1、第第13章章中华医学会临床微生物学组(14届)全国委员中 华 医 学 检 验 全 书 主 编北华大学临床微生物学 教 授 海 南 医 学 院 特 聘 教 授 李影林李影林 2010年年10月月 是指一大群要求在是指一大群要求在降低氧压降低氧压的条件下才能生长，而的条件下才能生长，而不能在含有不能在含有10%CO2（空气中含（空气中含18%氧气）的固体培养基表面生氧气）的固体培养基表面生长的革兰阳性球菌、杆菌和革兰阴性球菌、杆菌的总称。长的革兰阳性球菌、杆菌和革兰阴性球菌、杆菌的总称。2.分类分类 根据厌氧的程度可分为根据厌氧的程度可分为2 2种种:(1)极度厌氧菌（极度厌氧菌（extreme
2、oxygen sensitive anaerobes,EOSA）系指一些要求在系指一些要求在低于低于0.5%氧气氧气条件下才能生长，在条件下才能生长，在空气中暴露空气中暴露10min即死亡即死亡的细菌。的细菌。特点：甚难分离与培养。特点：甚难分离与培养。如：月形单胞菌和丁酸弧菌。人类粪便中的厌氧菌绝大多数为极度如：月形单胞菌和丁酸弧菌。人类粪便中的厌氧菌绝大多数为极度厌氧菌。厌氧菌。(2)中度厌氧菌（中度厌氧菌（moderate anaerobes）系指）系指能在能在2%8%（平均（平均3%）的氧分压环境中生长。在的氧分压环境中生长。在空气中暴露空气中暴露6090min尚能存活尚能存活的细菌。
3、的细菌。一般对人致病的厌氧菌（如脆弱类杆菌、产气荚膜芽胞梭菌）一般对人致病的厌氧菌（如脆弱类杆菌、产气荚膜芽胞梭菌）大多属于此类。大多属于此类。分布分布 G+G+或或G-外源性感染为主外源性感染为主 内源性感染为主内源性感染为主 外毒素为主，毒性强外毒素为主，毒性强 内毒素及侵袭因素，毒性弱内毒素及侵袭因素，毒性弱 10%10%90%90%关系不明显关系不明显 机体免疫功能下降机体免疫功能下降 多见外伤感染、食物中毒，多见外伤感染、食物中毒，各部位炎症，脓肿，败血症各部位炎症，脓肿，败血症 临床症状特殊临床症状特殊 无特殊症状无特殊症状 抗毒素治疗为主抗毒素治疗为主 抗菌治疗为主抗菌治疗为主抗
4、毒素紧急预防、类抗毒素紧急预防、类 毒素预防毒素预防 增强机体抵抗力增强机体抵抗力破伤风芽胞梭菌、产气荚膜破伤风芽胞梭菌、产气荚膜芽芽条件致病菌条件致病菌胞梭胞梭菌、肉毒菌、肉毒芽胞梭芽胞梭菌、艰难梭菌菌、艰难梭菌如双歧脆弱类杆菌等如双歧脆弱类杆菌等分布分布.自然界自然界 厌氧菌的分布广泛，土壤、沼泽、湖泊、厌氧菌的分布广泛，土壤、沼泽、湖泊、海洋、污水、食物以及人和动物体都有海洋、污水、食物以及人和动物体都有它的存在。它的存在。.人体人体 几种重要的厌几种重要的厌O2菌种类及其在正常人菌种类及其在正常人体内的分布体内的分布（）（）皮肤上占优势的厌皮肤上占优势的厌O2菌是座疮丙酸杆菌。菌是座疮
5、丙酸杆菌。第一节第一节 G+两端钝圆的芽胞杆菌两端钝圆的芽胞杆菌，除产气荚膜梭菌外，除产气荚膜梭菌外，芽胞均大于芽胞均大于菌体的宽度，有周鞭毛、无荚膜菌体的宽度，有周鞭毛、无荚膜，根据芽胞的形状和位置有鉴，根据芽胞的形状和位置有鉴别意义。别意义。严格厌氧（中度厌氧）严格厌氧（中度厌氧）芽胞对外界环境抵抗力强芽胞对外界环境抵抗力强（高温、干燥、消毒剂）。（高温、干燥、消毒剂）。进行进行消毒灭菌时应注意！消毒灭菌时应注意！能产生能产生多种多种强烈的强烈的外毒素和侵袭性酶，外毒素和侵袭性酶，毒性强烈毒性强烈，致病性致病性强强，都都可脱毒制成类毒素可脱毒制成类毒素来预防。来预防。艰难芽胞梭菌（艰难芽胞
6、梭菌（C.difficileC.difficile）引起抗生素相关性腹泻引起抗生素相关性腹泻 伪膜性肠炎伪膜性肠炎细长杆菌（细长杆菌（48m0.30.5m）周鞭毛，）周鞭毛，幼龄运动很活跃。幼龄运动很活跃。特殊菌形鼓槌样，端立芽胞要记牢。特殊菌形鼓槌样，端立芽胞要记牢。生化反应：不活跃。生化反应：不活跃。抵抗力：繁殖体抵抗力与一般细菌相似，抵抗力：繁殖体抵抗力与一般细菌相似，芽胞抵抗力很强。对青霉素敏感。芽胞抵抗力很强。对青霉素敏感。培养特性：培养特性：专性厌氧专性厌氧pH7.07.5 37最适。最适。营养要求不高营养要求不高，普通琼脂即可生长。，普通琼脂即可生长。典型菌落典型菌落：葡萄糖血液
7、琼脂平板：葡萄糖血液琼脂平板：菌落菲薄菌落菲薄，呈，呈不规则的交织不规则的交织的丝状，有时呈分叶状、地图状或小蜘蛛状等爬行状的丝状，有时呈分叶状、地图状或小蜘蛛状等爬行状，不规则的，不规则的菌落菌落。菌落透明有光泽。菌落周围有菌落透明有光泽。菌落周围有轻度轻度溶血区溶血区。庖肉培养基庖肉培养基：肉汤混浊肉汤混浊，因能产生甲基硫醇，故有，因能产生甲基硫醇，故有腐败腐败臭味臭味，肉渣开始变黑肉渣开始变黑，部分消化产生少量气体。，部分消化产生少量气体。无特殊鉴别意义。无特殊鉴别意义。梭梭梭梭致病性和免疫性致病性和免疫性 致病物质：强烈外毒素致病物质：强烈外毒素 1.破伤风痉挛毒素（破伤风痉挛毒素（t
8、etanospasmin）:（1）化学组成）化学组成：多肽，分子量为多肽，分子量为150kDa。（2）结构）结构：由两条肽链（由两条肽链（A A、B）借二硫键结合而成。）借二硫键结合而成。从菌体释从菌体释 被蛋白酶被蛋白酶 A 放的毒素放的毒素 切割切割 B（两条链分开则无生物学活性，重新组合又恢复其作用。两条链分开则无生物学活性，重新组合又恢复其作用。（3）特点）特点 性质不稳定性质不稳定 为蛋白质，可被肠道蛋白酶破坏。为蛋白质，可被肠道蛋白酶破坏。光、热、酸、硷、酒精（光、热、酸、硷、酒精（70%）均可破坏。）均可破坏。运动运动N 通过跨突触运动通过跨突触运动元细胞体元细胞体 小泡从运动小
9、泡从运动N元进入传入神经末梢元进入传入神经末梢 进入进入 中中 枢枢 神经系统神经系统 产生膜的转位产生膜的转位 使轻链进入胞质使轻链进入胞质。轻链轻链（为锌内肽酶）（为锌内肽酶）可裂解可裂解储存有抑制性储存有抑制性N介质（介质（氨基丁酸、甘氨酸）小泡上的）小泡上的膜蛋白特异性肽键膜蛋白特异性肽键 小泡膜蛋白发生改变小泡膜蛋白发生改变 阻止抑制性阻止抑制性N介质的释放介质的释放 致使肌肉活动的兴奋与抑制失调致使肌肉活动的兴奋与抑制失调 导致屈肌、伸肌同时发生强烈收缩导致屈肌、伸肌同时发生强烈收缩 骨骼肌出现强烈痉挛。骨骼肌出现强烈痉挛。破伤风溶血毒素：作用尚不清楚破伤风溶血毒素：作用尚不清楚破
10、伤风痉挛毒素破伤风痉挛毒素乙酰胆碱乙酰胆碱乙酰胆碱受体乙酰胆碱受体松弛的肌肉松弛的肌肉 肌肉收缩肌肉收缩神经兴奋神经刺激肌肉收缩神经刺激肌肉收缩乙酰胆碱乙酰胆碱乙酰胆碱受体乙酰胆碱受体肌肉收缩肌肉收缩抑制性介质破伤风外毒素抑制性中间神经元破伤风痉挛毒素封闭了抑制性中间神经元的抑制性介质的释放防防 治治 原原 则则G G+粗大杆菌。粗大杆菌。粗大杆菌无鞭毛，单双短链有芽胞。人粗大杆菌无鞭毛，单双短链有芽胞。人畜体内有荚膜，中偏卵圆小芽胞。畜体内有荚膜，中偏卵圆小芽胞。产气荚膜梭菌革兰染色 （1）厌氧，要求不严格厌氧，要求不严格，微氧环境也能生长。，微氧环境也能生长。（2）营养要求不高营养要求不高
11、。含糖培养基发育最佳，无糖发育不良，。含糖培养基发育最佳，无糖发育不良，但有利于形成芽胞。但有利于形成芽胞。（3）繁殖迅速繁殖迅速：通常培养：通常培养2h在液体培养基深层即有明显生长，在液体培养基深层即有明显生长，46h后出现表面生长。后出现表面生长。（4）庖肉培养基：混浊生长，产生气体，肉渣呈粉红色，不庖肉培养基：混浊生长，产生气体，肉渣呈粉红色，不被消化。被消化。（5）牛乳培养基）牛乳培养基“汹涌发酵汹涌发酵”现象现象，这是本菌的特，这是本菌的特点。产气荚膜梭菌在牛乳培养基中，经点。产气荚膜梭菌在牛乳培养基中，经37 6h培养后，培养后，由于本菌迅速分解牛乳中的乳糖由于本菌迅速分解牛乳中的
12、乳糖 ，产生大量的酸将酪，产生大量的酸将酪蛋白凝固，同时产生大量气体，又将凝固的酪蛋白冲散，蛋白凝固，同时产生大量气体，又将凝固的酪蛋白冲散，形成分散的海绵样碎块，来势颇为汹猛，称为其他厌氧形成分散的海绵样碎块，来势颇为汹猛，称为其他厌氧菌所没有的独特的菌所没有的独特的“汹涌发酵汹涌发酵”现象。现象。（6）血平板血平板：多数菌株有：多数菌株有双层溶血双层溶血。内环为。内环为-溶溶血（完全溶血）是由于血（完全溶血）是由于毒素的作用；外环为毒素的作用；外环为-溶血（不完全溶血）是由于溶血（不完全溶血）是由于毒素所致。毒素所致。什么叫什么叫Nagler反应？反应？（7）卵黄琼脂平板卵黄琼脂平板：菌落
13、周围出现：菌落周围出现乳白色混浊圈，乳白色混浊圈，是由于此菌产生的卵磷脂酶（是由于此菌产生的卵磷脂酶（毒素）分解卵毒素）分解卵黄中的卵磷脂，这一现象称为黄中的卵磷脂，这一现象称为Nagler反应。可反应。可被特异的抗血清所中和。被特异的抗血清所中和。产气荚膜梭菌菌落特征（厌氧血平板，双溶血环）生化反应在鉴别本菌上无特殊意义。生化反应在鉴别本菌上无特殊意义。产气荚膜梭菌汹涌发酵现象（右为未接种管）根据产生外毒素性质不同分根据产生外毒素性质不同分6型（型（AF）A型型气性坏疽、食物中毒气性坏疽、食物中毒C型型坏死性肠炎坏死性肠炎其他其他动物腹泻，肠炎动物腹泻，肠炎致病性致病性 指端气性坏疽指端气性
14、坏疽气性坏疽（1 1）G G+两端钝圆的短粗杆菌，常单独或成双存两端钝圆的短粗杆菌，常单独或成双存在，有时亦可成短链状。在，有时亦可成短链状。（2 2）周鞭毛，能运动，无荚膜。）周鞭毛，能运动，无荚膜。（3 3）芽胞为椭圆形，位于菌体的次末端，较菌）芽胞为椭圆形，位于菌体的次末端，较菌体大，呈汤匙状或网球拍状。体大，呈汤匙状或网球拍状。肉毒梭菌革兰染色肉毒梭菌芽胞染色肉毒梭菌芽胞染色2培养特点培养特点（1）专性厌氧）专性厌氧（2）对）对pH甚为敏感，只可在中性或弱甚为敏感，只可在中性或弱碱性（碱性（pH7.2）的培养基中生长。）的培养基中生长。（3）营养要求不高。）营养要求不高。（4）血平板：
15、菌落较大，边缘皱折，有）血平板：菌落较大，边缘皱折，有-溶血。溶血。（5）庖肉培养基：消化肉渣，使之变黑，）庖肉培养基：消化肉渣，使之变黑，有腐败恶臭。有腐败恶臭。肉毒梭菌菌落特征（厌氧血平板）3生化反应：对鉴定本菌意义不大。生化反应：对鉴定本菌意义不大。4抵抗力抵抗力（1）肉毒芽胞梭菌的芽胞抵抗力很强。）肉毒芽胞梭菌的芽胞抵抗力很强。（2）肉毒毒素的抵抗力比破伤风痉挛毒素）肉毒毒素的抵抗力比破伤风痉挛毒素强。强。（3）与破伤风痉挛毒素的主要区别）与破伤风痉挛毒素的主要区别 破伤风痉挛毒素破伤风痉挛毒素 肉毒毒素肉毒毒素1.肠道蛋白酶 易破坏 不易破坏2.对热敏感 敏感6530min破坏 耐热
16、3.对酸 不耐受，易破坏 耐酸4.作用机理 沿N轴突上行，留在N肌肉接头处 直接作用于中枢神经系统的脑 神经核和外周神经-肌肉神经 接头处及自主神经末梢5.编码 由质粒编码 C、D型由噬菌体编码 其他型由染色体编码（1）化学组成）化学组成：是简单蛋白质，由19种氨基酸组成。（2）特点：）特点：为嗜神经毒。毒性强烈毒性作用及机理：主要作用于中枢神经系统的脑神经核和外周神经-肌肉神经接头处及自主神经末梢，阻碍了胆碱能神经末梢传递介质（乙酰胆碱）的释放，导致肌肉麻痹。对酸、热、蛋白酶的抵抗力较强。阻碍阻碍Ach释放，影响神经冲动的传递，引起释放，影响神经冲动的传递，引起肌肉弛缓型麻痹肌肉弛缓型麻痹神
17、经兴奋乙酰胆碱乙酰胆碱乙酰胆碱受体肌肉松弛肌肉松弛神经神经乙酰胆碱乙酰胆碱乙酰胆碱受体乙酰胆碱受体肌肉松弛肌肉松弛肉毒毒素肉毒毒素阻碍乙酰胆硷释放所致疾病所致疾病微生物学检查法微生物学检查法离心取上清 小鼠存活小鼠存活加热10010 加抗毒素 小鼠存活小鼠存活 3检验方法检验方法（1）标本的直接检查）标本的直接检查意义不大。因本菌靠肉毒毒意义不大。因本菌靠肉毒毒素致病。素致病。（2）分离培养）分离培养（3）毒素测定）毒素测定 定性试验定性试验 毒素型别的鉴定毒素型别的鉴定A.A.反向间接血凝反向间接血凝 B.中和试验中和试验 此外，此外，ELISA双抗体夹心法双抗体夹心法 四、艰难芽胞梭菌四、
18、艰难芽胞梭菌（C.difficile）1形态与染色形态与染色（1）G+粗长杆菌，粗长杆菌，2d后后 有转阴性的趋势。有转阴性的趋势。（2）分为能运动（周鞭毛）分为能运动（周鞭毛）和不能运动两种类型。和不能运动两种类型。无荚膜无荚膜，芽胞为圆形或长方形芽胞为圆形或长方形，起初（起初（48h）位于菌体近端，）位于菌体近端，随着成熟逐渐移向顶端。随着成熟逐渐移向顶端。(一一)生物学性状生物学性状艰难梭菌革兰染色2培养特点：培养特点：（1）严格专性厌氧。）严格专性厌氧。（2 2）血琼脂、牛心脑浸液）血琼脂、牛心脑浸液琼脂及果糖琼脂（琼脂及果糖琼脂（CCFACCFA）平板）平板 菌落直径菌落直径3 35
19、mm5mm，圆形、，圆形、淡黄色、无光泽、不透明，淡黄色、无光泽、不透明，中央呈脐状凹陷，表面粗糙中央呈脐状凹陷，表面粗糙（毛玻璃状），边缘呈粗丝状或（毛玻璃状），边缘呈粗丝状或齿状。在暗处，紫外线照射，齿状。在暗处，紫外线照射，发生金黄色荧光。血平板上不溶发生金黄色荧光。血平板上不溶血，紫外线照射出现黄绿色荧光。血，紫外线照射出现黄绿色荧光。（3 3）经肉汤培养）经肉汤培养2d2d以上，菌体以上，菌体有自溶现象。有自溶现象。艰难梭菌菌落特征（厌氧血平板）艰难梭菌菌落特征（CCFA平板）3生化反应生化反应（1）可发酵葡萄糖、甘露醇、果糖产酸。）可发酵葡萄糖、甘露醇、果糖产酸。（2）不分解乳糖、
20、麦芽糖与蔗糖。）不分解乳糖、麦芽糖与蔗糖。（3）不分解蛋白质。不产生吲哚和）不分解蛋白质。不产生吲哚和H2S，不凝固，不凝固牛乳。硝酸盐还原牛乳。硝酸盐还原-。（4）水解七叶苷、液化明胶。）水解七叶苷、液化明胶。（5）不产生卵磷脂酶及脂肪酶。）不产生卵磷脂酶及脂肪酶。（6）挥发性代谢产物主要有少量乙酸、异丁酸、）挥发性代谢产物主要有少量乙酸、异丁酸、异戊酸、戊酸、丁酸和异已酸。异戊酸、戊酸、丁酸和异已酸。（二）微生物学检查法（二）微生物学检查法 1标本的采集标本的采集 2检验方法检验方法（1）直接涂片）直接涂片Gram染色检查染色检查镜检。镜检。（2）分离培养在）分离培养在CCFA上菌落特征明
21、显，即在紫外上菌落特征明显，即在紫外线照射下能发出金黄色荧光线照射下能发出金黄色荧光可作为鉴定本菌可作为鉴定本菌的重要依据。的重要依据。（3）毒素测定）毒素测定细胞毒性试验细胞毒性试验家兔肠袢试验家兔肠袢试验 致死试验致死试验（三）致病性（三）致病性 艰难芽胞梭菌艰难芽胞梭菌为肠道正常菌群成员。当长期使为肠道正常菌群成员。当长期使用有抗药性的药物（如氯林可霉素）后，引起用有抗药性的药物（如氯林可霉素）后，引起菌群失调，耐药的艰难芽胞梭菌可大量繁殖而菌群失调，耐药的艰难芽胞梭菌可大量繁殖而致病。致病。1致病因素致病因素（1）A毒素毒素肠毒素。肠毒素。（2）B毒素毒素细胞毒素细胞毒素。2所致疾病所
22、致疾病（1）伪膜性肠炎。）伪膜性肠炎。（2）肾盂肾炎、脑膜炎、腹腔及阴道感染。）肾盂肾炎、脑膜炎、腹腔及阴道感染。（3）菌血症和气性坏疽等。）菌血症和气性坏疽等。艰难梭菌致伪膜性肠炎第二节第二节 无芽胞厌氧菌无芽胞厌氧菌致致 病病 性性微生物学检查法 厌氧性球菌厌氧性球菌与临床感染与临床感染有关的有关的G+消化球菌属消化链球菌属G-韦荣球菌属 （一）生物学性状（一）生物学性状1形态与染色：形态与染色：G+成双、成堆或短链排列。成双、成堆或短链排列。一、消化球菌属（一、消化球菌属（Peptococcus）目前只有一个种目前只有一个种黑色消化球菌（黑色消化球菌（Peptococcus niger）
23、2培养特点培养特点（1）厌氧、生长缓慢，）厌氧、生长缓慢，24d才见菌落。才见菌落。（2）生长特点。）生长特点。血平板血平板 黑色、不溶血的小菌落。接黑色、不溶血的小菌落。接触空气后色变浅，触空气后色变浅，传代后黑色消失。传代后黑色消失。含血清的硫乙醇酸盐培养基含血清的硫乙醇酸盐培养基/庖肉培养基：庖肉培养基：产黑色素。产黑色素。（三）抵抗力（三）抵抗力对青霉素、红霉素、氯霉素、洁霉素、对青霉素、红霉素、氯霉素、洁霉素、四环素及灭滴灵敏感。四环素及灭滴灵敏感。本菌通常寄居于人的体表及与外界相通的本菌通常寄居于人的体表及与外界相通的腔道中，是人体正常菌群的成员之一。在腔道中，是人体正常菌群的成员
24、之一。在临床上可引起人体各部组织和器官的感染。临床上可引起人体各部组织和器官的感染。而且经常与其他细菌混合感染。如腹腔感而且经常与其他细菌混合感染。如腹腔感染、肝脓肿、外阴、阴道及盆腔感染，肺染、肝脓肿、外阴、阴道及盆腔感染，肺部和胸膜感染、颅内感染以及皮肤和软组部和胸膜感染、颅内感染以及皮肤和软组织感染等。本菌也可从阑尾炎、膀胱炎、织感染等。本菌也可从阑尾炎、膀胱炎、腹膜炎以及产后败血症的血中分离出来。腹膜炎以及产后败血症的血中分离出来。（四）致病性（四）致病性二、消化链球菌属二、消化链球菌属（Peptostreptococcus）（一）分类（一）分类 包括：以下九个种。包括：以下九个种。厌
25、氧消化链球菌（厌氧消化链球菌（P.anarobius）不解糖消化链球菌（不解糖消化链球菌（P.asaccharolyticus）吲哚消化链球菌吲哚消化链球菌(P.indolicus)大消化链球菌大消化链球菌(P.magnus)微小消化链球菌微小消化链球菌(P.micros)普氏消化链球菌（普氏消化链球菌（P.prevotii）产生消化链球菌产生消化链球菌（P.productus）四联消化链球菌四联消化链球菌（P.tetradius）天芥菜春还原消化链球菌天芥菜春还原消化链球菌（二）生物学性状（二）生物学性状 1形态与染色：形态与染色：G+球形或卵圆形，大小不等，球形或卵圆形，大小不等，常成双或
26、短链排列，易变常成双或短链排列，易变G-。无鞭毛。无鞭毛。厌氧消化链球菌革兰染色 2培养特点培养特点（1）专性厌氧，最适生长温度）专性厌氧，最适生长温度3537 pH77.5。（2）营养要求较高：需羊血或血清培养基才能）营养要求较高：需羊血或血清培养基才能生长。生长。（3）血平板）血平板 灰白色、凸起、不透明、边灰白色、凸起、不透明、边缘整齐的小菌落，一般不溶血缘整齐的小菌落，一般不溶血.（4）硫乙醇酸盐液体培养基：呈颗粒状沉淀生）硫乙醇酸盐液体培养基：呈颗粒状沉淀生长。长。在含硫培养基（如硫乙醇酸钠培养基）生化在含硫培养基（如硫乙醇酸钠培养基）生化反应较明显。反应较明显。葡萄糖葡萄糖+，乳糖
27、，乳糖-，水解胆汁，水解胆汁-，七叶苷，七叶苷-，吲哚吲哚-，尿素酶，尿素酶-，还原硝酸盐，还原硝酸盐-。4抵抗力：对多聚茴香磺酸钠（抵抗力：对多聚茴香磺酸钠（SPS）特）特别敏感。别敏感。3生化反应：不活泼。生化反应：不活泼。对多聚茴香磺酸钠对多聚茴香磺酸钠（SPS）特别敏感。）特别敏感。4抵抗力抵抗力（三）致病性（三）致病性 在临床标本中，本属菌中的厌氧消化链球菌最在临床标本中，本属菌中的厌氧消化链球菌最为多见。为多见。消化链球菌可引起人体各部组织和器消化链球菌可引起人体各部组织和器官感染，同时又以混合感染为多见。官感染，同时又以混合感染为多见。如腹腔感如腹腔感染、肝脓肿，外阴、阴道及盆腔
28、感染、肺部感染、肝脓肿，外阴、阴道及盆腔感染、肺部感染和胸膜感染，口腔感染、颅内感染以及皮肤染和胸膜感染，口腔感染、颅内感染以及皮肤和软组织感染等。和软组织感染等。厌氧消化链球菌可与金黄色葡萄球菌或溶血性厌氧消化链球菌可与金黄色葡萄球菌或溶血性链球菌协同引起严重的创伤感染，即厌氧链球链球菌协同引起严重的创伤感染，即厌氧链球菌肌炎。菌肌炎。本菌引起的细菌性心内膜炎，其原发病灶为口本菌引起的细菌性心内膜炎，其原发病灶为口腔、牙周和尿道感染而引起。腔、牙周和尿道感染而引起。革兰阴性无芽胞厌氧杆菌革兰阴性无芽胞厌氧杆菌 类杆菌属（类杆菌属（Bacteroides）（一）分类（一）分类 根据根据Berg
29、ys鉴定细菌学手册鉴定细菌学手册（1994）第九）第九版记载，类杆菌属列为群版记载，类杆菌属列为群6，现有，现有18个种。以脆弱个种。以脆弱类杆菌最常见。其次为多形类杆菌、普通类杆菌类杆菌最常见。其次为多形类杆菌、普通类杆菌和吉氏类杆菌。代表菌和吉氏类杆菌。代表菌脆弱类杆菌（脆弱类杆菌（B.fragilis)。（二）生物学性状（二）生物学性状1形成与染色形成与染色（1）G-0.50.81.54.5m菌端钝圆，两极浓染中间有不着色部菌端钝圆，两极浓染中间有不着色部分。分。（2）固体培养基上形态典型；在含糖液体培养基或陈旧培养物有时）固体培养基上形态典型；在含糖液体培养基或陈旧培养物有时显多形性，
30、呈细长或丝状。显多形性，呈细长或丝状。（3）无鞭毛，无芽胞，多数有荚膜。）无鞭毛，无芽胞，多数有荚膜。脆弱类杆菌革兰染色 脆弱类杆菌脓汁标本涂片2培养特点培养特点（1）专性厌氧）专性厌氧（2）氯化血红素、维生素）氯化血红素、维生素K1和和20%胆汁，可促进其生长。胆汁，可促进其生长。（3）厌氧血平板灰白色、圆形、微凸起、表面光滑，边缘整齐，）厌氧血平板灰白色、圆形、微凸起、表面光滑，边缘整齐，半透明，多数菌株，不溶血的小菌落（直径半透明，多数菌株，不溶血的小菌落（直径13mm）。）。（4）胆汁七叶苷（）胆汁七叶苷（BBE）平板生长旺盛，菌落较大，能分解七）平板生长旺盛，菌落较大，能分解七叶苷，
31、使培养基呈黑色，菌落周围有黑晕。叶苷，使培养基呈黑色，菌落周围有黑晕。脆弱类杆菌菌落特征（厌氧血平板）脆弱类杆菌菌落特征（BBE平板）3生化反应：较弱生化反应：较弱4抵抗力：大部分菌株对青霉素抵抗力：大部分菌株对青霉素G、卡那霉素和新霉素耐药。但卡那霉素和新霉素耐药。但95%以上以上菌株对氯霉素、氨苄青霉素、氧哌嗪菌株对氯霉素、氨苄青霉素、氧哌嗪青霉素、羧塞吩青霉素、亚胺硫霉素、青霉素、羧塞吩青霉素、亚胺硫霉素、甲硝唑等敏感。甲硝唑等敏感。（三）致病性（三）致病性 类杆菌常寄居于人的口腔、肠道和女性类杆菌常寄居于人的口腔、肠道和女性生殖道。正常菌群成员，同时也是一种生殖道。正常菌群成员，同时也
32、是一种条件致病菌，主要引起内源性感染。近条件致病菌，主要引起内源性感染。近来研究证明某些脆弱类杆菌可产生肠毒来研究证明某些脆弱类杆菌可产生肠毒素，引起女性生殖系统、胸腔及颅内感素，引起女性生殖系统、胸腔及颅内感染。染。一、乳杆菌属（一、乳杆菌属（Lactobacillus）共有共有5151种。其代表菌为德氏乳杆菌（种。其代表菌为德氏乳杆菌（L.debrueckiiL.debrueckii）。）。（一）（一）生物学性状生物学性状1.1.形态与染色形态与染色（1 1）G G+细长杆菌。成双、细长杆菌。成双、单、短链或栅栏状。单、短链或栅栏状。有些菌株呈多形性，有些菌株呈多形性，有些菌株两极浓染。有
33、些菌株两极浓染。（2 2）无芽胞、无鞭毛，无荚膜。）无芽胞、无鞭毛，无荚膜。革兰阳性无芽胞厌氧菌革兰阳性无芽胞厌氧菌乳杆菌革兰染色 2.2.培养特点培养特点（1 1）专性厌氧、兼性厌氧或微需氧，最适温度）专性厌氧、兼性厌氧或微需氧，最适温度30304040。（2 2）嗜酸。最适）嗜酸。最适pH5.5pH5.56.2,pH3.56.2,pH3.5也能生长。也能生长。（3 3）5 51010COCO2 2环境能生长，但在厌氧环境中生长环境能生长，但在厌氧环境中生长更好。更好。（4 4）营养要求复杂，几乎每个种都有特异的营养要求。）营养要求复杂，几乎每个种都有特异的营养要求。（5 5）常用）常用MR
34、SMRS营养琼脂或葡萄糖血清琼脂。菌落特点：营养琼脂或葡萄糖血清琼脂。菌落特点：针尖大，针尖大，表面粗糙，边缘不整齐，一般不产生色素。表面粗糙，边缘不整齐，一般不产生色素。（三）致病性（三）致病性 1.1.益处益处（1 1）乳酸杆菌是人及动物消化道、阴道的正）乳酸杆菌是人及动物消化道、阴道的正常菌群成员，对致病菌的繁殖有抑制作用。也常菌群成员，对致病菌的繁殖有抑制作用。也广泛存在于乳酪、酸奶等发酵性制品中。广泛存在于乳酪、酸奶等发酵性制品中。（2 2）在肠道中，因分解糖类产酸，而增加肠）在肠道中，因分解糖类产酸，而增加肠道酸度，从而抑制肠道病原菌的繁殖，防止蛋道酸度，从而抑制肠道病原菌的繁殖，
35、防止蛋白质分解，可用于治疗消化不良与婴儿腹泻等。白质分解，可用于治疗消化不良与婴儿腹泻等。（3 3）用于生物检定：如乳酪乳杆菌用于）用于生物检定：如乳酪乳杆菌用于VBVB1212检检定。定。（4 4）制造发酵饲料。）制造发酵饲料。2.2.乳酸杆菌与龋齿的关系乳酸杆菌与龋齿的关系 口腔中的变异链球菌口腔中的变异链球菌（S.mutansS.mutans）、血、血链球菌链球菌（S.sanguisS.sanguis）和消化链球菌和消化链球菌（P.anarobiusP.anarobius）等，能使蔗糖变成胶状等，能使蔗糖变成胶状葡聚糖，附着于齿面、形成齿斑。乳酸葡聚糖，附着于齿面、形成齿斑。乳酸杆菌则在
36、齿斑上进一步发酵蔗糖或其他杆菌则在齿斑上进一步发酵蔗糖或其他食品中的糖类产生乳酸。溶解齿质及法食品中的糖类产生乳酸。溶解齿质及法朗质中的磷酸钙，使之脱钙，使其他细朗质中的磷酸钙，使之脱钙，使其他细菌经牙质小管侵入牙髓，造成牙根端脓菌经牙质小管侵入牙髓，造成牙根端脓肿等。最后形成龋齿肿等。最后形成龋齿 致致 病病 性性微生物学检查法 思考题思考题 名词解释名词解释：厌氧菌、汹涌发酵现象、Nagler反应 简答题：简答题：1.简述破伤风芽胞梭菌的致病条件及致病机制。2.简述产气荚膜芽胞梭菌的致病物质及所致疾病。3.简述肉毒毒素的致病机制及所致食物中毒的特点 4.简述无芽胞厌氧菌的致病条件和致病特点。5.简述破伤风痉挛毒素与肉毒毒素的主要区别。6.简述厌氧芽胞杆菌和无芽胞厌氧杆菌的主要区别。
