1、生化检验常见问题及处理方法生化检验常见问题及处理方法黑龙江中医药大学附属第一医院黑龙江中医药大学附属第一医院艾民艾民1ppt课件病病人人准准备备标标本本核核收收标本标本分发分发与处与处理理分分析析测测定定结结果果报报告告结结果果发发布布检检验验后后标标本本的的保保存存检检验验后后废废弃弃物物处处理理检检验验申申请请标标本本采采集集标标本本运运输输与与保保存存检验前过程检验过程检验后过程生化检验的操作流程生化检验的操作流程 2ppt课件生化检验常见的问题生化检验常见的问题一、检验前常见问题一、检验前常见问题1 1、患者的准备问题；、患者的准备问题；2 2、标本的采集、运输、验收等问题。、标本的采
2、集、运输、验收等问题。二、二、检验过程常见问题检验过程常见问题1 1、标本处理问题；、标本处理问题；2 2、水质问题；、水质问题；3 3、交叉污染问题；、交叉污染问题；4 4、校准问题；、校准问题；5 5、试剂问题；、试剂问题；6 6、仪器问题；、仪器问题；7 7、参数问题；、参数问题；8 8、质控问题、质控问题 9 9、干扰物质、干扰物质三、检验后常见问题三、检验后常见问题1 1、检验报告基本信息问题；、检验报告基本信息问题；2 2、检验报告签发问题。、检验报告签发问题。3ppt课件 一、检验前常见问题及处理一、检验前常见问题及处理4ppt课件 检验前的质量管理是检验质量管理中最薄弱、检验前
3、的质量管理是检验质量管理中最薄弱、最易出现问题、最难控制的环节，标本质量不符合最易出现问题、最难控制的环节，标本质量不符合要求占要求占60%-80%60%-80%。按时间顺序包括：按时间顺序包括：检验申请检验申请 患者准备患者准备和识别和识别 原始样本采集、运送原始样本采集、运送和实验室内传递。和实验室内传递。5ppt课件检验前常见问题及处理检验前常见问题及处理1 1、患者的准备的常见问题及处理、患者的准备的常见问题及处理:（1 1）饮食）饮食：餐后、饮料、烟酒等，：餐后、饮料、烟酒等，影响患者的检测影响患者的检测结果。结果。处理方法：处理方法：患者空腹（患者空腹（8-128-12小时）。小时
4、）。（2 2）药物等其他因素的影响）药物等其他因素的影响:如含如含VCVC、抗肿瘤药物、抗肿瘤药物、降脂药物、输液等。降脂药物、输液等。处理方法：处理方法：尽量停止使用药物。超过药物的半衰期。尽量停止使用药物。超过药物的半衰期。6ppt课件（3 3）运动：剧烈的运动可使血中的一些酶类、离子等结果发生变化。）运动：剧烈的运动可使血中的一些酶类、离子等结果发生变化。处理方法：处理方法：检查前一天不要做剧烈运动。短期休息，平稳检查前一天不要做剧烈运动。短期休息，平稳1010分钟以上。分钟以上。（4 4）情绪：情绪激动，影响神经内分泌系统，使一些检验结果偏高。）情绪：情绪激动，影响神经内分泌系统，使一
5、些检验结果偏高。（5 5）体位：从立位到卧位使一些结果下降。）体位：从立位到卧位使一些结果下降。（6 6）特定时间采血：因人体生物节律的变化，不同时间采血检验结果）特定时间采血：因人体生物节律的变化，不同时间采血检验结果也会随着变化。如激素、糖耐量等。也会随着变化。如激素、糖耐量等。7ppt课件检验前常见问题及处理检验前常见问题及处理2 2、标本的采集、运输、验收等问题及处理。、标本的采集、运输、验收等问题及处理。（1 1）标本的采集：标本的采集：止血带压迫时间过长、标本混有气泡、止血带压迫时间过长、标本混有气泡、溶血、污染、输液时采血、标本量不足等。溶血、污染、输液时采血、标本量不足等。（2
6、 2）标本运输：时间过长、过度震荡、污染、高温变质、标本运输：时间过长、过度震荡、污染、高温变质、冷冻溶血、冷冻溶血、阳光照射等。阳光照射等。处理方法：处理方法：及时送检、用标本转运箱，外委标本要求要严及时送检、用标本转运箱，外委标本要求要严格避免上述情况。格避免上述情况。8ppt课件（3 3）标本验收：标本错误、标本外观溶血、脂血、）标本验收：标本错误、标本外观溶血、脂血、样本留取时间过长等。样本留取时间过长等。处理方法：处理方法：严格核对标本、拒收严重溶血、脂血、严格核对标本、拒收严重溶血、脂血、标本不足标本不足留取留取时间过长的标本。时间过长的标本。9ppt课件 二、检验过程常见问题二、
7、检验过程常见问题10ppt课件检验过程有三种说法：检验过程有三种说法：实验室接收标本开始，直至获得检测结果的过程。实验室接收标本开始，直至获得检测结果的过程。自仪器检测开始至获得检测结果。自仪器检测开始至获得检测结果。标本开始处理至标本开始处理至获得检测结果。获得检测结果。11ppt课件 基本概念基本概念检测系统：一个检验项目所涉的检测系统：一个检验项目所涉的仪器、试剂、校准品、仪器、试剂、校准品、测量程序测量程序（操作程序、质控程序、维护保养程序、检测（操作程序、质控程序、维护保养程序、检测用水）用水）、操作人员、消耗品、质控品、操作人员、消耗品、质控品等组合。等组合。12ppt课件量值溯源
8、：是通过一条具有规定不确定度的不间断的量值溯源：是通过一条具有规定不确定度的不间断的比较链，使测量结果能够与规定的参考标准联系起来比较链，使测量结果能够与规定的参考标准联系起来的一种特性。的一种特性。（通常是国家计量基准或国际计量基准）（通常是国家计量基准或国际计量基准）13ppt课件基质效应：处于分析物周围的基质（粘度、表面张基质效应：处于分析物周围的基质（粘度、表面张力、离子强度等）对分析物测定结果的影响。力、离子强度等）对分析物测定结果的影响。摩尔消光系数摩尔消光系数(?)：在特定条件下，一定波长的光，：在特定条件下，一定波长的光，光径光径1cm1cm时，通过所含吸光物质的浓度为时，通过
9、所含吸光物质的浓度为1mol/L1mol/L时时的吸光度。的吸光度。14ppt课件自动化分析仪概述自动化分析仪概述:15ppt课件16ppt课件计算机进行计算计算机进行计算按仪器设定标准曲线按仪器设定标准曲线打印机打印结果打印机打印结果比色杯比色杯光电感应器检测光电感应器检测吸光度变化吸光度变化样样本本比色杯比色杯试试剂剂1比色杯比色杯搅搅拌拌混匀混匀试试剂剂2比色杯比色杯比色杯比色杯搅搅拌拌反应反应比比色色传传输输传输传输人人工工编编程程机机械械臂臂代代替替手手工工17ppt课件18ppt课件定标方法定标方法u对于终点法和两点速率法，必须通过使用标准液，对于终点法和两点速率法，必须通过使用标
10、准液，建立一条标准曲线。建立一条标准曲线。u速率法检测的酶类可以采用理论因数法（速率法检测的酶类可以采用理论因数法（K K因数），因数），但多数但多数实验室对酶类（速率法）测试采用标准液实验室对酶类（速率法）测试采用标准液校正校正FactorFactor的方式，以消除仪器和试剂的系统误的方式，以消除仪器和试剂的系统误差。差。19ppt课件u2 2点定标点定标p 两点定标：以水作为零点，标准液作为另一点，两点定标：以水作为零点，标准液作为另一点，建立标准曲线。建立标准曲线。p 对于一些特殊试剂如：对于一些特殊试剂如：K K，NaNa，CLCL，因线性范围，因线性范围限制等，一般不以水作为零点，采
11、用定值的高、限制等，一般不以水作为零点，采用定值的高、低两个标准液，建立标准曲线。低两个标准液，建立标准曲线。20ppt课件u多点定标多点定标p 多点定标：采用两个以上的标准液来建立一条多点定标：采用两个以上的标准液来建立一条标准曲线。该曲线的特征一般为非线性，即吸标准曲线。该曲线的特征一般为非线性，即吸光度与浓度的变化不是直线关系。免疫比浊法光度与浓度的变化不是直线关系。免疫比浊法（胶乳增强）胶乳增强）测定的试剂，多为此方法。因为测定的试剂，多为此方法。因为抗原抗体反应形成的浊度的线性范围较窄。抗原抗体反应形成的浊度的线性范围较窄。21ppt课件生化试剂的分类生化试剂的分类 NAD NAD（
12、P P）H H系统指示反应系统指示反应 苯衍生物指示反应苯衍生物指示反应 H H2 2O O2 2偶联的指示系统偶联的指示系统 抗原抗体反应指示系统抗原抗体反应指示系统 其它显色反应其它显色反应22ppt课件NADNAD（P P）H H系统指示反应系统指示反应 NADHNADH和和NADPHNADPH在在340nm340nm有最有最 大吸收峰，而大吸收峰，而NADNAD+和和NADPNADP+在在 340nm340nm无吸收峰，利用其偶联的无吸收峰，利用其偶联的 脱氢酶脱氢酶(工具酶工具酶)反应，根据反应，根据 340nm340nm吸光度的变化，可以测定吸光度的变化，可以测定 物质的浓度或活性
13、。物质的浓度或活性。常见检验项目：常见检验项目：ALTALT、ASTAST、CKCK、LDHLDH、-HBDH-HBDH、UREAUREA、NHNH4 4+CO2CO2、GluGlu（己糖激酶法）等己糖激酶法）等 23ppt课件uNADNAD+-NADHNADH系统系统ALTALT（GPTGPT）的测定原理：）的测定原理：R1R1：NADH NADH、LDHLDH；R2R2：L-L-丙氨酸丙氨酸 、-酮戊二酸酮戊二酸 试剂试剂化学反应化学反应 ALTALTL-L-丙氨酸丙氨酸 +-+-酮戊二酸酮戊二酸 丙酮酸丙酮酸 +L-+L-谷氨酸谷氨酸 LDHLDH丙酮酸丙酮酸 +NADHNADH+H+H
14、+L-L-乳酸乳酸 +NADNAD+H+H2 2O O酸酸计算计算ALTALT(U/L)=(U/L)=A AR R min/min/A AS S min minC C=A AR R min minF F AR:AR:样本样本A A变化率变化率 ；ASAS：标准：标准A A变化率变化率 ;C C：标准品示值；：标准品示值；F:F:校准因素或用理论因素值（校准因素或用理论因素值（F F）（）（F F）=10=106 6/?TV/SVTV/SV 24ppt课件u苯衍生物指示反应苯衍生物指示反应如：如：p-NP(p-NP(磷酸对硝基苯酚磷酸对硝基苯酚）和）和p-NA(p-NA(硝基苯酚硝基苯酚)指示指
15、示系统：系统：p-NP p-NP和和p-NAp-NA在在405nm405nm有特征性吸收峰，根据有特征性吸收峰，根据405nm405nm吸光度的变化，可以测定物质的浓度或活性。吸光度的变化，可以测定物质的浓度或活性。临床项目有临床项目有ALPALP、r-GTr-GT、等。、等。25ppt课件ALPALP（AKPAKP）的测定原理）的测定原理试剂试剂R1R1：AMPAMP缓冲液缓冲液 、MgClMgCl2 2 ；R2R2：对硝基苯磷酸盐对硝基苯磷酸盐 化学反应化学反应 ALPALP磷酸对硝基苯酚磷酸对硝基苯酚+H H2 2O O 对硝基苯酚对硝基苯酚+磷酸盐磷酸盐 计算计算ALPALP(U/L)
16、=(U/L)=A AR R min/min/A AS S min minC C=A AR/R/minminF F26ppt课件uH H2 2O O2 2偶联的指示系统（偶联的指示系统（TrinderTrinder反应）反应）H H2 2O O2 2在过氧化物酶的作用下，可使无色色素在过氧化物酶的作用下，可使无色色素原氧化成有色的色素，导致某一波长吸光度的原氧化成有色的色素，导致某一波长吸光度的增加，因此可用来测定物质的浓度或活性。增加，因此可用来测定物质的浓度或活性。临床项目有临床项目有TCTC、TGTG、HDL-CHDL-C、LDL-CLDL-C、GluGlu（氧化酶法）氧化酶法）CrCr、
17、UAUA等。等。27ppt课件GLUGLU的测定原理的测定原理（氧化酶法氧化酶法 ）试剂试剂R1R1：4-4-氨基安替吡啉氨基安替吡啉 、抗坏血酸氧化酶、抗坏血酸氧化酶R2R2：葡萄糖氧化酶（葡萄糖氧化酶（GODGOD）、）、过氧化物酶（过氧化物酶（PODPOD）酚酚 化学反应化学反应 GODGOD 葡萄糖葡萄糖 +O O2 2+H+H2 2O O 葡萄糖酸葡萄糖酸 +H H2 2O O2 2计算计算 GLU(mmol/L)=A GLU(mmol/L)=AR R/A/AS SC C PODPOD2H2H2 2O O2 2+4-+4-氨基安替吡啉氨基安替吡啉+酚酚 醌亚胺醌亚胺 +4+4H H2
18、 2O O 28ppt课件抗原抗体反应指示系统抗原抗体反应指示系统 特异性抗体与抗原特异性抗体与抗原(待测物质待测物质)在相应的缓冲环境下反在相应的缓冲环境下反应生成抗原抗体复合物，形成一定的浊度，导致特定波应生成抗原抗体复合物，形成一定的浊度，导致特定波长透光率的改变。在抗体过剩的前提下，改变程度与抗长透光率的改变。在抗体过剩的前提下，改变程度与抗原浓度成正比原浓度成正比 临床项目有临床项目有apoAIapoAI、apoBapoB、Lp(a)Lp(a)、IgGIgG、IgAIgA、IgMIgM、C3C3、C4C4、CRPCRP等等29ppt课件 免疫透射比浊法，抗原抗体免疫复合物形成的浊度的
19、免疫透射比浊法，抗原抗体免疫复合物形成的浊度的大小在合适的抗体浓度下与抗原含量成正比大小在合适的抗体浓度下与抗原含量成正比试剂试剂R1R1:磷酸盐缓冲液、聚乙二醇、表面活性剂等磷酸盐缓冲液、聚乙二醇、表面活性剂等 R2R2（抗血清）抗血清）:羊抗人羊抗人apoAapoAl l或或apoapoB B 化学反应化学反应抗原抗原(血清中的血清中的apoAapoAl l或或apoapoB)+B)+抗体抗体(抗血清试剂抗血清试剂)缓冲环境缓冲环境 抗原抗体免疫复合物抗原抗体免疫复合物计算计算 吸光度吸光度-浓度曲线浓度曲线30ppt课件其它显色反应（其它显色反应（TPTP）测定原理：蛋白质中的肽键在碱性
20、溶液中能与铜离子测定原理：蛋白质中的肽键在碱性溶液中能与铜离子作用产生紫红色络合物，导致作用产生紫红色络合物，导致540540nmnm吸光度的增加，增加吸光度的增加，增加的程度与蛋白质的含量成正比。的程度与蛋白质的含量成正比。碱性条件碱性条件 酞键酞键 +CuCu2 2+紫红色络合物紫红色络合物 蛋白含量（蛋白含量（g/Lg/L）=A=AR R/A/AS S C=AC=AR RF F A AR R:测定吸光度；测定吸光度；A AS S：标准吸光度：标准吸光度 C C：标准值：标准值 F:F:仪器自动换算的因数仪器自动换算的因数31ppt课件其它显色反应（其它显色反应（CaCa2+2+）CaCa
21、2+2+测定原理：测定原理：甲基麝香草酚兰甲基麝香草酚兰(MTB)(MTB)在碱性条件下可与在碱性条件下可与CaCa2+2+形形成红色络合物，引起成红色络合物，引起612612nmnm吸光度的上升，上升程吸光度的上升，上升程度与度与CaCa浓度成正比浓度成正比 。碱性条件碱性条件 MTB+CaMTB+Ca2+2+红色络合物红色络合物32ppt课件二、检验过程常见问题及处理二、检验过程常见问题及处理1 1、标本处理问题及处理：、标本处理问题及处理：放置时间过长、离心不充分、血清剥离不当等。放置时间过长、离心不充分、血清剥离不当等。处理方法：处理方法：应在应在2h2h内分离血清内分离血清/血浆，尽
22、量缩短时间；血浆，尽量缩短时间；离心离心时间一般时间一般5-105-10分钟分钟/3000/3000转；转；新采集标本新采集标本应室温（应室温（22222525）放置）放置30306060分钟，使其自行分钟，使其自行凝集后离心。不能及时做的标本分离出血清，室凝集后离心。不能及时做的标本分离出血清，室温放置不超过温放置不超过4 4小时，小时，2-2-44保存不超过保存不超过8 8小时，在小时，在-20-20条件下可保存较长时间。条件下可保存较长时间。33ppt课件二、检验过程常见问题及处理二、检验过程常见问题及处理 2 2、水质问题及处理：、水质问题及处理：生化用水不合格。常影响血清中离子及其他
23、生化项目的检生化用水不合格。常影响血清中离子及其他生化项目的检测，常被忽略。测，常被忽略。处理方法：处理方法：纯水分级纯水分级(GB6682-2008(GB6682-2008水标准水标准)与应用领域与应用领域三级水：电阻率三级水：电阻率0.2M/cm0.2M/cm，主要用于冲洗玻璃器皿，水浴等；，主要用于冲洗玻璃器皿，水浴等；二级水：电阻率二级水：电阻率1M/cm1M/cm，用于制备常用试剂、缓冲液、仪器管道和比色杯清洗，用于制备常用试剂、缓冲液、仪器管道和比色杯清洗 等；等；一级水：电阻率一级水：电阻率18.25M/cm18.25M/cm，常用于，常用于HPLCHPLC、原子吸收、分子生物学
24、、细胞和细、原子吸收、分子生物学、细胞和细 菌培养等。菌培养等。生化用水：电阻率生化用水：电阻率2M/cm2M/cm ，细菌，细菌10clu/ml10clu/ml或或参考仪器说参考仪器说明书规定。明书规定。电导率电导率s/cms/cm（微西门子厘米）（微西门子厘米）1/1/电阻率。电阻率。34ppt课件二、检验过程常见问题及处理二、检验过程常见问题及处理3 3、交叉污染问题及处理：、交叉污染问题及处理：（1 1）样品针、试剂针、搅拌棒、反应杯、管路系统等清）样品针、试剂针、搅拌棒、反应杯、管路系统等清洗不干净，导致交叉污染。洗不干净，导致交叉污染。处理方法：处理方法：按仪器说明书要求进行保养、
25、按要求及时更换零部件按仪器说明书要求进行保养、按要求及时更换零部件定期对仪器校准。定期对仪器校准。如：每日用无水乙醇擦拭样品针、试剂如：每日用无水乙醇擦拭样品针、试剂针、搅拌棒，进行日保养、周保养、月保养、年保养等。针、搅拌棒，进行日保养、周保养、月保养、年保养等。35ppt课件（2 2）检验项目间的交叉污染）检验项目间的交叉污染 相邻检验项目的干扰，相邻检验项目的干扰，A A项目试剂或产物中含有项目试剂或产物中含有B B项目项目的测定物质或影响的测定物质或影响B B项目反应，而导致项目反应，而导致B B试验结果的改变。试验结果的改变。如：如：MgMg放在放在ALPALP项目后面测定，可能会使
26、检测结果偏高或重项目后面测定，可能会使检测结果偏高或重复性差。因复性差。因ALPALP试剂中含有试剂中含有MgclMgcl2 2，使测定结果偏高等。，使测定结果偏高等。处理方法：处理方法：调整实验的前后顺序来消除这种影响；调整实验的前后顺序来消除这种影响；在两个项目之间设定其他项目或设置清洗剂并设定清洗在两个项目之间设定其他项目或设置清洗剂并设定清洗次数。次数。36ppt课件二、检验过程常见问题及处理二、检验过程常见问题及处理4 4、校准问题及处理；、校准问题及处理；仪器不定期仪器校准、检测系统不校准、校准品失效或适用不当、仪器不定期仪器校准、检测系统不校准、校准品失效或适用不当、校准品不匹配
27、、更换试剂批号或仪器维修后不校准，导致结果不良。校准品不匹配、更换试剂批号或仪器维修后不校准，导致结果不良。校准的分类：校准的分类：p仪器校准仪器校准/产品校准：由仪器工程师在仪器安装使用后定期进行，主产品校准：由仪器工程师在仪器安装使用后定期进行，主要校准仪器的光路系统、温控系统、加注系统（样品针、试剂针位置）要校准仪器的光路系统、温控系统、加注系统（样品针、试剂针位置）等，通常是发给校准证书或校准报告。等，通常是发给校准证书或校准报告。p检测系统的校准检测系统的校准/功能校准：由检验人员使用校准物进行的分析校准。功能校准：由检验人员使用校准物进行的分析校准。37ppt课件处理方法：处理方法
28、：定期进行仪器校准，当仪器维修、生化试剂定期进行仪器校准，当仪器维修、生化试剂批号或质控出现异常时进行校准，正确选择批号或质控出现异常时进行校准，正确选择和使用校准品，（试剂生产厂家校准品），和使用校准品，（试剂生产厂家校准品），有良好的溯源性，注意质控品的分装和保存。有良好的溯源性，注意质控品的分装和保存。38ppt课件5 5、试剂常见问题及处理：、试剂常见问题及处理：（1 1）试剂质量问题：）试剂质量问题：（2 2）试剂是否在有效期内及开瓶稳定性：）试剂是否在有效期内及开瓶稳定性：（3 3）不同试剂批号混合、新旧试剂混使用）不同试剂批号混合、新旧试剂混使用 （4 4）试剂瓶长期不清洗使新倒
29、入试剂被污染）试剂瓶长期不清洗使新倒入试剂被污染 （5 5）试剂空白）试剂空白 （6 6）底物耗尽：）底物耗尽：39ppt课件5 5、试剂常见问题及处理：、试剂常见问题及处理：（1 1）试剂质量问题：）试剂质量问题：p 试剂有效成分含量不足，导致试剂有效成分含量不足，导致线性范围窄，高值测定不高；线性范围窄，高值测定不高；p 试剂底物浓度不足。反应曲线斜率下降，试剂底物浓度不足。反应曲线斜率下降，灵敏度变低；灵敏度变低；p 试剂自身不稳定，自行分解，工具酶纯度不够，杂酶含量过试剂自身不稳定，自行分解，工具酶纯度不够，杂酶含量过 多，测定结果变化。多，测定结果变化。40ppt课件（2 2）试剂的
30、有效期及开瓶稳定性：）试剂的有效期及开瓶稳定性：试剂是否在有效期内；试剂是否在有效期内；试剂开瓶时间过长，超过说明书中开瓶期或试剂开瓶时间过长，超过说明书中开瓶期或接近开瓶期，使试剂变质、挥发、接近开瓶期，使试剂变质、挥发、PHPH改变等影响改变等影响该项目的化学反应。该项目的化学反应。41ppt课件（4 4）不同试剂批号混合、新旧试剂混使用；）不同试剂批号混合、新旧试剂混使用；试剂稳定的情况下，进行该项目校准得到一个试剂稳定的情况下，进行该项目校准得到一个F(F(校准因校准因素素)值，在稳定的期内，反应的吸光度变化乘以值，在稳定的期内，反应的吸光度变化乘以F F值等于测定值等于测定结果。如果
31、试剂的成分含量发生变化，再校准后结果。如果试剂的成分含量发生变化，再校准后F F值就会发值就会发生变化，如果还用上述的生变化，如果还用上述的F F值得出的结果不准确。值得出的结果不准确。（5 5）试剂瓶长期不清洗使新倒入试剂被污染。）试剂瓶长期不清洗使新倒入试剂被污染。灰尘、细菌、大量杂质、盐类含量高等影响测定结果。灰尘、细菌、大量杂质、盐类含量高等影响测定结果。42ppt课件（6 6）试剂空白）试剂空白 试剂空白吸光度是反映试剂质量的指标之一。每种试剂都有一定的试剂空白吸光度是反映试剂质量的指标之一。每种试剂都有一定的空白吸光度范围，提示该试剂是否变质；如：空白吸光度范围，提示该试剂是否变质
32、；如：p利用利用TrinderTrinder反应（反应（H H2 2O O2 2偶联）偶联）为原理的检测试剂会因含酚类物质被氧为原理的检测试剂会因含酚类物质被氧化为醌而变为红色。空白吸光度会超过说明书限值。化为醌而变为红色。空白吸光度会超过说明书限值。pALPALP、r r-GT-GT等检测试剂会因基质分解出硝基酚或酚基苯胺而变黄。空等检测试剂会因基质分解出硝基酚或酚基苯胺而变黄。空白吸光度会超过说明书限值。白吸光度会超过说明书限值。pALTALT、ASTAST负反应，在放置过程中试剂空白吸光度会因负反应，在放置过程中试剂空白吸光度会因NADHNADH自行氧化为自行氧化为NAD+NAD+而下降
33、。因此，试剂空白吸光度超出试剂说明书的限值时，仪器而下降。因此，试剂空白吸光度超出试剂说明书的限值时，仪器会自动报警，提示更换试剂。会自动报警，提示更换试剂。43ppt课件44ppt课件45ppt课件二、检验过程常见问题及处理二、检验过程常见问题及处理（7 7）底物耗尽：底物耗尽：使用连续监测法、两点法测定酶活性时，若酶活性非常使用连续监测法、两点法测定酶活性时，若酶活性非常高，底物接近被耗尽，吸光度上升或下降会超过某一吸光度高，底物接近被耗尽，吸光度上升或下降会超过某一吸光度变化范围，监测期的吸光度将偏离线性，使测定结果不可靠变化范围，监测期的吸光度将偏离线性，使测定结果不可靠 上述等试剂原
34、因可导致测定结果不良。上述等试剂原因可导致测定结果不良。46ppt课件二、检验过程常见问题及处理二、检验过程常见问题及处理处理方法：处理方法：（1 1）购买质量好的试剂：精密度高、线性范围宽、开瓶稳定）购买质量好的试剂：精密度高、线性范围宽、开瓶稳定期长、批间差小、偏倚小、抗干扰能力强等期长、批间差小、偏倚小、抗干扰能力强等（2 2）试剂瓶在仪器内使用时间不要过长，及时更换或清洗。）试剂瓶在仪器内使用时间不要过长，及时更换或清洗。（3 3）不同批号试剂或新旧试剂建议不要混用，如果混用最好不同批号试剂或新旧试剂建议不要混用，如果混用最好重新定标；重新定标；（4 4）清洗好试剂针、定期维护和保养等
35、）清洗好试剂针、定期维护和保养等47ppt课件二、检验过程常见问题及处理二、检验过程常见问题及处理6 6、仪器常见问题及处理、仪器常见问题及处理 （1 1）加注系统）加注系统 （2 2）温控系统）温控系统 （3 3）光路系统）光路系统 （4 4）搅拌系统）搅拌系统 （5 5）清洗系统）清洗系统48ppt课件6 6、仪器常见问题及处理、仪器常见问题及处理 （1 1）加注系统常见问题导致结果不良：）加注系统常见问题导致结果不良：加样针、试剂针脏污、堵塞；密封垫老化、磨损；位置加样针、试剂针脏污、堵塞；密封垫老化、磨损；位置偏移；针变形、注射器密封不良有气泡、管路漏气等。偏移；针变形、注射器密封不良
36、有气泡、管路漏气等。解决方法：解决方法：每日擦拭样本针（试剂针）并经常通透，避免取样不准每日擦拭样本针（试剂针）并经常通透，避免取样不准和残留；按说明书要求及时更换密封垫和注射器；定期进行和残留；按说明书要求及时更换密封垫和注射器；定期进行仪器校准。仪器校准。49ppt课件50ppt课件（2 2）温控系统常见问题导致结果不良：）温控系统常见问题导致结果不良：试剂仓制冷故障，试剂仓温度超标；反应槽水温试剂仓制冷故障，试剂仓温度超标；反应槽水温变化（加热故障、环境温度过高）等。变化（加热故障、环境温度过高）等。处理方法：处理方法：定期进行仪器校准；发现制冷和加温故障时立即维定期进行仪器校准；发现制
37、冷和加温故障时立即维修，并检查试剂是否失效；改善环境温度。修，并检查试剂是否失效；改善环境温度。51ppt课件（3 3）光路因素导致结果不良）光路因素导致结果不良:光源灯老化、透光窗脏污（灰尘、污物）、反应槽水光源灯老化、透光窗脏污（灰尘、污物）、反应槽水质脏污、反应杯脏污或划痕、电压变化、分光纯度等。质脏污、反应杯脏污或划痕、电压变化、分光纯度等。处理方法：处理方法：购买正规的光源灯（该仪器厂家生产）按说明书要求购买正规的光源灯（该仪器厂家生产）按说明书要求的使用时间或根据光度计检查情况及时更换；定期检定光的使用时间或根据光度计检查情况及时更换；定期检定光路系统；定期擦洗和反应槽换水、更换反
38、应杯、保持光路路系统；定期擦洗和反应槽换水、更换反应杯、保持光路清洁、无灰尘等。清洁、无灰尘等。52ppt课件（4 4）搅拌系统导致结果不良：）搅拌系统导致结果不良：搅拌棒污染、纤维蛋白缠绕、搅拌位置偏移、旋转不良等影搅拌棒污染、纤维蛋白缠绕、搅拌位置偏移、旋转不良等影响结果响结果处理方法：处理方法：每日擦拭搅拌棒，防止纤维缠绕等。每日擦拭搅拌棒，防止纤维缠绕等。（5 5）清洗机构导致结果不良：）清洗机构导致结果不良：管路真空不良使废液吸不干净；液路故障（管路堵塞漏水）、管路真空不良使废液吸不干净；液路故障（管路堵塞漏水）、清洗液失效等。清洗液失效等。处理方法：处理方法：定期的维护和保养、防止
39、结晶形成及掉落等定期的维护和保养、防止结晶形成及掉落等53ppt课件二、检验过程常见问题及处理二、检验过程常见问题及处理7 7、参数常见的问题及处理：、参数常见的问题及处理：（1 1）方法学选择错误）方法学选择错误（2 2）样本加入量、试剂量输入错误、样本量和试剂量（）样本加入量、试剂量输入错误、样本量和试剂量（S S、R1R1、R2R2）未要求的比例输入；反应总体积不足；校准品浓度值输入错误；未要求的比例输入；反应总体积不足；校准品浓度值输入错误；（3 3）反应方向、量程点、测光点输入错误。）反应方向、量程点、测光点输入错误。处理方法：处理方法：按试剂说明书输入或请试剂供应商应用工程师输入。
40、按试剂说明书输入或请试剂供应商应用工程师输入。54ppt课件二、检验过程常见问题及处理二、检验过程常见问题及处理8 8、质控问题及处理、质控问题及处理（1 1）不做质控、做质控不认真分析、质控规则选择不当、控制限）不做质控、做质控不认真分析、质控规则选择不当、控制限选择不合理、质控品保存不当、稀释不准确等。选择不合理、质控品保存不当、稀释不准确等。处理方法：处理方法：应每日做室内质控，最好两个水平以上，认真进行质控分析应每日做室内质控，最好两个水平以上，认真进行质控分析（月小结、失控分析等）确定合理的质控限，选择瓶间差小、稳（月小结、失控分析等）确定合理的质控限，选择瓶间差小、稳定性好的质控品
41、，在定性好的质控品，在-20-20度冰箱保存。按正确的方法稀释和溶解质度冰箱保存。按正确的方法稀释和溶解质控品，稀释的量具要准确等。控品，稀释的量具要准确等。参加省内或卫生部室间质评，不合格应详细查找原因，更正。参加省内或卫生部室间质评，不合格应详细查找原因，更正。55ppt课件二、检验过程常见问题及处理二、检验过程常见问题及处理9 9、干扰物质、干扰物质（1 1）溶血、脂血、高胆红素血；）溶血、脂血、高胆红素血；（2 2）患者治疗的药物、摄入的物质（酒精、饮料等）；）患者治疗的药物、摄入的物质（酒精、饮料等）；（3 3）患者的病理代谢产物；）患者的病理代谢产物；（4 4）样本处理过程的添加物
42、（抗凝剂、防腐剂等）；）样本处理过程的添加物（抗凝剂、防腐剂等）；（5 5）样本处理过程中操作者引入的污染物；）样本处理过程中操作者引入的污染物；（6 6）样本基质本身变化（与新鲜血清不同的理化特性）样本基质本身变化（与新鲜血清不同的理化特性）（7 7）检测过程携带的污染；检测过程携带的污染；（8 8）试剂的质量、气泡等。）试剂的质量、气泡等。56ppt课件干扰机制：干扰机制：（1 1）物理作用：颜色、光散射、电极响应等）物理作用：颜色、光散射、电极响应等（2 2）化学作用：干扰物可以竞争试剂、抑制指示反应、改变分析物性质等）化学作用：干扰物可以竞争试剂、抑制指示反应、改变分析物性质等（3 3
43、）酶抑制作用：）酶抑制作用：干扰物可以螯合酶活化所必需的金属离子、结合酶的催干扰物可以螯合酶活化所必需的金属离子、结合酶的催化部位、氧化酶分子内所必须的巯基等化部位、氧化酶分子内所必须的巯基等（4 4）非特异性：干扰物质与分析物以相同的方式与试剂反应，在免疫化学）非特异性：干扰物质与分析物以相同的方式与试剂反应，在免疫化学方法中干扰物能和抗体发生交叉反应方法中干扰物能和抗体发生交叉反应（5 5）水的取代：样本中非水溶性物质（蛋白质、脂质等）取代水溶性血浆）水的取代：样本中非水溶性物质（蛋白质、脂质等）取代水溶性血浆的体积。的体积。（6 6）基质效应：改变样本基质的物理特性等）基质效应：改变样本
44、基质的物理特性等57ppt课件 三、检验后常见问题及处理三、检验后常见问题及处理58ppt课件三、检验后常见问题及处理三、检验后常见问题及处理 正常情况下，检验报告单应包括以下信息：正常情况下，检验报告单应包括以下信息：医院名称、实验室名称、仪器名称、实验室联系方式；医院名称、实验室名称、仪器名称、实验室联系方式；患者的标识：姓名、性别、年龄、科别、民族、唯一标识、患者的标识：姓名、性别、年龄、科别、民族、唯一标识、临临 床诊断床诊断等；等；检验申请者姓名或唯一标识；检验申请者姓名或唯一标识；标本的识别：标本种类、标本的识别：标本种类、标本状态、采集时间、接收时间标本状态、采集时间、接收时间；
45、检验项目名称检验项目名称、结果、单位、参考区间、异常提示；、结果、单位、参考区间、异常提示；检验科者、审核者标识、报告时间检验科者、审核者标识、报告时间。59ppt课件三、检验后常见问题及处理三、检验后常见问题及处理1 1、检验报告基本信息常见问题及处理：、检验报告基本信息常见问题及处理：（1 1）多数临床医生不标注临床症断；）多数临床医生不标注临床症断；处理方法：处理方法：建议医生标注临床诊断或简单症状等。建议医生标注临床诊断或简单症状等。（2 2）在标本状态有改变时不标注标本状态；）在标本状态有改变时不标注标本状态；处理方法：处理方法：标本状态改变时标注。如：脂血、溶血、黄疸等。标本状态改
46、变时标注。如：脂血、溶血、黄疸等。（3 3）不标注或标注不全的标本采集、接收、）不标注或标注不全的标本采集、接收、报告的日期和时间；报告的日期和时间；处理方法：处理方法：时间应标注到分钟，如：时间应标注到分钟，如：2017-11-72017-11-7：5353（4 4）检验项目名称不规范；）检验项目名称不规范；处理方法：处理方法：规范。如：谷丙转氨酶规范。如：谷丙转氨酶谷氨酸氨基转移酶等。谷氨酸氨基转移酶等。60ppt课件三、检验后常见问题及处理三、检验后常见问题及处理2 2、检验报告签发问题、检验报告签发问题 检验者和审核者不进行手签字或签字不全检验者和审核者不进行手签字或签字不全处理方法：处理方法：手签字，最好是双签字（急诊除外）具有法手签字，最好是双签字（急诊除外）具有法律效力。律效力。61ppt课件小结小结1 1、患者的准备问题；、患者的准备问题；2 2、标本的采集、运输、验收等问题。、标本的采集、运输、验收等问题。3 3、标本处理、水质、交叉污染问题、标本处理、水质、交叉污染问题4 4、仪器、试剂、校准等问题、仪器、试剂、校准等问题 5 5、检验报告基本信息问题；、检验报告基本信息问题；6 6、检验报告签发问题。、检验报告签发问题。62ppt课件 谢谢！63ppt课件64ppt课件
