1、仿制药质量一致性研究：注射剂中不溶性微粒的评价及对微循环的影响沙先谊 复旦大学药学院副教授 硕士研究生导师 1目录2目录3雾霾、PM2.5成为社会关注焦点4什么是颗粒物(Particular Matter)、PM2.5？头发丝（70m）细沙（50m）PM10（10m）PM2.5（小于2.5m）细颗粒物：又称细粒、细颗粒。PM2.5：细颗粒物指环境空气中空气动力学当量直径小于等于 2.5 微米的颗粒物。它能较长时间悬浮于空气中，其在空气中含量浓度越高，就代表空气污染越严重。5小粒径不溶性微粒可进入体循环，健康危害最大0.65-1.1m可钻进肺泡，进入体循环7m可进入鼻腔2.1-3.3m进入支气管
2、PM2.5与居民健康危害（尤其是心血管疾病风险）关系最为显著，且粒径越小，健康危害越大 161 Size-Fractionated Particle Number Concentrations and Daily Mortality in a Chinese City Environmental Health Perspectives October 2013药物制剂中不溶性微粒的危害性712345造成局部组织栓塞和坏死引起静脉炎引起肉芽肿的产生引起药物过敏反应引起肿瘤形成和肿瘤样反应大于毛细血管直径的微粒，就可直接堵塞毛细血管，小动脉的阻塞可抑制氧化代谢或其他代谢活动，导致细胞损伤和器官坏死
3、。微粒在进入人体后，可随血液循环，引起血管内壁刺激损伤使血管壁正常状态发生改变，变得不光滑，引起血小板的粘着，导致静脉火的产生。研究表明：输液中微粒含量的多少与静脉炎的发生有关，占70左右。当微粒侵入肺、脑、肾等组织毛细血管内时，会引起巨噬细胞增殖，形成肉芽肿，从而引起脑、肺、肾和眼等部位不同程度的供血不足，造成循环障碍，直至坏死。注射液微小粒子研究具有重要的临床意义在国内，同一种药物多个厂家生产，产品存在内在质量的差异，尤其是在注射液中不溶性微粒方面。中国2010版药典对于注射剂的不溶性微粒仅仅设定大于10m和大于25m两个质控点，而对于小于10m的粒径没有严格的规定。产品的内在质量缺乏严格
4、合理的控制，存在着严重的临床用药安全性的隐患，因此研究注射液微小粒子研究具有重要的临床意义.8目录910盐酸氨溴索注射液不溶性微粒评价试验设计研究目的评价盐酸氨溴索注射液内在质量，评价药物的内在质量评价与临床用药安全性，旨在为临床用药选择提供参考和依据研究内容比较四个不同厂家各三批号注射液样品中不溶微粒数量;考察不同厂家的注射液不同剂量下的稳定性;通过建立微循环的动物模型，考察不同厂家的注射液中不溶性微粒对微循环功能的影响的差异性。D（粉剂2）A（沐舒坦）B（水剂）C（粉剂1）水针粉针微粒分别采取微粒分别采取 PM/mL=0.5m/1m/2.5m/25m/50m.共共5个测量点个测量点 沐舒坦
5、中不溶性微粒总量少于其他对照样品四个厂家产品中不溶性微粒数量具有显著性的差别(P0.05）数量从低到高排列依次为 ABCD11D(粉剂2)A(沐舒坦)B(水剂)C(粉剂1)沐舒坦小粒径的不溶性微粒数量显著性少于仿制品12A(沐舒坦)C(粉剂1)B(水剂)D(粉剂2)光子相关光度法测定盐酸氨溴索注射液不溶性微粒（0.5-2.5m）盐酸氨溴索水针剂的不溶性微粒数量显著性少于盐酸氨溴索粉针剂，其中沐舒坦中的不溶性微粒数量显著性少于其它三个厂家的产品(P0.05）。0.20.42.516.6粒子数量 *106盐酸氨溴索注射液临床用药过程中制剂稳定性评价13稳定性研究是临床用药安全的主要研究内容之一,其
6、中注射液pH变化会导致药品与其配伍溶液之间的相互作用以及药效和质量产生影响，从而在临床上具有重要的研究意义。盐酸氨溴索注射液在磷酸缓冲液(pH7.4，PBS)中的稳定性盐酸氨溴索注射液用药稳定性的临床意义根据盐酸氨溴索注射液临床用药情况，分别考察不同厂家的盐酸氨溴索注射液不同剂量下在4种常用输液配伍后的稳定性.我们以PBS模拟血液的pH环境，评价了四种产品在不同剂量条件下的稳定性。PBS定义：磷酸缓冲液(phosphate buffer solution)，因其pH值接近人体血浆，常作为体外模拟体内生理环境的标准溶液水针剂注射液在用药稳定性方面表现良好从60mg/100ml到480mg/100
7、ml下，水针剂用药稳定性优于粉针剂A(沐舒坦)B(水剂)C(粉剂1)D(粉剂2)Ambroxol Hydrochloride(%)Ambroxol Hydrochloride(%)Ambroxol Hydrochloride(%)Ambroxol Hydrochloride(%)14盐酸氨溴索注射液处方成分对用药稳定性的分析制剂处方成分A(沐舒坦)盐酸氨溴索一水柠檬酸，二水磷酸氢二钠氯化钠，注射用水，氮气B(水剂)盐酸氨溴索枸橼酸、磷酸二氢钠氯化钠、注射用水C(粉剂1)盐酸氨溴索、甘露醇D(粉剂2)盐酸氨溴索、甘露醇 水针剂在一定程度上避免了用药过程中出现药物析出，减少不溶性微粒产生的风险。1
8、5实验目的通过建立微循环的动物模型，考察不同厂家的盐酸氨溴索注射液中不溶性微粒对微循环功能的影响的差异性。旨在为该药物的内在质量评价与临床用药安全性提供一定的理论参考依据。建立正常对照组和肢体缺血再灌注大鼠小肠肠系膜微循环的动物模型，考察盐酸氨溴索注射液中的不溶性微粒对微循环功能的影响。实验方法动物模型建立评价微循环影响16沐舒坦在正常组大鼠肠系膜微循环基本无影响CA(沐舒坦)CN(生理盐水)CCCBB和D组影响较为严重 CD四种盐酸氨溴索注射液组肠系膜微血管均出现了一定程度的微循环障碍，其中A组微循环状态影响程度最轻，类似于生理盐水组。17电镜录像阳性对照颗粒越小对正常条件下大鼠肠系膜微循环
9、影响越大三个阳性微粒组的影响与粒径呈现负相关性即粒径越小影响越严重。CECFCG18沐舒坦LIR条件下(肢体缺血)大鼠肠系膜微循环的变化RNRBRDRA (沐舒坦)RCA组肠系膜微血管状态接近于同条件下的生理盐水组19阳性对照颗粒越小对LIR条件下大鼠肠系膜微循环影响越大聚苯乙烯微球0.5m组聚苯乙烯微球25m组聚苯乙烯微球2.5m组其余各样品组尤其是粉针剂组和阳性对照组加重了肠系膜微循环障碍20不溶性微粒对微静脉口径与血流速度的影响 正常大鼠组 与生理盐水相比，各实验组均显著性降低静脉血管流速(P0.05)，不同厂家产品存在差异性，其中CA组影响程度最低，CD组影响最为显著（P0.05）。2
10、101002003004005006007000510152025303540CNCACBCCCDCECFCGDV（m）BFVV(m/s)微静脉口径（m）血管流速（m/s）血管流速血管半径22BCDANS组别正常组NS（生理盐水）正常A(沐舒坦)血管直径变化不大，血流速度轻微减慢B(水剂)血流明显减慢，肠系膜有出血C(粉剂1)微循环血流速慢D(粉剂2)血管淤血、扩张，流速减慢沐舒坦注射液对大鼠模型的微循环影响最小 慢快大小正常大鼠组观测方法：愈接近中心NS，对动物模型影响愈小不溶性微粒对微静脉口径与血流速度的影响 在LIR条件下（肢体缺血组）显著性降低LIR条件下微静脉血流速度（P0.05），
11、各厂家之间存在差异性；B与D组对微静脉口径具有显著性的影响（P60岁）50%中青年（18-60岁）48%儿童（18岁）2%盐酸氨溴索用药人群分析盐酸氨溴索注射液临床用药问题临床用药在大剂量使用现象中发现有不良反应出现，可能为生产质量和工艺原因用药安全性是注射剂质量一致性评价的关键点30“因此，仿制药与原研药相比，质量存在一定的差距”“甚至一些企业的仿制药产品与原研药相比，质量和疗效得不到有效保障”仿药一致性的内容及药物评价具有深远影响意义312013年仿制药质量一致性评价工作方案规定仿制药品分期分批进行一致性评价评估其内在物质和临床疗效上与原研产品的一致性优异的生产工艺是药品质量的重要保障 可
12、保证不同时间、地域、批次产品质量的稳定性 最低限度的减少有效成分、生物利用度、杂质残留等的差异32优良生产工艺可保障我国仿制药主要存在的四点差距我国仿制药仍面临巨大挑战33原料的差距新技术的差距辅助材料的差距创新剂型的差距34借鉴原研产品生产标准，在生产工艺和处方研发的过程中，应该从源头上控制药品的质量，提高药品标准，保证临床用药安全性。如何提高仿制药一致性的建议谢谢大家35试验设计细节-分组正常对照组大鼠分组生理盐水组（CN组）：生理盐水 250l；沐舒坦组（CA组）：不溶性微粒混悬液250l（CB组）：不溶性微粒混悬液250l（CC组）：不溶性微粒混悬液250l（CD组）：不溶性微粒混悬液250l聚苯乙烯微球0.5m组（CE组）：微球0.5m稀释液 250l聚苯乙烯微球2.5m组（CF组）：微球2.5m稀释液 250l聚苯乙烯微球25m组（CG组）：微球25m稀释液250l生理盐水组（RN组）：生理盐水 250l沐舒坦组（RA组）：不溶性微粒混悬液250l（RB组）：不溶性微粒混悬液250l（RC组）：不溶性微粒混悬液250l（RD组）：不溶性微粒混悬液250l聚苯乙烯微球0.5m组（RE组）：微球0.5m稀释液250l聚苯乙烯微球2.5m组（RF组）：微球2.5m稀释液250l聚苯乙烯微球25m组（RG组）：微球25m稀释液250l缺血再灌注大鼠分组36
