1、ISO11135标准理解与实施环氧乙烷灭菌确认标准理解与实施环氧乙烷灭菌确认环氧乙烷灭菌确认环氧乙烷灭菌确认 ISO11135标准理解与实施环氧乙烷灭菌确认标准理解与实施环氧乙烷灭菌确认环环 氧氧 乙乙 烷烷 灭灭 菌菌 确确 认认 1、灭菌确认依据、原理2、概念、定义3、如何实施灭菌确认4、确认出证（灭菌确认报告）ISO11135标准理解与实施环氧乙烷灭菌确认标准理解与实施环氧乙烷灭菌确认 特殊生产过程 无菌保证水平 对数死亡规律 ISO 11135-1ISO11135标准理解与实施环氧乙烷灭菌确认标准理解与实施环氧乙烷灭菌确认环环 氧氧 乙乙 烷烷 灭灭 菌菌 确确 认认 概概 念念 定定
2、 义义灭菌确认灭菌确认 对获得的结果进行记录和整理的书面程序，证明灭菌过程可持续生产符合预定规格的产品得出无菌保证水平10-6的验证验证确认中的仪器、设备适合性 验证灭菌循环科学性、适合性文件化ISO11135标准理解与实施环氧乙烷灭菌确认标准理解与实施环氧乙烷灭菌确认无菌保证水平：无菌保证水平：灭菌后，在单位产品上检出存活微生物的概率。在实际生产过程中，理解为一批经灭菌的产品中发生灭菌不完全的产品数量。理论基础 微生物的死亡规律遵循一级化学反应方程。灭菌时间t，与存活微生物数量的对数值lgN呈直线线性关系，这就是微生物的对数死亡规律。环环 氧氧 乙乙 烷烷 灭灭 菌菌 确确 认认 概概 念念
3、 定定 义义ISO11135标准理解与实施环氧乙烷灭菌确认标准理解与实施环氧乙烷灭菌确认预处理预处理在灭菌循环开始前，在一房间或柜室内先对产品进行处理，以达到预定温度和相对湿度。灭菌循环灭菌循环 在一密闭的柜室内，包括进行去除空气、处理（若采用）、加入灭菌剂、EO作用、去除EO和换气。通风通风 将EO和（或）其它反应产物从医疗器械解吸至预定水平的过程。环环 氧氧 乙乙 烷烷 灭灭 菌菌 确确 认认 概概 念念 定定 义义ISO11135标准理解与实施环氧乙烷灭菌确认标准理解与实施环氧乙烷灭菌确认灭菌循环构成灭菌循环类正压灭菌循环正压灭菌循环 EO作用（灭菌）阶段压力大于大气 压。负压灭菌循环负
4、压灭菌循环 EO作用（灭菌）阶段压力小于大气压。影响灭菌循环效果（见环氧乙烷灭菌四要素）环环 氧氧 乙乙 烷烷 灭灭 菌菌 确确 认认 概概 念念 定定 义义ISO11135标准理解与实施环氧乙烷灭菌确认标准理解与实施环氧乙烷灭菌确认处理目的（冷点、热点）通过导入蒸气，给产品加温、加湿，使被灭菌的产品内温湿度达到预定的温度和相对湿度，并且品内温湿度尽可能均一。处理方式 静态处理 动态处理影响处理效果的因素真空度：真空度越高，蒸气分压越大，温湿度越易到达产品内。处理的方式：动态处理方式效果较好。产品包装、结构、密度 装载方式环环 氧氧 乙乙 烷烷 灭灭 菌菌 确确 认认 概概 念念 定定 义义热
5、点冷点ISO11135标准理解与实施环氧乙烷灭菌确认标准理解与实施环氧乙烷灭菌确认品内温度品内温度冷点冷点（考虑到最低温度应是设定定温度）灭菌负载中最难灭菌的位置，一般情况下温度最低的点就是冷点。冷点往往在靠近灭菌罐门的产品负载中。热点热点（考虑到最高温度对产品的影响）热点是温度最高的点，一般是靠近灭菌罐内壁的灭菌负载，在灭菌气体导入口处的产品往往热点。品温与灭菌循环品内温度环环 氧氧 乙乙 烷烷 灭灭 菌菌 确确 认认 概概 念念 定定 义义ISO11135标准理解与实施环氧乙烷灭菌确认标准理解与实施环氧乙烷灭菌确认作用时间（灭菌时间）灭菌罐内的温度、EO浓度、压力和湿度保持在规定范围内的持
6、续时间。作用时间设定的方法测D值法 存活曲线法 部分阴性法 半时循环法（过剩杀灭法）使用的生物指示剂的芽孢含量必须达到106CFU/片 必须有一次短时间循环证明复苏技术的可靠性。环环 氧氧 乙乙 烷烷 灭灭 菌菌 确确 认认 概概 念念 定定 义义ISO11135标准理解与实施环氧乙烷灭菌确认标准理解与实施环氧乙烷灭菌确认环环 氧氧 乙乙 烷烷 灭灭 菌菌 确确 认认 概概 念念 定定 义义A、生物指示剂/生物负载法B、过度杀灭法1、直接计数法2、部分阴性法（HSKP、SMCP）1、半周期法（106）2、周期计算法（106？）灭菌过程致死率灭菌过程致死率 灭菌过程对微生物的杀灭率ISO1113
7、5标准理解与实施环氧乙烷灭菌确认标准理解与实施环氧乙烷灭菌确认D值 在特定的条件下，杀灭90%的微生物所需的时间或剂量。D值与四要素的关系 温度：温度越高D值越小 浓度：浓度越高D值越小 湿度：无明确的线性关系 时间：D值越小，所需灭菌 时间越短环环 氧氧 乙乙 烷烷 灭灭 菌菌 确确 认认 概概 念念 定定 义义ISO11135标准理解与实施环氧乙烷灭菌确认标准理解与实施环氧乙烷灭菌确认生物指示剂生物指示剂 对特定的灭菌过程有确定的抗力，装在内层包装中可供使用的染菌载体。生物指示剂种类（按使用特性分）条状生物指示剂 自含式生物指示剂生物指示剂性能 菌种：枯草芽孢杆菌黑色变种 芽孢数量：在标称
8、量的-50%和+300%之间，日常监测用的芽孢数量必须大于1.0106，规定增值不大于0.1 106。抗力：D值大于2.5min或12.5min(相同浓度不同温湿度）生物指示剂的培养 培养基：胰蛋白胨大豆肉汤（TSB）培养条件：3035，有氧培养7天 条状生物指示剂自含式生物指示剂环环 氧氧 乙乙 烷烷 灭灭 菌菌 确确 认认 概概 念念 定定 义义ISO11135标准理解与实施环氧乙烷灭菌确认标准理解与实施环氧乙烷灭菌确认 过程挑战用具过程挑战用具 确认用PCD 选择内径最小、长度最长、结构复杂的产品.BI设置在产品内灭菌剂最难到达的部位，且不影响灭菌剂进入产品 测D值或短时间循环确定最难灭
9、菌的产品及部位日常监测用PCD 均匀设在灭菌负载的外面 抵抗性等于或大于确认用PCD确认用PCD日常用PCD环环 氧氧 乙乙 烷烷 灭灭 菌菌 确确 认认 概概 念念 定定 义义ISO11135标准理解与实施环氧乙烷灭菌确认标准理解与实施环氧乙烷灭菌确认灭菌确认体系图：灭菌确认体系图：如如 何何 实实 施施 环环 氧氧 乙乙 烷烷 灭灭 菌菌 确确 认认ISO11135标准理解与实施环氧乙烷灭菌确认标准理解与实施环氧乙烷灭菌确认设备合格性确认设备合格性确认 主要在新设备导入时和设备变更时进行安装合格性确认（IQ）目的：确认灭菌设备及其辅助系统的安装符合设备规格及设计规范 确认项目：对说明书等资
10、料进行确认、保管 外观检查 设备规范确认运行合格性确认（OQ）如如 何何 实实 施施 环环 氧氧 乙乙 烷烷 灭灭 菌菌 确确 认认ISO11135标准理解与实施环氧乙烷灭菌确认标准理解与实施环氧乙烷灭菌确认目的：在指定的灭菌条件下对灭菌机进行实际空罐运行，检查其性能参数的符合性步骤及方法：检测仪器的校准 确认用温度传感器的设置 实际运行3次 数据处理、分析检查项目：罐内温度分布（设定值 3内）抽真空到达的真空度及速度 加压后的气密性检查 EOG导入压力上升及到达速度 排气是的减压速度与减压度 复压时压力上升及速度运行合格性确认（运行合格性确认（OQ）如如 何何 实实 施施 环环 氧氧 乙乙
11、烷烷 灭灭 菌菌 确确 认认ISO11135标准理解与实施环氧乙烷灭菌确认标准理解与实施环氧乙烷灭菌确认性能合格性确认（性能合格性确认（PQ）新产品、改良品及其包装、负载方式、设备、工艺参数变更时进行。所用的产品应与日常灭菌的产品包装相同。目的 确认在使用实际产品或替代产品检查灭菌机、辅助系统及灭菌工艺所灭菌的产品符合产品质量规范。性能合格性确认替代品很重要，最好是实际产品。确认项目 微生物性能合格性确认（MPQ）物理性能合格性确认（PPQ）产品合格性确认如如 何何 实实 施施 环环 氧氧 乙乙 烷烷 灭灭 菌菌 确确 认认ISO11135标准理解与实施环氧乙烷灭菌确认标准理解与实施环氧乙烷灭
12、菌确认如如 何何 实实 施施 环环 氧氧 乙乙 烷烷 灭灭 菌菌 确确 认认微生物性能合格性确认（MPQ）半时循环法 短时间运行物理性能合格性确认（PPQ）整周循环法产品合格性确认 整周循环运行后按产品检验、检查SOP进行产品机能、残留EO评价 目前最常见的确认方法：目前最常见的确认方法：ISO11135标准理解与实施环氧乙烷灭菌确认标准理解与实施环氧乙烷灭菌确认替代品的选择与收集替代品的选择与收集 收集尽可能多的实际产品 微生物性能合格性确认用（密度大、体积大）物理性能合格性确认用（密度小、体积小）收集实际产品用的单位盒、出荷箱 里面装前面收集到的产品 如不够则装类似的产品，密度与实际产品相
13、同 考虑产品的体积密度、装载，调整替代品 替代品越接近实际产品，得出的结果就越接近实际值 装载方式如如 何何 实实 施施 环环 氧氧 乙乙 烷烷 灭灭 菌菌 确确 认认ISO11135标准理解与实施环氧乙烷灭菌确认标准理解与实施环氧乙烷灭菌确认 装载方式 确定灭菌工程中的装载方式是确认中最重要的设定内容，因为即 使是相同的出荷箱，装载的方式不同，产品各部位 的品内温度、湿度也会不一样，设定要点如下：考虑产品的生产量、灭菌机状况，决定恰当的灭菌量考虑EO气体和蒸气的渗透性，在产品装载之间留出一点缝隙 或在灭菌机内留有较多空间产品装载的方向性 产品横竖等装载方向也会影响 产品的灭菌性如如 何何 实
14、实 施施 环环 氧氧 乙乙 烷烷 灭灭 菌菌 确确 认认ISO11135标准理解与实施环氧乙烷灭菌确认标准理解与实施环氧乙烷灭菌确认如如 何何 实实 施施 环环 氧氧 乙乙 烷烷 灭灭 菌菌 确确 认认微生物性能合格性确认微生物性能合格性确认目的：根据灭菌处理后BI无菌试验结 果设定评价灭菌时间方法：半时循环法实施步骤替代品的准备确认用仪器仪表的校正PCDs的准备PCDs、温湿度传感器在替代品中的设置（PCDs、温湿度传感器所需数量参见表2）半时循环运行半时循环运行 温度、湿度、压力、时间下限3 次 2小时内将PCDs、温湿度传感器取出进 行BI的无菌试验和数据处理根据BI无菌试验结果评价半时
15、循环的时间确定半时循环时间后用比半时循环短的时间运行，确认BI无菌试验结果呈阳性。影响微生物性能的因素PCDs、温湿度传感器在替代品中的设置位置ISO11135标准理解与实施环氧乙烷灭菌确认标准理解与实施环氧乙烷灭菌确认如如 何何 实实 施施 环环 氧氧 乙乙 烷烷 灭灭 菌菌 确确 认认影响微生物性能的因素影响微生物性能的因素产品包装、结构、装载方式、装载量产品包装、结构、装载方式、装载量 纸塑包装、全塑包装灭菌性能 产品结构越复杂，灭菌越困难 装载越紧凑、装载量越大灭菌越困难灭菌参数灭菌参数（参见环氧乙烷灭菌四要素）温度：湿度：浓度：时间：外界环境外界环境 温度：灭菌循环开始时环境温度越低
16、，产品 温度越低，灭菌效果越差 湿度：干燥季节环境湿度偏低，可能会影 响到灭菌效果ISO11135标准理解与实施环氧乙烷灭菌确认标准理解与实施环氧乙烷灭菌确认如如 何何 实实 施施 环环 氧氧 乙乙 烷烷 灭灭 菌菌 确确 认认物理性能合格性确认物理性能合格性确认目的：方法：整周循环法确认项目灭菌参数确认（包括半时循环的参数）产品合格性确认实施步骤 替代品的准备 确认用仪器仪表的校正 样品准备 样品、温湿度传感器在替代品中的设置（温湿度传感器所需数量参见表2）实施整周循环 温度、湿度、压力、时间上限3次 数据处理、分析ISO11135标准理解与实施环氧乙烷灭菌确认标准理解与实施环氧乙烷灭菌确认
17、如如 何何 实实 施施 环环 氧氧 乙乙 烷烷 灭灭 菌菌 确确 认认灭菌参数合格性确认灭菌参数合格性确认 灭菌工程中的压力 调节工程及灭菌工程中灭菌罐内及 产品温湿度分布 灭菌工程中EO浓度 到达真空度及到达速度 EOG导入后的压力上升及到达速度 排气时的减压速度与减压度 复压时压力上升及速度 EOG导入时温度ISO11135标准理解与实施环氧乙烷灭菌确认标准理解与实施环氧乙烷灭菌确认如如 何何 实实 施施 环环 氧氧 乙乙 烷烷 灭灭 菌菌 确确 认认ISO11135标准理解与实施环氧乙烷灭菌确认标准理解与实施环氧乙烷灭菌确认如如 何何 实实 施施 环环 氧氧 乙乙 烷烷 灭灭 菌菌 确确
18、 认认ISO11135标准理解与实施环氧乙烷灭菌确认标准理解与实施环氧乙烷灭菌确认如如 何何 实实 施施 环环 氧氧 乙乙 烷烷 灭灭 菌菌 确确 认认ISO11135标准理解与实施环氧乙烷灭菌确认标准理解与实施环氧乙烷灭菌确认如如 何何 实实 施施 环环 氧氧 乙乙 烷烷 灭灭 菌菌 确确 认认产品合格性确认 与物理性能合格性确认时同时进行目的 确认经整周循环灭菌处理后，产品 机能能符合产品规格，经通风放置 一段时间后残留EO降至25g/g以下确认项目 产品机能 残留EO方法（导管为例）产品机能 残留EO 气相色谱法影响产品合格性的因素环氧乙烷环氧乙烷(EO)灭菌性能确认（灭菌性能确认（PQ
19、)ISO11135标准理解与实施环氧乙烷灭菌确认标准理解与实施环氧乙烷灭菌确认如如 何何 实实 施施 环环 氧氧 乙乙 烷烷 灭灭 菌菌 确确 认认影响产品合格性的因素影响产品合格性的因素关于产品机能 温度：温度过高易使产品变形、接着脱落等；湿度：湿度过高易使产品接着脱落,出厂箱变形等；压力变化（排气、导入EO、复压速度等）：压力变化过快易引起产品包装破损或形成真空包装；关于残留EO 产品的材质、构造及其包装 灭菌时的温度、湿度、浓度、换气次数等 灭菌后的保存条件（包括温度、湿度、换气次数等）ISO11135标准理解与实施环氧乙烷灭菌确认标准理解与实施环氧乙烷灭菌确认如如 何何 实实 施施 环
20、环 氧氧 乙乙 烷烷 灭灭 菌菌 确确 认认灭菌确认标准程序ISO11135标准理解与实施环氧乙烷灭菌确认标准理解与实施环氧乙烷灭菌确认如如 何何 实实 施施 环环 氧氧 乙乙 烷烷 灭灭 菌菌 确确 认认ISO11135标准理解与实施环氧乙烷灭菌确认标准理解与实施环氧乙烷灭菌确认如如 何何 实实 施施 环环 氧氧 乙乙 烷烷 灭灭 菌菌 确确 认认灭菌确认的审核与批准ISO11135标准理解与实施环氧乙烷灭菌确认标准理解与实施环氧乙烷灭菌确认如如 何何 实实 施施 环环 氧氧 乙乙 烷烷 灭灭 菌菌 确确 认认ISO11135标准理解与实施环氧乙烷灭菌确认标准理解与实施环氧乙烷灭菌确认灭灭
21、菌菌 过过 程程 有有 效效 性性 的的 维维 持持ISO11135标准理解与实施环氧乙烷灭菌确认标准理解与实施环氧乙烷灭菌确认灭灭 菌菌 过过 程程 有有 效效 性性 的的 维维 持持ISO11135标准理解与实施环氧乙烷灭菌确认标准理解与实施环氧乙烷灭菌确认环 氧 乙 烷 (EO)灭 菌 常 规 控 制ISO11135标准理解与实施环氧乙烷灭菌确认标准理解与实施环氧乙烷灭菌确认环 氧 乙 烷 (EO)灭 菌 常 规 控 制ISO11135标准理解与实施环氧乙烷灭菌确认标准理解与实施环氧乙烷灭菌确认灭菌剂加入时的压力升高，能间接的测量灭菌器中的EO浓度。由于EO浓度是影响灭菌过程有效性的关键
22、参数，因此需要一个独立的第二系统，说明压力升高是由于EO加入所引起。环 氧 乙 烷 (EO)灭 菌 常 规 控 制ISO11135标准理解与实施环氧乙烷灭菌确认标准理解与实施环氧乙烷灭菌确认环 氧 乙 烷 (EO)灭 菌 常 规 控 制EOG浓度的计算ISO11135标准理解与实施环氧乙烷灭菌确认标准理解与实施环氧乙烷灭菌确认上述计算方法可简化为：上述计算方法可简化为：EOconc=（灭菌剂中（灭菌剂中EO的混合比例的混合比例*44000*P）/（RT）P：atm 灭菌剂导入到筒内引起的压力变化灭菌剂导入到筒内引起的压力变化 1atm=101.3kPa T：K 气体暴露时的筒内温度气体暴露时的
23、筒内温度 1K=1+273R：常数常数 0.0821atm.l/mol.k 上述实例计算：上述实例计算：EOconc=（0.203*44000*2.096）/（0.0821*323）=706.4（mg/L）环 氧 乙 烷 (EO)灭 菌 常 规 控 制ISO11135标准理解与实施环氧乙烷灭菌确认标准理解与实施环氧乙烷灭菌确认用重量法：用重量法：EOconc=（灭菌剂中（灭菌剂中EO的混合比例的混合比例*导入灭菌剂的重量）导入灭菌剂的重量）/灭菌机容积灭菌机容积 导入灭菌剂的重量：导入灭菌剂的重量：单位单位mg 灭菌机容积灭菌机容积:单位单位L 在标准中要求至少两种方法监测灭菌剂已经导入到灭菌机内，最常用的是监在标准中要求至少两种方法监测灭菌剂已经导入到灭菌机内，最常用的是监测重量和压力，若要计算灭菌机的灭菌剂的浓度，用压力变化计算得到浓度测重量和压力，若要计算灭菌机的灭菌剂的浓度，用压力变化计算得到浓度比较准确。比较准确。环 氧 乙 烷 (EO)灭 菌 常 规 控 制ISO11135标准理解与实施环氧乙烷灭菌确认标准理解与实施环氧乙烷灭菌确认环 氧 乙 烷 (EO)灭 菌 常 规 控 制ISO11135标准理解与实施环氧乙烷灭菌确认标准理解与实施环氧乙烷灭菌确认环 氧 乙 烷 (EO)灭 菌 常 规 控 制
