1、 原理原理 以电位法测定土壤悬液以电位法测定土壤悬液pHpH，通常用，通常用pHpH玻璃玻璃电极为指示电极，甘汞电极为参比电极电极为指示电极，甘汞电极为参比电极（本实验所用的复合电极为玻璃电极和参（本实验所用的复合电极为玻璃电极和参比电极的合二为一）。在溶液中二电极构比电极的合二为一）。在溶液中二电极构成一电池反应，产生电位差，电位差之大成一电池反应，产生电位差，电位差之大小取决于待测液的小取决于待测液的H H+离子活度或其负对数离子活度或其负对数pHpH。根据此原理，可用电位计测定电动势。再根据此原理，可用电位计测定电动势。再换算成换算成pHpH。材料材料 酸度计、烧杯、玻璃棒，标准缓冲溶液
2、（酸度计、烧杯、玻璃棒，标准缓冲溶液（pH6.86pH6.86缓冲溶液、缓冲溶液、酸性溶液、碱性溶液）。酸性溶液、碱性溶液）。步骤步骤 进行单点校正或斜率矫正。进行单点校正或斜率矫正。称取通过称取通过1mm1mm筛孔的风干土筛孔的风干土1010克，放在克，放在50ml50ml的烧杯中，加的烧杯中，加去离子水各去离子水各25ml(25ml(此时土水比为此时土水比为1:2.5)1:2.5)，间歇搅拌或摇动，间歇搅拌或摇动3030分钟，放置分钟，放置3030分钟后用酸度计测定。分钟后用酸度计测定。注意：注意：1 1、土水比的影响：一般土壤悬液愈稀，测得的、土水比的影响：一般土壤悬液愈稀，测得的pHp
3、H愈高，尤以碱性土的稀释效应较大。为了便于比较，测定愈高，尤以碱性土的稀释效应较大。为了便于比较，测定pHpH的土水比应当固定（本实验为的土水比应当固定（本实验为1 1：2.52.5）。）。2 2、蒸馏水中、蒸馏水中C0C02 2会影响土壤会影响土壤pHpH，导致其偏低，故应，导致其偏低，故应尽量除去，减少干扰。尽量除去，减少干扰。3 3、土样不宜磨得太细，宜过、土样不宜磨得太细，宜过1mm1mm筛孔。筛孔。4 4、一般为、一般为KClKCl饱和溶液灌注甘汞电极，应该保持溶饱和溶液灌注甘汞电极，应该保持溶液的饱和状态液的饱和状态(可适时添加可适时添加KClKCl)。测定土壤含水量（野外实际含水
4、量、吸湿测定土壤含水量（野外实际含水量、吸湿水含量）水含量）实验步骤实验步骤 选取具有代表性的风干土壤样品，压碎、通过选取具有代表性的风干土壤样品，压碎、通过1mm1mm筛，混筛，混合均匀后备用合均匀后备用(若测定野外土壤实际含水量则用当时采集若测定野外土壤实际含水量则用当时采集的土壤样品的土壤样品)。取铝盒在取铝盒在105105度恒温箱中烘烤度恒温箱中烘烤2 2小时，移入干燥器内冷却至小时，移入干燥器内冷却至室温，称重，精确至室温，称重，精确至0.0010.001克，克，用角勺将风干土样用角勺将风干土样(若测定野外土壤实际含水量则用当时若测定野外土壤实际含水量则用当时采集的土壤样品采集的土壤
5、样品)混匀，舀取约混匀，舀取约5 5克，均匀地平铺在铝盒中，克，均匀地平铺在铝盒中，盖好，称重。盖好，称重。将铝盒盖子揭开，放在盒底下，置于已经预热至将铝盒盖子揭开，放在盒底下，置于已经预热至105105度的度的烘箱中烘烤烘箱中烘烤8 8小时，在干燥器中冷却至室温，立即称重。小时，在干燥器中冷却至室温，立即称重。风干土样风干土样(若测定野外土壤实际含水量则用当时采集的土若测定野外土壤实际含水量则用当时采集的土壤样品壤样品)的水分测定应该做两个平行测定。的水分测定应该做两个平行测定。结果计算：吸湿水含量（结果计算：吸湿水含量（oror野外土壤实际含水量）（野外土壤实际含水量）（%）=（烘干前铝盒
6、及土样质量（烘干前铝盒及土样质量-烘干后铝盒及土样质量）烘干后铝盒及土样质量）/（烘（烘干后铝盒及土样质量干后铝盒及土样质量-烘干空铝盒质量）烘干空铝盒质量）*100100植物叶面积指数（植物叶面积指数（LAILAI）测定）测定原理原理 植物光合作用与其叶片面积有密切关系，通常，植物光合作用与其叶片面积有密切关系，通常，衡量一种植物群体叶面积的大小，用叶面积指数衡量一种植物群体叶面积的大小，用叶面积指数来表示。来表示。叶面积指数（叶面积指数（LAILAI）=叶片面积叶片面积/所选择的样方面所选择的样方面积积 叶面积指数越大，表明单位样方土地面积上的叶叶面积指数越大，表明单位样方土地面积上的叶面
7、积越大。面积越大。材料材料 尺、叶面积测定仪、求积仪、记录表格、鼓风干尺、叶面积测定仪、求积仪、记录表格、鼓风干燥箱、天平、干燥器、螺旋测微尺和织物测厚器燥箱、天平、干燥器、螺旋测微尺和织物测厚器 步骤步骤 1 1、纸样称重比例法：将各点取样叶片（除未展开、纸样称重比例法：将各点取样叶片（除未展开的和黄叶外）依次每个叶片平铺在厚薄均匀的纸的和黄叶外）依次每个叶片平铺在厚薄均匀的纸上（纸的均匀程度可预先剪同等大小的纸片称重上（纸的均匀程度可预先剪同等大小的纸片称重测定），用铅笔沿叶缘描下，然后用剪刀按铅笔测定），用铅笔沿叶缘描下，然后用剪刀按铅笔所画叶形剪下。测定质量得所画叶形剪下。测定质量得m
8、1m1，另取已测知面积，另取已测知面积为为a1a1的纸，称重得的纸，称重得m2m2，则按照比例可求得叶面积，则按照比例可求得叶面积a2a2为：为：a2=a1a2=a1*m1/m2 m1/m2 2 2、比叶重法：、比叶重法：鲜重法：将取样的全部叶片鲜样称质量，再选取其中鲜重法：将取样的全部叶片鲜样称质量，再选取其中大、小两个类型的叶片各大、小两个类型的叶片各1010片，叠集起来，分别用二片，叠集起来，分别用二种规格的已知面积纸板（或种规格的已知面积纸板（或PVCPVC板、木板），压在叠板、木板），压在叠好的叶片上，用刀片小心沿纸板边缘切割，把切下的好的叶片上，用刀片小心沿纸板边缘切割，把切下的一
9、定面积的样品在天平上称质量。或者用已知面积的一定面积的样品在天平上称质量。或者用已知面积的打孔器打孔后，将期打孔圆称重。经过计算得出比叶打孔器打孔后，将期打孔圆称重。经过计算得出比叶重值，两个值平均后得平均比叶重。重值，两个值平均后得平均比叶重。叶面积指数（叶面积指数（LAILAI）=（取样点鲜叶质量（取样点鲜叶质量/平均比叶重）平均比叶重）/取样样方面积取样样方面积 如果面积单位为平方厘米则需要转化为平方米。如果面积单位为平方厘米则需要转化为平方米。干重法：按上述方法将切割后已知面积的叶片及其余干重法：按上述方法将切割后已知面积的叶片及其余叶片，测定干重，求出平均比叶重叶片，测定干重，求出平
10、均比叶重,再求出其取样点再求出其取样点的叶面积。的叶面积。3 3、叶面积仪测定法、叶面积仪测定法 光电面积测定仪（进口）的原理为：当均匀光源照叶光电面积测定仪（进口）的原理为：当均匀光源照叶面积仪的磨砂玻璃时，由于漫反射，而使其成为一均面积仪的磨砂玻璃时，由于漫反射，而使其成为一均匀散亮面，这一均匀亮面经透镜成像于光电池上，使匀散亮面，这一均匀亮面经透镜成像于光电池上，使光电池产生电流，经放大后由电流指示，若将被测叶光电池产生电流，经放大后由电流指示，若将被测叶片放在均匀亮面上，则亮面面积相应减少，光电池上片放在均匀亮面上，则亮面面积相应减少，光电池上产生的电流也相应减小。产生的电流也相应减小
11、。仪器接通电源开机后先预热，选择测量叶面积模式，仪器接通电源开机后先预热，选择测量叶面积模式，将被测叶片夹入有机玻璃夹内，插入磨砂玻璃亮面板将被测叶片夹入有机玻璃夹内，插入磨砂玻璃亮面板下，即可在液晶显示面板上直接读出叶面积值、叶长、下，即可在液晶显示面板上直接读出叶面积值、叶长、叶宽。如果叶片面积过长，可先剪切，然后再分开测叶宽。如果叶片面积过长，可先剪切，然后再分开测定。定。4、求积仪法、求积仪法叶片在纸上描下叶形，用求积仪测定面积，叶片在纸上描下叶形，用求积仪测定面积，仪器尖从某个标记点开始，沿叶缘描一圈，仪器尖从某个标记点开始，沿叶缘描一圈，仍回到原来起点，记读数，每片叶测定两仍回到原
12、来起点，记读数，每片叶测定两次，在允许误差范围内的两次读数，取平次，在允许误差范围内的两次读数，取平均值，即为该叶片的叶面积值。均值，即为该叶片的叶面积值。5 5、长、长宽积宽积系数法：系数法：长长宽的积，常比实际上的叶面积为大，宽的积，常比实际上的叶面积为大，因些要有一个较正系数。对于一些植物，因些要有一个较正系数。对于一些植物，有一些经验系数，比如冬小麦取为有一些经验系数，比如冬小麦取为0.830.83，校正系数也可以用其他方法求出（如利用校正系数也可以用其他方法求出（如利用求积仪或面积仪求得）。求积仪或面积仪求得）。不同植物叶片或不同时期不同部位叶片的不同植物叶片或不同时期不同部位叶片的
13、校正系数可能不同，往往要先求出该种植校正系数可能不同，往往要先求出该种植物叶面积的校正系数。物叶面积的校正系数。6 6、冠层分析仪法、冠层分析仪法 冠层分析仪器（冠层分析仪器（LI-2000LI-2000）可用于野外条件下）可用于野外条件下植物群体叶面积指数的测定。植物冠层分析植物群体叶面积指数的测定。植物冠层分析仪是通过菜单操作的线性光合有效辐射测量仪是通过菜单操作的线性光合有效辐射测量仪，用于测量植物冠层中光线的拦截，它能仪，用于测量植物冠层中光线的拦截，它能快速实时测量有效光合辐射快速实时测量有效光合辐射PARPAR值，同时计算值，同时计算冠层的叶面积指数冠层的叶面积指数LAILAI值。
14、仪器外置的值。仪器外置的PARPAR传传感器，可测量上、下冠层的感器，可测量上、下冠层的PARPAR值。在实际野值。在实际野外条件下，将样地中多点测定的结果取平均，外条件下，将样地中多点测定的结果取平均，得到得到LAILAI数值。数值。此法优点：简单快速，接近野外实际条件；此法优点：简单快速，接近野外实际条件；缺点：与叶片直接测量法测定的结果有一定缺点：与叶片直接测量法测定的结果有一定差别。差别。干湿球温度计的使用、植物群落调查方法干湿球温度计的使用、植物群落调查方法 干湿温度表的使用干湿温度表的使用 干湿球温度表由两支完全相同的温度表组成，一支干湿球温度表由两支完全相同的温度表组成，一支球部
15、包有湿纱布成为湿球，另一个称为干球。由于球部包有湿纱布成为湿球，另一个称为干球。由于纱布上的水分不断蒸发，消耗的潜热使湿球及其附纱布上的水分不断蒸发，消耗的潜热使湿球及其附近的薄层空气降温。另一方面湿球与流经其周围的近的薄层空气降温。另一方面湿球与流经其周围的空气发生热量交换，当湿球因蒸发而散失的热量与空气发生热量交换，当湿球因蒸发而散失的热量与周围空气中获得的热量相平衡时，湿球温度维持稳周围空气中获得的热量相平衡时，湿球温度维持稳定，干湿球产生温差，通过温差测得空气湿度的大定，干湿球产生温差，通过温差测得空气湿度的大小。小。使用步骤：加水，湿润湿球使用步骤：加水，湿润湿球待干球、湿球温度读待
16、干球、湿球温度读数稳定数稳定读取干球、湿球温度读取干球、湿球温度根据干湿球温度差根据干湿球温度差及干球（湿球）温度查表可得空气湿度的数值。及干球（湿球）温度查表可得空气湿度的数值。植物生态学野外调查方法植物生态学野外调查方法 法国生态学工作者提出巢式样方法。即在研究法国生态学工作者提出巢式样方法。即在研究样本植物类型的植物种类特征时，所用样方面样本植物类型的植物种类特征时，所用样方面积最初为积最初为1/64 m1/64 m2 2，之后依次为，之后依次为1/321/32，1/161/16，1/81/8，1/41/4，1/21/2，1 1，2 2，4 4，8 8，1616，3232，6464，12
17、8128，256256，512 m512 m2 2，依次记录相应面积中物种，依次记录相应面积中物种的数量。把含样地总种数的数量。把含样地总种数84%84%的面积作为群落的面积作为群落最小面积。针对不同的群落类型，巢式样方起最小面积。针对不同的群落类型，巢式样方起始面积和面积扩大的级数有所不同。将巢式样始面积和面积扩大的级数有所不同。将巢式样方法获得的结果，在坐标纸上以面积为横坐标、方法获得的结果，在坐标纸上以面积为横坐标、种类数目为纵坐标作图，可以获得群落最小面种类数目为纵坐标作图，可以获得群落最小面积。积。植物硝态氮含量的测定植物硝态氮含量的测定原理原理在浓酸条件下，硝酸根与水杨酸反应，生成
18、硝基水杨在浓酸条件下，硝酸根与水杨酸反应，生成硝基水杨酸，硝基水杨酸在碱性条件下（酸，硝基水杨酸在碱性条件下（pH12pH12）呈黄色，在）呈黄色，在一定范围内，其颜色深浅与含量成正比，可直接比色一定范围内，其颜色深浅与含量成正比，可直接比色测定。测定。材料材料 722722型分光光度计、天平（型分光光度计、天平（0.00010.0001）、试管、吸管、）、试管、吸管、容量瓶、小漏斗、玻棒、吸耳球、电炉、铝锅、玻璃容量瓶、小漏斗、玻棒、吸耳球、电炉、铝锅、玻璃塞、定量滤纸塞、定量滤纸 500ppm500ppm硝酸根标准溶液：精确称取烘至恒重的硝酸钾硝酸根标准溶液：精确称取烘至恒重的硝酸钾0.7
19、2210.7221克溶于无离水中，定容至克溶于无离水中，定容至200ml200ml。5%5%水杨酸一硫酸溶液：称取水杨酸一硫酸溶液：称取5 5克水杨酸溶于克水杨酸溶于100ml100ml，浓，浓硫酸中（密度为硫酸中（密度为1.841.84），搅拌溶解，贮于棕色瓶。置），搅拌溶解，贮于棕色瓶。置冰箱保存一周有效。冰箱保存一周有效。8%8%氢氧化纳溶液：氢氧化纳溶液：80g80g氢氧化钠溶于氢氧化钠溶于1L1L蒸馏水中。蒸馏水中。步骤步骤标准曲线的制作标准曲线的制作 （1 1）吸取）吸取500ppm500ppm硝酸根标准液硝酸根标准液1 1、2 2、3 3、4 4、6 6、8 8、1010、12m
20、l12ml分分别放入别放入50ml50ml容量瓶中，用无离子定至刻度，使之成容量瓶中，用无离子定至刻度，使之成1010、2020、3030、4040、6060、8080、100100、120ppm120ppm的系列标准溶液。的系列标准溶液。（2 2）吸收上述系列标准溶液）吸收上述系列标准溶液0.11ml0.11ml，分别放入刻度试管中，以，分别放入刻度试管中，以0.11ml0.11ml无离子水代替标准溶液作空白，再分别加入无离子水代替标准溶液作空白，再分别加入0.4ml0.4ml水杨酸一硫水杨酸一硫酸溶液，摇匀，在室温下放置酸溶液，摇匀，在室温下放置2020分钟后再加入分钟后再加入8%NaOH
21、8%NaOH溶液溶液9.51ml9.51ml摇摇匀冷却至室温，显色液总体积为匀冷却至室温，显色液总体积为101ml101ml。（3 3）以空白作参比，在）以空白作参比，在410nm410nm波长下测定吸光度。以波长下测定吸光度。以NO3-NNO3-N浓度浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。（2 2）吸取上述系列标准溶液）吸取上述系列标准溶液0.1ml0.1ml，分别放入刻度试管中，以，分别放入刻度试管中，以0.1ml0.1ml蒸馏水代替标准溶液作空白。再分别加入蒸馏水代替标准溶液作空白。再分别加入0.4ml 5%0.4ml 5%水杨酸水杨酸硫酸溶
22、液，硫酸溶液，摇匀，在室温下放置摇匀，在室温下放置20min20min后，再加入后，再加入8%NaOH8%NaOH溶液溶液9.5ml9.5ml，摇匀冷却，摇匀冷却至室温。显色液总体积为至室温。显色液总体积为10ml10ml。（3 3）以空白作参比，在）以空白作参比，在410 nm410 nm波长下测定光密度。以硝态氮浓度为波长下测定光密度。以硝态氮浓度为横坐标，光密度为纵坐标，绘制标准曲线并计算出回归方程。横坐标，光密度为纵坐标，绘制标准曲线并计算出回归方程。样品中硝酸盐的测定样品中硝酸盐的测定 （1 1）取一定量的植物材料剪碎混匀，用天平精确称）取一定量的植物材料剪碎混匀，用天平精确称取材料
23、取材料2g2g，重复三次，分别放入三支刻度试管中，各，重复三次，分别放入三支刻度试管中，各加入加入10ml10ml无离子水，用玻璃泡封口，置入沸水浴中提无离子水，用玻璃泡封口，置入沸水浴中提取取3030分钟，取出，以自来水冷却，将提取液过滤到分钟，取出，以自来水冷却，将提取液过滤到25ml25ml容量瓶中，并反复冲洗残渣，最后定容至刻度。容量瓶中，并反复冲洗残渣，最后定容至刻度。（2 2）吸取样品液）吸取样品液0.1ml0.1ml分别于三支刻度试管中，然后分别于三支刻度试管中，然后加入加入5%5%水杨酸水杨酸硫酸溶液硫酸溶液0.4ml0.4ml，混匀后置室温下，混匀后置室温下20min20mi
24、n，再慢慢加入，再慢慢加入9.5ml 8%NaOH9.5ml 8%NaOH溶液，待冷却至室溶液，待冷却至室温后，以空白作参比，在温后，以空白作参比，在410nm410nm波长下测其光密度。波长下测其光密度。在标准曲线上查得或用回归方程计算出硝态氮浓度，在标准曲线上查得或用回归方程计算出硝态氮浓度，再用以下公式计算其含量：再用以下公式计算其含量：硝态氮含量（硝态氮含量（ug/gug/g鲜重）鲜重）=（标准曲线上查得或标准曲线上查得或回归方程计算得到的硝态氮浓度回归方程计算得到的硝态氮浓度*（样品液（样品液总量总量/吸取样品液的量）吸取样品液的量）/样品鲜重样品鲜重土壤速效磷的测定土壤速效磷的测定
25、 材料材料塑料杯，振荡摇床，分光光度计塑料杯，振荡摇床，分光光度计无磷活性碳粉：如所用活性碳含磷，应先用无磷活性碳粉：如所用活性碳含磷，应先用1 1：1 1盐酸溶液浸泡盐酸溶液浸泡24h24h，然后移至，然后移至平板漏斗抽气过滤，用水淋洗到无平板漏斗抽气过滤，用水淋洗到无ClCl-为止（约为止（约4 45 5次），再用碳酸氢钠浸提次），再用碳酸氢钠浸提剂浸泡剂浸泡24h24h，在平板漏斗上抽气过滤用水洗尽碳酸氢钠，并至无磷为止，烘干，在平板漏斗上抽气过滤用水洗尽碳酸氢钠，并至无磷为止，烘干备用；备用；氢氧化钠溶液（氢氧化钠溶液（100g/L100g/L）；）；碳酸氢钠浸提剂；称取碳酸氢钠浸提剂
26、；称取42.0g42.0g碳酸氢钠碳酸氢钠(NaHCO(NaHCO3 3)溶于约溶于约950ml950ml水中，用水中，用100g100g L L-1-1氢氧化钠溶液调节氢氧化钠溶液调节pHpH至至8.58.5（用酸度计测定），用水稀释至（用酸度计测定），用水稀释至1L1L。贮。贮存于聚乙烯瓶或玻璃瓶中备用。如贮存期超过存于聚乙烯瓶或玻璃瓶中备用。如贮存期超过20d20d使用时须重新校正使用时须重新校正pHpH；酒石酸氧锑钾溶液：称取酒石酸氧锑钾溶液：称取0.3g0.3g酒石酸锑钾溶于水中，稀释至酒石酸锑钾溶于水中，稀释至100ml100ml；钼锑贮备液：称取钼锑贮备液：称取10.0g10.0
27、g钼酸铵溶于钼酸铵溶于300ml300ml约约6060水中，冷却。另取水中，冷却。另取181ml181ml浓浓硫酸缓缓注入硫酸缓缓注入800ml800ml水中，搅匀，冷却。然后将稀硫酸注入钼酸铵溶液中，搅水中，搅匀，冷却。然后将稀硫酸注入钼酸铵溶液中，搅匀，冷却。再加入匀，冷却。再加入100ml 3g100ml 3g L L-1-1酒石酸锑钾溶液，最后用水稀释至酒石酸锑钾溶液，最后用水稀释至2L2L，盛于，盛于棕色瓶中备用；棕色瓶中备用；钼锑抗显色剂：称取钼锑抗显色剂：称取0.5g0.5g抗坏血酸抗坏血酸(左旋）溶于左旋）溶于100mL100mL钼锑贮备液中。此溶液钼锑贮备液中。此溶液有效期不
28、长，应用时现配；有效期不长，应用时现配；磷标准贮备溶液：称取磷标准贮备溶液：称取105105烘干的磷酸二氢钾烘干的磷酸二氢钾(优级纯优级纯)0.4390g)0.4390g，用水溶解，用水溶解后，加入后，加入5mL5mL浓硫酸（浓硫酸（4.64.6），然后加水定容至），然后加水定容至1000mL1000mL，该溶液放入冰箱可供，该溶液放入冰箱可供长期使用；长期使用；磷标准溶液：吸取磷标准溶液：吸取5.00ml5.00ml磷标准贮备溶液于磷标准贮备溶液于100ml100ml容量瓶中，定容。该溶液容量瓶中，定容。该溶液用时现配。用时现配。步骤步骤 称取通过称取通过2mm2mm孔径筛的风干土样孔径筛的
29、风干土样2.50g2.50g，置于干燥的，置于干燥的200mL200mL塑料塑料瓶中，加入约瓶中，加入约1g1g无磷活性碳，加入无磷活性碳，加入252511的碳酸氢钠浸提剂的碳酸氢钠浸提剂50.0mL50.0mL，摇匀，在，摇匀，在252511的温度下，于振荡器上用振荡的温度下，于振荡器上用振荡30min30min，用无磷滤纸过滤入于干燥的用无磷滤纸过滤入于干燥的150mL150mL三角瓶。三角瓶。吸取滤液吸取滤液10.00mL10.00mL于于25mL25mL比色管中，加入显色剂比色管中，加入显色剂5.00mL5.00mL，慢慢，慢慢摇动，排出摇动，排出COCO2 2后加水定容至刻度，充分摇
30、匀。在室温高于后加水定容至刻度，充分摇匀。在室温高于2020处放置处放置30min30min，用空白溶液（以，用空白溶液（以10.00mL10.00mL碳酸氢钠浸提剂代碳酸氢钠浸提剂代替土壤浸提液，同上处理）为参比，用替土壤浸提液，同上处理）为参比，用1ml1ml光径比色皿在波长光径比色皿在波长700nm700nm处比色，测量吸光度。处比色，测量吸光度。标准曲线绘制：吸取磷标准溶液标准曲线绘制：吸取磷标准溶液(P(P)=5ug)=5ug ml ml-1-100、0.500.50、1.001.00、1.501.50、2.002.00、2.502.50、3.00ml3.00ml于于25ml25ml
31、比色管中，加入浸提比色管中，加入浸提剂剂10.00ml10.00ml，显色剂，显色剂5ml5ml，慢慢摇动，排出，慢慢摇动，排出COCO2 2后加水定容至刻后加水定容至刻度。此标准系列溶液中磷的浓度依次为度。此标准系列溶液中磷的浓度依次为0.000.00、0.100.10、0.200.20、0.300.30、0.400.40、0.500.50、0.60ug0.60ug ml-1 ml-1。在室温高于。在室温高于2020处放置处放置30min30min后，按上述样品待测液分步骤、条件进行比色，测量吸后，按上述样品待测液分步骤、条件进行比色，测量吸光度，绘制标准曲线或回归方程。光度，绘制标准曲线或
32、回归方程。土壤速效土壤速效P P（mg/kgmg/kg）=比色液（比色液（mg/Lmg/L）定容体积定容体积/W/W分取倍分取倍数数植株全氮测定植株全氮测定 材料材料 40%(m/v)NaOH40%(m/v)NaOH溶液溶液 2%H3BO32%H3BO3指示剂溶液指示剂溶液 标准溶液标准溶液C(HClC(HCl或或1/2H1/2H2 2SOSO4 4)=0.01mol/L)=0.01mol/L 碱性溶液（碱性溶液（NaOHNaOH）步骤步骤(1)(1)蒸馏法：吸取定容后的消煮液蒸馏法：吸取定容后的消煮液5.005.0010.00ml(V210.00ml(V2，含，含NHNH4 4N N约约1m
33、l)1ml)，注入半微量蒸馏器的内室，另取，注入半微量蒸馏器的内室，另取150ml150ml三角瓶，内加入三角瓶，内加入5ml2%H5ml2%H3 3BOBO3 3指示剂溶液，放在冷凝管下端，管口置于指示剂溶液，放在冷凝管下端，管口置于H H3 3BOBO3 3液面液面以下，然后向蒸馏器内室慢慢加入约以下，然后向蒸馏器内室慢慢加入约3ml40%(m/v)NaOH3ml40%(m/v)NaOH溶液，通溶液，通入蒸气蒸馏，入蒸气蒸馏，(注意开放冷凝水，勿使馏出液的温度超过注意开放冷凝水，勿使馏出液的温度超过40)40)待馏出液体积约达待馏出液体积约达505060ml60ml时，停止蒸馏，用少量已调
34、节至时，停止蒸馏，用少量已调节至pHpH为为4.54.5的水冲洗冷凝管末端。用酸标准溶液滴定馏出液至由蓝绿的水冲洗冷凝管末端。用酸标准溶液滴定馏出液至由蓝绿色突变为紫红色色突变为紫红色(终点的颜色应和空白测定的终点相同终点的颜色应和空白测定的终点相同)。用酸。用酸标准溶液，同时进行空白液的蒸馏测定，以校正试剂和滴定误标准溶液，同时进行空白液的蒸馏测定，以校正试剂和滴定误差。差。(2)(2)扩散法：吸取定容后的消煮液扩散法：吸取定容后的消煮液200200500ml(V2500ml(V2，含，含NHNH4 4N0.05N0.050.5mg)0.5mg)于于1010厘米的扩散皿外室。内室加入厘米的扩
35、散皿外室。内室加入2%H2%H3 3BOBO3 3指示指示剂溶液剂溶液3ml3ml，进行扩散和滴定，中和，进行扩散和滴定，中和H H2 2SOSO4 4需用需用40%NaOH40%NaOH溶液溶液2ml2ml，扩散可在室温下进行，室温在扩散可在室温下进行，室温在2020以上时，放置约以上时，放置约24h24h，低于，低于2020时，须放置较长时间。在扩散期间，可将扩散皿内容物小时，须放置较长时间。在扩散期间，可将扩散皿内容物小心转动混匀心转动混匀2 23 3次，加速扩散，可缩短扩散时间。在测定样品次，加速扩散，可缩短扩散时间。在测定样品的同时，须在同一条件下做空白试验。的同时，须在同一条件下做空白试验。结果计算结果计算 全全N%=C(v-v0)N%=C(v-v0)0.0410.041100/(m100/(mv2/v1)v2/v1)C C酸标准溶液浓度，酸标准溶液浓度，mol/Lmol/L；v v滴定试样所用的酸标准液，滴定试样所用的酸标准液，mlml；v0v0滴定空白所用的酸标准液，滴定空白所用的酸标准液，mlml；0.0410.041N N的毫摩尔质量，的毫摩尔质量，g/mmolg/mmol；m m称样量，称样量，g g；v1v1消煮液定容体积，消煮液定容体积，mlml；v2v2吸取测定的消煮液体积吸取测定的消煮液体积mlml。
