1、实验七 尿液理化n尿液理学检查:尿色尿色 通明度通明度 比密比密n尿液化学检查:酸碱度酸碱度 蛋白蛋白 糖定性糖定性要求:要求:掌握尿液的常规检查;掌握各种实验的基本原掌握尿液的常规检查;掌握各种实验的基本原理,会按规程操作;能观察和判断各项实验的理,会按规程操作;能观察和判断各项实验的正常和异常结果正常和异常结果一、尿液的理学检验一、尿液的理学检验1 尿液颜色尿液颜色:直接倒入试管观察:直接倒入试管观察 报告方式:书明尿液色泽及深度,报告方式:书明尿液色泽及深度,如如淡黄色,深黄色,乳白色淡黄色,深黄色,乳白色等等 新鲜尿液为淡黄色,颜色主要源于尿色素及新鲜尿液为淡黄色,颜色主要源于尿色素及
2、尿胆原尿胆原;受到饮水受到饮水,季节季节,生理生理,药物药物,病理等因素病理等因素影响,可呈现不同黄色。如血尿分为镜下,影响,可呈现不同黄色。如血尿分为镜下,肉眼。棕色,咖啡色可能是肾前疾病,而血肉眼。棕色,咖啡色可能是肾前疾病,而血块、红色则为下尿道感染。块、红色则为下尿道感染。2 尿液透明度:尿液透明度:报告方式:报告方式:清晰透明、微混、混浊清晰透明、微混、混浊,若有凝块等亦需注明若有凝块等亦需注明 正常尿液混浊:主要为结晶所致。正常尿液混浊:主要为结晶所致。病理性混浊尿:为尿中含有白细胞、红细胞及细病理性混浊尿:为尿中含有白细胞、红细胞及细菌。尿中如有粘蛋白、核蛋白也可因菌。尿中如有粘
3、蛋白、核蛋白也可因pH变化而析变化而析出后产生混浊。出后产生混浊。正常尿液:淡黄色正常尿液:淡黄色 清晰透明清晰透明注意事项注意事项n尿液标本要新鲜n混浊尿的初步鉴别 加热加热 消失消失-尿酸盐尿酸盐混浊尿混浊尿-加醋酸加醋酸 增加增加 -变清,无气泡变清,无气泡-草酸盐、磷酸盐草酸盐、磷酸盐 变清,有气泡变清,有气泡-碳酸盐碳酸盐 浊度增加浊度增加-蛋白尿、菌尿蛋白尿、菌尿 加加NaOHNaOH 无变化无变化-变为胶状变为胶状 脓尿脓尿 -振荡后变清振荡后变清 脂肪尿脂肪尿 尿液:乙醚:乙醇尿液:乙醚:乙醇 1:1:23 尿液比密尿液比密:比密计悬浮法:比密计悬浮法 操作:将比密计轻轻放入已
4、盛尿液(操作:将比密计轻轻放入已盛尿液(2/3高度)高度)的比密筒中,并加以捻转,使其垂直悬浮于的比密筒中,并加以捻转,使其垂直悬浮于尿液中,待比密计平稳后,读取与尿液凹面尿液中,待比密计平稳后,读取与尿液凹面相切的刻度。相切的刻度。成人:成人:1.0031.030 注意注意:尿液沿比密筒壁缓慢加入,不要产生气泡:尿液沿比密筒壁缓慢加入,不要产生气泡 尿比密与排出的水分、盐类、有机物含量和尿量有关;尿比密与排出的水分、盐类、有机物含量和尿量有关;在病理情况下还受到尿蛋白、尿糖及细胞成分等影响。在病理情况下还受到尿蛋白、尿糖及细胞成分等影响。尿比密尿比密可粗略可粗略反映肾小管的浓缩稀释功能。反映
5、肾小管的浓缩稀释功能。二、二、尿液化学检验尿液化学检验n1 pH值值:尿试带法:尿试带法/PH试纸试纸n正常范围正常范围 4.68 n正常新鲜尿液常为弱酸性,主要受肾小管分泌正常新鲜尿液常为弱酸性,主要受肾小管分泌H、泌、泌NH3和铵盐的形成、和铵盐的形成、HCO3-的重吸收等因素影响。还受饮食种类、的重吸收等因素影响。还受饮食种类、运动、饥饿、服用药物及疾病的影响。运动、饥饿、服用药物及疾病的影响。受到药物、疾病等影响,受到药物、疾病等影响,npH降低:酸中毒,肾小球肾炎,痛风等。降低:酸中毒,肾小球肾炎,痛风等。npH升高:尿路感染,呼吸性碱中毒等。升高:尿路感染,呼吸性碱中毒等。2 尿蛋
6、白定性尿蛋白定性n1)加热乙酸法加热乙酸法原理:加热可使蛋白变性凝固,然后加醋酸使得尿液原理:加热可使蛋白变性凝固,然后加醋酸使得尿液的的pH接近蛋白质的等电点,有利于蛋白质下沉。接近蛋白质的等电点,有利于蛋白质下沉。操作:操作:2/3试管尿液,用试管夹夹住试管底部,倾试管尿液,用试管夹夹住试管底部,倾斜试管使上斜试管使上1/3尿液处煮沸,加尿液处煮沸,加5%乙酸乙酸2dd,再加热至沸腾,观察结果。再加热至沸腾,观察结果。结果判断:结果判断:清晰清晰-黑色背景下轻微浑浊黑色背景下轻微浑浊+/-明显浑浊无颗粒明显浑浊无颗粒+明显浑浊有较多颗粒明显浑浊有较多颗粒+大量絮状物有部分沉淀大量絮状物有部
7、分沉淀+絮块状大量沉淀絮块状大量沉淀+评价:最为经典也最为准确的尿蛋白定性方法。评价:最为经典也最为准确的尿蛋白定性方法。特异性强特异性强n2)磺基水杨酸法磺基水杨酸法 n 原理:磺基水杨酸在略低于蛋白质等电点的酸性原理:磺基水杨酸在略低于蛋白质等电点的酸性 环境下,其阴离子与蛋白质氨基酸的阳离子结合,环境下,其阴离子与蛋白质氨基酸的阳离子结合,生成不溶性的蛋白盐而沉淀。生成不溶性的蛋白盐而沉淀。操作:试管操作:试管2支,各加支,各加ml尿液,一管对照另一尿液,一管对照另一管加管加20磺基水杨酸磺基水杨酸0.1ml,轻轻混匀轻轻混匀1min后观察后观察结果。结果。结果判断:结果判断:与对照管通
8、明度一致与对照管通明度一致-黑色背景下轻微浑浊黑色背景下轻微浑浊+/-不加黑色背景可见浑浊但无颗粒不加黑色背景可见浑浊但无颗粒+明显浑浊并出现颗粒明显浑浊并出现颗粒+浑浊更明显出现絮状物浑浊更明显出现絮状物+严重浑浊出现大量絮块严重浑浊出现大量絮块+评价:敏感,假阳性率高,适用蛋白尿的筛选。评价:敏感,假阳性率高,适用蛋白尿的筛选。n3 糖定性试验糖定性试验:班氏试验:班氏试验 n 原理:葡萄糖含有醛基,在热碱性溶液中,原理:葡萄糖含有醛基,在热碱性溶液中,能将班氏试剂的兰色硫酸铜还原为黄色的氧化能将班氏试剂的兰色硫酸铜还原为黄色的氧化亚铜,进而生成红色氧化亚铜沉淀。亚铜,进而生成红色氧化亚铜
9、沉淀。n 操作:操作:ml班氏试剂,加热试管底部,煮班氏试剂,加热试管底部,煮沸,观察,再加尿液沸,观察,再加尿液0.1ml,继续煮沸继续煮沸min,冷却后观察结果。冷却后观察结果。n 结果判断:结果判断:蓝色不变蓝色不变-蓝中略带绿无沉淀蓝中略带绿无沉淀+/-绿色有少许黄绿色沉淀绿色有少许黄绿色沉淀+较多黄绿色沉淀较多黄绿色沉淀+土黄色浑浊大量沉淀土黄色浑浊大量沉淀+大量红棕大量红棕/砖红色沉淀砖红色沉淀+n 评价:方法稳定,缺乏特异性。评价:方法稳定,缺乏特异性。三、三、注意事项注意事项n1、尿蛋白、尿蛋白 n(1)尿)尿pH 尿液偏碱时尿液偏碱时(pH9.0)可使加热乙酸法,可使加热乙酸
10、法,磺基水杨酸法呈假阴性,而使干化学试带法呈假磺基水杨酸法呈假阴性,而使干化学试带法呈假阳性;尿液偏酸阳性;尿液偏酸(pH3)也会引起蛋白定性假阴性。也会引起蛋白定性假阴性。因此,实验前需先将尿液因此,实验前需先将尿液pH调至调至5.0-6.0。n(2)离子强度离子强度 尿液离子强度很低时,可使加热尿液离子强度很低时,可使加热乙酸法呈假阴性。因此对于限盐或无盐饮食的病乙酸法呈假阴性。因此对于限盐或无盐饮食的病人使用本法进行尿蛋白定性时,需滴加饱和氯化人使用本法进行尿蛋白定性时,需滴加饱和氯化钠溶液钠溶液1一一2滴后再进行检查。滴后再进行检查。n(3)药物药物 药物不仅影响磺基水杨酸法蛋白药物不
11、仅影响磺基水杨酸法蛋白定性结果,对于化学试带法也会产生干扰。当定性结果,对于化学试带法也会产生干扰。当病人应用大剂量青霉素钾盐、庆大霉素、磺胺、病人应用大剂量青霉素钾盐、庆大霉素、磺胺、含碘造影剂时,容易使磺基水杨酸法出现假阳含碘造影剂时,容易使磺基水杨酸法出现假阳性;而使化学试带法呈假阴性。性;而使化学试带法呈假阴性。n(4)标本的污染标本的污染 当尿中混有生殖道分泌物当尿中混有生殖道分泌物时,可使定性出现时,可使定性出现“假假”阳性,为此很有必要阳性,为此很有必要指导病人清洁尿道口采集中段尿,或离心后测指导病人清洁尿道口采集中段尿,或离心后测定上清液。定上清液。n(5)在规定时间内判读结果
12、)在规定时间内判读结果 加热乙酸法和加热乙酸法和磺基水杨酸法都要求立即观察结果。磺基水杨酸法都要求立即观察结果。n2 2、尿糖、尿糖 (1 1)标本留取)标本留取 根据临床需要留取清晨空腹尿或餐根据临床需要留取清晨空腹尿或餐后后2 2h h尿。尿。(2 2)容器清洁)容器清洁 不含氧化性物质,否则易导致班氏不含氧化性物质,否则易导致班氏法假阴性而试带法假阳性。法假阴性而试带法假阳性。(3 3)及时送检)及时送检 标本不宜长时间存放,以免细菌繁标本不宜长时间存放,以免细菌繁殖造成假阴性结果。殖造成假阴性结果。(4 4)干扰因素及处理)干扰因素及处理 (a)a)尿中尿酸、水杨酸盐等,可使班氏定性出现假尿中尿酸、水杨酸盐等,可使班氏定性出现假阳性;而高浓度的阳性;而高浓度的VitCVitC使试带法呈假阴性。使试带法呈假阴性。(b)b)蛋白尿蛋白尿 影响班氏法的检查结果,应加热除去。影响班氏法的检查结果,应加热除去。(c)c)其它还原性糖类其它还原性糖类 会使班氏法定性结果高于试带会使班氏法定性结果高于试带法,此时按试带法结果报告。法,此时按试带法结果报告。