂的检测流程抗体检测，即第三代有反应再行两次抗体复测，即第三代复测有任一反应即行补充实验三代兼顾敏感度和特异度可以满足初筛和复测需要策略2：用不能区分抗原抗体的检测流程HIV Combo，即第四代有反应再行抗体复测，即第三代复测有反应即行补充实验四代高敏感初筛纳入，三代高特异排除策略3：用可区分抗原抗体的检测流程抗体+P24即第三代和抗原分别检测只要抗
18、体有反应性即行抗体复测，第三代复测有反应即行补充实验的抗体确证实验利用三代抗体特异度和抗原敏感度抗原阳性即行补充实验的核酸检测三代和四代HIV检测试剂同样重要，在许多IVD公司同时存在。精2223试剂-1有反应无反应试剂1双份或双孔检测或两种试剂均有反应一有反应,一无反应均无反应 补充试验报告HIV抗体阴性1.使用抗体检测试剂的检测流程初筛为抗体检测，如3代HIV1/2 抗体复测试剂：3代HIV1/2 抗体重复检测2次/或者两种试剂进行检测。精23242.使用不区分抗原抗体联合检测试剂的检测流程（如四代抗体HIV Combo）不区分抗原抗体的检测试剂有反应无反应抗体检测有反应无反应补充试验HI
19、V-1核酸试验或P24抗原试验或2-4周后随访报告HIV抗体阴性P24抗原阴性初筛检测为 四代HIV Combo复测试剂：推荐使用3代 HIV1/2抗体进行复检。精24253.区分抗原抗体检测试剂检测流程（如3代抗体HIV 1/2 +单独 P24抗原检测）区分抗原抗体检测试剂抗体有反应抗原有反应抗体有反应抗原无反应抗体无反应抗原有反应抗体无反应抗原无反应抗体检测有反应无反应补充试验：抗体确证试验HIV-1核酸试验或24周后随访报告HIV抗体阴性，HIV P24抗原阴性初筛检测为3代抗体HIV 1/2 +单独 P24抗原检测初筛阳性样本初筛阳性样本：推荐使用3代 HIV1/2抗体进行复检。精25
20、艾滋病补充试验1:抗体确证试验26免疫印迹试验(WB/RIBA)不确定阴性阳性出现HIV-2指示带核酸试验或24周后随访报告HIV-1抗体阴性报告HIV-1抗体阳性根据情况进一步检测HIV-2图图5 5 免疫印迹试验流程免疫印迹试验流程精2627HIV-1核酸检测HIV-1核酸定量检测有反应报告HIV-1核酸阳性无反应报告HIV-1核酸阴性报告低于检测限5000CPs/ml报告检测值;5000CPs/ml重新采样检测低于检测限高于检测限HIV-1核酸定性检测艾滋病补充试验2:HIV-1核酸试验精2728FAQ1：CDC规范指出三代HIV试剂仍大有用武之地使用抗体检测试剂的检测流程 仍然是最新C
21、DC规范推荐的策略之一四代HIVCombo窗口期提前有限（3-5天），特异度受到一定影响，假阳性率提高，反而增加患者心理负担；而三代是相对成熟的检测方法，兼顾灵敏度和特异度；从2015 CDC推荐筛查策略来看，即使初筛选择四代HIVCombo，对于首次检测有反应性样本，仍然建议选择对于首次检测有反应性样本，仍然建议选择3 3代代HIV1/2 HIV1/2 抗体进行复抗体进行复检检。如果单纯为了提高检测灵敏度角度，实验室可以选择3代HIV1/2抗体+单独P24 抗原检测，兼顾灵敏度和特异度，但同样对于首次检对于首次检测有反应性样本，仍然建议选择测有反应性样本，仍然建议选择3 3代代HIV1/2
22、HIV1/2 抗体进行复检抗体进行复检；对于抗体筛查阳性的样本，要进行抗体确证实验（WB/RIBA），该确证实验只检测抗体，不检测抗原。精2829FAQ2：HIV 三代和四代的区别？A：一代检测HIV-1抗体，二代检测HIV-1/2抗体，三代检测HIV-1/2/O抗体，四代比三代多检测了p24抗原。四代比三代提高了灵敏度，降低了特异性。精2930FAQ3：HIV 第四代缩短窗口期的实际意义？A：从患者感染（RNA出现）到HIV抗体检出有4至12周，最长达6个月。检测P24抗原仅仅比抗体检出提前3至7天，就治疗监控而言价值有限。全球推荐方法仍以第三代抗体检测为主。2015最新修订版CDC HIV
23、指南指出，第三代HIV抗体检测仍是主流检测，并给出了第三代抗体检测的筛查流程。精30使用第三代HIV抗体检测仍然是最新CDC规范推荐的策略之一31全国艾滋病检测技术规范（全国艾滋病检测技术规范（20152015年修订版）年修订版）推荐临床诊断的三种可行策略：1.使用抗体检测试剂的检测流程2.用不能区分抗原抗体的检测流程3.用可区分抗原抗体的检测流程CDC规范的三种策略初筛 试剂有反应性的复测试剂补充实验策略评论策略1：使用抗体检测试剂的检测流程抗体检测，即第三代有反应再行两次抗体复测，即第三代复测有任一反应即行补充实验三代兼顾敏感度和特异度可以满足初筛和复测需要策略2：用不能区分抗原抗体的检测
24、流程HIV Combo，即第四代有反应再行抗体复测，即第三代复测有反应即行补充实验四代高敏感初筛纳入，三代高特异排除策略3：用可区分抗原抗体的检测流程抗体+P24即第三代和抗原分别检测只要抗体有反应性即行抗体复测，第三代复测有反应即行补充实验的抗体确证实验利用三代抗体特异度和抗原敏感度抗原阳性即行补充实验的核酸检测三代和四代HIV检测试剂同样重要，在许多IVD公司同时在售精3132VITROS HIV 1+2:大有用武之地四代HIV Combo窗口期提前有限（3-5天），特异度受到一定影响，假阳性率提高，反而增加患者心理负担；而三代是相对成熟的检测方法，兼顾灵敏度和特异度；从2015 CDC推荐筛查策略来看，即使初筛选择四代HIV Combo，对对于首次检测有反应性样本，仍然建议选择于首次检测有反应性样本，仍然建议选择3 3代代HIV1/2 HIV1/2 抗体进行复检抗体进行复检。如果单纯为了提高检测灵敏度角度，实验室可以选择3代HIV1/2抗体+单独P24 抗原检测，兼顾灵敏度和特异度，但同样对于首次检对于首次检测有反应性样本，仍然建议选择测有反应性样本，仍然建议选择3 3代代HIV1/2 HIV1/2 抗体进行复检抗体进行复检；对于抗体筛查阳性的样本，要进行抗体确证实验（WB/RIBA），该确证实验只检测抗体，不检测抗原。精32n 谢谢！精33
