1、病原生物学教研室病原生物学教研室第三节第三节 沙沙 门门 菌菌 属属DANIEL ELMER SALMON,(1850-1914)美国兽医微生物和病理学家。美国兽医微生物和病理学家。是美国授予的第一位兽医学博是美国授予的第一位兽医学博士。士。1884年任美国农业部畜牧年任美国农业部畜牧局局 首任局长。他首次从病猪中首任局长。他首次从病猪中分离出猪霍乱沙门氏菌。在医分离出猪霍乱沙门氏菌。在医学微生物中通用的沙门菌一词，学微生物中通用的沙门菌一词，就是为纪念他而以就是为纪念他而以 他的名字命他的名字命名的。名的。沙门菌（沙门菌（Salmonella）沙门菌属（沙门菌属（Samonella）:为一大
2、类寄生人和动为一大类寄生人和动物肠道内生化反应和抗原构物肠道内生化反应和抗原构 造相似的造相似的G-杆菌。杆菌。两个种两个种肠道沙门菌肠道沙门菌肠道亚种肠道亚种撒拉姆亚种撒拉姆亚种亚利桑那亚种亚利桑那亚种豪顿亚种豪顿亚种英迪加亚种英迪加亚种 致病种类：即肠道亚种中的十余种可引起人和致病种类：即肠道亚种中的十余种可引起人和动物致病，如伤寒沙门菌、甲、乙、丙型副伤寒动物致病，如伤寒沙门菌、甲、乙、丙型副伤寒沙门菌等。沙门菌等。邦戈沙门菌邦戈沙门菌一、生物学性状一、生物学性状 (一一)形态与染色形态与染色 无芽胞，无荚膜，一般有鞭毛，多有无芽胞，无荚膜，一般有鞭毛，多有菌毛，菌毛，G G-杆菌。杆菌
3、。(二二)培养特性培养特性 兼性厌氧，中等大小、半透明的兼性厌氧，中等大小、半透明的S S型型菌落菌落(三三)生化反应生化反应（表格）（表格）发酵葡萄糖、甘露醇发酵葡萄糖、甘露醇,产酸产气产酸产气(伤寒沙门菌除外伤寒沙门菌除外)。不分解乳糖和蔗糖；大多产生不分解乳糖和蔗糖；大多产生H H2 2S;S;不分解尿素；不分解尿素；IMViC:-+-+;IMViC:-+-+;赖氨酸和鸟氨酸脱羧酶阳性。赖氨酸和鸟氨酸脱羧酶阳性。1.1.菌体抗原菌体抗原(O(O抗原抗原)脂多糖脂多糖,稳定、耐热稳定、耐热,特异性低特异性低。为沙。为沙 门菌共有。门菌共有。O O抗体，抗体，IgMIgM，早现早退，早现早退
4、 2.2.鞭毛抗原鞭毛抗原(H(H抗原抗原)蛋白质蛋白质,不稳定不稳定,不耐热不耐热,特异性高，特异性高，可鉴别伤寒杆菌与副伤寒杆菌及副伤可鉴别伤寒杆菌与副伤寒杆菌及副伤 寒杆菌的分型。寒杆菌的分型。H H抗体，抗体，IgGIgG，迟现迟退，迟现迟退(四四)抗原构造与分类抗原构造与分类3.3.表面抗原表面抗原(Vi(Vi抗原抗原)与毒性有关：抗吞噬作用，与致病性与毒性有关：抗吞噬作用，与致病性 有关有关 新分离菌才有，抗原性弱新分离菌才有，抗原性弱ViVi抗体：体内有菌时产生，无菌时消失，抗体：体内有菌时产生，无菌时消失，可作为伤寒带菌者指标可作为伤寒带菌者指标几种沙门菌抗原构造几种沙门菌抗原
5、构造组组型型O O抗原抗原H H抗原抗原第第1 1相相第第2 2相相A A组组甲型副伤寒沙门菌甲型副伤寒沙门菌1 1，2 2，1212a a-B B组组乙型副伤寒沙门菌乙型副伤寒沙门菌1 1，4 4，5 5，1212b b1 1，2 2鼠伤寒沙门菌鼠伤寒沙门菌1 1，4 4，5 5，1212i i1 1，2 2C C组组 丙型副伤寒沙门菌丙型副伤寒沙门菌ViVi6 6，7 7，c c1 1，5 5猪霍乱沙门菌猪霍乱沙门菌6 6，7 7，c c1 1，5 5D D组组伤寒沙门菌伤寒沙门菌ViVi9 9，1212，d d-肠炎沙门菌肠炎沙门菌1 1，9 9，1212g.mg.m-（五）变异性（五）
6、变异性S-RS-R变异：菌落由光滑型向粗糙型的变异变异：菌落由光滑型向粗糙型的变异H-OH-O变异：有鞭毛的沙门菌失去鞭毛的变异：有鞭毛的沙门菌失去鞭毛的 变异变异V-WV-W变异：沙门菌失去变异：沙门菌失去ViVi的变异的变异相位变异：双相鞭毛的沙门菌成为单相相位变异：双相鞭毛的沙门菌成为单相 鞭毛的菌的变异鞭毛的菌的变异(六六)抵抗力抵抗力 对热抵抗力不强，可用胆盐、煌绿对热抵抗力不强，可用胆盐、煌绿制备肠道杆菌选择性培养基，利于分离制备肠道杆菌选择性培养基，利于分离沙门氏菌沙门氏菌 SSSS平板平板二、致病性免疫二、致病性免疫 (一一)致病物质致病物质 内毒素和侵袭力，个别产内毒素和侵袭
7、力，个别产 生产毒素。生产毒素。1.1.侵袭力侵袭力:侵入小肠黏膜，先粘附至侵入小肠黏膜，先粘附至M M细细胞表面，引发细胞肌动蛋白重排、内在化胞表面，引发细胞肌动蛋白重排、内在化，菌存在于吞噬泡，吞噬泡转送未经降解，菌存在于吞噬泡，吞噬泡转送未经降解的菌并释放至上皮下区，菌被固有层中的的菌并释放至上皮下区，菌被固有层中的巨噬细胞吞噬，在巨噬细胞吞噬，在巨巨噬细胞中继续繁殖，噬细胞中继续繁殖，导致宿主细胞死亡。导致宿主细胞死亡。2.2.内毒素内毒素:菌死亡后释放，引起发热、菌死亡后释放，引起发热、白细胞减少。大剂量时可白细胞减少。大剂量时可 发生中毒性休克。发生中毒性休克。3.3.肠毒素肠毒素
8、:类似于大肠杆菌肠毒素类似于大肠杆菌肠毒素 可形成可形成ViVi抗原，能抗吞噬和杀伤，抗原，能抗吞噬和杀伤，阻挡抗体和补体等破坏菌体的作用。阻挡抗体和补体等破坏菌体的作用。(二二)所致疾病所致疾病 人类因食用患病或带菌动物的肉、乳、人类因食用患病或带菌动物的肉、乳、蛋或被病鼠尿污染的食物等而患病。人类蛋或被病鼠尿污染的食物等而患病。人类沙门菌感染有沙门菌感染有4 4种类型：种类型：1.1.肠热症肠热症:是伤寒病和副伤寒病的总称是伤寒病和副伤寒病的总称，主要由伤寒和甲、乙、丙型副伤寒杆菌，主要由伤寒和甲、乙、丙型副伤寒杆菌引起。引起。典型伤寒病的病程较长。菌是胞内寄典型伤寒病的病程较长。菌是胞内
9、寄生菌，被巨噬细胞吞噬后，在吞噬体内生生菌，被巨噬细胞吞噬后，在吞噬体内生存和繁殖存和繁殖伤寒沙门菌伤寒沙门菌小肠小肠肠系膜肠系膜淋巴结淋巴结初次菌血症初次菌血症 肝、脾、骨肝、脾、骨髓中的巨噬髓中的巨噬细胞内繁殖细胞内繁殖菌血症菌血症发热、发热、肾和其肾和其他器官他器官感染感染胆囊胆囊集合淋巴集合淋巴结溃疡和结溃疡和炎症炎症腹泻腹泻,肠出血肠出血,肠穿孔肠穿孔胆囊炎胆囊炎或带菌或带菌状态状态淋巴结淋巴结胸导管胸导管胆汁胆汁胆汁胆汁胃胃淋巴管淋巴管胸导管胸导管发热、全身不适发热、全身不适乏力，血培（乏力，血培（+）出现抗体出现抗体病菌病菌小肠粘膜上皮，巨噬小肠粘膜上皮，巨噬C C吞噬吞噬肠壁、
10、肠系膜淋巴结肠壁、肠系膜淋巴结血流（第血流（第1 1次菌血症）次菌血症）第第1 1周周第第4 4周周 恢复期恢复期菌菌-肾肾-尿尿（尿检菌）尿检菌）菌菌-胆囊胆囊-粪便（粪检菌）粪便（粪检菌）小肠肠壁小肠肠壁变态反应变态反应肠坏死、穿孔肠坏死、穿孔持续发热，相对缓脉，持续发热，相对缓脉，WBCWBC下降，表情淡漠、下降，表情淡漠、全身中毒症状全身中毒症状全身、器官和组织全身、器官和组织 再次入血（第再次入血（第2 2次菌血症）次菌血症）第第2 2、3 3周周肝脾肿大肝脾肿大皮肤玫瑰疹皮肤玫瑰疹表情淡漠表情淡漠 伤寒小结具有病理诊断价值伤寒小结具有病理诊断价值 伤寒坏死期伤寒坏死期伤寒溃疡期伤寒
11、溃疡期伤寒髓样肿胀期伤寒髓样肿胀期2019-11-9 Salmonella Outbreak in Pennsylvania Due to Raw Milk Consumption 在宾夕凡尼亚州生牛奶引发伤寒爆发在宾夕凡尼亚州生牛奶引发伤寒爆发 29人腹泻的症状。没有患者死亡，但是人腹泻的症状。没有患者死亡，但是有有2名患者必需住院名患者必需住院“伤寒玛丽伤寒玛丽”本名叫玛丽本名叫玛丽梅伦梅伦 1869 1869年生于爱尔兰，年生于爱尔兰，1515岁时移民美国。起岁时移民美国。起初她给人当女佣。后来，她发现自己很有烹调初她给人当女佣。后来，她发现自己很有烹调才能，于是转行当厨师，拿到比做女佣
12、高出很才能，于是转行当厨师，拿到比做女佣高出很多的薪水。玛丽对自己的处境非常满意。多的薪水。玛丽对自己的处境非常满意。19061906年夏天，纽约的银行家华伦带着全家年夏天，纽约的银行家华伦带着全家去长岛消夏，雇玛丽做厨师。去长岛消夏，雇玛丽做厨师。8 8月底，华伦的月底，华伦的一个女儿最先感染了伤寒。接着，华伦夫人、一个女儿最先感染了伤寒。接着，华伦夫人、两个女佣、园丁和另一个女儿相继感染。他们两个女佣、园丁和另一个女儿相继感染。他们消夏的房子住了消夏的房子住了1111个人，有个人，有6 6个人患病。个人患病。房主深为焦虑，他想方设房主深为焦虑，他想方设法找到了有处理伤寒疫情法找到了有处理伤
13、寒疫情经验的工程专家索柏。经验的工程专家索柏。索柏将目标锁定在玛丽身索柏将目标锁定在玛丽身上。他详细调查了玛丽此上。他详细调查了玛丽此前前7 7年的工作经历，发现年的工作经历，发现7 7年中玛丽换过年中玛丽换过7 7个工作地个工作地点，而每个工作地点都暴点，而每个工作地点都暴发过伤寒病，累计共有发过伤寒病，累计共有2222个病例，其中个病例，其中1 1例死亡。例死亡。索柏设法得到玛丽的血液、粪便样本，以验证索柏设法得到玛丽的血液、粪便样本，以验证自己的推断。但这非常棘手，索柏对此有过精自己的推断。但这非常棘手，索柏对此有过精彩的描述：他找到玛丽，彩的描述：他找到玛丽，“尽量使用外交语言，尽量使
14、用外交语言，但玛丽很快就作出了反应。她抓起一把大杈子，但玛丽很快就作出了反应。她抓起一把大杈子，朝我直戳过来。我飞快地跑过又长又窄的大厅，朝我直戳过来。我飞快地跑过又长又窄的大厅，从铁门里逃了出去从铁门里逃了出去”。玛丽当时反应激烈，因为在她那个年代，玛丽当时反应激烈，因为在她那个年代，“健健康带菌者康带菌者”还是一个闻所未闻的概念，她自己还是一个闻所未闻的概念，她自己身体棒棒的，说她把伤寒传染给了别人，简直身体棒棒的，说她把伤寒传染给了别人，简直就是对她的侮辱。就是对她的侮辱。后来，索柏试图通过地方卫生官员说服玛后来，索柏试图通过地方卫生官员说服玛丽，没想到，这更惹恼了这个倔脾气的爱尔兰丽，
15、没想到，这更惹恼了这个倔脾气的爱尔兰裔女人，她将他们骂出门外，宣布他们是裔女人，她将他们骂出门外，宣布他们是“不不受欢迎的人受欢迎的人”。最后，当地的卫生官员带着一辆救护车和最后，当地的卫生官员带着一辆救护车和5 5名警察找上门。这一次，玛丽又动用了大杈子。名警察找上门。这一次，玛丽又动用了大杈子。在众人躲闪之际，玛丽突然跑了。警察后来在在众人躲闪之际，玛丽突然跑了。警察后来在壁橱里找到了她，壁橱里找到了她，5 5名警察把她抬进救护车送往名警察把她抬进救护车送往医院。一路上的情景就像医院。一路上的情景就像“笼子里关了头愤怒笼子里关了头愤怒的狮子的狮子”。医院检验结果证实了索柏的怀疑。玛丽被医院
16、检验结果证实了索柏的怀疑。玛丽被送入纽约附近一个名为送入纽约附近一个名为“北边兄弟北边兄弟”的小岛上的小岛上的传染病房。的传染病房。1910 1910年年2 2月，当地卫生部门与玛丽达成和解，月，当地卫生部门与玛丽达成和解，解除对她的隔离，条件是玛丽同意不再做厨师。解除对她的隔离，条件是玛丽同意不再做厨师。这一段公案就此了结。这一段公案就此了结。19151915年，玛丽已经被解年，玛丽已经被解除隔离除隔离5 5年，大家差不多都把她忘了。这时，年，大家差不多都把她忘了。这时，纽约一家妇产医院暴发了伤寒病，纽约一家妇产医院暴发了伤寒病，2525人被感染，人被感染，2 2人死亡。卫生部门很快在这家医
17、院的厨房里人死亡。卫生部门很快在这家医院的厨房里找到了玛丽，她已经改名为找到了玛丽，她已经改名为“布朗夫人布朗夫人”。据说玛丽因为认定自己不是传染源才重新去做据说玛丽因为认定自己不是传染源才重新去做厨师的，毕竟做厨师挣的钱要多得多。但无论厨师的，毕竟做厨师挣的钱要多得多。但无论如何，公众对玛丽的同情心这次却消失了。如何，公众对玛丽的同情心这次却消失了。玛丽自觉理亏，老老实实地回到了小岛上。医玛丽自觉理亏，老老实实地回到了小岛上。医生对隔离中的玛丽使用了可以治疗伤寒病的所生对隔离中的玛丽使用了可以治疗伤寒病的所有药物，但伤寒病菌仍一直顽强地存在于她的有药物，但伤寒病菌仍一直顽强地存在于她的体内。
18、体内。玛丽渐渐了解了一些传染病的知识，积极配合玛丽渐渐了解了一些传染病的知识，积极配合医院的工作，甚至成了医院实验室的义工。医院的工作，甚至成了医院实验室的义工。19321932年，玛丽患中风半身不遂，年，玛丽患中风半身不遂，6 6年后去世。年后去世。玛丽玛丽梅伦以梅伦以“伤寒玛丽伤寒玛丽”的绰号名留的绰号名留美国医学史。今天，美国人有时会以开美国医学史。今天，美国人有时会以开玩笑的口吻称患上传染病的朋友为玩笑的口吻称患上传染病的朋友为“伤伤寒玛丽寒玛丽”由于故事中的玛丽由于故事中的玛丽梅伦总是不停地更梅伦总是不停地更换工作地点，那些频繁跳槽的人，也会换工作地点，那些频繁跳槽的人，也会被周围的
19、人戏称为被周围的人戏称为“伤寒玛丽伤寒玛丽”。带菌问题：带菌问题：3-5%3-5%的人病后可随粪便排的人病后可随粪便排菌菌3 3周至周至3 3月，成为伤寒带菌者月，成为伤寒带菌者(传染源传染源)。值得注意值得注意2.2.食物中毒（急性胃肠炎）食物中毒（急性胃肠炎）鼠伤寒杆菌鼠伤寒杆菌 肠炎杆菌肠炎杆菌 污染食物引起污染食物引起108 猪霍乱杆菌猪霍乱杆菌 主要症状：发热、呕吐、腹痛、腹泻主要症状：发热、呕吐、腹痛、腹泻3.3.败血症败血症 猪霍乱杆菌猪霍乱杆菌 丙型副伤寒杆菌丙型副伤寒杆菌 鼠伤寒杆菌鼠伤寒杆菌4.4.慢性肠炎慢性肠炎 主要由鼠伤寒杆菌引起主要由鼠伤寒杆菌引起症状似菌痢：粪中带
20、有粘液或脓液症状似菌痢：粪中带有粘液或脓液多见于婴幼儿和老年人多见于婴幼儿和老年人(三三)免疫性免疫性主要是细胞免疫，病后有牢固的免疫性主要是细胞免疫，病后有牢固的免疫性，特异性体液抗体有辅助杀菌作用。胃肠，特异性体液抗体有辅助杀菌作用。胃肠炎的恢复与炎的恢复与SIgASIgA特异性防止伤寒杆菌粘附特异性防止伤寒杆菌粘附于肠粘膜表面有关。抗于肠粘膜表面有关。抗O O和抗和抗ViVi抗体能抵抗抗体能抵抗病原菌的感染。病原菌的感染。三、微生物学诊断三、微生物学诊断(一一)标本采集标本采集 不同疾病、不同病程采集不同标本不同疾病、不同病程采集不同标本 伤寒、副伤寒：第伤寒、副伤寒：第1 1、2 2周
21、采血；周采血；第第2 2、3 3周采粪、尿；周采粪、尿；全程全程 可采骨髓。可采骨髓。血清学检查：第二周起即可采血清。血清学检查：第二周起即可采血清。败血症：采血。败血症：采血。肠炎：粪便、呕吐物、可疑食物肠炎：粪便、呕吐物、可疑食物血液、骨髓血液、骨髓粪、尿、可疑食物粪、尿、可疑食物增菌培养增菌培养（胆盐葡萄糖肉汤）（胆盐葡萄糖肉汤）分分 离离 培培 养养（SS、EMB、MAC、血平板）、血平板）增菌培养增菌培养(SF、CN、TT)37 1824h可疑菌落可疑菌落初初 步步 鉴鉴 定定（涂染检、（涂染检、KIA、MIU、IMViC等生化反应、等生化反应、A-F多价血清凝集）多价血清凝集）最最
22、 终终 鉴鉴 定定肠道杆菌系统生化反应肠道杆菌系统生化反应 单价因子血清定血清型单价因子血清定血清型37 1824h37 1824h37 1824h（二）检验程序及方法（二）检验程序及方法沙门菌属细菌的初步鉴定沙门菌属细菌的初步鉴定MIU 触酶 氧化酶硝酸盐还原诊断血清凝集KIA斜面 底层 产气 H2S甲型副伤寒 K A +-/+-+AF多价+A群+乙型副伤寒 K A +-+AF多价+B群+丙型副伤寒 K A +-+AF多价+C群+vi+猪霍乱沙门菌 K A +-/+-+AF多价+C群+伤寒沙门菌 K A -+/-+-+AF多价+D群+vi+其他沙门菌 K A +-+AF多价+肠炎+五项生化试
23、验五项生化试验1.1.三糖铁琼脂试验三糖铁琼脂试验 2.2.吲哚试验吲哚试验3.3.尿素酶试验尿素酶试验 4.4.赖氨酸脱羧酶试验赖氨酸脱羧酶试验5.5.氰化钾试验氰化钾试验(三三)血清学诊断：血清学诊断：肥大反应肥大反应:用于伤寒、副伤寒的诊断用于伤寒、副伤寒的诊断 原理：原理：用已知用已知4 4种抗原测未知抗体种抗原测未知抗体伤寒沙门菌伤寒沙门菌O O抗原抗原伤寒沙门菌伤寒沙门菌H H抗原抗原甲型副伤寒甲型副伤寒H H抗原抗原乙型副伤寒乙型副伤寒H H抗原抗原+待测血清待测血清 凝集反应凝集反应 结果解释：结果解释：正常值正常值 ：伤寒沙门菌伤寒沙门菌O O凝集价凝集价 1 1：8080伤
24、寒沙门菌伤寒沙门菌H H凝集价凝集价 1 1：160160甲型副伤寒甲型副伤寒H H凝集价凝集价 1 1：8080乙型副伤寒乙型副伤寒H H凝集价凝集价 1 1：8080 动态观查：若效价逐次递增或恢复期效价比动态观查：若效价逐次递增或恢复期效价比初次初次 4 4者有诊断意义。者有诊断意义。O O与与H H抗体在诊断上的意义抗体在诊断上的意义 IgMIgM型型O O抗体出现较早，持续半年左右，消失抗体出现较早，持续半年左右，消失后不易重新出现。后不易重新出现。IgGIgG型型H H抗体出现较晚，维持可达数年，消失抗体出现较晚，维持可达数年，消失后易重新出现。后易重新出现。若若H H、O O凝集
25、效价均超过正常值，则感染伤凝集效价均超过正常值，则感染伤寒、副伤寒的可能性大；寒、副伤寒的可能性大；H H与与O O效价均低，则患肠热症的可能性甚小效价均低，则患肠热症的可能性甚小 若若H H效价高而效价高而O O不高，可能系预防接种或非不高，可能系预防接种或非特异性回忆反应特异性回忆反应 如如O O效价高而效价高而H H不高，可能是感染早期或其他沙不高，可能是感染早期或其他沙门氏菌感染引起的交叉反应。门氏菌感染引起的交叉反应。入院后第入院后第4天天入院后第入院后第12天天TH1：801：80TO1：801：320TA（甲）（甲）1：401：160TB（乙）（乙）1：401：20TC（丙）（丙
26、）1：401：20 其他：其他：肥达氏试验始终阴性的，可能是肥达氏试验始终阴性的，可能是 发病早期曾用大量或多种抗生素治疗；发病早期曾用大量或多种抗生素治疗；患者免疫功能低下。患者免疫功能低下。伤寒伤人不同病期血、粪便、尿液中病原菌与伤寒伤人不同病期血、粪便、尿液中病原菌与特异性凝集素的阳性检出率特异性凝集素的阳性检出率（图）（图）(四四)伤寒带菌者的检查伤寒带菌者的检查 最可靠的方法是分离培养病原菌最可靠的方法是分离培养病原菌 四、防治原则四、防治原则 皮下多次接种死菌苗，有一定的保护作用，但常皮下多次接种死菌苗，有一定的保护作用，但常引起局部和全身反应。引起局部和全身反应。目前以目前以Ty
27、-21aTy-21a株减毒口服活菌苗的副反应较小，株减毒口服活菌苗的副反应较小，免疫效果且较持久。服用安全，口服后粪便中排菌仅免疫效果且较持久。服用安全，口服后粪便中排菌仅一天，以产生细胞免疫为主，此菌株安全、稳定、有一天，以产生细胞免疫为主，此菌株安全、稳定、有效免疫期至少为三年。效免疫期至少为三年。治疗用治疗用氯霉素氯霉素、氨苄青、氨苄青霉素、羟氨苄等，中药白霉素、羟氨苄等，中药白花蛇舌草，穿心莲等有效。花蛇舌草，穿心莲等有效。思考题思考题1、试述肠伤寒致病特点。、试述肠伤寒致病特点。2、肥达（、肥达（Widal）氏反应的意义及）氏反应的意义及结果如何判断？结果如何判断？沙门氏菌第一沙门氏菌第一代显色培养基代显色培养基菌名 葡萄糖 乳糖麦芽糖 甘露醇 蔗糖硫化氢 鼠素糖 吲哚甲基红 VP 枸椽酸盐 卫矛醇 赖脱氨羧酸酶 鸟脱氨羧酸酶 木胶糖 阿胶拉伯糖 伤寒杆菌+-+-/+-+-+/-+-+/-+/-甲型副伤寒杆菌-/+-+-+-乙型副伤寒杆菌-+-+-+/-+丙型副伤寒杆菌-+-+-+
