1、L/O/G/O1检疫性真菌病害第五章 2标题添加点击此处输入相关文本内容点击此处输入相关文本内容前言点击此处输入相关文本内容标题添加点击此处输入相关文本内容3植物检疫性真菌常见检疫检验技术 直接检验 染色检验 洗涤检验 保湿萌芽检验 分离培养检验41.1.直接检验 适用范围：具明显症状的植物材料 主要工具：放大镜或解剖镜，主要是利用肉眼现场快速初检52.2.染色检验法 原理：染病的组织，或病原菌本身，经特殊的化学药品处理后，可带有特殊的颜色。例如：马铃薯癌肿病（Synchytrium endobioticum）薯块上癌瘤不明显时，可做徒手切片，加1滴1的“藏花红”染色液，健康组织细胞壁呈亮红色
2、，感病组织细胞壁呈暗红色。63.3.洗涤检验法 原理：种子表面常附着真菌孢子，将一定量样品放入容器内，加一定量无菌水，充分振荡，可使病菌孢子洗涤下来，离心后，可沉淀，镜检沉淀物可确定其种类和数量。主要仪器和试剂：振荡器、离心机、显微镜、0.1吐温溶液等7称取样品洗脱孢子（振荡）离心富集镜检计数主要试验流程81.种子表面的病菌孢子不一定能完全洗涤下来；2.离心管内，悬浮液表面常形成一层极难沉降的孢子薄膜，管壁上也可能黏附孢子；3.将悬浮液滴于玻片时，由于孢子迅速沉淀，造成一些视野间孢子分布极不均匀；4.操作不够严格，造成人为误差。影响检验结果的因素：94.保湿萌芽检验 原理：种子携带的真菌，无论
3、外表黏附的还是潜伏于种子内的，在种子萌发阶段即可开始侵染，甚至有些在种子还未萌发时就可长出病菌。主要仪器及试剂：吸水纸、沙土、冰箱、培养箱等。主要包括：保湿培养检验、沙土萌芽和土内萌芽检验等三种方法，其中保湿培养检验法是国内外最常用的一种方法。10 吸水纸法无菌吸水纸（3层）灭菌培养皿吸水11.5cm培养、观察12h光照黑暗交替恒温所观察到的结果示意图如下11125.分离培养检测 常规植物病理学方法13典型检疫性真菌病害小麦矮腥黑穗病 Wheat dwarf bunt v 小麦印度腥黑穗病 Wheat karnal buntw烟草霜霉病 Tobacco blue moldx马铃薯癌肿病 Pot
4、ato warty榆树枯萎病 Dutch elm disease14小麦矮腥黑穗病 Wheat dwarf bunt15受害麦穗与健康麦穗16小麦矮腥黑穗病 Wheat dwarf bunt分布：是麦类黑穗病中危害最大、防治最难的一种病害，它于1847年及1860年先后发现于捷克和美国，在全世界范围内传播和蔓延，目前已在欧洲、北美、南美、澳洲、亚洲、非洲等40多个国家发生。寄主：禾本科5个族，18个属，65个种。主要栽培植物有冬小麦、大麦、黑麦，冰草属为天然发病的主要禾草寄主。17危害性：1962年美国减产68.7，1972年西部7州，平均减产17，损失1.2亿Kg。菌瘿可存活10年以上。症状
5、：系统侵染性，表现为：病株特矮（1/31/2），分孽特多（1倍），病穗特密，病粒特硬，有鱼腥臭味。18病原菌：小麦矮腥黑穗菌担子菌亚门、冬孢菌纲、黑粉菌目、黑粉菌科、腥黑粉菌属、麦矮化腥黑穗菌种；形态特征：冬孢子堆多生于子房内 ，形成黑粉状的孢子团，即黑粉病瘿，可含冬孢子10-100万个。冬孢子球形，黄褐色至暗棕褐色，平均直径19-23m。外孢壁为多角形网眼状纹饰，网眼直径3-5 m，内脊平均高度1.5-3m，外围有透明胶质鞘包被，不育细胞球形或近球形，无色透明或微绿色。1920冬孢子萌发及产生的H型孢子21生物学特征：冬孢子萌发-215（38），弱光400600lx，土壤含水量3588，萌发
6、周期长3个月。冬孢子内含有内源孢子萌发抑制剂。生理分化：美国15小种，德国8个小种。初侵染来源：土壤带菌，冬孢子可存活1年，菌瘿可存活310年。传播：种子；运输工具、包装材料及下脚料；粪肥；雨水。22发病规律：侵染期长，12月4月，12月是盛期，幼嫩分蘖处侵入，细胞间蔓延，50天到生长点，随寄主生长，菌丝进入穗原始体，到各个花器，破坏子房，形成冬孢子堆。长时间38 低温利于侵染；冬麦区苗期日平均温度010 达45d以上，即使没有雪覆盖也同样利于发病。23TCK的循环:黑粉散生24流行因素：大面积感病品种、足够的菌源、冬季日均温010 的日数大于40d、稳定积雪70d以上，积雪厚度10cm以上。
7、国内适生区域：西北高原冬麦区和新疆、青藏高原晚播冬麦区极为适宜病害的发生，属高度危险区；江淮流域及华北、东北冬麦区基本适合病害发生，属危险区；西南高海拔地区有时也具备病菌入侵条件，也可能受害；春麦区不发病。25直接检查：放大镜 菌瘿洗涤检查：50g100ml无菌水，振荡5min，1015ml离心3min，定容，制片观察。冬孢子鉴定：孢子形态鉴定（网脊高度、胶鞘厚度、网目径、孢子大小、不育细胞等）。冬孢子自发荧光实验：TCK孢子于荧光显微镜下有自发荧光现象，而TCT孢子则无。冬孢子萌发试验：5、17 下，光照。孢子5 下21d开始萌发，17 不萌发。PCR技术：引物5-TGACAACGGATCT
8、CTTGGTT-3、5-TCACCAACTCCAAGCAATCT-3，206bp处有特异扩增带。检验与检测：26进口小麦和原粮必须进行检疫，病麦需除害处理。带菌小麦原粮必须集中在几个规定有条件的口岸加工灭菌处理。采用高温灭菌法，130 0.5h或120 1h。病区用40五氯硝基苯，种子重量0.5药量拌种，并在播种沟内施药处理。或单用1药量拌种。重病地应轮作倒茬或改种春小麦；冬小麦晚播可减轻发病。种植抗病品种。检疫和防治27小麦印度腥黑穗病 Wheat karnal bunt分布：印度、巴基斯坦、尼泊尔、阿富汗、伊拉克、土耳其、黎巴嫩、叙利亚、原苏联、瑞典、美国、墨西哥、澳大利亚等。寄主：小麦、
9、硬粒小麦、六倍体小麦28危害及重要性：产量影响不大，对品质影响较大，3%-面粉具臭味（三甲胺）。症状：局部侵染性，部分黑穗病，麦粒的一部分被侵染，小穗顶端麦粒黑斑，颖片张开，主要侵染胚乳，一般不侵染胚，在种子腹面表皮下形成冬孢子堆，背面胚乳部分仍完好。293031病原菌：印度尾孢黑粉菌 属于担子菌亚门、冬孢菌纲、黑粉菌目、黑粉菌科冬孢子：棕褐色，球形，近球形，2249m，外壁棘状突起，1.55m；未成熟黄色，透明胶质鞘，成熟消失，外壁有尖形尾丝。不孕细胞球形，近球形，泪珠状，半透明，淡黄褐色，附着菌丝体残体，1333m。冬孢子萌发：4月以上休眠期，萌发产生10190m 先菌丝，上产生65185
10、个担孢子，长镰刀形，可不配对结合，而直接产生芽管，作侵染菌丝用。32A partially mature teliospore showing ornamentation in median view A partially mature teliospore showing ornamentation in surface view 33初侵染来源：种子带菌，土壤带菌，秸秆和粪肥等带菌。冬孢子可存活5年。传播：种子；运输工具、包装材料及下脚料；粪肥；雨水；也可空气传播。生理分化：异宗配合，印度7个生理小种。34冬孢子萌发的适温1522，扬花期先菌丝产生的担孢子随气流传播到麦穗上，产生次生担孢
11、子，上生芽管，从颖片、外稃和内稃开张的气孔侵入。在一定温度范围内，该病流行与湿度呈正相关，与温度呈负相关。因此，扬花期遇多云、寡日照、细雨多雾的高湿天气适宜发病。发生规律：35直接检查：根据病粒的特有症状鉴定洗涤检验发病轻的麦粒可用0.2NaOH浸24h（1825），吸去多余液体，实体显微镜下观察。乌黑发亮的种子有病，淡褐色无病。PCR技术：扩增引物为5-CGTGTGAGCCATGCTACGACT-3和5-AACTTCCAAGGCGACCGTTT-3，在743bp处有一特异性扩增带，其他近似种或相关种均未出现该扩增带。检验方法：36严格检疫高温灭菌：带菌小麦原粮必须集中在几个规定有条件的口岸加
12、工灭菌处理。采用高温灭菌法，85，相对湿度80，处理3min可以杀死孢子，处理5min可以杀死菌瘿。农业措施：小麦与鹰嘴豆间作，适时早播，病轻。化学防治：三唑类和苯并吡咯类拌种，喷洒药剂（萎锈灵）等。检疫和防治：37菲律宾霜霉病3839 玉米叶片感病症状40 菲律宾霜霉病病菌形态特征4142烟草霜霉病 Tobacoo blue mold分布与危害：1891年澳大利亚首先报道，后传入欧洲、非洲、美洲和亚洲，现广泛分布，中国尚未发现。苗床和田间均可发病，蔓延速度极快，引起大量植株枯死，是烟草的毁灭性病害。1960年欧洲大流行，烟草损失达27,500吨。寄主范围：侵染，寄主范围窄，主要侵染烟草，自然
13、条件下，还可侵染番茄、辣椒、茄子和马铃薯等茄科植物，人工接种可侵染矮牵牛、酸浆和灯笼草等。43发病时期：主要在苗期，大田期也发生。发病部位：主要为害叶片。症状特点：美国生理型，主要危害幼苗，不易感染茎部；澳洲生理型，既危害烟草幼苗，还能危害烟茎和成株。病叶表面和边缘表现淡黄色、黄绿色、暗绿色的病斑，病斑为圆形、近圆形、多角形或形状不规则。病叶背面密生灰蓝色或灰褐色的霜霉层，干烟叶一般表现为灰白色或灰褐色，苗床上的病苗表现为灰蓝色。症状：44烟草霜霉病病状45 烟草霜霉病的病斑有时容易与烟草黑胫病叶部症状相混淆。黑胫病叶部病斑圆形，表现青褐色大斑，呈水渍状，背面霉层稀少，毛短色白，故与霜霉病仍有
14、区别。烟草黑胫病症状 烟草霜霉病与其他病害的症状区别46病原菌：烟草霜霉菌，Peronospora hyoscyami de Bary f.sp.tabacina(Adam)Skalicky 异名 Peronospora tabacina D.B.Adam Peronospora hyoscyami de Bary Peronospora nicotianae Speg 英文名称：blue mould of tobacco；tobacco blue mould；downy mildew；angular tobacco leaf spot；tobacco black fire；tobacco w
15、ildfire 分类地位：鞭毛菌亚门、卵菌纲、霜霉目、霜霉属病原菌47 细胞内菌丝产生细胞内吸器，孢囊梗在叶片的下表面通过气孔口伸出，长450-750m，二叉式分枝，基部分枝成锐角，上部呈直角，顶端弯曲，末端尖，上生孢子囊；孢子囊透明无色，柠檬形，大小16-28 13-17m，每个孢子含 8-22 核；卵孢子黄褐色到红褐色，球形。病原菌形态特征L/O/G/O4849 在适宜湿度条件下，孢子囊生成的最低温度为1-2，最适宜温度为15-23 ，最高温度为30 ，而在最适温度条件下，孢子形成所需的最适湿度范围是叶面相对湿度97-100%。孢子囊萌发的温度范围为：最低 l-2，最适为15-22，30有
16、少量萌发，35萌发率为0.1%。卵孢子有极强的抗逆性，经贮存4年后仍能存活；在80下烘烤4天，然后在35、RH50-60条件下发酵，孢子仍有侵染能力。致病性分化：本病菌的美国生理型和澳洲生理型致病性不同。澳洲生理型存在有3个生理小种。病原菌生物学特征：50 气流传播：气流传播是烟叶霜霉病得以造成重大危害的主要途径，而孢囊孢子是进行气流传播的主要病原体，根据气流及温度、湿度条件，孢子在两小时之内，可传播200km，最高可达1600km。卵孢子传播：在加拿大甚至中欧和北欧，卵孢子也是翌年侵染的主要来源。由于卵孢子所具有的特殊抗逆性，存在于烟株下部叶片的卵孢子，可能是病害远地传播的另一途径。传播途径
17、：51越冬：菌丝体在田间或温室的病株、自生烟苗、野生烟草上越冬；卵孢子能在病株残体和土壤中越冬。发病条件：温度和湿度是影响病害发生和流行的主要因素，夜间温度10，白天21，有间歇小雨或结露时间长或叶面湿润，光照弱等有利于病害发生。适生区域：中国大部分烟草种植区。发病规律：521.症状检查：对每批烟叶按上、中、下三层以对角线抽取烟叶，来自烟叶霜霉病疫区的烟叶，每品种每批抽样总数应不少于5万张。抽取的烟叶样品，应在杜绝污染的条件下适当回潮，使叶面舒张，然后在4x40W-5x40W白色荧光灯照射下检查病斑，病斑淡黄褐色，常受叶脉所限，呈不规则圆形，易于透光，叶背面可见霜霉霉层，可以直接用立体显微镜（
18、50 x）观察孢梗及孢囊群体，也可在光学显微镜下鉴定病原。检验方法532.洗涤检验孢子囊：3.组织透明法检验卵孢子：卵孢子大多聚生于叶脉附近，可剪取小块病斑组织（约0.5cm）滴加少许PH7磷酸缓冲液（0.02M）在-20 冻融过夜，然后用0.02MPBS（PH=7）匀浆，匀浆液经80um及90um双层筛过滤并清洗取集20um筛上物离心，检查沉淀液。54 为观察子叶或幼苗病期的症状，可将种子用0.2%NaClO灭菌后，植入盛有2%琼脂培养基或任何用于植物水培的盐类培养基的密封玻皿内，每200ml 培养基平面可播养1000粒种子，在20 光照条件下培养，种子出苗后的2周内，观察烟种幼苗有无染病迹
19、象，对可疑幼苗所生成的霉层进行镜检鉴定。4.试植检查：55 选带有暗绿色或灰褐色病斑的烟丝碎片，在双筒解剖镜下检查，选取有霜霉层病斑的碎片，置于载玻片上，滴上2-3滴苯胺兰乳酚油，用解剖针挑开铺平，加盖玻片，在酒精灯上离火焰几公分高缓缓加热煮沸，注意不要过火，以免液体喷出玻片外，并从盖玻片外补充苯胺兰乳酚油，保持不干。煮沸5-10分钟，待玻片冷却后，用吸水纸吸去多余液体即可镜检。叶片组织染成淡蓝色，卵孢子呈淡黄色至黄褐色，孢子囊和梗染成蓝色。5.烟丝检查561.1966年我国将烟草霜霉病列为对外检疫对象；1990年又颁布法令，禁止从疫区进口烟叶及种子和有关易感植物，对因科研需要自疫区引进烟属植
20、物幼苗的，应在指定的隔离检疫圃隔离试种，以严防此病传入。2.灭除病原 任何新区一旦发生烟霜霉病，应立即采取封锁病区，根除发病点的措施，除处理苗床或病田外，也要消灭病菌的各种越冬场所。检疫和防治57 药剂防治 瑞毒霉+代森锰，甲霜灵，杀毒矾等。抗病育种 栽培防治 种子播种前消毒，加强苗床管理，对发病苗床应采用蒸气灭菌，或用2%福尔马林进行土壤薰蒸，或更换新苗床，烧毁病株及残体；清除粉兰烟及野生烟，定期进行田间调查，发现病株及时拔除，消灭带病昆虫，防止人为携带等措施。3.防治方法58马铃薯癌肿病 Potato wart 分布 50多个国家受害。寄主植物 除为害马铃薯外，经人工接种的其他植物包括茄属
21、、碧冬茄属、烟草属、酸浆属，此菌还侵染番茄。59 主要侵染茎基部、匍匐茎和块茎，病菌侵入寄主刺激细胞组织增生，长出畸形、粗糙、疏松的肿瘤，瘤块大小不一，极似花椰菜。地下的癌瘤初呈乳白色，渐变成粉红色或褐色，最后变黑、腐烂。有的植株矮化，分枝增多，后期保持绿色的时间比健株长。凡地上部出现症状的，地下部不结薯，几乎全为癌瘤。危害情况6061马铃薯癌肿病菌为害整个整个薯块症状62 学名 Synchytrium endobioticum(Schib)Percival异名 Chrysophlyctis edobiotica(Schilb)；Synchytrium solani Massee英文名 war
22、t disease of potato；potato wart disease；black wart of potato；potato black scab分类地位 真菌界Fungi；壶菌门Chytridiomycota；壶菌目Chytridiales；集壶菌科Synchytriaceae；集壶菌属Synchytrium病原菌：马铃薯癌肿病菌63 病菌休眠孢子囊球形或长圆形，锈褐色，壁厚，分为三层，内壁薄而无色，中壁光滑，金黄褐色；外壁厚，色较暗，具有不规则的脊突。癌肿病菌的休眠孢子囊在春季萌发形成游动孢子，卵形或梨形，具单鞭毛，这是本菌特点之一。夏孢子囊堆近球形，直径47-72 81-100
23、m，单个夏孢子囊壁薄，呈淡黄色，成熟后散出游动孢子。形态特征64马铃薯癌肿病菌休眠孢子囊65 休眠孢子囊需要相当长的休眠期（几个月至30年或更长），才能萌发分化为孢子囊，并释放游动孢子。休眠孢子囊的抗逆性很强，100湿热2.5 min或60湿热2h才能杀死；游动孢子或双鞭毛的接合子寿命很短，无合适寄主，一般2-3小时后死亡。土壤水分是夏孢子囊和休眠孢子囊萌发、释放游动孢子，以及游动孢子活动和侵入寄主的重要条件。生物学66 病原菌主要以病种薯及病土进行远距离传播。农事操作人畜传带，喂食病薯的牲畜粪，雨水和灌溉水等都可能近距离传播。传播途径671.直接检验：有无肿瘤 2.土壤检验：漂浮法收集休眠孢
24、子囊 3.染色检验：0.1升汞或1锇酸固定，酸性品红或3龙胆紫染色，观察有无单鞭毛的游动孢子和双鞭毛的接合子 4.病原菌形态观察：夏孢子囊堆和休眠孢子囊。检验方法：68一、处理方法：划分疫区、封锁疫区、严格检疫二、防治方法：1.建立无病种薯繁育基地 推广经过茎尖脱毒、组织繁殖、无土栽培、工厂化生产脱毒种薯。2.种植抗病品种3.合理轮作 可采取与燕麦、玉米、亚麻、向日葵、油菜及豆灯等作物长期轮作，能有效地减轻发病。4.药剂和生物防治 用噻唑钠或生石灰作土壤处理，对癌肿病有防治效果。5.在出苗70%至齐苗期，用三唑酮喷雾1次。检疫措施：69榆枯萎病 Dutch elm disease分 布 印度、
25、前苏联、伊朗、土耳其、丹麦、挪威、瑞典、波兰、捷克、斯洛伐克、匈牙利、德国、奥地利、瑞士、荷兰、比利时、英国、法国、西班牙、葡萄牙、意大利、前南斯拉夫、罗马尼亚、保加利亚、希腊、加拿大、美国70S榆属：美洲榆（Ulmus americana）、山榆（U.glabra）、糙枝榆（U.fulva）和翼枝长序榆（U.alata）高度感病S荷兰榆（U.hollandica）中度感病；S榔榆（U.parvifolia）、白榆、光叶榆、英国榆和帕劳榆较抗病。寄主植物71最具毁灭性的病害之一、两次大规模的流行C20世纪初期：法国中欧 南欧 英国北美西南亚 中亚，后果：榆树大面积死亡，如美国193035年，2
26、50万株死树；C70年代：英国北美中西部北美欧洲 中亚西南亚，后果：大部分成年榆树死亡，如英国南部，197078年，230万棵榆树中有75死亡；葡萄牙，1979年80的榆树死亡。危害情况72 新稍萎嫣叶片变成黄褐色死亡；干枯的叶片往往悬挂在枝条上一段时间不脱落，症状从一个枝条迅速蔓延到另一个枝条，渐向较大枝条扩展，最后波及全株，导致整株榆树死亡；病枝颜色较深，横切面深褐色的条纹和斑点,呈褐色环；纵剖面褐色长条纹状；树杈处有许多害虫的坑道为害症状73A row of dead elm trees affected by the Dutch Elm Disease in Belgium aroun
27、d 1920 7475 榆蛇口壳 Ophiostoma ulmi(Buisman)Nannf.新榆蛇口壳 O.novo-ulmi Brasier异名 Ceratocystis ulmi 榆长喙壳分类地位 Fungi;Ascomycota;Ascomycetes;粪科菌亚纲Sordariomycetidae;蛇口壳目Ophiostomatales;蛇口壳科Ophiostomataceae;蛇口壳属Ophiostoma.病原菌：76 子囊壳黑色，基部球形，具长颈，以褐色假根状菌丝表生或埋生在基质上。子囊球形至卵形，壁薄，易消解，子囊孢子透明，单胞、桔瓣形，大小为4.5-61-1.5m，成熟后，随膨
28、胀的胶质物从长颈内流出，聚集成奶白色的粘性孢子滴。病原形态：7778生物学特性致病力培养基上生长速度最适温度 菌落形态O.ulmi榆蛇口壳 弱导致第一次流行慢30蜡质光滑O.novo-ulmi新强导致第二次流行快2022 绒毛型79越 冬菌丝体、子囊孢子、分生孢子在衰弱的病株内或被砍伐的病树、死树内的虫道和蛹室中越冬80田间主要随昆虫传播 已肯定的介体有：欧洲榆小蠹（d）、欧洲大榆小蠹、美洲榆小蠹、闪光边材小蠹、炸黑小蠹、短体边材小蠹、额沟黑小蠹、腹瘤小蠹，虽然传播介体种类很多,但最主要的是前3种小蠹虫。远距离传播：苗木、原木、木制品和包装箱垫的榆木 传 播 途 径8182 夏秋季，小蠹虫的雌
29、虫成在病死树木或快死的榆树上食蛀产卵，来年春天与羽化出来的成虫身上和体内大量的病菌孢子，这些昆虫取食健康的树木，使得孢子由取食部位侵入树体内部。通过根接也能传播病菌。侵 染 规 律8384v 抗病性：欧美榆一般感病，亚洲榆比较抗病。v 春季和初夏形成的导管孔径大，并无分隔，这个时期是榆树的高感阶段。v 不同地区，各传病介体起的作用不同。在北美，欧洲榆小蠹和美洲榆小蠹同时存在，但由于前者的繁殖速度大于后者，所以就更为重要；而在英国，欧洲大榆小蠹的羽化时期适逢榆树的最感病阶段，所以是比较重要的介体。v 长期干旱而炎热的天气以及充足的肥料也有利于病害的发生。影响发病因素85v严格施行检疫,禁止从榆枯
30、萎病疫区引进榆属苗木和原木,对传病介体昆虫的检疫也需引起重视.v外观症状检验v病原菌鉴定v分子生物学方法：已选择出对病菌产生的霉素有特异性的单克隆抗体,它可检测和定位出植物组织中的毒素,是一种很灵敏的鉴定手段.检 疫 与 检 验86v营林防治：对发病的枝条及时修剪，处理；对根部感病的树，毁根、嫁根，已死和频死的树要彻底烧毁.v化学防治：喷施杀虫剂防治介体昆虫，也可给病树注射缝隙磷，二甲砷酸，杀死寄居树干的传病介体。利用杀菌剂进行喷施和茎干注射可起治疗和保护作用,较有效的杀菌剂为多菌灵和涕必灵防治方法87v生物防治 绿色木霉、丁香假单胞、荧光假单胞、镰刀菌和菊属植物提取物对菌有抑制效果。在介体生
31、防方面，已合成欧洲大榆小蠹的性外激素，还发现一种寄生蜂，另外苏云金杆菌等对防治小蠹虫有效果。v抗病品种防治方法88大豆疫霉根腐病 病史、分布 该病菌于1948年发生在美国印第安纳州，现分布于美洲的美国、加拿大,欧洲的俄罗斯、德国、英国、法国,非洲的埃及，大洋洲的澳大利亚、新西兰，亚洲的中国、印度、日本等20多个国家。1989年在我国东北大豆产区第一次分离到大豆疫霉，现国内分布于黑龙江、吉林、安徽、河南、福建、江苏(南京)和浙江(杭州)、北京、山东等9个省区的局部地区。89危害 可引起根腐、茎腐、植株矮化、枯萎和死亡。一般发病田减产30%50%，高感品种减产50%70%，严重地块绝产，为毁灭性病
32、害。每年造成的大豆损失超过10亿美元。被害种子大多是不成熟的青豆，蛋白质含量明显降低。近几年在我省调查过程中发现凡分离到病菌的地块大多都是50%以上的死亡率。90病害症状 发病时间：整个生育期 危害部位：主要是根系 症状特点：苗前-烂种，烂芽 出苗差；幼苗-子叶节处水渍状软腐,渐变褐,变细,猝倒；真叶期后-叶由下向上变黄，萎焉，根系变褐腐烂，可沿主茎向上 扩展，形成凹陷条斑。91各生长期发病症状929394 学名：大豆疫霉菌，Phytophthora megasperma f.sp.glycinea Kuan Erwin 称为大雄疫霉大豆专化型，分类地位：属鞭毛菌亚门，卵菌纲，霜霉目，腐霉科，
33、疫霉属。病原菌：95病原形态：有性态产生卵孢子。卵孢子球形，壁厚，单生在藏卵器里。雄器侧生。卵孢子发芽长出芽管，形成菌丝或孢囊。孢囊无乳状突起，萌发后形成游动孢子或直接萌发生出芽管。形成游动孢子适温15，最低5，孢子囊直接萌发适温25。卵孢子在水中4天后萌发，每天需光照2小时以上。2427卵孢子萌发率高达78%，15或30萌发率只有8%9%。该菌已划分出24个生理小种。96大豆疫霉菌：菌丝形态特征幼龄菌丝体无隔，近直角分枝，在分枝基部稍微缢缩，老化时产生隔膜，并形成结节状或不规则的膨大。膨大部球形、椭圆形，大小不等。97大豆疫霉-菌丝膨大体98大豆疫霉-孢子囊 孢囊梗单生，无限生长，多数不分枝
34、；孢子囊顶生，初梨形，顶部稍厚，乳突不明显。99100传播途径和发病条件 病菌以卵孢子在土壤中存活越冬成为该病初侵染源。带有病菌的土粒被风雨吹或溅到大豆上能引致初侵染，积水土中的游动孢子遇上大豆根以后，先形成休止孢子，后萌发侵入，产生菌丝在寄主细胞间蔓延，形成球状或指状吸器汲取营养，同时还可形成大量卵孢子。土壤中或病残体上卵孢子可存活多年。卵孢子经30天休眠才能发芽。湿度高或多雨天气、土壤粘重，易发病。重茬地发病重。101适生性 1.寄主范围：羽扁豆、菜豆、豌豆、双花扁豆、红花、欧芹、甜菜、菠菜、胡萝卜、马铃薯、番茄、甘蔗、甜三叶草等 2.传 播：田间随土壤、流水 远距离病残体、种子、土壤10
35、2检验方法 1 1、产地检疫 2 2、症状观察：以重茬大豆地块和低洼内涝地块为重点，分苗期和成株期两期进行。苗期：子叶期重点检查有无烂籽、缺苗。真叶期重点检查猝倒、茎部缢缩、水渍状病斑。成株期:重点检查有无枯黄的植株，茎部缢缩病 斑和“八”字形下垂的叶子。103 3、分离培养 培养基 胡萝卜培养基（鲜胡萝卜200g，琼脂17g，蒸馏水1000ml）病组织 新鲜，边缘，块大 表面消毒 70%酒精5秒，无菌水冲洗，吸干 培养温度 24-28 C 观察孢子囊 将菌块放入盛有自来水的培养皿中，25 C，24h。观察卵孢子 在玉米粉琼脂平板 室温(20 C)2周 104检验方法-调运检疫 种子 将可疑病
36、粒剥下种皮，乳酚油透明，也可将豆粒放在10%KOH水溶液中处理，剥下种皮，制片镜检卵孢子。疫霉和霜霉：卵孢子大小、形状相同，区别为:疫霉 霜霉 壁厚 2.33.2m 1.32.6 m 颜色 黄褐 淡黄 部位 表皮里面，分散 表皮里面，集中 种子表面 无霜霉层 有灰白色干粉霉层105 土壤 诱捕 干土壤加蒸馏水湿润至饱和，光照下预培养46天，加510 mm深蒸馏水，加感病品种大豆叶碟，诱集624h，蒸馏水或选择性培养基培养。l3d后检查叶碟边缘有无孢子囊。取得单游动孢子菌株后，以形态特征和致病性作为最终鉴定结果。根 茎荚 叶残体 组织透明 镜检 有条件时也可进行血清学和分子生物学检验。106检疫
37、处理 1.不要从病区引种，病区种子不能外运，引种时要严格检疫 2.种子处理：甲霜灵，用药量为0.38g/kg种子，或种子重0.4%的杀毒矾闷种。3.化学防治 发现病株立即用药防治。可用：50%安克可湿性粉剂1500倍液；或氟硅唑、甲霜灵锰锌、普力克等药剂喷雾，7d喷一次，共喷3次。土壤处理可沟施甲霜灵，0.281.12kg/hm2107 4.病田实行4年以上轮作。5.种植抗病品种 6.生物防治108棉花黄萎病 棉花黄萎病从1891年美国首次发现到如今，遍布世界各主要产棉区。我国于1935年在由美国引进斯字棉时传入，截止20世纪80年代末，棉花黄萎病已遍及全国18个省、市、自治区的478个县（市
38、）。上世纪90年代以后，黄萎病扩展速度更快，尤其93、95和96年连续3年在全国范围内连续大发生，损失相当严重。据估计，我国棉花黄萎病的发生面积每年大约为266.7万hm2，占全国植棉面积的一半，重病田133.3万hm2，每年损失皮棉约为200万担。109发病症状 黄萎病一般在现蕾后才开始发生，开花结铃期达高峰。两种类型：普通型落叶型110普通型：病株症状自下而上扩展。病斑呈“褐色掌状斑驳”，后变色部位的叶缘和斑驳组织逐渐枯焦，呈现“花西瓜皮”症状111 落叶型：顶叶向下卷曲褪绿、叶片突然萎垂，呈水渍状，随即脱落成光秆，表现出急性萎蔫落叶症状。叶、蕾，甚至小铃在几天内可全部落光，后植株枯死。1
39、12病原菌 学名：大丽轮枝菌，Verticillium dahliae 分类：属于半知菌亚门，丝孢纲，丝孢目，淡色孢科，轮枝孢属。113 1.分生孢子梗及分生孢子 2.干燥时分生孢子着生状 3.假头状着生 4.膨胀菌丝 5.厚垣孢子 6.拟菌核114病原生物学 大丽轮枝菌在1030均可生长，病菌生长的最适温度为2025，33绝大多数菌株不生长，但有些菌株耐高温的能力较强，在33下仍能缓慢生长。微菌核对不良环境的抵抗力较强，能耐80高温和-30低温。微菌核萌发适温为2530，在察氏培养基上培养18h后，微菌核的萌发率接近90%。土壤含水量为20%，有利微菌核形成；40%以上则不利其形成。115寄
40、生范围：大丽轮枝菌的寄主范围极广，国外报道可为害38科660种植物，其中农作物184种，杂草153种。我国经鉴定，寄主植物至少20科80种，大田作物包括向日葵、茄子、辣子、番茄、烟草、马铃薯、甜瓜、西瓜、黄瓜、花生、菜豆、绿豆、大豆、芝麻、甜菜等，一般禾本科作物如水稻、麦类、玉米、谷子、高梁等不受侵害。116病菌致病性：产生致病毒素和导管堵塞是致病的主要机制。黄萎病菌所产轮枝菌素（VD-toxin）是致萎的主要原因。导管堵塞的原因：一是菌丝及分生孢子大量繁殖。二是病菌侵入寄主后，刺激邻近的薄壁细胞产生凝胶体、树胶和侵填体。三是病菌侵入后产生果胶酶，分解细胞和细胞壁中的胶状物质和果胶物质，引起组
41、织解体，从而堵塞导管。117侵染循环 初侵染：主要以微菌核及菌丝体在土壤、病残组织、带菌的棉籽、棉籽饼、棉籽壳和未经腐熟的土杂肥上越冬。种子带菌主要是短绒带菌，内部带菌率很低，一般不超过0.026%，但对病害的传播仍起重要作用。传播：传播途径和传播方式与枯萎病基本相同。侵入与发病：从棉花根毛细胞、根表皮细胞或根部伤口侵入，经过皮层进入导管。试验证明，接种后3天内病菌即可扩散到全株。再侵染：黄萎病菌主要以初侵染为主，再次侵染作用不大118发病条件 1.土壤菌源数量：土壤中菌源数量是黄萎病能否流行的先决条件。2.气候条件：适宜的气候条件是黄萎病能否发生流行的重要外在因素。温度25左右，相对湿度80
42、%以上是该病大发生的关键因子。3.种和品种抗病性：棉花不同种和品种间对黄萎病的抗病性存在明显差异，以海岛棉抗病性最强，陆地棉次之，亚洲棉较弱。4.病菌致病性变异及强致病力落叶型菌系的出现：病菌的变异导致产生新的生理小种或致病类型。有利于病害发生和流行。119 5.耕作与栽培措施：连作病重。病田连作年限越长，土壤内病菌积累越多，发病越重。与非寄主作物如禾谷类作物玉米、高梁、小麦、大麦等轮作发病轻，特别是水旱轮作防病效果更好。深耕可以把病残体翻入土壤深层，加速其分解，并使病菌窒息死亡，发病减轻。地势低洼、排水不良，地下水位高，田间湿度大的棉田有利于病害发生。土壤缺肥，尤其缺磷、钾肥或施氮肥过多、大
43、水漫灌的棉田病重；铺膜栽培与不铺膜棉田相比黄萎病发生早而重。120检验方法v严格施行检疫v外观症状检验：叶片、整株症状v病原菌鉴定：实验室培养v分子生物学方法：使用特异性引物进行PCR扩增-目的片段与已知片段序列比对121防治方法 采取“加强植物检疫、种植抗病品种和加强栽培管理为主”的综合防治措施。1.保护无病区，控制新病区，压缩重病区，消灭零星病区，严格检疫制度，严防病种子传入无病区。122 2.种植抗病品种 培育和种植耐黄萎病品种是防治黄萎病的根本措施之一。在种植时选用抗枯萎病耐黄萎病的品种，如：中棉12、中棉16、辽棉5号、86-6、86-4等。123 3轮作倒茬 在重病田采取玉米、小麦、大麦、高梁、油菜等与棉花轮作34年，对减轻病害有明显作用。实行稻棉水旱轮作或苜蓿与棉花轮作以及种植绿肥等效果更佳。124Q&A问答环节敏而好学，不耻下问。学问学问，边学边问。Heisquickandeagertolearn.Learningislearningandasking.125结束语感谢参与本课程，也感激大家对我们工作的支持与积极的参与。课程后会发放课程满意度评估表，如果对我们课程或者工作有什么建议和意见，也请写在上边点击进入126感谢您的观看与聆听本课件下载后可根据实际情况进行调整
