1、一、概述v（一）分布：在自然界分布较广，可存在于水、空气、尘埃、（一）分布：在自然界分布较广，可存在于水、空气、尘埃、牛奶、粪便及人的咽喉和病灶中。牛奶、粪便及人的咽喉和病灶中。v（二）分类（二）分类 1 1、按溶血能力分类按溶血能力分类：（1 1）甲型（甲型（）溶血性链球菌）溶血性链球菌 （2 2）乙型（）乙型（）溶血性链球菌）溶血性链球菌 （3 3）丙型（丙型（）链球菌）链球菌 v 一、概述v2、按血清学分类 主要是根据链球菌细胞壁抗原进行分类，这种方法可靠，但工作复杂。v根据族特异性抗原的不同，将乙型（乙型（）溶血性链）溶血性链球菌球菌 分成A B C D E F G H K L M N
2、 O P Q R S T，共18族 v在一个族内因表面抗原（即型特异性抗原）不同，又分成若干型。如A族分成60多个型，B族分为4个血清型，C族分成13个血清型。用阿拉伯数字表示。v与人类疾病有关的大多属于乙型溶血链球菌，其血清型 90%属于A族链球菌。（一）形态与染色：（一）形态与染色：1 1、呈球形或卵圆形，呈球形或卵圆形，直径直径0.5um-1um 0.5um-1um 链状链状 排列（长短与什么有关）排列（长短与什么有关）2 2、革兰氏染色阳性，革兰氏染色阳性，衰老培养物常成阴性衰老培养物常成阴性 3 3、无芽孢、无鞭毛、多数无夹膜无芽孢、无鞭毛、多数无夹膜 二、生物学特性生物学特性二、生
3、物学特性生物学特性（二）培养特性（二）培养特性 1 1、多数为需氧或兼性厌氧，少数为微需氧或多数为需氧或兼性厌氧，少数为微需氧或专性厌氧专性厌氧 2 2、对营养要求高，普通培养基不能良好生对营养要求高，普通培养基不能良好生长，（需加血清、血液、腹水等）。大多数菌株长，（需加血清、血液、腹水等）。大多数菌株需苏氨酸、核黄素、维生素需苏氨酸、核黄素、维生素B6B6、烟酸等生长因子。、烟酸等生长因子。3 3、最适温度、最适温度37 PH7.47.6 37 PH7.47.6 4 4、在液体培养基中，溶血菌株、在液体培养基中，溶血菌株,呈絮状或颗呈絮状或颗粒状沉淀生长（上清下浊）；不溶血菌球，均匀粒状沉
4、淀生长（上清下浊）；不溶血菌球，均匀浑浊生长，如粪链菌浑浊生长，如粪链菌。（二）培养特性（二）培养特性 5 5、在血平板上，形成灰白色，半透明、表在血平板上，形成灰白色，半透明、表面光滑、圆形突起的细小菌落，直径面光滑、圆形突起的细小菌落，直径0.50.50.75mm0.75mm，针尖大小。不同菌型其菌落周围的溶血，针尖大小。不同菌型其菌落周围的溶血现象不同。甲型在菌落周围出现现象不同。甲型在菌落周围出现1-2mm1-2mm的绿色溶的绿色溶血环，放冰箱一夜呈透明溶血环，且溶血环扩大；血环，放冰箱一夜呈透明溶血环，且溶血环扩大；乙型在菌落周围有乙型在菌落周围有2-3mm2-3mm的透明溶血环；丙
5、型菌的透明溶血环；丙型菌落周围不具溶血环。落周围不具溶血环。二、生物学特性生物学特性甲链甲链乙链乙链丙链丙链二、生物学特性生物学特性(三三)生化特性生化特性 1 1、均分糖葡萄糖产酸、均分糖葡萄糖产酸 2 2、对乳糖、甘露醇、水杨苷等的分解因菌株而异。、对乳糖、甘露醇、水杨苷等的分解因菌株而异。3 3、能使牛奶产酸而不凝固，不液化明胶。、能使牛奶产酸而不凝固，不液化明胶。4 4、乙型溶血链球菌山梨醇阴性，不被胆汁溶解、不、乙型溶血链球菌山梨醇阴性，不被胆汁溶解、不分解菊糖，可与肺炎双球菌区别。分解菊糖，可与肺炎双球菌区别。4 4、触酶阴性可与葡萄球菌区别。、触酶阴性可与葡萄球菌区别。5 5、A
6、 A族菌对杆菌肽敏感，可被其抑制。族菌对杆菌肽敏感，可被其抑制。3、最适温度37 PH7.4、触酶阴性可与葡萄球菌区别。主要是根据链球菌细胞壁抗原进行分类，这种方法可靠，但工作复杂。2、食品在加工前就已带菌、奶牛患化脓性乳腺炎或畜禽局部化脓时，其奶和肉尸某些部位污染；3、溶血性链球菌在血平板中生长有何特征？S对氧稳定，对热和酸敏感。（四）致病性链球菌可产生的毒素和酶2、溶血性链球菌能产生什么毒素和酶？（1）甲型（）溶血性链球菌8mL灭菌生理盐水，混匀，再加入链球菌18-24h36肉浸液肉汤培养物0.25mL，混匀，置于36水浴10min,血浆混合物自行凝固，观察凝块重新完全溶解的时间，完全溶解
7、为阳性，如24h后不溶解即为阴性。一般来说，溶血性链球菌常通过以下途径污染食品：1、均分糖葡萄糖产酸固体检样样品处理增菌培养分离培养分纯培养生化鉴定报告链球菌溶血素O为含有-SH基的蛋白质，能破坏白细胞和血小板，动物试验又证实对心脏有急性毒害作用，使心脏骤停，抗原性强，感染后23周，85%以上病上产生抗“O”抗体。8mL灭菌生理盐水，混匀，再加入链球菌18-24h36肉浸液肉汤培养物0.大多数菌株需苏氨酸、核黄素、维生素B6、烟酸等生长因子。同时用肉浸液肉汤做阴性对照，用已知的链激酶阳性的菌株做阳性对照。（1）甲型（）溶血性链球菌8mL灭菌生理盐水，混匀，再加入链球菌18-24h36肉浸液肉汤
8、培养物0.二、生物学特性生物学特性（四）致病性链球菌可产生的毒素和酶（四）致病性链球菌可产生的毒素和酶 1 1、溶血素：有溶解红细胞，杀死白细胞、血小板及、溶血素：有溶解红细胞，杀死白细胞、血小板及毒害心脏的作用，有毒害心脏的作用，有O O和和S S两种。两种。链球菌溶血素链球菌溶血素O O为含有为含有-SH-SH基的蛋白质，能破坏基的蛋白质，能破坏白细胞和血小板，动物试验又证实对心脏有急性毒白细胞和血小板，动物试验又证实对心脏有急性毒害作用，使心脏骤停，抗原性强，感染后害作用，使心脏骤停，抗原性强，感染后2 23 3周，周，85%85%以上病上产生抗以上病上产生抗“O”O”抗体。抗体。S S
9、为小分子多肽，相对分子质量较小，故无抗原为小分子多肽，相对分子质量较小，故无抗原性。性。S S对氧稳定，对热和酸敏感。对氧稳定，对热和酸敏感。血平板所见透明溶血是由血平板所见透明溶血是由“S”S”所引起，能破坏所引起，能破坏白细胞和血小板，给动物静注可迅速致死。注射小白细胞和血小板，给动物静注可迅速致死。注射小鼠腹腔，引起肾小管坏死。鼠腹腔，引起肾小管坏死。二、生物学特性生物学特性（四）致病性链球菌可产生的毒素和酶（四）致病性链球菌可产生的毒素和酶 2 2、致热外毒素：曾称红疹毒素、致热外毒素：曾称红疹毒素(Erythrotoxin)(Erythrotoxin)或猩或猩红红热毒素热毒素(Sca
10、rletfever toxin)(Scarletfever toxin)，是人类猩红热的，是人类猩红热的主要致病物质，为外毒素。主要有主要致病物质，为外毒素。主要有A A族链球菌产生。族链球菌产生。小剂量可使局部产生红疹，大剂量引起全身性红疹，小剂量可使局部产生红疹，大剂量引起全身性红疹，并伴有发热、头痛、恶心、呕吐、周身不适等。并伴有发热、头痛、恶心、呕吐、周身不适等。3 3、透明质酸酶：又称扩散因子，可溶解组织间质的透透明质酸酶：又称扩散因子，可溶解组织间质的透明质酸，故能增加细菌的侵袭力。明质酸，故能增加细菌的侵袭力。4 4、链激酶：又、链激酶：又称溶纤维蛋白酶，具有增强细菌在组织称溶纤
11、维蛋白酶，具有增强细菌在组织中的扩散作中的扩散作用。用。5 5、杀白细胞素：在肉汤培养基中培养可产生。、杀白细胞素：在肉汤培养基中培养可产生。可使白可使白细胞失去动力，变为球形，最后膨胀破裂。细胞失去动力，变为球形，最后膨胀破裂。v 二、生物学特性生物学特性（五）（五）抵抗力抵抗力 抵抗力一般不强，抵抗力一般不强，6030min6030min即被杀死，对常用即被杀死，对常用消毒剂敏感。消毒剂敏感。乙型链球菌对青霉素、红霉素、氯霉素、四环乙型链球菌对青霉素、红霉素、氯霉素、四环素、磺胺均敏感。青霉素是溶血链球菌感染的首选素、磺胺均敏感。青霉素是溶血链球菌感染的首选药物。药物。v(六六)流行病学与
12、致病性流行病学与致病性 溶血性链球菌在自然界中分布较广，存在于水、溶血性链球菌在自然界中分布较广，存在于水、空气、尘埃、粪便及健康人和动物的口腔、鼻腔、空气、尘埃、粪便及健康人和动物的口腔、鼻腔、咽喉中，可通过直接接触、空气飞沫传播或通过皮咽喉中，可通过直接接触、空气飞沫传播或通过皮肤、粘膜伤口感染，被污染的食品如奶、肉、蛋及肤、粘膜伤口感染，被污染的食品如奶、肉、蛋及其制品也会对人类进行感染。上呼吸道感染患者、其制品也会对人类进行感染。上呼吸道感染患者、人畜化脓性感染部位常成为食品污染的污染源。人畜化脓性感染部位常成为食品污染的污染源。二、生物学特性生物学特性v一般来说，溶血性链球菌常通过以
13、下途径污染食品：1、食品加工或销售人员口腔、鼻腔、手、面部有化脓性炎症时造成食品的污染；2、食品在加工前就已带菌、奶牛患化脓性乳腺炎或畜禽局部化脓时，其奶和肉尸某些部位污染；3、熟食制品因包装不善而使食品受到污染。溶血性链球菌常可引起皮肤、皮下组织的化脓性炎症、呼吸道感染、流行性咽炎的爆发性流行以及新生儿败血症、细菌性心内膜炎、猩红热和风湿热、肾小球肾炎等变态反应。化脓性链球菌)三、微生物检验三、微生物检验（一）检验程序（一）检验程序 液体检样液体检样 v固体检样固体检样样品处理样品处理增菌培养增菌培养分离培养分离培养分纯分纯培养培养生化鉴定生化鉴定报告报告 v（二）检验操作要点（二）检验操作
14、要点 1 1、采样：食品：按常规、采样：食品：按常规 2 2、增菌培养：、增菌培养：葡萄糖肉浸液肉汤葡萄糖肉浸液肉汤 ：一般情况：一般情况 36361 24h1 24h 匹克氏肉汤：在污染严重时用匹克氏肉汤：在污染严重时用 （二）检验操作要点（二）检验操作要点 3 3、分离培养：血平板，、分离培养：血平板，37 24h,37 24h,菌落菌落:灰白色，灰白色，半透明或不透明，表面光滑，有透明溶血环半透明或不透明，表面光滑，有透明溶血环 4 4、分纯培养：血平板、分纯培养：血平板 37 24h37 24h 5 5、镜检：革兰氏染色，阳性，、镜检：革兰氏染色，阳性，G G+链状排列，符合链状排列，
15、符合者可做生化鉴定。者可做生化鉴定。三、微生物检验三、微生物检验 （二）检验操作要点（二）检验操作要点 6 6、生化鉴定：、生化鉴定：（1 1）链激酶试验（溶纤维蛋白酶试验）链激酶试验（溶纤维蛋白酶试验）吸取草酸钾血浆吸取草酸钾血浆0.2mL0.2mL，加，加0.8mL0.8mL灭菌生理盐水，灭菌生理盐水，混匀，再加入链球菌混匀，再加入链球菌18-24h3618-24h36肉浸液肉汤培养物肉浸液肉汤培养物0.5mL0.5mL及及0.25%0.25%氯化钙氯化钙0.25mL0.25mL，混匀，置于，混匀，置于3636水浴水浴10min,10min,血浆混合物自行凝固，观察凝块重新完全溶血浆混合物
16、自行凝固，观察凝块重新完全溶解的时间，完全溶解为阳性，如解的时间，完全溶解为阳性，如24h24h后不溶解即为后不溶解即为阴性。同时用肉浸液肉汤做阴性对照，用已知的链阴性。同时用肉浸液肉汤做阴性对照，用已知的链激酶阳性的菌株做阳性对照。激酶阳性的菌株做阳性对照。三、微生物检验三、微生物检验 三、微生物检验三、微生物检验（二）检验操作要点（二）检验操作要点 6 6、生化鉴定：、生化鉴定：（2 2）杆菌肽敏感试验）杆菌肽敏感试验 将分纯的乙型溶血性链球菌接种血平板，在划将分纯的乙型溶血性链球菌接种血平板，在划线处贴附杆菌肽纸片，线处贴附杆菌肽纸片，3718h3718h，出现抑菌带为阳，出现抑菌带为阳
17、性，据此可推测为乙型溶血性链球菌。性，据此可推测为乙型溶血性链球菌。（二）检验操作要点（二）检验操作要点 v7 7、报告：、报告：根据培养后的形态，菌落特征及生化试验可报告：有乙型溶血性链球菌生长。三、微生物检验三、微生物检验思考题思考题1 1、链球菌的溶血现象有哪几个类型，各类型的溶、链球菌的溶血现象有哪几个类型，各类型的溶血特征如何？血特征如何？2 2、溶血性链球菌能产生什么毒素和酶？、溶血性链球菌能产生什么毒素和酶？3 3、溶血性链球菌在血平板中生长有何特征？、溶血性链球菌在血平板中生长有何特征？（一）检验程序 液体检样5、在血平板上，形成灰白色，半透明、表面光滑、圆形突起的细小菌落，直
18、径0.(六)流行病学与致病性3、无芽孢、无鞭毛、多数无夹膜2、对乳糖、甘露醇、水杨苷等的分解因菌株而异。5、在血平板上，形成灰白色，半透明、表面光滑、圆形突起的细小菌落，直径0.1、采样：食品：按常规葡萄糖肉浸液肉汤：一般情况 361 24h3、分离培养：血平板，37 24h,菌落:灰白色，半透明或不透明，表面光滑，有透明溶血环（1）链激酶试验（溶纤维蛋白酶试验）主要是根据链球菌细胞壁抗原进行分类，这种方法可靠，但工作复杂。（一）分布：在自然界分布较广，可存在于水、空气、尘埃、牛奶、粪便及人的咽喉和病灶中。同时用肉浸液肉汤做阴性对照，用已知的链激酶阳性的菌株做阳性对照。8mL灭菌生理盐水，混匀
19、，再加入链球菌18-24h36肉浸液肉汤培养物0.在一个族内因表面抗原（即型特异性抗原）不同，又分成若干型。（四）致病性链球菌可产生的毒素和酶1、按溶血能力分类：2、溶血性链球菌能产生什么毒素和酶？主要是根据链球菌细胞壁抗原进行分类，这种方法可靠，但工作复杂。丙型菌落周围不具溶血环。一、概述v（一）分布：在自然界分布较广，可存在于水、空气、尘埃、（一）分布：在自然界分布较广，可存在于水、空气、尘埃、牛奶、粪便及人的咽喉和病灶中。牛奶、粪便及人的咽喉和病灶中。v（二）分类（二）分类 1 1、按溶血能力分类按溶血能力分类：（1 1）甲型（甲型（）溶血性链球菌）溶血性链球菌 （2 2）乙型（）乙型（
20、）溶血性链球菌）溶血性链球菌 （3 3）丙型（丙型（）链球菌）链球菌 v（二）检验操作要点（二）检验操作要点 3 3、分离培养：血平板，、分离培养：血平板，37 24h,37 24h,菌落菌落:灰白色，灰白色，半透明或不透明，表面光滑，有透明溶血环半透明或不透明，表面光滑，有透明溶血环 4 4、分纯培养：血平板、分纯培养：血平板 37 24h37 24h 5 5、镜检：革兰氏染色，阳性，、镜检：革兰氏染色，阳性，G G+链状排列，符合链状排列，符合者可做生化鉴定。者可做生化鉴定。三、微生物检验三、微生物检验排列（长短与什么有关）2、对营养要求高，普通培养基不能良好生长，（需加血清、血液、腹水等
21、）。（1）链激酶试验（溶纤维蛋白酶试验）4、在液体培养基中，溶血菌株,呈絮状或颗粒状沉淀生长（上清下浊）；溶血性链球菌常可引起皮肤、皮下组织的化脓性炎症、呼吸道感染、流行性咽炎的爆发性流行以及新生儿败血症、细菌性心内膜炎、猩红热和风湿热、肾小球肾炎等变态反应。4、链激酶：又称溶纤维蛋白酶，具有增强细菌在组织中的扩散作用。（1）甲型（）溶血性链球菌一般来说，溶血性链球菌常通过以下途径污染食品：4、分纯培养：血平板 37 24h上呼吸道感染患者、人畜化脓性感染部位常成为食品污染的污染源。小剂量可使局部产生红疹，大剂量引起全身性红疹，并伴有发热、头痛、恶心、呕吐、周身不适等。（1）甲型（）溶血性链球
22、菌3、分离培养：血平板，37 24h,菌落:灰白色，半透明或不透明，表面光滑，有透明溶血环可使白细胞失去动力，变为球形，最后膨胀破裂。2、对乳糖、甘露醇、水杨苷等的分解因菌株而异。2、对乳糖、甘露醇、水杨苷等的分解因菌株而异。主要有A族链球菌产生。（2）杆菌肽敏感试验5、在血平板上，形成灰白色，半透明、表面光滑、圆形突起的细小菌落，直径0.如A族分成60多个型，B族分为4个血清型，C族分成13个血清型。2、对乳糖、甘露醇、水杨苷等的分解因菌株而异。一般来说，溶血性链球菌常通过以下途径污染食品：5、镜检：革兰氏染色，阳性，G+链状排列，符合者可做生化鉴定。25mL，混匀，置于36水浴10min,
23、血浆混合物自行凝固，观察凝块重新完全溶解的时间，完全溶解为阳性，如24h后不溶解即为阴性。1、采样：食品：按常规（2）乙型（）溶血性链球菌根据族特异性抗原的不同，将乙型（）溶血性链球菌 分成A B C D E F G H K L M N O P Q R S T，共18族4、链激酶：又称溶纤维蛋白酶，具有增强细菌在组织中的扩散作用。溶血性链球菌常可引起皮肤、皮下组织的化脓性炎症、呼吸道感染、流行性咽炎的爆发性流行以及新生儿败血症、细菌性心内膜炎、猩红热和风湿热、肾小球肾炎等变态反应。S对氧稳定，对热和酸敏感。不溶血菌球，均匀浑浊生长，如粪链菌。同时用肉浸液肉汤做阴性对照，用已知的链激酶阳性的菌株
24、做阳性对照。8mL灭菌生理盐水，混匀，再加入链球菌18-24h36肉浸液肉汤培养物0.5um-1um 链状4、乙型溶血链球菌山梨醇阴性，不被胆汁溶解、不分解菊糖，可与肺炎双球菌区别。2、对乳糖、甘露醇、水杨苷等的分解因菌株而异。(六)流行病学与致病性S为小分子多肽，相对分子质量较小，故无抗原性。（四）致病性链球菌可产生的毒素和酶1、呈球形或卵圆形，(六)流行病学与致病性（一）检验程序 液体检样大多数菌株需苏氨酸、核黄素、维生素B6、烟酸等生长因子。主要有A族链球菌产生。1、多数为需氧或兼性厌氧，少数为微需氧或专性厌氧根据族特异性抗原的不同，将乙型（）溶血性链球菌 分成A B C D E F G
25、 H K L M N O P Q R S T，共18族3、分离培养：血平板，37 24h,菌落:灰白色，半透明或不透明，表面光滑，有透明溶血环2、对乳糖、甘露醇、水杨苷等的分解因菌株而异。可使白细胞失去动力，变为球形，最后膨胀破裂。（1）甲型（）溶血性链球菌4、在液体培养基中，溶血菌株,呈絮状或颗粒状沉淀生长（上清下浊）；25mL，混匀，置于36水浴10min,血浆混合物自行凝固，观察凝块重新完全溶解的时间，完全溶解为阳性，如24h后不溶解即为阴性。（1）甲型（）溶血性链球菌3、无芽孢、无鞭毛、多数无夹膜1、食品加工或销售人员口腔、鼻腔、手、面部有化脓性炎症时造成食品的污染；（一）分布：在自然
26、界分布较广，可存在于水、空气、尘埃、牛奶、粪便及人的咽喉和病灶中。4、在液体培养基中，溶血菌株,呈絮状或颗粒状沉淀生长（上清下浊）；3、分离培养：血平板，37 24h,菌落:灰白色，半透明或不透明，表面光滑，有透明溶血环5、镜检：革兰氏染色，阳性，G+链状排列，符合者可做生化鉴定。同时用肉浸液肉汤做阴性对照，用已知的链激酶阳性的菌株做阳性对照。6、生化鉴定：（1）甲型（）溶血性链球菌1、采样：食品：按常规5、在血平板上，形成灰白色，半透明、表面光滑、圆形突起的细小菌落，直径0.（四）致病性链球菌可产生的毒素和酶2、对乳糖、甘露醇、水杨苷等的分解因菌株而异。（2）乙型（）溶血性链球菌（四）致病性
27、链球菌可产生的毒素和酶在一个族内因表面抗原（即型特异性抗原）不同，又分成若干型。（2）杆菌肽敏感试验2、食品在加工前就已带菌、奶牛患化脓性乳腺炎或畜禽局部化脓时，其奶和肉尸某些部位污染；3、分离培养：血平板，37 24h,菌落:灰白色，半透明或不透明，表面光滑，有透明溶血环固体检样样品处理增菌培养分离培养分纯培养生化鉴定报告5、镜检：革兰氏染色，阳性，G+链状排列，符合者可做生化鉴定。S为小分子多肽，相对分子质量较小，故无抗原性。（1）甲型（）溶血性链球菌（1）甲型（）溶血性链球菌3、最适温度37 PH7.同时用肉浸液肉汤做阴性对照，用已知的链激酶阳性的菌株做阳性对照。2、致热外毒素：曾称红疹
28、毒素(Erythrotoxin)或猩红热毒素(Scarletfever toxin)，是人类猩红热的主要致病物质，为外毒素。2、对营养要求高，普通培养基不能良好生长，（需加血清、血液、腹水等）。同时用肉浸液肉汤做阴性对照，用已知的链激酶阳性的菌株做阳性对照。5、在血平板上，形成灰白色，半透明、表面光滑、圆形突起的细小菌落，直径0.（四）致病性链球菌可产生的毒素和酶 （二）检验操作要点（二）检验操作要点 6 6、生化鉴定：、生化鉴定：（1 1）链激酶试验（溶纤维蛋白酶试验）链激酶试验（溶纤维蛋白酶试验）吸取草酸钾血浆吸取草酸钾血浆0.2mL0.2mL，加，加0.8mL0.8mL灭菌生理盐水，灭菌生理盐水，混匀，再加入链球菌混匀，再加入链球菌18-24h3618-24h36肉浸液肉汤培养物肉浸液肉汤培养物0.5mL0.5mL及及0.25%0.25%氯化钙氯化钙0.25mL0.25mL，混匀，置于，混匀，置于3636水浴水浴10min,10min,血浆混合物自行凝固，观察凝块重新完全溶血浆混合物自行凝固，观察凝块重新完全溶解的时间，完全溶解为阳性，如解的时间，完全溶解为阳性，如24h24h后不溶解即为后不溶解即为阴性。同时用肉浸液肉汤做阴性对照，用已知的链阴性。同时用肉浸液肉汤做阴性对照，用已知的链激酶阳性的菌株做阳性对照。激酶阳性的菌株做阳性对照。三、微生物检验三、微生物检验
