1、聘聘1PPT课件2PPT课件3PPT课件第二章第二章 工业微生物菌种的选育、保藏与培养工业微生物菌种的选育、保藏与培养l 了解常用的微生物菌种保藏机构了解常用的微生物菌种保藏机构l 掌握从自然界中分离筛选菌种的方法掌握从自然界中分离筛选菌种的方法l 熟悉自然选育的作用和意义熟悉自然选育的作用和意义l 熟悉人工诱变育种的方法熟悉人工诱变育种的方法4PPT课件CICC(中国工业微生物菌种保藏管理中心)CGMCC(中国普通微生物菌种保藏管理中心)CICC目前保藏国内外各类工业微生物菌种10153株,30余万备份,其中细菌4445株,酵母菌3222株,霉菌2220株,大型真菌266株。共计212个属,
2、839个种,基本覆盖了食品与发酵行业各类生产和科研用微生物。CGMCC目前保存各类微生物资源超过5000种,46,000余株,用于专利程序的生物材料7100余株,微生物元基因文库约75万个克隆。5PPT课件国际菌种保藏联合会(WFCC)美国典型微生物菌种保藏中心(ATCC)美国农业研究菌种保藏中心(NRRL)日本技术评价研究所生物资源中心(NBRC)荷兰微生物菌种保藏中心(CBS)德国微生物菌种保藏中心(DSMZ)英国国家典型微生物菌种保藏中心(NCTC)6PPT课件从自然界分离微生物菌种是最初获得工业微生物菌种的主要方式。从土壤中分离微生物菌种是典型分离方式之一。从土壤中分离微生物菌种将要花
3、费大量时间和资金。7PPT课件8PPT课件增殖培养 地点 时间 样品种类 地理 生态参数采样生产性能测定纯种分离及培养9PPT课件 进行增殖培养增殖培养时可根据预定的技术措施和菌种特性,人为地加入一定的限制因素,以使所需的微生物在增殖后在数量上占绝对优势。1,控制培养基中碳源的种类,控制培养基中碳源的种类2,添加某些抑制因子或促进因子,添加某些抑制因子或促进因子3,控制培养条件,控制培养条件10PPT课件 通过增殖培养,样品中的微生物还是处于混杂生长状态,如何把它们逐个分离逐个分离出来?稀释分离法:稀释分离法:划线分离法:划线分离法:组织分离法:组织分离法:11PPT课件 选育:选育:经过分离
4、筛选获得的菌种,一般不能立即适应实际生产需要,还要通过选育,才能提高代谢产物的产量、改进产品质量、简化工艺、提高产品附加值。自然选育、诱变育种、杂交育种、原生质体融合、基因工程等自然选育、诱变育种、杂交育种、原生质体融合、基因工程等 自然选育:自然选育:在生产过程中,不经过人工处理,利用菌种的自发突变,从而选育出优良菌种的过程叫作自然选育。12PPT课件 诱变育种诱变育种是指用人工的方法处理微生物,使它们发生突变,再从中筛选出符合要求的突变菌株,供生产和科学实验用。欲知详细,请听下回分解13PPT课件 1,本节内容中,你了解到了菌种保藏机构有哪些?如,本节内容中,你了解到了菌种保藏机构有哪些?
5、如何获取联系或购买菌种?何获取联系或购买菌种?2,从自然界中分离筛选微生物的过程你是否已经熟悉?,从自然界中分离筛选微生物的过程你是否已经熟悉?每一步需要注意些什么?每一步需要注意些什么?3,分离获得的菌株需要怎样的过程才能用于工业生产?,分离获得的菌株需要怎样的过程才能用于工业生产?你是怎样理解自然选育的?你是怎样理解自然选育的?设法从土壤中分离筛选出一株黑曲霉,并将其邮寄给设法从土壤中分离筛选出一株黑曲霉,并将其邮寄给CICC进行菌种的鉴定。进行菌种的鉴定。作业内容包括完整的从自然界中分离纯化黑曲霉的过程和邮寄所附信件信息。作业内容包括完整的从自然界中分离纯化黑曲霉的过程和邮寄所附信件信息
6、。14PPT课件l 熟悉诱变育种的一般步骤熟悉诱变育种的一般步骤l 熟悉营养缺陷型等一般概念熟悉营养缺陷型等一般概念l 掌握突变菌株尤其是营养缺陷型的筛选策略掌握突变菌株尤其是营养缺陷型的筛选策略15PPT课件选择出发菌种同步培养制备单细胞或单孢子菌悬液诱变处理筛选变异菌株16PPT课件17PPT课件一、培养条件二、物理筛分18PPT课件 生理盐水生理盐水就是0.9%的氯化钠水溶液,因为它的渗透压值和正常人的血浆、组织液都是大致一样的,所以可以用作补液(不会降低和增加正常人体内钠离子浓度)以及其他医疗用途,也常用作体外培养活组织、细胞。是人体细胞所处的液体环境浓度。19PPT课件诱变剂物理诱变
7、剂化学诱变剂诱变剂量:诱变剂量:一般是指作用强度与作用时间的乘积。一般是指作用强度与作用时间的乘积。正向突变较多地出现在偏低的剂量中,负向突变则较多地出现于偏高的剂量中。20PPT课件 菌种经过诱变后,绝大多数是负突变菌株,正突变占极少数。选择合适的筛选方法可以大大减少工作量。初筛复筛21PPT课件平皿快速检测法平皿快速检测法变色圈变色圈抑菌圈抑菌圈生长圈生长圈透明圈透明圈22PPT课件营养缺陷型:营养缺陷型:是指某一野生型菌株由于发生基因突变而丧失合成一种或几种生长因子的能力,因而无法在基本培养基上正常生长繁殖的变异类型。野生型野生型基本培养基基本培养基补充培养基补充培养基完全培养基完全培养
8、基23PPT课件CBAA:B:C:基本培养基补充培养基完全培养基24PPT课件淘汰野生型检出营养缺陷型营养缺陷型的鉴定l 抗生素法抗生素法l 过滤法过滤法u 逐个检出法逐个检出法u 夹层检出法夹层检出法u 营养限量法营养限量法u 影印检出法影印检出法n 缺陷营养类别缺陷营养类别n 缺陷营养因子缺陷营养因子25PPT课件影印检出法影印检出法26PPT课件 1,微生物诱变选育的主要过程如何?诱变的方法你了,微生物诱变选育的主要过程如何?诱变的方法你了解的哪些?解的哪些?2,什么是营养缺陷型?如何实现营养缺陷型的筛选?,什么是营养缺陷型?如何实现营养缺陷型的筛选?将变色圈法、透明圈法、生长圈法、抑菌圈法筛选变异菌株的一般原理整理将变色圈法、透明圈法、生长圈法、抑菌圈法筛选变异菌株的一般原理整理到作业本上。到作业本上。27PPT课件