1、病毒学国家重点实验室实验室生物安全实验室生物安全实验室常用生物安全操作技术实验室常用生物安全操作技术 1实验室常用仪器的生物安全操作实验室常用仪器的生物安全操作 23生物安全管理组织体系生物安全管理组织体系实验室常用生物安全操作技术实验室常用生物安全操作技术 一一.血清分离的生物安全操作血清分离的生物安全操作 血清分离作为实验室的常规工作，应有相应的标准操作血清分离作为实验室的常规工作，应有相应的标准操作程序。程序。1.1.血清分离操作时应戴手套，同时做好眼晴和粘膜的防血清分离操作时应戴手套，同时做好眼晴和粘膜的防护措施。护措施。2.2.进行血清或血液操作时，应用移液器小心吸取，不能进行血清或
2、血液操作时，应用移液器小心吸取，不能倾倒。倾倒。3.3.移液管使用完后应完全浸入适当的消毒液中，要浸泡移液管使用完后应完全浸入适当的消毒液中，要浸泡足够长的时间，然后再丢弃或高压灭菌后重复使用。足够长的时间，然后再丢弃或高压灭菌后重复使用。4.4.准备适当的消毒剂来清洗喷溅和溢出的样品。准备适当的消毒剂来清洗喷溅和溢出的样品。5.5.带有血凝块的废弃样品管，在加盖后置于适当的容器内带有血凝块的废弃样品管，在加盖后置于适当的容器内高压灭菌。高压灭菌。二二.组织匀浆器和研磨器的生物安全操作组织匀浆器和研磨器的生物安全操作 可能造成的危害因素为气溶胶，溢漏和容器破碎。可能造成的危害因素为气溶胶，溢漏
3、和容器破碎。1.使用实验室专用的结构上可以最大限度避免气溶胶产生的组织匀使用实验室专用的结构上可以最大限度避免气溶胶产生的组织匀浆器，浆器，homogenizer。当使用匀浆器处理危险度。当使用匀浆器处理危险度3级以上的微生级以上的微生物时，应在生物安全柜中进行操作。物时，应在生物安全柜中进行操作。2.尽量选用在转子轴承和垫圈处有防漏设计的机型。器具的盖，管尽量选用在转子轴承和垫圈处有防漏设计的机型。器具的盖，管和瓶体应处于良好状态，无裂缝或变形。和瓶体应处于良好状态，无裂缝或变形。3.使用匀浆器或超声处理器，使用匀浆器或超声处理器，sonicator时，应选择有一定强度的时，应选择有一定强度
4、的透明塑料罩设备，并在操作后进行消毒处理。这些仪器也可以在透明塑料罩设备，并在操作后进行消毒处理。这些仪器也可以在生物安全柜内覆盖塑料盖后操作。生物安全柜内覆盖塑料盖后操作。4.玻璃研磨器玻璃研磨器,glass grinder外部应使用吸收材料包裹，戴手套操外部应使用吸收材料包裹，戴手套操作，以采用聚四乙烯塑料研磨器较为安全。操作和打开研磨器时作，以采用聚四乙烯塑料研磨器较为安全。操作和打开研磨器时应当在生物安全柜内进行。应当在生物安全柜内进行。三三.搅拌器和振荡器的生物安全操作搅拌器和振荡器的生物安全操作 可能造成的主要危害为气溶胶，飞溅物和溢出物。可能造成的主要危害为气溶胶，飞溅物和溢出物
5、。1.使用实验室专用的搅拌器使用实验室专用的搅拌器,stirrer和混匀器和混匀器,vortex.2.使用这些仪器前，所使用的管子，盖子，杯子和瓶子都应保持使用这些仪器前，所使用的管子，盖子，杯子和瓶子都应保持完好，无裂缝，无变形。采用结实的螺旋盖培养瓶，瓶口装有完好，无裂缝，无变形。采用结实的螺旋盖培养瓶，瓶口装有防护滤膜。防护滤膜。3.在混匀，振荡的过程中，容器的压力会增加，所以装容液的容在混匀，振荡的过程中，容器的压力会增加，所以装容液的容器应控制样品量，含有感染性材料的气溶胶可能从容器和盖子器应控制样品量，含有感染性材料的气溶胶可能从容器和盖子之间的空隙逸出。之间的空隙逸出。4.使用搅
6、拌器和振荡器使用搅拌器和振荡器,oscillator时，应有防护装置，并在生物时，应有防护装置，并在生物安全柜中操作。特别在使用涡旋振荡器时，必须在生物安全柜安全柜中操作。特别在使用涡旋振荡器时，必须在生物安全柜内操作，操作的容器必须是密闭的，以免产生气溶胶和液体飞内操作，操作的容器必须是密闭的，以免产生气溶胶和液体飞溅而污染工作台面。溅而污染工作台面。四四.离心机使用的安全操作技术离心机使用的安全操作技术 可能造成的危害因素为气溶胶，飞溅物和离心管液体泄露。在可能造成的危害因素为气溶胶，飞溅物和离心管液体泄露。在离心过程中可以产生高速运动的气溶胶颗粒，在传统开口的离心过程中可以产生高速运动的
7、气溶胶颗粒，在传统开口的I级和级和II级生物安全柜内，也不能防护这些产生的气溶胶。级生物安全柜内，也不能防护这些产生的气溶胶。1.在使用离心机时，应按操作程序使用离心机，保持离心机有良好在使用离心机时，应按操作程序使用离心机，保持离心机有良好的机械性能。的机械性能。2.离心管和装液体的容器应为厚壁玻璃，最好为塑料制品，应检查离心管和装液体的容器应为厚壁玻璃，最好为塑料制品，应检查是否破损。是否破损。3.用于离心的试管和标本容器应当始终牢固盖紧。采用封闭式的吊用于离心的试管和标本容器应当始终牢固盖紧。采用封闭式的吊桶，离心杯和转头。固定角转头要加盖离心，用前要检查密封圈桶，离心杯和转头。固定角转
8、头要加盖离心，用前要检查密封圈是否完好。水平转头最好选用风屏密闭式的离心机。是否完好。水平转头最好选用风屏密闭式的离心机。4.离心机吊桶，套管，离心管必须按重量配对，准确配平，空离心离心机吊桶，套管，离心管必须按重量配对，准确配平，空离心桶应当用水来平衡，而不能使用盐溶液。离心管中溶液不能装过桶应当用水来平衡，而不能使用盐溶液。离心管中溶液不能装过量，应留有适当空间。量，应留有适当空间。5.对危险度对危险度3级和级和4级的微生物，必须使用可封口的离心桶。级的微生物，必须使用可封口的离心桶。生物安全管理组织体系 我国的实验室生物安全管理组织体系由国家、地区、单位上级主管部门、实验室所在单位和实验
9、室五个层面构成。国家病原微生物实验室 生物安全专家委员会 组成 由国务院卫生主管部门和兽医主管部门会同国务院有关部门与病原学、免疫学、检验医学、流行病学、预防兽医学、环境保护和实验室管理等方面的专家组成。职责 承担从事高致病性病原微生物相关实验活动实验室的设立与运行的生物安全评估和技术咨询、论证工作。地区病原微生物实验室生物安全专家委员会 组成 由省、自治区、直辖市人民政府卫生主管部门和兽医主管部门会同同级人民政府有关部门组织病原学、免疫学、检验医学、流行病学、预防兽医学、环境保护和实验室管理等方面的专家组成。职责 承担本地区实验室设立和运行的技术咨询工作。单位或上级主管部门病原微生物实验室生
10、物安全委员会 组成 由病原微生物实验室所在单位或上级主管部门成立的生物安全委员会。职责 制定所在单位的生物安全规章制度、操作规范和标准操作程序等；对某些研究方案进行审查和风险程度评估；负责日常监督和检查。实验室感染控制管理机构 组成 该实验室具有病原微生物有关的传染病防治知识的机构或人员。职责 承担实验室感染控制工作，定期检查实验室的生物安全防护、病原微生物菌毒种和样本保存与使用、安全操作、实验室排放的废物处置等规章制度的实施情况。生物安全委员会的组成生物安全委员会的组成 生物安全委员会制定所在单位的生物安全政策和操作规范，生物安全委员会制定所在单位的生物安全政策和操作规范，研究方案涉及感染性
11、因子，动物使用和重组研究方案涉及感染性因子，动物使用和重组DNADNA时，生物安时，生物安全委员会应进行审查。其它工作还包括危险度评估，制定新全委员会应进行审查。其它工作还包括危险度评估，制定新的安全政策和仲裁安全事件纠纷。的安全政策和仲裁安全事件纠纷。生物安全委员会的组成生物安全委员会的组成 生物安全官员生物安全官员 生物科学研究人员生物科学研究人员 医务人员医务人员 动物科学研究人员动物科学研究人员 技术人员技术人员 实验室管理人员实验室管理人员生物安全官员生物安全官员 在一个研究机构，生物安全官员可以是微生物学家或者是一在一个研究机构，生物安全官员可以是微生物学家或者是一位专业人员，他们
12、可以以兼职的形式来完成这一职责，位专业人员，他们可以以兼职的形式来完成这一职责，必须具必须具有良好的微生物学实验室工作背景和实验室安全工作的经验。有良好的微生物学实验室工作背景和实验室安全工作的经验。定期的生物安全检查定期的生物安全检查 确保所有工作人员都接受了适当的教育和培训确保所有工作人员都接受了适当的教育和培训 对所有人员进行继续安全教育对所有人员进行继续安全教育 为工作人员提供新的安全操作程序和资料为工作人员提供新的安全操作程序和资料 参与感染性物质和有毒物品意外事故的处理和调查参与感染性物质和有毒物品意外事故的处理和调查实验室负责人 组成组成 由实验室负责人或任命的具有专业知识的由实
13、验室负责人或任命的具有专业知识的 实验室生物安全负责人。实验室生物安全负责人。职责职责 对所有员工和实验室来访者的安全负责。对所有员工和实验室来访者的安全负责。2、生物安全管理制度 规章制度规章制度 1.1.人员培训制度人员培训制度 2.2.实验室准入制度实验室准入制度 3.3.安全计划审核制度安全计划审核制度 4.4.安全检查制度安全检查制度 5.5.事件、伤害、事故和职业性疾病报告制度事件、伤害、事故和职业性疾病报告制度 6.6.危险标识制度危险标识制度 7.7.记录制度记录制度 管理规范 1.1.实验室安全手册实验室安全手册 2.2.食品、饮料及类似物品食品、饮料及类似物品 3.3.化妆
14、品、发、珠宝化妆品、发、珠宝 4.4.免疫免疫 5.5.个人物品个人物品 6.6.内务行为内务行为 7.7.洗手洗手 8.8.接触生物源性材料的安全工作行为接触生物源性材料的安全工作行为 9.9.减少接触有害气溶胶行为减少接触有害气溶胶行为 10.10.化学物品安全化学物品安全 11.11.放射安全放射安全 12.12.紫外线和激光光源紫外线和激光光源 13.13.电气设备电气设备 14.14.防火防火 15.15.紧急撤离紧急撤离 16.16.样本运送样本运送 17.17.废物处置废物处置 带有生命支持系统通带有生命支持系统通风装置的正压防护服风装置的正压防护服武汉大学武汉大学ABSL-3级实验室及个人防护设备级实验室及个人防护设备谢谢！
