1、实验性肝性脑病实验性肝性脑病 实验目的实验目的?掌握肝性脑病的概念、发病机制和临床表现。?掌握氨中毒复制肝性脑病动物模型的方法。?熟悉氨在肝性脑病发病机制中的作用。?病因与分类?发病机制?诱发因素 实验原理实验原理 肝 性 脑 病 概 念 是继发于严重肝脏疾病的神经精神综合征。是由于急性或慢性肝功能不全，使大量毒性代谢产物在血循环中堆积，临床上出现一系列神经精神症状，最终出现肝性昏迷。严重肝脏疾患严重肝脏疾患 肝脏不能处理 毒性代谢产物 门-体分流 毒性产物 绕过肝脏 病因与分类病因与分类 一、病因 严重肝功能障碍 1.晚期肝硬化 2.急性重型病毒性肝炎 3.晚期肝癌 4.严重急性肝中毒 5.
2、门-体静脉分流术后 二、分类二、分类 内源性肝性脑病、外源性肝性脑病 由急性严重肝细胞坏死 引起，毒性物质在通过肝脏时未经解毒即进入体循环。多由慢性肝脏疾患引起，毒性物质通过分流绕过肝脏，未经解毒即进入体循环。第一期：轻微的性格及行为异常 记忆力下降，学习、定向障碍 (前驱期)三、分期与临床表现三、分期与临床表现 第二期：嗜睡期，精神错乱、肌张力增高、扑翼样震颤(昏迷前期)肝性脑病第三期 第三期：昏睡期，精神错乱、易怒、暴躁 (昏睡期)肝性脑病第四期 第四期：昏迷期，神志丧失、不能唤醒 (昏迷期)发 病 机 制 、氨中毒学说 、假性神经递质学说 、血浆氨基酸失衡学说 、学说 一、氨中毒学说 3
3、 脑代谢、功能障碍 （一）血氨升高（一）血氨升高 1、血氨清除不足 A、酶系统受损 B、底物不足 C、消耗大量ATP 75%的氨来源于肠道 蛋白质 氨基酸 氨 氧化酶 尿素 氨 尿素酶 2、血氨产生过多（1）肠道产氨增多肠道产氨增多 上消化道出血 血液蛋白质分解 氨产生增加 肠粘膜淤血、水肿肠粘膜淤血、水肿 食物消化、吸收和排空食物消化、吸收和排空 氨的生成增多氨的生成增多 肝肾综合征 氮质血症 弥散入 肠道的尿素 产氨增多（2）肾脏产氨增多 对肾泌氨及肠道吸收氨的影响 NH4+NH3 H+OH-（3）肌肉产氨增多）肌肉产氨增多 肌肉收缩加剧 腺苷酸分解 产氨增多 上消化道出血 高蛋白饮食 血
4、氨升高 肠道细菌产氨增加 肝硬化 肠粘膜淤血、水肿 肌肉分解代谢增强 肾脏产氨 （二）氨对脑的毒性作用 1.干扰脑细胞的能量代谢(氨从四个环节干扰脑组织有氧氧化)氨对脑组织的毒性作用 示意图-能量代谢 2.2.使脑内神经递质含量发生改变 兴奋性神经递质(谷氨酸、乙酰胆碱):减少 抑制性神经递质(谷氨酰胺、-氨基丁酸):增多 (氨干扰脑内两类四种神经递质含量)3.对神经细胞膜有抑制作用 干扰活性 3 内流减少，影响的正常膜分布 神经冲动的形成、传导受抑制 二、假性神经递质学说二、假性神经递质学说 与正常(真性)神经递质结构相似，但其功能却远较正常神经递质为 弱的一类物质(递质)正常及假性神经递质
5、正常及假性神经递质 苯丙氨酸 酪氨酸 酪胺 羟苯乙醇胺 苯乙胺 氨基酸脱羧酶 苯乙醇胺-羟化酶 假性神经递质的致病作用 脑干网状结构是维持意识的基础。外周感受器的 神经冲动 脑干网状结构 上行激动系统 维持大脑 皮层兴奋 假性神经递质增多假性神经递质增多 竞争性取代正常神经递质竞争性取代正常神经递质 网状结构上行激动系统功能障碍网状结构上行激动系统功能障碍 昏睡、昏迷昏睡、昏迷 1.血浆氨基酸分类 支链氨基酸(,)：缬氨酸、亮氨酸、异亮氨酸 芳香族氨基酸（,)：苯丙氨酸、酪氨酸、色氨酸 三、氨基酸失衡学说三、氨基酸失衡学说 氨基酸平衡图氨基酸平衡图 3.03.5 0.61.2 2.血浆氨基酸失
6、衡及机制 (胰高血糖素)(胰岛素)氨基酸代谢不平衡机制示意图 胰高血糖素胰高血糖素 肌肉、肝脏肌肉、肝脏分解代谢分解代谢 骨骼肌内摄取利用增加 3.血浆氨基酸失衡与肝性脑病血浆氨基酸失衡与肝性脑病 :酪氨酸、苯丙氨酸、色氨酸酪氨酸、苯丙氨酸、色氨酸 :亮氨酸、异亮氨酸、缬氨酸亮氨酸、异亮氨酸、缬氨酸 由同一载体转运而通过血脑屏障由同一载体转运而通过血脑屏障 假性神经递质假性神经递质 苯乙胺 苯乙醇胺 脱羧酶?-羟化酶 酪胺 羟苯乙醇胺 脱羧酶?-羟化酶 AAA BCAA 血脑屏障 5-羟色氨酸 5-羟色胺 羟化酶 脱羧酶 多巴 多巴胺 去甲肾上腺素 苯丙氨酸 酪氨酸 色氨酸 羟化酶 羟化酶 脱
7、羧酶?-羟化酶 血浆氨基酸失衡学说：假性神经递质学说的补充和发展。四、四、-氨基丁酸学说氨基丁酸学说 1.来源：来源：谷氨酸 肠道 细菌脱羧酶?突触间隙?神经类固醇类物质?受体-配体结合?2.毒性作用：抑制性神经递质 血 3 Cl-与突触后神经元的特异性受体结合 氯离子通道开放 氯离子进入胞内 神经细胞静息电位处于超极化状态 突触后抑制 肝性脑病 血氨血氨 胰高血糖素 胰岛素 谷氨酰胺 脑内,神经类固醇,受体-配体结合 促进中性入脑 氨基酸失衡 假性神经递质 正常神经递质 作用+谷氨酸 诱 发 因 素 1.消化道出血：食管下端和胃底部静脉消化道出血：食管下端和胃底部静脉 2.曲张 曲张的食管
8、下端静脉破裂 血液中蛋白分解血液中蛋白分解 氨产生增加 2.2.电解质和酸碱平衡紊乱电解质和酸碱平衡紊乱 3 4+肾小管上皮细胞肾小管上皮细胞 血液 管腔 3 4+酸中毒时酸中毒时 肾小管上皮细胞肾小管上皮细胞 血液血液 管腔管腔 碱中毒时碱中毒时 3 促进氨的生促进氨的生成与吸收成与吸收 3.3.感染：细菌及其毒素加重肝实质损伤感染：细菌及其毒素加重肝实质损伤 感染 组织蛋白 分解 内源性 氮负荷 氨产生增多 4.4.肾功能障碍：氮质血症肾功能障碍：氮质血症 肝性脑病 肾功能不全 血尿素浓度 肠腔内尿素 5.5.高蛋白饮食高蛋白饮食 蛋白 氨及有毒物质 肠道细菌 实验原理实验原理 采用大部分
9、肝叶结扎法，造成肝功能严重损害，然后经十二指肠输入氯化铵溶液，使动物体内血氨迅速升高，以致出现震颤、抽搐、昏迷等肝性脑病的症状。?动物：家兔。?器材：常规动物手术器械、兔台、5和20注射器、细导尿管、粗棉线、纱布。?药品：1%普鲁卡因、5%氯化铵溶液。实验用品实验用品 1、称重、固定、腹部正中备皮。实验步骤实验步骤 2、1%普鲁卡因（78）作上腹壁正中局麻，自剑突下沿腹白线，作上腹正中纵切口约78，打开腹腔。局部麻醉上腹部切口3、暴露肝脏，切断镰状韧带和肝胃韧带，完全游离肝叶。注意事项：游离肝脏要轻柔，剪镰状韧带时勿损伤膈肌!4、结扎肝叶：保留右外叶及尾叶。、结扎肝叶：保留右外叶及尾叶。左外叶
10、左中叶右中叶尾叶右外叶注意事项：结扎肝叶应靠近根部肝门处，避免损伤肝叶造成出血！5、十二指肠插管。、十二指肠插管。注意事项：朝向十二指肠方向，插入肠腔约4-5，必须固定牢固，以防插管滑脱掉入腹腔。6、将细导尿管另一端置于腹腔之外，用止血钳夹住腹壁，关闭腹腔。每隔 5向插管内注入5氯化铵溶液5，直至动物出现抽搐。注意事项：术后须关闭腹腔，避免腹压升高导致内脏外溢！实验分组 结扎+生理盐水：1组 不结扎4液：2、3组 结扎4液：4、5、6、7组 观察项目 实验前 实验后 角膜反射 疼痛刺激反应 肌张力 角弓反张出现时间 单位体重的氯化铵用量 （）死亡时间 实验结果记录实验结果记录 思考题思考题?为什么从十二肠道注入氯化铵溶液可为什么从十二肠道注入氯化铵溶液可使家兔的血氨升高？?血氨升高引起肝性脑病的机制是什么？?各实验组出现不同结果说明了什么问题？
