1、人类辅助生殖技术探讨人类辅助生殖技术探讨 人类辅助生殖技术人类辅助生殖技术 人类辅助生殖技术(Assisted Reproductive Technology,ART)的简称,指采用医疗辅助手段使不育夫妇妊娠的技术,包括人工授精(Artificial Insemination,AI)和体外受精-胚胎移植(In Vitro Fertilization and Embryo Transfer,IVF-ET)及其衍生技术。主要方法主要方法 人工授精(AI)体外受精-胚胎移植(IVF-ET)卵泡浆内单精子显微注射(ICSI)胚胎植入前遗传学诊断(PGD)赠卵IVF-ET 代孕一、人工受精分类和适应症一
2、、人工受精分类和适应症 夫精人工授精(AIH)(1)性交障碍(2)精子在女性生殖道内运行障碍(3)少、弱精症 供精(非配偶)人工授精(AID)(1)无精症(2)男方有遗传疾病(3)夫妻间特殊性血型或免疫不相容 精子优化获能精子优化获能 受精前精子都须进行优选诱导获能处理,其作用是去除含有抑制与影响受精成分的精浆,激活诱导精子获能。自然受精中,精子是在穿过宫颈粘液及在输卵管内停留等候卵子的过程中获能临床处理临床处理 采用离心洗涤和使用成分相似于输卵管液的授精培养液培养相结合的方法完成 上游法:正常者,方法简单,回收率低 梯度离心法:少、弱精症,可回收不同活力的精子授精授精 术前对女方的排卵监测、
3、选在排卵前48h至排卵后12h之间进行。授精部位目前常用的是将精子注入宫颈 严格无菌措施下注入宫腔。二、体外受精二、体外受精-胚胎移植(胚胎移植(IVF-ETIVF-ET)从母体取出的卵子置于培养皿内,加入经优选诱导获能处理的精子,使精卵在体外受精,并发育成前期胚胎后移植回母体子宫内,经妊娠后分娩婴儿。由于胚胎最初2天在试管内发育,所以又叫试管婴儿技术。IVF-ETIVF-ET的建立的建立 1959年与科学家Pincus合作研究中,果然成功地实现了兔子的体外受精和胚胎移植,为人类IVF-ET的建立奠定了基础。1970年,英国胚胎学家Edwards与妇产科医生Steptoe合作,开始了人类的体外
4、受精与胚胎移植研究。1977年,他们取出因输卵管阻塞不育的患者Lesley的卵子与丈夫的精子行体外授精后,将发育的胚胎移植回Lesley的子宫内。1978年7月25日,Lesley终于分娩了世界上第一例试管婴儿Louise Brown。至此人类IVF-ET技术正式建立。适应证适应证 输卵管堵塞 子宫内膜异位伴盆腔内粘连或输卵管异常,使精子在盆腔内被巨嗜细胞吞噬。男性轻度少精、弱精症。免疫性不育、抗精子抗体阳性。原因不明的不育。临床处理临床处理 控制性超排卵与卵泡监测 取卵 体外授精 胚胎移植 胚胎冻融 胚胎移植后监测 胚胎移植合并症胚胎移植合并症 流产 宫外孕 多胎妊娠 卵巢过度刺激综合症(O
5、HSS)。妊娠率妊娠率 目前为25%35%。随着对影响妊娠成功因素的深入研究和相应技术环节的改进,预期IVF-ET妊娠率还会提高。三、卵泡浆内单精子显微注射(三、卵泡浆内单精子显微注射(ICSIICSI)这一技术是在针对男性精子数量不足,功能异常导致受精障碍所采取的体外受精的微滴法、透明带部分切除法及透明带下授精等方法基础上发展起来的。1992年Palerme等报道了用该技术授精的首例试管婴儿诞生。第二代试管婴儿 操作过程操作过程 选择一个形态正常,缓慢运动的精子先予以制动 注射针挤压精子尾部,稍微擦破细胞质膜,诱导精子从擦破点释放精子细胞质体因子激活卵细胞 按尾先头后的顺序吸精子放入注射针,
6、再通过显微操作,将精子注入卵胞浆内,即完成受精 适应证适应证 严重少、弱畸精症 输精管阻塞 先天性双侧输精管缺如 输精管结扎后子女伤亡 吻合输精管失败或无法吻合者 精道不通的患者可进行附睾穿刺,如吸出物中无精子,则从睾丸取活组织分离精子,或取精细胞激活后使用 四、胚胎植入前遗传学诊断(四、胚胎植入前遗传学诊断(PGDPGD)胚胎植入前遗传学诊断(Preimplantation genetic diagnosis)也称第三代试管婴儿,指在IVF-ET的胚胎移植前,取胚胎的遗传物质进行分析,诊断是否有异常,筛选健康胚胎移植,防止遗传病传递的方法.检测方法检测方法 聚合酶链反应(PCR)检测男女性别和单基因遗传病 荧光原位杂交(FISH)检测性别和染色体病 前前 景景 理论上讲,凡能诊断的遗传病,应该都能通过PGD防止其传递,但限于目前的技术条件,PGD的适应证还有一定的局限。但随着分子生物技术的发展和更多遗传病基因被确定,一些准确、安全的遗传诊断技术会不断出现,PGD技术会日趋完善。