1、 组织学与胚胎学的研究内容 组织学发展简史 组织学研究方法 如何学习?内容提要内容提要一、组织学与胚胎学的定义和研究内容一、组织学与胚胎学的定义和研究内容组织学组织学(histology):):研究机体研究机体微细结构微细结构及其及其相关相关 功能功能的科学。的科学。人体解剖学人体解剖学组织学组织学为什么要学习组织学为什么要学习组织学?1.组织学又叫组织学又叫微观解剖学微观解剖学(Microanatomy),是,是解剖学解剖学知知识的进一步完善。识的进一步完善。2.结构是功能的基础,学好结构是功能的基础,学好组织学是学好组织学是学好生理学生理学(Physiology)的基础。的基础。3.只有了
2、解正常结构,才能只有了解正常结构,才能学习其异常变化。因此组织学习其异常变化。因此组织学是学是病理学病理学(Pathology)的基的基础。础。一、组织学与胚胎学的定义和研究内容一、组织学与胚胎学的定义和研究内容细胞细胞细胞间质细胞间质(细胞外基质细胞外基质)上皮组织上皮组织结缔组织结缔组织肌肉组织肌肉组织神经组织神经组织器官和系统器官和系统人体人体组织学的研究内容组织学的研究内容:细胞外基质细胞外基质(extracellular matrix)是细胞产生的、存在于细胞间的物质,包括纤纤维、基质和体液维、基质和体液,是细胞生存的微环境。神经、内分泌、免疫、循环、感觉、消化、呼吸、泌尿、生殖等(
3、二)(二)胚胎学(胚胎学(embryologyembryology):):研究人体发生和生长及其发育机理的科学,其内容研究人体发生和生长及其发育机理的科学,其内容包括发生过程(生殖细胞形成、受精、卵裂、植入、包括发生过程(生殖细胞形成、受精、卵裂、植入、三胚层形成与分化、胎膜与胎盘等)、发育机制、三胚层形成与分化、胎膜与胎盘等)、发育机制、先天性畸形等。先天性畸形等。精子穿卵受精卵6周胚胎11周胚胎12周胚胎4月胚胎畸形学:在胚胎发育过程中,由于遗传因素或环境有害因素畸形学:在胚胎发育过程中,由于遗传因素或环境有害因素的影响,可导致形成异常胚胎,即先天性畸形的影响,可导致形成异常胚胎,即先天性
4、畸形。二、组织学发展简史:二、组织学发展简史:英国物理学家Robert Robert HookeHooke(16631663一一1703)1703)创造了第一台有科学研究价值的显微镜,放大倍数为40一140倍,写成一书名为显微图谱发表于1665年,此书中描述了他所见到的木栓是由许多盒状的小室所组成。真正观察活细胞的是同时代的荷兰科学家Antony von Leeuwenhoek(1632一1723),发现精子、红细胞、肌细胞、神经细胞等。对组织胚胎学基础的建立作出了重要的贡献。19世纪30年代,显微镜制造技术有了明显的改进,分辨率提高到m以内,同时还由于切片机的制造成功,使显微解剖学取得许多新
5、进展。德国的植物学家Schleiden论证了所有植物都是由细胞组合而成。德国的动物学家Schwann认为动物体也是由细胞所组成的。Schleiden和Schwann(1838-18391838-1839)总结了前人的工作,提出总结了前人的工作,提出了细胞学说,宣称了细胞学说,宣称:一切生物从单细胞到高等动、植物都是一切生物从单细胞到高等动、植物都是由细胞组成的由细胞组成的;细胞是生物形态结构和功能活动的基本单位。细胞是生物形态结构和功能活动的基本单位。论证了生物界的统一性和共同起源。论证了生物界的统一性和共同起源。1933试制成功第一台实用电子显微镜。超薄切片机的问世和电镜生物制样技术快速发展
6、 细胞内多种细胞器的发现。1965年扫描电镜问世。组胚的研究进入到一个新的阶段。1953年年Watson和和Crick提出提出DNA双螺旋结构模型。双螺旋结构模型。证明证明DNA复制是半保留复制。复制是半保留复制。Crick创立了中心法则创立了中心法则(central dogma)。1955年,提出了三联体密码年,提出了三联体密码假说。假说。1961年确立了每一种氨基酸年确立了每一种氨基酸的密码。的密码。免疫组织免疫组织 化学技术化学技术 组织工程组织工程 问题问题 解决方法解决方法 观察对象太小观察对象太小 放大放大(显微镜)显微镜)观察对象无色,无反差观察对象无色,无反差 染色染色(HEH
7、E染色染色)观察对象生化成分不同观察对象生化成分不同 细胞化学细胞化学、免疫组织化学免疫组织化学 观察对象是活体观察对象是活体 培养培养三、三、组织学的研究方法和技术组织学的研究方法和技术分辨率:0.2m光镜标本制作程序光镜标本制作程序切片机:苏木精苏木精(Hematoxylin)伊红伊红(Eosin)碱性染料碱性染料将嗜碱性物质将嗜碱性物质(本本身酸性身酸性)染成蓝色染成蓝色酸性染料酸性染料将嗜酸性物质将嗜酸性物质(本本身碱性身碱性)染成红色染成红色细胞核中的细胞核中的DNA和和RNA、细胞质中细胞质中的的RNA细胞质细胞质、膜性结构膜性结构(线粒体线粒体、溶酶体溶酶体、滑面内质网滑面内质网
8、)组织结构的嗜色性组织结构的嗜色性 特殊染色法特殊染色法:硝酸银、地衣红、甲苯胺蓝染色法等 活体染色活体染色:台盼蓝活体注射地衣红染色示弹性纤维甲苯胺蓝染色示肥大细胞台盼蓝活体染色示巨噬细胞血涂片Wright染色透射电镜透射电镜(transmission electron microscope):):观察细胞内部结构观察细胞内部结构扫描电镜扫描电镜(scanning electron microscope):观察组织或细胞表面的立体结构观察组织或细胞表面的立体结构(二)电子显微镜技术(二)电子显微镜技术分辨率:电镜(0.2nm)、光镜(0.2m)透射电镜结构图电子密度高电子密度低透射电镜结构图
9、透射电镜结构图扫描电镜结构图(三)组织化学技术 1 1一般组织化学术一般组织化学术 原理:原理:化学或物理反应原理 应用:应用:对组织或细胞内某种化学成分进行定性、定位、定量及相关功能的研究。PAS反应:过碘酸-Schiff反应(periodic acid Schiff reaction,PAS反应)是显示组织或细胞内多糖的一种染色方法。多糖多糖醛醛紫红色沉淀紫红色沉淀氧化氧化Schiff试剂试剂HIO4糖类PAS反应肝糖原小肠粘原颗粒2.2.免疫组织化学(immunohistochemistry)(immunohistochemistry)技术:原理:原理:抗原和抗体特异性结合。应用:应用:
10、检测细胞、组织中多肽、蛋白质等。(1)直接法(2)间接法免疫组织化学(辣根过氧化物酶标记)示胰岛B细胞呈胰岛素阳性(四四)原位杂交技术原位杂交技术(in site hybridization)为核酸(为核酸(DNA和和RNA)组织化学术。用带组织化学术。用带有标记物的已知碱基顺序的核酸探针,与细有标记物的已知碱基顺序的核酸探针,与细胞内待测的核酸结合(杂交),从而在原位胞内待测的核酸结合(杂交),从而在原位显示该核酸。显示该核酸。(五)细胞培养术(cell culture)细胞培养术:是把从机体取得的细胞在体外模拟体内的条件下进行培养的技术。原代培养(primary culture):传代培养(sub culture):细胞系(cell line):超净工作台培养箱四、组织胚胎学学习方法要点四、组织胚胎学学习方法要点 平面与立体的关系 结构与功能相联系 静态结构了解动态变化 纵横联系深化认识平面与立体结构与功能舒张状态舒张状态收缩状态收缩状态静态与动态综合与比较