病毒标本的采集、运送及生物安全要求课件.pptx

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资源描述

1、新型冠状病毒(新型冠状病毒(属)属)-2019-nCoV 对热敏感,对热敏感,56 30 56 30 分钟、分钟、75%75%酒精酒精 、含氯消毒剂、过氧乙酸和、含氯消毒剂、过氧乙酸和 氯仿等脂溶剂均可有效灭活,氯仿等脂溶剂均可有效灭活,氯已氯已定不能有效灭活。定不能有效灭活。目前收治病例多数有武汉市华南海鲜市场暴目前收治病例多数有武汉市华南海鲜市场暴露史,部分病例为家庭聚集性发病,有医务人员露史,部分病例为家庭聚集性发病,有医务人员感染,证实了人传人传染。感染,证实了人传人传染。飞沫传播飞沫传播接触传播接触传播根据目前掌握的新型冠状病毒生物学特点、根据目前掌握的新型冠状病毒生物学特点、流行病

2、学特征、致病性、临床表现等信息,该病流行病学特征、致病性、临床表现等信息,该病原体暂按照病原微生物危害程度分类中原体暂按照病原微生物危害程度分类中第二类病第二类病原微生物原微生物进行管理。进行管理。新型冠状病毒感染的肺炎实验室检测技术指南(第二版)(国卫办疾控函202041号 附件4)新型冠状病毒实验室生物安全指南(第二版)(国卫办科教函202070号)新型冠状病毒感染新型冠状病毒感染观察病例(已隔离)观察病例(已隔离);需要进行新型冠状病毒需要进行新型冠状病毒感染诊断或鉴别诊感染诊断或鉴别诊断断者;者;其它需要进一步筛查检测的研究材料(如其它需要进一步筛查检测的研究材料(如溯源分析)。溯源分

3、析)。人员资质:人员资质:从事新型冠状病毒检测标本采集的技术人员应经过生物安全培训(培训合格)和具备相应的实验技能(护理技术手册-“标本采集技术”)。采样人员个人防护(采样人员个人防护(PPEPPE)装备:)装备:N95口罩、护目镜、防护服、乳胶手套、防水靴套;如果接触患者血液、体液、分泌物或排泄物时,戴双层乳胶手套。根据实验室检测工作的需要,可结合病程多次采样。根据实验室检测工作的需要,可结合病程多次采样。每个病例必须采集每个病例必须采集急性期呼吸道标本和急性期血液标本急性期呼吸道标本和急性期血液标本;重症病例优先采集下呼吸道标本;重症病例优先采集下呼吸道标本 (如支气管或肺泡灌洗(如支气管

4、或肺泡灌洗液等)。液等)。上呼吸道标本上呼吸道标本:包括咽拭子、鼻拭子、鼻咽抽取物;:包括咽拭子、鼻拭子、鼻咽抽取物;下呼吸道标本下呼吸道标本:包括深咳痰液、呼吸道抽取物、支气管:包括深咳痰液、呼吸道抽取物、支气管灌洗液、肺泡灌洗液、肺组织活检标本;灌洗液、肺泡灌洗液、肺组织活检标本;血液标本血液标本:尽量采集发病后:尽量采集发病后7 7天内的天内的急性期血液标本急性期血液标本。病毒采样管病毒采样管咽拭子咽拭子:用聚丙烯纤维头的塑料杆拭子同时擦拭双侧咽:用聚丙烯纤维头的塑料杆拭子同时擦拭双侧咽扁桃体及咽后壁,将拭子头浸入扁桃体及咽后壁,将拭子头浸入3mL3mL采样液的管中,尾部弃采样液的管中,

5、尾部弃去,旋紧管盖。去,旋紧管盖。鼻拭子鼻拭子:将:将1 1根聚丙烯根聚丙烯纤维头的塑料杆拭子轻轻纤维头的塑料杆拭子轻轻插入鼻道内鼻腭处,停留插入鼻道内鼻腭处,停留片刻后缓慢转动退出。取片刻后缓慢转动退出。取另一根拭子以同样方法采另一根拭子以同样方法采集另一侧鼻孔。上述两根集另一侧鼻孔。上述两根拭子浸入拭子浸入同一同一含含3mL3mL采样液采样液的管中,尾部弃去,旋紧的管中,尾部弃去,旋紧管盖。管盖。深咳痰液:深咳痰液:要求病人深咳后,将咳出的痰液收集于含要求病人深咳后,将咳出的痰液收集于含3mL3mL病毒保存液的病毒保存液的50mL50mL螺口塑料管中。螺口塑料管中。血清标本血清标本:用不含

6、抗凝剂的真空负压采血管采集血液标:用不含抗凝剂的真空负压采血管采集血液标本本5mL5mL(红头管红头管),以空腹血为佳。室温静置以空腹血为佳。室温静置3030分钟,分钟,150015002000rpm2000rpm离心离心1010分钟,收集血清于无菌螺口塑料管中。分钟,收集血清于无菌螺口塑料管中。鼻咽抽取物或呼吸道抽取物鼻咽抽取物或呼吸道抽取物:用与负压泵相连的收集器从鼻咽部抽:用与负压泵相连的收集器从鼻咽部抽取粘液或从气管抽取呼吸道分泌物。取粘液或从气管抽取呼吸道分泌物。支气管灌洗液支气管灌洗液:将收集器头部从鼻孔或气管插口处插入气管(约:将收集器头部从鼻孔或气管插口处插入气管(约30cm3

7、0cm深处),注入深处),注入5mL5mL生理盐水,接通负压,旋转收集器头部并缓慢退生理盐水,接通负压,旋转收集器头部并缓慢退出。收集抽取的粘液,并用采样液冲洗收集器出。收集抽取的粘液,并用采样液冲洗收集器1 1次。次。肺泡灌洗液肺泡灌洗液:局部麻醉后将纤维支气管镜通过口或鼻经过咽部插入:局部麻醉后将纤维支气管镜通过口或鼻经过咽部插入右肺中叶或左肺舌段的支管,将其顶端契入支气管分支开口,经气管活右肺中叶或左肺舌段的支管,将其顶端契入支气管分支开口,经气管活检孔缓缓加入灭菌生理盐水,每次检孔缓缓加入灭菌生理盐水,每次303050mL50mL,总量,总量100100250mL,250mL,不应超不

8、应超过过300mL300mL。其它材料:依据相关需求规范采集其它材料:依据相关需求规范采集所有标本应放在大小适合的所有标本应放在大小适合的带螺旋盖内有垫圈、耐冷冻的样带螺旋盖内有垫圈、耐冷冻的样本采集管里,拧紧。本采集管里,拧紧。采样前采样前,容容器外注明姓名、采样单位、采样器外注明姓名、采样单位、采样时间、样本编号及时间、样本编号及种类种类。将密闭后的标本放入大小合将密闭后的标本放入大小合适的塑料袋内密封,每袋装一份适的塑料袋内密封,每袋装一份标本。标本。用于病毒分离和核酸检测的标本应尽快进行检测,用于病毒分离和核酸检测的标本应尽快进行检测,2424小时内能检测的标本可置于小时内能检测的标本

9、可置于4 4保存;保存;2424小时内无法检测的小时内无法检测的标本则应置于标本则应置于-70-70 或以下保存(如无或以下保存(如无-70-70 保存条件,保存条件,则于则于-20-20 冰箱暂存);冰箱暂存);血清可以血清可以4 4存放存放3 3天,可在天,可在-20-20 以下长期保存;以下长期保存;标本应避免反复冻融,并应设立专库或专柜单独保存标本应避免反复冻融,并应设立专库或专柜单独保存标本。标本。两种两种4 4管标本:管标本:符合采样要求的符合采样要求的呼吸道标本呼吸道标本两管(每两管(每份不少于份不少于3ml3ml););血清标本血清标本两管两管(每份不少于每份不少于1ml1ml

10、);运送保存要求:应运送保存要求:应低温运输低温运输 ,避免反复冻融,避免反复冻融;标本包装要求:采用标本包装要求:采用A A类类UN2814UN2814,严格,严格3 3层层运输包装。运输包装。标本信息要求:标本信息要求:最内层容器上注明样本编号、最内层容器上注明样本编号、样本种类样本种类、姓名及采、姓名及采样日期;样日期;第二层包装容器上注明第二层包装容器上注明送样单位送样单位;随样附样本送检单:规范填写随样附样本送检单:规范填写新型冠状病毒检测新型冠状病毒检测标本送检表标本送检表,要求信息完整、字迹清晰可辨、,要求信息完整、字迹清晰可辨、加盖单位加盖单位公章公章(或送检专用章)。(或送检

11、专用章)。最内层包装最内层包装第二层包装容器第二层包装容器转运箱转运箱运输高致病性原微生物菌(毒)种或样本,应当有运输高致病性原微生物菌(毒)种或样本,应当有专专人运送人运送;送样单位应当对运送人员进行相关的生物安全知识培送样单位应当对运送人员进行相关的生物安全知识培训,并在运送过程中采取相应的防护措施;训,并在运送过程中采取相应的防护措施;运输过程注意运输过程注意交接环节的消毒交接环节的消毒:运送箱交给运送人员:运送箱交给运送人员前,要求最外层表面经过有效消毒,通常用前,要求最外层表面经过有效消毒,通常用75%75%酒精擦拭消酒精擦拭消毒;毒;运送人员个人防护:采用运送人员个人防护:采用一级

12、防护一级防护,取一次性工作帽,取一次性工作帽一次性外科口罩、工作服(白大褂),必要时戴一次性乳一次性外科口罩、工作服(白大褂),必要时戴一次性乳胶手套。胶手套。穿戴一次性工作帽穿戴一次性工作帽 、一次、一次性性外科口罩外科口罩和和工作服工作服(白大(白大褂),必要时戴一次性乳胶褂),必要时戴一次性乳胶手套;手套;适用于一般诊疗活动:适用于一般诊疗活动:预预检分诊、检分诊、普通门诊普通门诊 、感染、感染科门诊等科门诊等。二二穿戴一次性工作帽、护目镜(防穿戴一次性工作帽、护目镜(防雾型)、医用防护口罩(雾型)、医用防护口罩(N95N95)、)、防护内服或工作服、外套一次性防护内服或工作服、外套一次

13、性防渗透隔离衣防渗透隔离衣 /一次性防护服一次性防护服(视情况而定)、一次性乳胶手(视情况而定)、一次性乳胶手套,必要时穿一次性鞋套。套,必要时穿一次性鞋套。适用于医务人员在从事与患者有适用于医务人员在从事与患者有密切接触的诊疗活动时(如发热密切接触的诊疗活动时(如发热门诊门诊 、留观室和隔离病房)。、留观室和隔离病房)。三三 穿戴一次性工作帽、全面型呼吸防护器或正压式头套、穿戴一次性工作帽、全面型呼吸防护器或正压式头套、医用防护口罩、防护内服或工作服、外套一次性防护医用防护口罩、防护内服或工作服、外套一次性防护服、一次性乳胶手鞋、一次性鞋套。服、一次性乳胶手鞋、一次性鞋套。适用于为患者实施吸

14、痰、呼道采样、气管插管和气管适用于为患者实施吸痰、呼道采样、气管插管和气管切开等有可能发生患者呼吸道分泌物、体内质的喷射切开等有可能发生患者呼吸道分泌物、体内质的喷射或飞溅工作时。或飞溅工作时。注:注:佩戴全面型呼吸防护器或正压式头套时可无需目佩戴全面型呼吸防护器或正压式头套时可无需目镜和医用口罩。镜和医用口罩。指病毒分离、培养、滴定、中和试验、活病毒及其指病毒分离、培养、滴定、中和试验、活病毒及其蛋白纯化、病毒冻干以及产生活病毒的重组实验等操蛋白纯化、病毒冻干以及产生活病毒的重组实验等操作。应当在作。应当在生物安全三级(生物安全三级(BSL-3BSL-3)实验室)实验室内进行。使内进行。使用

15、病毒培养物提取核酸,裂解剂或灭活剂的加入必须用病毒培养物提取核酸,裂解剂或灭活剂的加入必须在与病毒培养等同级别的实验室和防护条件下进行;在与病毒培养等同级别的实验室和防护条件下进行;应报国家卫健委批准,取得开展相应活动的资质。应报国家卫健委批准,取得开展相应活动的资质。指以活病毒感染动物、感染动物取样、感染性样本指以活病毒感染动物、感染动物取样、感染性样本处理和检测、感染动物特殊检查等,应当处理和检测、感染动物特殊检查等,应当动物生物安动物生物安全三级(全三级(ABSL-3ABSL-3)实验室操作。)实验室操作。未经培养的感染性材料在采用可靠的方法灭活前进未经培养的感染性材料在采用可靠的方法灭

16、活前进行的病毒抗原检测、血清学检测、核酸提取、生化分行的病毒抗原检测、血清学检测、核酸提取、生化分析,以及临床样本的灭活等操作,应当在析,以及临床样本的灭活等操作,应当在生物安全二生物安全二级(级(BSL-2BSL-2)实验室)实验室进行,同时采用进行,同时采用生物安全三级实验生物安全三级实验室的个人防护室的个人防护。感染性材料或活病毒在采用可靠的方法灭活后可进感染性材料或活病毒在采用可靠的方法灭活后可进行的核酸检测、抗原检测、血清学检测、生化分析等行的核酸检测、抗原检测、血清学检测、生化分析等操作应当在操作应当在生物安全二级(生物安全二级(BSL-2BSL-2)实验室进行。)实验室进行。分子

17、分子克隆等不含致病性活病毒的其他操作,可以在克隆等不含致病性活病毒的其他操作,可以在BSL-1BSL-1实实验室进行。验室进行。下列情况严禁进入下列情况严禁进入BSL-2BSL-2进行操作:进行操作:有感染性疾病有感染性疾病 身体明显不适身体明显不适 裸露体表有较严重外伤裸露体表有较严重外伤 醉酒、吃药等醉酒、吃药等 心理、情绪等心理、情绪等样本的分装、灭活、裂样本的分装、灭活、裂解、检测等均应在生物解、检测等均应在生物安全柜内操作;安全柜内操作;未经可靠灭活的样本必未经可靠灭活的样本必须密闭封装,容器外表须密闭封装,容器外表面消毒后再拿出生物安面消毒后再拿出生物安全;全;单位内部、实验室间样

18、单位内部、实验室间样本的运输应使用内部转本的运输应使用内部转运箱。运箱。建议此次建议此次2019-nCoV2019-nCoV检测实验室消毒工作:检测实验室消毒工作:常规消毒:常规消毒:75%75%酒精;酒精;溢洒等局限污染处理:使用溢洒等局限污染处理:使用有效氯含量有效氯含量为(为(0.55%0.55%)消毒液,消毒液需要现用现消毒液,消毒液需要现用现配,配,2424小时内使用。小时内使用。实验室空间:紫外、过氧化氢等实验室空间:紫外、过氧化氢等建议此次建议此次2019-nCoV2019-nCoV检测工作中废弃物处理:检测工作中废弃物处理:严格按照医疗废弃物处理规程;严格按照医疗废弃物处理规程;两层包装,垃圾不过夜;利器单独处理;两层包装,垃圾不过夜;利器单独处理;外表面消毒;外表面消毒;高压灭菌高压灭菌;移交登记。移交登记。

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