高二生物同步课件:2-1-微生物的实验室培养(人教版选修I-61).ppt

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1、热点考向示例热点考向示例随堂达标检测随堂达标检测课堂互动探究课堂互动探究教科书问题解答教科书问题解答活页规范训练活页规范训练 热点考向示例热点考向示例随堂达标检测随堂达标检测课堂互动探究课堂互动探究教科书问题解答教科书问题解答活页规范训练活页规范训练 课题课题1微生物的实验室培养微生物的实验室培养热点考向示例热点考向示例随堂达标检测随堂达标检测课堂互动探究课堂互动探究教科书问题解答教科书问题解答活页规范训练活页规范训练 热点考向示例热点考向示例随堂达标检测随堂达标检测课堂互动探究课堂互动探究教科书问题解答教科书问题解答活页规范训练活页规范训练 课程标准课程标准进进行微生物的分离和培养。行微生物

2、的分离和培养。课标解读课标解读1.知知道培养基的基础知识,进行无菌技术的操作。道培养基的基础知识,进行无菌技术的操作。2.进行微生物培养。进行微生物培养。热点考向示例热点考向示例随堂达标检测随堂达标检测课堂互动探究课堂互动探究教科书问题解答教科书问题解答活页规范训练活页规范训练 1培养基培养基(1)培培养基概念养基概念按照微生物对按照微生物对 的不同需求,配制出供其的不同需求,配制出供其 的营的营养基质。养基质。培养基的成分及无菌操作技术培养基的成分及无菌操作技术 营养物质营养物质生长繁殖生长繁殖热点考向示例热点考向示例随堂达标检测随堂达标检测课堂互动探究课堂互动探究教科书问题解答教科书问题解

3、答活页规范训练活页规范训练(2)培养基种类培养基种类包括包括 培养基和培养基和 培养基等。培养基等。(3)培养基的化学成分培养基的化学成分一般都含有一般都含有 、和和 四类营养成分。还需四类营养成分。还需要满足微生物生长对要满足微生物生长对 、及及 等的要求。等的要求。固体固体液体液体水水碳源碳源氮源氮源无机盐无机盐pH特殊营养物质特殊营养物质氧气氧气热点考向示例热点考向示例随堂达标检测随堂达标检测课堂互动探究课堂互动探究教科书问题解答教科书问题解答活页规范训练活页规范训练 2无菌技术无菌技术(1)无无菌技术围绕着如何避免杂菌的污染展开,主要包括以下四菌技术围绕着如何避免杂菌的污染展开,主要包

4、括以下四个方面个方面对实验操作的对实验操作的 、操作者的、操作者的 ,进行清洁和,进行清洁和 ;将用于微生物培养的器皿、将用于微生物培养的器皿、和和 等进行等进行;为避免周围环境中微生物的污染,实验操作应在为避免周围环境中微生物的污染,实验操作应在 附近进行;附近进行;实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与 相相接触。接触。空间空间衣着和手衣着和手消毒消毒接种用具接种用具培养基培养基灭菌灭菌酒精灯火焰酒精灯火焰周围的物品周围的物品热点考向示例热点考向示例随堂达标检测随堂达标检测课堂互动探究课堂互动探究教科书问题解答教科书问题解答活页规范训练活页规范训练

5、(2)消毒和灭菌消毒和灭菌消毒:消毒是指使用消毒:消毒是指使用 方法仅杀死物体表方法仅杀死物体表面或内部一部分面或内部一部分 的微生物,的微生物,(包括;不包包括;不包括括)芽孢和孢子,常用的方法有芽孢和孢子,常用的方法有 消毒法、消毒法、消毒法、消毒法、消毒法。消毒法。灭菌:灭菌是指使用灭菌:灭菌是指使用 杀死物体内外杀死物体内外 ,(包括,不包括包括,不包括)芽孢和孢子,常用的方法芽孢和孢子,常用的方法有有 灭菌、灭菌、灭菌和灭菌和 灭菌。灭菌。较为温和的物理或化学较为温和的物理或化学对人体有害对人体有害不包括不包括煮沸煮沸巴氏巴氏化学药剂化学药剂强烈的理化因素强烈的理化因素所有的所有的微

6、生物微生物包括包括灼烧灼烧高压蒸汽高压蒸汽干热干热热点考向示例热点考向示例随堂达标检测随堂达标检测课堂互动探究课堂互动探究教科书问题解答教科书问题解答活页规范训练活页规范训练 思维激活思维激活1 用用酒精擦拭实验者手臂属消毒还是灭菌?酒精擦拭实验者手臂属消毒还是灭菌?70%与与95%的酒精,哪一种效果更好?为什么?的酒精,哪一种效果更好?为什么?提示提示酒精擦拭属化学消毒,酒精消毒时,酒精擦拭属化学消毒,酒精消毒时,70%的酒精杀菌效果的酒精杀菌效果最好。原因是:浓度过高,使菌体表面蛋白质凝固成一层保护膜,最好。原因是:浓度过高,使菌体表面蛋白质凝固成一层保护膜,乙醇分子不能渗入其中;浓度过低

7、,杀菌力减弱。乙醇分子不能渗入其中;浓度过低,杀菌力减弱。热点考向示例热点考向示例随堂达标检测随堂达标检测课堂互动探究课堂互动探究教科书问题解答教科书问题解答活页规范训练活页规范训练 1碳源、氮源及生长因子的来源与功能归纳碳源、氮源及生长因子的来源与功能归纳营养要素营养要素来源来源功能功能碳源碳源无机碳源无机碳源CO2、NaHCO3、CaCO3等含碳无机物等含碳无机物构成细胞物质和一构成细胞物质和一些代谢产物;些代谢产物;有机碳既是碳源又有机碳既是碳源又是能源是能源有机碳源有机碳源糖类、脂质、蛋白质、糖类、脂质、蛋白质、有机酸、石油、花生粉有机酸、石油、花生粉饼等饼等热点考向示例热点考向示例随

8、堂达标检测随堂达标检测课堂互动探究课堂互动探究教科书问题解答教科书问题解答活页规范训练活页规范训练 氮源氮源无机氮源无机氮源无机氮:无机氮:NH3、铵盐、铵盐、硝酸盐、硝酸盐、N2等等将无机氮合成含氨的将无机氮合成含氨的代谢产物代谢产物有机氮源有机氮源牛肉膏、蛋白胨、牛肉膏、蛋白胨、核酸、尿素、氨基酸核酸、尿素、氨基酸合成蛋白质、核酸及合成蛋白质、核酸及含氮的代谢产物含氮的代谢产物生长因子生长因子维生素、氨基酸、碱基维生素、氨基酸、碱基酶和核酸的组成成酶和核酸的组成成分;分;参与代谢过程参与代谢过程中的酶促反应中的酶促反应热点考向示例热点考向示例随堂达标检测随堂达标检测课堂互动探究课堂互动探究

9、教科书问题解答教科书问题解答活页规范训练活页规范训练 2.培养基类型划分培养基类型划分划分划分标准标准培养基种类培养基种类特点特点用途用途物理物理性质性质液体培养基液体培养基不加凝固剂不加凝固剂工业生产工业生产半固体培养基半固体培养基加凝固剂,如加凝固剂,如琼脂琼脂观察微生物的运动、分观察微生物的运动、分类鉴定类鉴定固体培养基固体培养基微生物分离、鉴定、活微生物分离、鉴定、活菌计数、保藏菌种菌计数、保藏菌种化学化学成分成分天然培养基天然培养基含化学成分不明含化学成分不明确的天然物质确的天然物质工业生产工业生产合成培养基合成培养基培养基成分明确培养基成分明确(用化学成分已知用化学成分已知的化学物

10、质配成的化学物质配成)分类、鉴定分类、鉴定热点考向示例热点考向示例随堂达标检测随堂达标检测课堂互动探究课堂互动探究教科书问题解答教科书问题解答活页规范训练活页规范训练 用用途途选择培选择培养基养基培养基中加入某种化培养基中加入某种化学物质,以抑制不需学物质,以抑制不需要的微生物的生长,要的微生物的生长,促进所需要的微生物促进所需要的微生物的生长的生长培养、分离出特定微生物培养、分离出特定微生物(如如培养酵母菌和霉菌,可在培培养酵母菌和霉菌,可在培养基中加入青霉素;培养金养基中加入青霉素;培养金黄色葡萄球菌,可在培养基黄色葡萄球菌,可在培养基中加入高浓度食盐中加入高浓度食盐)鉴别培鉴别培养基养基

11、根据微生物的代谢特根据微生物的代谢特点,在培养基中加入点,在培养基中加入某种指示剂或化学药某种指示剂或化学药品品鉴别不同种类的微生物,如鉴别不同种类的微生物,如可用伊红美蓝培养基鉴别可用伊红美蓝培养基鉴别饮用水或乳制品中是否有大饮用水或乳制品中是否有大肠杆菌肠杆菌(若有,菌落呈现黑若有,菌落呈现黑色,并带有金属光泽色,并带有金属光泽)热点考向示例热点考向示例随堂达标检测随堂达标检测课堂互动探究课堂互动探究教科书问题解答教科书问题解答活页规范训练活页规范训练 3.无菌技术无菌技术(1)消消毒和灭菌的区别毒和灭菌的区别条件条件结果结果常用的方法常用的方法消毒消毒较为温和较为温和的物理或的物理或化学

12、方法化学方法仅杀死物体表面或内仅杀死物体表面或内部一部分对人体有害部一部分对人体有害的微生物的微生物(不包括芽孢不包括芽孢和孢子和孢子)煮沸消毒法、巴氏煮沸消毒法、巴氏消毒法、紫外线或消毒法、紫外线或化学药物消毒法化学药物消毒法灭菌灭菌强烈的理强烈的理化因素化因素杀死物体内外所有的杀死物体内外所有的微生物,包括芽孢和微生物,包括芽孢和孢子孢子灼烧灭菌、干热灭灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌菌、高压蒸汽灭菌热点考向示例热点考向示例随堂达标检测随堂达标检测课堂互动探究课堂互动探究教科书问题解答教科书问题解答活页规范训练活页规范训练(2)无菌技术主要操作要求无菌技术主要操作要求实验前应对操作空间、操

13、作人员消毒,对所用器具和培养基灭实验前应对操作空间、操作人员消毒,对所用器具和培养基灭菌。菌。实验进行时需在酒精灯火焰周围无菌区操作,另外要避免已灭实验进行时需在酒精灯火焰周围无菌区操作,另外要避免已灭菌处理材料再次污染。菌处理材料再次污染。热点考向示例热点考向示例随堂达标检测随堂达标检测课堂互动探究课堂互动探究教科书问题解答教科书问题解答活页规范训练活页规范训练 特别提示特别提示(1)微生物最常用的碳源是糖类,尤其是葡萄糖;最常微生物最常用的碳源是糖类,尤其是葡萄糖;最常利用的氮源是铵盐、硝酸盐。利用的氮源是铵盐、硝酸盐。(2)对异养微生物来说,含对异养微生物来说,含C、H、O、N的有机物既

14、是碳源,又是的有机物既是碳源,又是氮源、能源。氮源、能源。(3)大凡对生长因子不能合成或合成能力有限的微生物,其培养基大凡对生长因子不能合成或合成能力有限的微生物,其培养基中均需额外添加生长因子,而许多微生物能自行合成生长因子,中均需额外添加生长因子,而许多微生物能自行合成生长因子,其培养基中不需再添加。其培养基中不需再添加。热点考向示例热点考向示例随堂达标检测随堂达标检测课堂互动探究课堂互动探究教科书问题解答教科书问题解答活页规范训练活页规范训练【巩固巩固1】下下列培养基配方中能作为选择培养基、鉴别培养基的列培养基配方中能作为选择培养基、鉴别培养基的依次是依次是()。原料原料蛋白胨蛋白胨/g

15、10101010乳糖乳糖/g5555蔗糖蔗糖/g5555KH2PO4/g2222伊红伊红/g0.4美蓝美蓝/g0.065琼脂琼脂/g1020NaCl/g20蒸馏水蒸馏水/mL 1 000 1 000 1 000 1 000热点考向示例热点考向示例随堂达标检测随堂达标检测课堂互动探究课堂互动探究教科书问题解答教科书问题解答活页规范训练活页规范训练 A.B C D解析解析高浓度的食盐可以抑制多种细菌的生长,但不影响金黄色高浓度的食盐可以抑制多种细菌的生长,但不影响金黄色葡萄球菌的生长,从而可以将金黄色葡萄球菌分离出来,有高浓葡萄球菌的生长,从而可以将金黄色葡萄球菌分离出来,有高浓度食盐的培养基为选

16、择培养基。在培养基中加入伊红和美蓝,可度食盐的培养基为选择培养基。在培养基中加入伊红和美蓝,可以用来鉴别饮用水和乳制品中是否存在大肠杆菌,有伊红和美蓝以用来鉴别饮用水和乳制品中是否存在大肠杆菌,有伊红和美蓝的培养基为鉴别培养基。的培养基为鉴别培养基。答案答案D热点考向示例热点考向示例随堂达标检测随堂达标检测课堂互动探究课堂互动探究教科书问题解答教科书问题解答活页规范训练活页规范训练 1制备牛肉膏蛋白胨固体培养基制备牛肉膏蛋白胨固体培养基(1)制制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的步骤:备牛肉膏蛋白胨固体培养基的步骤:称量称量 倒平板。倒平板。(2)倒平板的过程:倒平板的过程:在火焰旁右手拿锥形瓶,左手

17、在火焰旁右手拿锥形瓶,左手 。右手拿锥形瓶,使锥形瓶的瓶口迅速通过右手拿锥形瓶,使锥形瓶的瓶口迅速通过 。左手将培养皿打开一条缝隙,右手将培养基倒入培养皿,左左手将培养皿打开一条缝隙,右手将培养基倒入培养皿,左手立刻手立刻 。待平板冷却凝固后,将平板待平板冷却凝固后,将平板 放置,使皿盖在下、皿放置,使皿盖在下、皿底在上。底在上。培养基的制备与大肠杆菌的纯化技术培养基的制备与大肠杆菌的纯化技术 计算计算溶化溶化灭菌灭菌拔出棉塞拔出棉塞火焰火焰盖上皿盖盖上皿盖倒过来倒过来热点考向示例热点考向示例随堂达标检测随堂达标检测课堂互动探究课堂互动探究教科书问题解答教科书问题解答活页规范训练活页规范训练

18、2纯化大肠杆菌纯化大肠杆菌(1)微微生物接种的最常用方法是生物接种的最常用方法是 和和 。(2)平板划线法:通过平板划线法:通过 在琼脂固体培养基表面在琼脂固体培养基表面 的操作,将聚集的菌种的操作,将聚集的菌种 。(3)稀释涂布平板法:将菌液进行一系列的稀释涂布平板法:将菌液进行一系列的 ,然后将不,然后将不同稀释度的菌液分别同稀释度的菌液分别 ,进行培,进行培养。当稀释倍数足够高时,即可获得养。当稀释倍数足够高时,即可获得 。平板划线法平板划线法稀释涂布平板法稀释涂布平板法接种环接种环连续连续划线划线逐步稀释分散到培养基的表面逐步稀释分散到培养基的表面梯度稀释梯度稀释涂布到琼脂固体培养基的

19、表面涂布到琼脂固体培养基的表面单个细菌形成的菌落单个细菌形成的菌落热点考向示例热点考向示例随堂达标检测随堂达标检测课堂互动探究课堂互动探究教科书问题解答教科书问题解答活页规范训练活页规范训练 3菌种的保存菌种的保存为为了保持菌种的纯净,需对菌种进行保藏。对于频繁使用的菌了保持菌种的纯净,需对菌种进行保藏。对于频繁使用的菌种,我们可以采用种,我们可以采用 法;对于需要长期保存的菌种,法;对于需要长期保存的菌种,可以采用可以采用 法。法。临时保藏临时保藏甘油管藏甘油管藏热点考向示例热点考向示例随堂达标检测随堂达标检测课堂互动探究课堂互动探究教科书问题解答教科书问题解答活页规范训练活页规范训练 思维

20、激活思维激活2 除除平板划线法与稀释涂布平板法外,还有哪些接种方平板划线法与稀释涂布平板法外,还有哪些接种方法?微生物接种技术中最核心的内容是什么?法?微生物接种技术中最核心的内容是什么?提示提示微生物接种方法还有斜面接种及穿刺接种等方法,所有微微生物接种方法还有斜面接种及穿刺接种等方法,所有微生物接种方法中最核心的内容是生物接种方法中最核心的内容是“防止杂菌污染,保证培养物的防止杂菌污染,保证培养物的纯度纯度”。热点考向示例热点考向示例随堂达标检测随堂达标检测课堂互动探究课堂互动探究教科书问题解答教科书问题解答活页规范训练活页规范训练 1制备牛肉膏蛋白胨固体培养基制备牛肉膏蛋白胨固体培养基计

21、计算:依据牛肉膏蛋白胨培养基配方比例,计算配制算:依据牛肉膏蛋白胨培养基配方比例,计算配制100 mL的培养基时,各种成分的用量的培养基时,各种成分的用量 称量:牛肉膏比较黏稠,可用称量纸称取,牛肉膏和蛋白胨都称量:牛肉膏比较黏稠,可用称量纸称取,牛肉膏和蛋白胨都易吸潮,称取时动作要迅速,称后要及时盖上瓶盖易吸潮,称取时动作要迅速,称后要及时盖上瓶盖热点考向示例热点考向示例随堂达标检测随堂达标检测课堂互动探究课堂互动探究教科书问题解答教科书问题解答活页规范训练活页规范训练 热点考向示例热点考向示例随堂达标检测随堂达标检测课堂互动探究课堂互动探究教科书问题解答教科书问题解答活页规范训练活页规范训

22、练 2微生物分离与纯化技术微生物分离与纯化技术(1)原理原理微微生物的分离与纯化就是将待检测微生物样品通过划线或涂布生物的分离与纯化就是将待检测微生物样品通过划线或涂布接种在固体培养基上,样品中的每一个细胞或孢子都可以生长接种在固体培养基上,样品中的每一个细胞或孢子都可以生长繁殖形成单个菌落。将单个菌落接种到斜面培养基上,经培养繁殖形成单个菌落。将单个菌落接种到斜面培养基上,经培养后,即可得到一个微生物的纯种。后,即可得到一个微生物的纯种。热点考向示例热点考向示例随堂达标检测随堂达标检测课堂互动探究课堂互动探究教科书问题解答教科书问题解答活页规范训练活页规范训练(2)方法步骤方法步骤微生物的分

23、离包括样品稀释、划线或涂布及培养三个步骤微生物的分离包括样品稀释、划线或涂布及培养三个步骤梯度稀释操作梯度稀释操作(如图如图1)图图1微生物分离操作流程图微生物分离操作流程图热点考向示例热点考向示例随堂达标检测随堂达标检测课堂互动探究课堂互动探究教科书问题解答教科书问题解答活页规范训练活页规范训练 a将分别盛有将分别盛有9 mL水的水的6支试管灭菌,并按支试管灭菌,并按101106的顺序编号。的顺序编号。b用移液管吸取用移液管吸取1 mL已培养的菌悬液,注入第二支试管中。用已培养的菌悬液,注入第二支试管中。用手指轻压移液管上的橡皮头,吹吸三次,使菌悬液与水充分混匀。手指轻压移液管上的橡皮头,吹

24、吸三次,使菌悬液与水充分混匀。c从从101倍稀释的试管中吸取倍稀释的试管中吸取1 mL稀释液,注入稀释液,注入102倍稀释的试管倍稀释的试管中,重复第中,重复第2步的操作。以此类推,直到完成最后一支试管的稀释。步的操作。以此类推,直到完成最后一支试管的稀释。注意:移液管需要经过灭菌。操作时,试管口和移液管应在离火注意:移液管需要经过灭菌。操作时,试管口和移液管应在离火焰焰12 cm处。处。热点考向示例热点考向示例随堂达标检测随堂达标检测课堂互动探究课堂互动探究教科书问题解答教科书问题解答活页规范训练活页规范训练 划线或涂布划线或涂布平板划线分离法:在近火焰处,左手拿皿底,右手拿接种环,挑平板划

25、线分离法:在近火焰处,左手拿皿底,右手拿接种环,挑取大肠杆菌培养液在平板上划线,常用的划线方法有平行划线和取大肠杆菌培养液在平板上划线,常用的划线方法有平行划线和连续划线两种。平行划线时,每转一个角度烧一次接种环。划线连续划线两种。平行划线时,每转一个角度烧一次接种环。划线完毕后,盖上培养皿盖,做好标记。完毕后,盖上培养皿盖,做好标记。图图2划线示意图划线示意图热点考向示例热点考向示例随堂达标检测随堂达标检测课堂互动探究课堂互动探究教科书问题解答教科书问题解答活页规范训练活页规范训练 涂布分离法:取涂布分离法:取3个平板,底面分别用记号笔写上个平板,底面分别用记号笔写上104、105和和106

26、三种稀释度,然后用无菌吸管分别吸取相应稀释度的稀释液各三种稀释度,然后用无菌吸管分别吸取相应稀释度的稀释液各0.1 mL,放入已标记好的平板上,用无菌玻璃涂棒在培养基表面,放入已标记好的平板上,用无菌玻璃涂棒在培养基表面轻轻地涂布均匀,室温下静置轻轻地涂布均匀,室温下静置510 min,使菌悬液吸附进培养基,使菌悬液吸附进培养基(图图3)。培养培养将划线或涂布接种的平板倒置于培养箱或温室中将划线或涂布接种的平板倒置于培养箱或温室中37 培养培养1624 h,即可长出单菌落,即可长出单菌落(图图4)热点考向示例热点考向示例随堂达标检测随堂达标检测课堂互动探究课堂互动探究教科书问题解答教科书问题解

27、答活页规范训练活页规范训练 图图3涂布法示意图图涂布法示意图图4斜面接种法斜面接种法热点考向示例热点考向示例随堂达标检测随堂达标检测课堂互动探究课堂互动探究教科书问题解答教科书问题解答活页规范训练活页规范训练(3)结果分析结果分析确认培养基制备是否合格确认培养基制备是否合格为确认培养基制备是否合格,需设置对照实验,即接种后的培养为确认培养基制备是否合格,需设置对照实验,即接种后的培养基和一个未接种的培养基都放入基和一个未接种的培养基都放入37 恒温箱中,培养恒温箱中,培养12 h和和24 h,观察现象并记录观察现象并记录如果未接种的培养基在恒温箱中保温如果未接种的培养基在恒温箱中保温12 d后

28、后无菌落生长,说明培养基的制备是成功的,否则实验失败需要重无菌落生长,说明培养基的制备是成功的,否则实验失败需要重新制备。新制备。热点考向示例热点考向示例随堂达标检测随堂达标检测课堂互动探究课堂互动探究教科书问题解答教科书问题解答活页规范训练活页规范训练 接种操作成功的标准接种操作成功的标准如果培养基上生长的菌落的颜色、形状、大小基本一致,并符合如果培养基上生长的菌落的颜色、形状、大小基本一致,并符合该菌菌落的特点,则说明接种操作是符合要求的;如果培养基上该菌菌落的特点,则说明接种操作是符合要求的;如果培养基上出现了其他菌落,则说明接种过程中无菌操作还未达到要求,实出现了其他菌落,则说明接种过

29、程中无菌操作还未达到要求,实验失败,需要分析原因,再次制备。验失败,需要分析原因,再次制备。热点考向示例热点考向示例随堂达标检测随堂达标检测课堂互动探究课堂互动探究教科书问题解答教科书问题解答活页规范训练活页规范训练 特别提醒特别提醒(1)进行划线时最后一区和第一区不可接触。进行划线时最后一区和第一区不可接触。(2)平板划线各次灼烧接种环的目的。平板划线各次灼烧接种环的目的。平板划线操作第一次划线及每次划线之前都需灼烧灭菌,划线操平板划线操作第一次划线及每次划线之前都需灼烧灭菌,划线操作结束仍需灼烧接种环,每次灼烧目的不同。作结束仍需灼烧接种环,每次灼烧目的不同。(3)灼烧接种环之后,要冷却后

30、才能伸入菌液,以免温度太高杀死灼烧接种环之后,要冷却后才能伸入菌液,以免温度太高杀死菌种。菌种。第一次灼烧第一次灼烧每次划线之前灼烧每次划线之前灼烧划线结束划线结束目的目的避免接种环避免接种环上可能存在上可能存在的微生物污的微生物污染培养物染培养物灼烧杀死上次划线结束灼烧杀死上次划线结束后接种环上残留的菌后接种环上残留的菌种,使每种,使每 次划线的菌种次划线的菌种来自上次划线末端来自上次划线末端划线结束后杀死接划线结束后杀死接种环上残留的菌种种环上残留的菌种,避免细菌污染环,避免细菌污染环境和感染操作者境和感染操作者热点考向示例热点考向示例随堂达标检测随堂达标检测课堂互动探究课堂互动探究教科书

31、问题解答教科书问题解答活页规范训练活页规范训练【巩固巩固2】下下列有关平板划线操作的叙述不正确的是列有关平板划线操作的叙述不正确的是()。A第一步灼烧接种环是为了避免接种环上可能存在的微生第一步灼烧接种环是为了避免接种环上可能存在的微生物污染培养物物污染培养物B每次划线前,灼烧接种环是为了杀死上次划线结束后,每次划线前,灼烧接种环是为了杀死上次划线结束后,接种环上残留的菌种接种环上残留的菌种C在第二区域内划线时,接种环上的菌种直接来源于菌液在第二区域内划线时,接种环上的菌种直接来源于菌液D划线结束后,灼烧接种环,能及时杀死接种环上残留的划线结束后,灼烧接种环,能及时杀死接种环上残留的菌种,避免

32、细菌污染环境和感染操作者菌种,避免细菌污染环境和感染操作者热点考向示例热点考向示例随堂达标检测随堂达标检测课堂互动探究课堂互动探究教科书问题解答教科书问题解答活页规范训练活页规范训练 解析解析平板划线操作中,接种环取菌种前灼烧的目的是避免接种平板划线操作中,接种环取菌种前灼烧的目的是避免接种环上可能存在的微生物污染培养物,以后每次划线前灼烧接种环环上可能存在的微生物污染培养物,以后每次划线前灼烧接种环是为了杀死上次划线后残留的菌种。划线结束仍需灼烧接种环,是为了杀死上次划线后残留的菌种。划线结束仍需灼烧接种环,是为了能及时杀死接种环上残留的菌种,避免细菌污染环境和感是为了能及时杀死接种环上残留

33、的菌种,避免细菌污染环境和感染操作者。从第二次划线开始,每次划线时接种环上的菌种直接染操作者。从第二次划线开始,每次划线时接种环上的菌种直接来源于上次划线的末端。来源于上次划线的末端。答案答案C热点考向示例热点考向示例随堂达标检测随堂达标检测课堂互动探究课堂互动探究教科书问题解答教科书问题解答活页规范训练活页规范训练【例例1】氯氯苯化合物是重要的有机化工原料,因其不易降解,会污苯化合物是重要的有机化工原料,因其不易降解,会污染环境。某研究小组依照下列实验方案染环境。某研究小组依照下列实验方案(图图1)筛选出能高效降解筛选出能高效降解氯苯的微生物氯苯的微生物SP1菌。培养基配方如表菌。培养基配方

34、如表1。微生物的营养与培养基类型微生物的营养与培养基类型 图图1热点考向示例热点考向示例随堂达标检测随堂达标检测课堂互动探究课堂互动探究教科书问题解答教科书问题解答活页规范训练活页规范训练 表表1培养基的组成培养基的组成热点考向示例热点考向示例随堂达标检测随堂达标检测课堂互动探究课堂互动探究教科书问题解答教科书问题解答活页规范训练活页规范训练(1)配制配制号固体培养基时,除添加号固体培养基时,除添加号液体培养基成分外,还应号液体培养基成分外,还应添加添加1%的的_。(2)培养基配制时,灭菌与调培养基配制时,灭菌与调pH的先后顺序是的先后顺序是_。(3)从用途上来说,从用途上来说,号培养基和号培

35、养基和号培养基分别属于号培养基分别属于_培养培养基和基和_培养基。在培养基。在号培养基中,为号培养基中,为SP1菌提供氮源的成分是菌提供氮源的成分是_。(4)在营养缺乏或环境恶劣时,在营养缺乏或环境恶劣时,SP1的菌体变成一个圆形的休眠体,的菌体变成一个圆形的休眠体,这种休眠体被称为这种休眠体被称为_。热点考向示例热点考向示例随堂达标检测随堂达标检测课堂互动探究课堂互动探究教科书问题解答教科书问题解答活页规范训练活页规范训练(5)将将SP1菌接种在含不同浓度氯苯的菌接种在含不同浓度氯苯的号培养液中培养,得到生号培养液中培养,得到生长曲线长曲线(如图如图2)。从图。从图2可知,可知,SP1菌在菌

36、在_培养条件下最早停止培养条件下最早停止生长,其原因是生长,其原因是_。图图2热点考向示例热点考向示例随堂达标检测随堂达标检测课堂互动探究课堂互动探究教科书问题解答教科书问题解答活页规范训练活页规范训练 思维导图:思维导图:热点考向示例热点考向示例随堂达标检测随堂达标检测课堂互动探究课堂互动探究教科书问题解答教科书问题解答活页规范训练活页规范训练 深度剖析深度剖析本题考查培养基的配制原则以及微生物的实验室培养本题考查培养基的配制原则以及微生物的实验室培养过程,意在考查考生的图表信息转换与分析能力。过程,意在考查考生的图表信息转换与分析能力。(1)固体培养基固体培养基中需加入琼脂作为凝固剂。中需

37、加入琼脂作为凝固剂。(2)先配制培养基后灭菌,调先配制培养基后灭菌,调pH属于培属于培养基的配制过程,故先调养基的配制过程,故先调pH后灭菌。后灭菌。(3)从用途上看,从用途上看,号培养基号培养基为通用培养基为通用培养基(基本培养基基本培养基);号培养基是选择培养基,以氯苯为号培养基是选择培养基,以氯苯为唯一的碳源,其中为唯一的碳源,其中为SP1菌提供氮源的成分是硝酸铵。菌提供氮源的成分是硝酸铵。(4)芽孢是芽孢是在细胞质内高度浓缩脱水形成的抗逆性很强的球形或椭圆形的休在细胞质内高度浓缩脱水形成的抗逆性很强的球形或椭圆形的休眠体。眠体。(5)由图示可知由图示可知SP1菌在菌在20 mg/L氯苯

38、培养条件下最早停止生氯苯培养条件下最早停止生长,长,20 mg/L氯苯可提供的碳源较少,碳源最早耗尽,影响菌体的氯苯可提供的碳源较少,碳源最早耗尽,影响菌体的生长繁殖。生长繁殖。热点考向示例热点考向示例随堂达标检测随堂达标检测课堂互动探究课堂互动探究教科书问题解答教科书问题解答活页规范训练活页规范训练 答案答案(1)琼琼脂脂(2)先调先调pH,后灭菌,后灭菌(3)通用选择硝酸铵通用选择硝酸铵(4)芽孢芽孢(5)20 mg/L氯苯碳源最早耗尽氯苯碳源最早耗尽误区警示误区警示(1)琼脂是最常用的凝固剂,但固体培养基未必均加琼琼脂是最常用的凝固剂,但固体培养基未必均加琼脂,如棉子壳培养基也属固体培养

39、基。脂,如棉子壳培养基也属固体培养基。(2)牛肉膏、蛋白胨等天然物质既可提供碳源,也可提供氮源及生牛肉膏、蛋白胨等天然物质既可提供碳源,也可提供氮源及生长因子。长因子。热点考向示例热点考向示例随堂达标检测随堂达标检测课堂互动探究课堂互动探究教科书问题解答教科书问题解答活页规范训练活页规范训练【例例2】培养培养基、培养皿、接种环、实验操作者的双手、空气、基、培养皿、接种环、实验操作者的双手、空气、牛奶所采用的灭菌、消毒方法依次是牛奶所采用的灭菌、消毒方法依次是()。化学消毒化学消毒灼烧灭菌灼烧灭菌干热灭菌干热灭菌紫外线灭菌紫外线灭菌高压蒸汽灭菌高压蒸汽灭菌巴氏消毒法巴氏消毒法A BC D无菌操作

40、技术无菌操作技术 思维导图:思维导图:热点考向示例热点考向示例随堂达标检测随堂达标检测课堂互动探究课堂互动探究教科书问题解答教科书问题解答活页规范训练活页规范训练 深度剖析深度剖析培养基用高压蒸汽灭菌;培养皿能耐高温,需用干热培养基用高压蒸汽灭菌;培养皿能耐高温,需用干热灭菌;接种环可用灼烧灭菌达到迅速彻底的灭菌效果;实验操作灭菌;接种环可用灼烧灭菌达到迅速彻底的灭菌效果;实验操作者的双手可用化学药剂进行消毒,如用酒精擦拭双手;空气可用者的双手可用化学药剂进行消毒,如用酒精擦拭双手;空气可用紫外线消毒;牛奶为不破坏其营养成分可采用巴氏消毒法。紫外线消毒;牛奶为不破坏其营养成分可采用巴氏消毒法。

41、答案答案A热点考向示例热点考向示例随堂达标检测随堂达标检测课堂互动探究课堂互动探究教科书问题解答教科书问题解答活页规范训练活页规范训练 思维深化思维深化几种常用灭菌方法比较几种常用灭菌方法比较(见下表见下表)方法方法灭菌操作灭菌操作适用对象适用对象灼烧灼烧灭菌灭菌在酒精灯火焰的充分燃烧在酒精灯火焰的充分燃烧层灼烧层灼烧对接种环、接种针或其他金属对接种环、接种针或其他金属工具灭菌,也可以对试管口、工具灭菌,也可以对试管口、瓶口灭菌瓶口灭菌干热干热灭菌灭菌在干热灭菌箱内,在干热灭菌箱内,160170 条件下,加热条件下,加热12 h耐高温且需保持干燥的物品,耐高温且需保持干燥的物品,如玻璃器皿和金

42、属用具等如玻璃器皿和金属用具等高压高压蒸汽蒸汽灭菌灭菌在高压蒸汽灭菌锅内,在高压蒸汽灭菌锅内,121,100 kPa,灭菌,灭菌1530 min培养基、发酵设备等培养基、发酵设备等紫外紫外线灭线灭菌菌30 W照射照射30 min小型接种室、接种箱等小型接种室、接种箱等热点考向示例热点考向示例随堂达标检测随堂达标检测课堂互动探究课堂互动探究教科书问题解答教科书问题解答活页规范训练活页规范训练【例例3】如如图是微生物平板划线示意图,划线的顺序为图是微生物平板划线示意图,划线的顺序为12345。下。下列操作方法正确的是列操作方法正确的是()。A操作前要将接种环放在火焰边灼烧灭菌操作前要将接种环放在火

43、焰边灼烧灭菌B划线操作须在火焰上进行划线操作须在火焰上进行C在在5区域中才可以得到所需菌落区域中才可以得到所需菌落D在在12345区域中划线前后都要对接种环灭菌区域中划线前后都要对接种环灭菌微生物纯化培养微生物纯化培养 热点考向示例热点考向示例随堂达标检测随堂达标检测课堂互动探究课堂互动探究教科书问题解答教科书问题解答活页规范训练活页规范训练 深度剖析深度剖析本题考查平板划线的操作方法。在每次划线前后都要本题考查平板划线的操作方法。在每次划线前后都要对接种环进行灭菌,接种环的灭菌方法应是在火焰上灼烧,接种对接种环进行灭菌,接种环的灭菌方法应是在火焰上灼烧,接种时划线操作是在火焰边进行。在时划线

44、操作是在火焰边进行。在5个区域中,只要有单个活细菌,个区域中,只要有单个活细菌,通过培养即可获得所需菌落。通过培养即可获得所需菌落。答案答案D热点考向示例热点考向示例随堂达标检测随堂达标检测课堂互动探究课堂互动探究教科书问题解答教科书问题解答活页规范训练活页规范训练 归纳提升归纳提升(1)倒平板时不要将培养基溅在皿盖与皿底之间,否则倒平板时不要将培养基溅在皿盖与皿底之间,否则此培养基不能用来培养微生物。此培养基不能用来培养微生物。(2)平板倒置原因:平板皿盖上会凝结水珠,培养基表面的温度也平板倒置原因:平板皿盖上会凝结水珠,培养基表面的温度也较高,平板倒置后,既可使培养基表面的水分更好地挥发,

45、又可较高,平板倒置后,既可使培养基表面的水分更好地挥发,又可防止皿盖上的水珠落入培养基,造成污染。防止皿盖上的水珠落入培养基,造成污染。(3)两种纯化方法的比较两种纯化方法的比较热点考向示例热点考向示例随堂达标检测随堂达标检测课堂互动探究课堂互动探究教科书问题解答教科书问题解答活页规范训练活页规范训练 项目项目优点优点缺点缺点适用范围适用范围平板划平板划线法线法可以观察菌落特征,可以观察菌落特征,对混合菌进行分离对混合菌进行分离不能计数不能计数适用于好氧菌适用于好氧菌稀释涂稀释涂布平板布平板法法可以计数,可以观察可以计数,可以观察菌落特征菌落特征吸收量较少,较吸收量较少,较麻烦,平板不干麻烦,

46、平板不干燥效果不好,容燥效果不好,容易蔓延易蔓延适用于厌氧菌适用于厌氧菌和兼性厌氧菌和兼性厌氧菌热点考向示例热点考向示例随堂达标检测随堂达标检测课堂互动探究课堂互动探究教科书问题解答教科书问题解答活页规范训练活页规范训练 单击此处进入单击此处进入 随堂达标检测随堂达标检测热点考向示例热点考向示例随堂达标检测随堂达标检测课堂互动探究课堂互动探究教科书问题解答教科书问题解答活页规范训练活页规范训练 旁栏思考题旁栏思考题1无无菌技术除了用来防止实验室的培养物被其他外来微生物菌技术除了用来防止实验室的培养物被其他外来微生物污染外,还有什么目的?污染外,还有什么目的?解析解析许多微生物对人类是有害的,因

47、此实验室中无菌技术许多微生物对人类是有害的,因此实验室中无菌技术还能有效避免操作者自身被微生物感染。还能有效避免操作者自身被微生物感染。答案答案无无菌技术还能有效避免操作者自身被微生物感染。菌技术还能有效避免操作者自身被微生物感染。热点考向示例热点考向示例随堂达标检测随堂达标检测课堂互动探究课堂互动探究教科书问题解答教科书问题解答活页规范训练活页规范训练 2请你判断以下材料或用具是否需要消毒或灭菌。如果需要,请你判断以下材料或用具是否需要消毒或灭菌。如果需要,请选择合适的方法。请选择合适的方法。(1)培养细菌用的培养基与培养皿。培养细菌用的培养基与培养皿。(2)玻璃试管、烧瓶和吸管。玻璃试管、

48、烧瓶和吸管。(3)实验操作者的双手。实验操作者的双手。解析解析消毒和灭菌是无菌技术的两项基本技术,实践中需要消毒和灭菌是无菌技术的两项基本技术,实践中需要根据无菌操作的对象合理地选择使用。原则是既要考虑使用的效根据无菌操作的对象合理地选择使用。原则是既要考虑使用的效果,又要考虑无菌操作对象的承受能力。果,又要考虑无菌操作对象的承受能力。答案答案(1)、(2)需需要灭菌;要灭菌;(3)需要消毒。需要消毒。热点考向示例热点考向示例随堂达标检测随堂达标检测课堂互动探究课堂互动探究教科书问题解答教科书问题解答活页规范训练活页规范训练 倒平板操作讨论题倒平板操作讨论题1培培养基灭菌后,需要冷却到养基灭菌

49、后,需要冷却到50 左右时,才能用来倒平左右时,才能用来倒平板。你用什么办法来估计培养基的温度?板。你用什么办法来估计培养基的温度?答案答案可以用手触摸盛有培养基的锥形瓶,感觉锥形瓶的温可以用手触摸盛有培养基的锥形瓶,感觉锥形瓶的温度下降到刚刚不烫手时,就可以进行倒平板了。度下降到刚刚不烫手时,就可以进行倒平板了。2为什么需要使锥形瓶的瓶口通过火焰?为什么需要使锥形瓶的瓶口通过火焰?答案答案通通过灼烧灭菌,防止瓶口的微生物污染培养基。过灼烧灭菌,防止瓶口的微生物污染培养基。热点考向示例热点考向示例随堂达标检测随堂达标检测课堂互动探究课堂互动探究教科书问题解答教科书问题解答活页规范训练活页规范训

50、练 3平板冷凝后,为什么要将平板倒置?平板冷凝后,为什么要将平板倒置?答案答案平平板冷凝后,皿盖上会凝结水珠,凝固后的培养基表板冷凝后,皿盖上会凝结水珠,凝固后的培养基表面的湿度也比较高,将平板倒置,既可以使培养基表面的水分更面的湿度也比较高,将平板倒置,既可以使培养基表面的水分更好地挥发,又可以防止皿盖上的水珠落入培养基,造成污染。好地挥发,又可以防止皿盖上的水珠落入培养基,造成污染。4在倒平板的过程中,如果不小心将培养基溅在皿盖与皿底在倒平板的过程中,如果不小心将培养基溅在皿盖与皿底之间的部位,这个平板还能用来培养微生物吗?为什么?之间的部位,这个平板还能用来培养微生物吗?为什么?答案答案

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