1、临床免疫学检查临床免疫学检查 上海交通大学医学院季育华 教授所有抗体都是免疫球蛋白,所有抗体都是免疫球蛋白,但免疫球蛋白不都是抗体。但免疫球蛋白不都是抗体。(Precipitation(PrecipitationReaction)Reaction)(In fluid phase)(In fluid phase)(In agar)(In agar)l (ringring、immune-turbidityimmune-turbidity、et alet al)(diffusiondiffusion)(electrophoresiselectrophoresis)AgAgAbAb环环状状沉沉淀淀试试
2、验验 透射免疫比浊:透射免疫比浊:(turbidimetryturbidimetry)在直射角度上测定光在直射角度上测定光的透射强度,以吸收的透射强度,以吸收光单位(光单位(A A)表示,)表示,A A值与复合物量呈正值与复合物量呈正比。比。(nephelometrynephelometry)在光路的在光路的5 5-95-95角的方向上测量角的方向上测量散射光散射光强度强度和被测溶液中微粒浓度关系的一种方法。和被测溶液中微粒浓度关系的一种方法。散射光散射光:一定波长的光线沿水平轴通过复合物:一定波长的光线沿水平轴通过复合物的混合液时导致光散射,散射光的强度与复合物的混合液时导致光散射,散射光的
3、强度与复合物量呈正比。量呈正比。测定抗原抗体反应达平衡时测定抗原抗体反应达平衡时,终点(,终点(endend)测定单位时间内抗原抗体形成最大量时测定单位时间内抗原抗体形成最大量时,速速 率(率(raterate)操作:待检血清操作:待检血清 +抗血清抗血清IgG IgA IgM 链链 链链 I抗原抗体对应沉淀抗原抗体对应沉淀并被固定,染色等并被固定,染色等结果结果(result)(result):正常参考值范围正常参考值范围 Et 64.4Et 64.46.7%6.7%Ea 20%Ea 20%40%40%流式细胞术流式细胞术(flowcytometry,FCMflowcytometry,FCM
4、):CDCD3 3+T+T细胞细胞 616185%85%;CDCD4 4+T+T细胞细胞 282858%58%;CDCD8 8+T+T细胞细胞 191948%48%;CD4+/CD8+TCD4+/CD8+T细胞细胞比值比值 1.661.660.33(0.33(1)1)。Lymphocyte transformation(%)Lymphocyte transformation(%)=(transferred lymphocyte)=(transferred lymphocyte)200200100%100%Reference value:Reference value:70%70%Stimula
5、ting index(SI)Stimulating index(SI)=mean CPM of the stimulated cells/=mean CPM of the stimulated cells/mean CPM of the corresponding control mean CPM of the corresponding control Cells(unstimulatedCells(unstimulated=control)=control)斑点计数,数据分析斑点计数,数据分析阳性阳性阴性阴性检测模式和结果示意图检测模式和结果示意图 细胞因子细胞因子(cytokines):(cytokines):由活化的免疫细胞和某些基质细胞分泌由活化的免疫细胞和某些基质细胞分泌的,介导和调节免疫、炎症反应的小分的,介导和调节免疫、炎症反应的小分子多肽。细胞因子少入血,检测局部含子多肽。细胞因子少入血,检测局部含量有意义;量有意义;细胞因子具网络特性,联细胞因子具网络特性,联合检测多信息分析有意义。合检测多信息分析有意义。