1、 血液细胞形态学检查血液细胞形态学检查北京协和医院血液科北京协和医院血液科葛昌文葛昌文工作步骤工作步骤1.登记登记(1)收到标本后，登记患者姓名、性别、年龄、病历号，并告知病人取报告的时间和日期；(2)标本要登记化验号及分类号、标本采取日期穿刺部位、标本来源（如：病房、门诊、外院）。.染色染色 (1)在玻片血膜头部标明姓名或编号，并将其平置于染色架上；(2)加瑞氏染液6-8滴覆盖全部血膜，随后加缓冲液(PH6.4)10-12滴，用洗耳球吹匀；(3)血片染色10-15min，骨髓片染15-20min(根据有核细胞的多少而定)，必要时用低倍镜观察染色效果；(4)手摇玻片数次，使染液渣上浮，用自来水
2、先缓后急冲去染液，晾干待检。3.镜检镜检外周血涂片检查法1.复习申请单的临床诊断、送检目的和要求。2.肉眼观察涂片血膜大小、厚薄程度、染色好坏。3.低倍镜检查（1）涂片的厚薄及染色情况。（2）估计白细胞数（可大体核对WBC直接计数是否正确）。（3）了解白细胞大致分布及片尾部有无异常细胞、特大细胞及细胞团。（4）选择具有代表性的镜检区域（多介于涂片体尾之间，细胞分布均匀，互不重叠、挤压）。4.油镜检查油镜检查(1)进行WBC分类计数：一般计数100个有核细胞(若WBC1.0109/L，WBC分类计数不足100个，则注明有核细胞少见，全片分类多少个WBC；特殊情况如骨髓移植后，则注明有核细胞少，无
3、法分类)，观察细胞形态、比例及有无巨大或异常细胞。(2)白细胞分类计数：计数中性粒细胞、嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞、淋巴细胞及单核细胞比例，注意各类细胞形态有无异常。(3)注意片尾部有无不成熟细胞或异常细胞(如中晚幼粒、有核红细胞、淋巴细胞、吞噬细胞、肿瘤细胞等)。(4)红细胞形态（群体、个体）及排列（重叠、缗钱状）(5)血小板数量、形态及聚集性。(6)寄生虫。5.外周血涂片报告单内容：外周血涂片报告单内容：(1)WBC 数及主要成分、各类白细胞比例及形态是否 正常。(2)有无不成熟白细胞、有核红细胞及异常细胞情况。(3)成熟红细胞大小、形态、色素状态(中心淡染、核 残余物、多嗜性RBC)及排
4、列等情况。(4)血小板数量、形态及聚集性。(5)寄生虫。骨髓细胞形态检查法 1.复习患者病历资料、实验室检查结果及治疗情况 2.肉眼观察 涂片在染色前均需用肉眼观察；以确定标本的取材、涂片是否“合格”，血膜厚薄，有无脂肪珠及“骨髓小粒”。3.低倍镜检查低倍镜检查(1)取材、涂片、染色的好坏。(2)有核细胞多少(判定增生程度)及其分布；粒与红系的比例及各阶段比例的初步印象。(3)寻找异常细胞如转移癌细胞等。(4)选择油镜检查区域：要求能代表此涂片细胞的基本情况，有核细胞多，分布均匀，形态舒展、清晰易辨认。4.油镜检查油镜检查 观察细胞形态及进行有核细胞分类计数。一般油镜观察区域在涂片血膜的体尾交
5、界部位，分类计数时标本上下移动，验证低倍镜检查所得的初步印象。通常计数 200个有核细胞，特殊情况可计数 400或 500个有核细胞，增生低下或有核细胞甚少时，可分类计数 100个有核细胞。在油镜观察中，通过血细胞工作站对有代表性的细胞区域采集图象并入库保存（见血细胞工作站操作程序）。具体内容如下：(1)骨髓有核细胞分类计数，以百分率(%)表示，计算各系所占百分比和粒红比例(M/E)。(2)粒系：计算粒系所占%及各阶段比例；观察核移向(左移、右移)及形态的改变(巨幼变、双核、P-H畸形、胞浆颗粒多少或有无)。(3)红系：计算红系所占%及各阶段比例；观察形态有无异常(巨幼变、类巨幼变及双核、多核
6、、核分裂等残余物)、多嗜性红细胞多少、成熟红细胞形态及排列等。(4)淋巴细胞及单核细胞比例及形态有无异常 (5)巨核系：外周血血小板数量正常时(100-300109/L),一般不做巨核细胞计数；当PLT500109/L时，应计数全片的巨核细胞数量，但无需分类；当PLT100109/L，要计数全片巨核细胞，分类50个巨核细胞(或换算成%)，并注明有无血小板生成。注意病理性巨核细胞(巨大异常巨核、亚小型、小型、微型巨核),计数100个有核细胞中的病理性小型、微型及亚小型巨核细胞的数量。注意血小板量与质(形态、大小、聚集性等)的改变。(6)非造血细胞的种类和数量：此类多在涂片尾部或边缘处，分类计数结
7、果可能比实际低。(7)异常细胞：如 转移瘤细胞、高雪氏细胞、N-P细胞、恶组细胞等。5.骨髓涂片检查报告单内容：骨髓涂片检查报告单内容：(1)取材涂片及染色情况。(2)骨髓增生程度及主要成分，一般用M/E表示。(3)粒系：增生情况及所占%，各阶段比例，核移向(左移、右移)形态发育与异常改变，嗜酸性及嗜碱性细胞情况。(4)红系:增生情况及所占%,各阶段比例，形态有无异常(如巨变、类巨幼变、分裂相、核残余物、双核、多核等)及成熟红细胞形态。(5)淋巴及单核细胞：数量和形态是否有异常。(6)巨核系：数量、分类及形态有无异常，产血小板情况；血小板形态和数量。(7)浆细胞：形态与数量，有无不成熟或病理性
8、浆细胞。(8)造血与非造血细胞岛及非造血细胞增生情况。(9)涂片中有无巨大异型及肿瘤细胞等。(10)寄生虫。(11)结论:诊断、印象和建议。附录附录:1.骨髓增生程度标准:增生度标 准红(无核)细胞 :有核细胞增生极度活跃增生明显活跃增生活跃增生尚活跃增生低下增生极度低下 1-5 :1 6-10 :1 11-20 :1 21-40 :1 41-100 :1 100以上 :12.骨髓细胞正常值骨髓细胞正常值:粒 系原始0-1.0红系原始0-0.5淋巴系原始早幼0.1-2.5早幼0-2.0幼稚0-0.6中性中幼3.18-13.2中幼3.77-13.0淋巴8.4-32.4晚幼5.22-20.2晚幼3
9、.44-10.0其他组织0-1.0杆状8.47-24.4巨核系原始吞噬0-0.1分叶6.12-25.0幼稚内皮0-0.2嗜酸性早幼颗粒巨0-0.2组碱0-0.1中幼0-1.1产板巨组酸0-0.1晚幼0-2.1裸核巨浆0-1.2杆状0-1.1小原成纤分叶0-3.4小幼脂肪0-0.1嗜碱性早幼小巨中幼0-0.1单核系原始晚幼0-0.1幼稚杆状0-0.1单核0-3.0分叶0-0.33.说明说明:(1)本室采用国联M99-M型医学图象工作站，参阅其使用手册。(2)本室骨髓分类采用全骨髓计数方法(ANC)，当红系大于50%时，采用非红细胞计数法(NEC)；(3)诊断标准采用张之南主编血液病诊断及疗效标准第二版，其中白血病及MDS的诊断采用FAB分型标准。
