1、第第2 2章章 临床微生物检验标本临床微生物检验标本的采集的采集第一节第一节 标本的采集和处理原则标本的采集和处理原则一、标本采集的一般原则一、标本采集的一般原则1.早期采集早期采集2.无菌采集无菌采集3.根据目的菌的特性用不同的方法采集根据目的菌的特性用不同的方法采集4.采集适量标本采集适量标本5.安全采集安全采集二、标本的处理二、标本的处理 一些对环境敏感的细菌如脑膜炎奈瑟菌、淋病一些对环境敏感的细菌如脑膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌和流感嗜血杆菌等应保温并立即送检奈瑟菌和流感嗜血杆菌等应保温并立即送检 厌氧性标本应放在专门的运送瓶或试管内运送，厌氧性标本应放在专门的运送瓶或试管内运送，有时可直接
2、用抽取标本的注射器运送。有时可直接用抽取标本的注射器运送。其他所有的标本采集后最好在其他所有的标本采集后最好在2h之内送到实验室。若不能之内送到实验室。若不能及时送检，标本应置于一定环境中保存，如支气管洗液、及时送检，标本应置于一定环境中保存，如支气管洗液、心包液、痰、尿等标本应保存在心包液、痰、尿等标本应保存在4环境中，脑脊液等则环境中，脑脊液等则要在要在25保存。保存。患者标本中可能含有大量致病菌，不管标本运送距离远近，患者标本中可能含有大量致病菌，不管标本运送距离远近，都必须注意安全防护。标本切勿污染容器的瓶口和外壁，都必须注意安全防护。标本切勿污染容器的瓶口和外壁，容器必须包装好，防止
3、送检过程中倒翻或碰破流出。容器必须包装好，防止送检过程中倒翻或碰破流出。临床常见微生物学检验标本通常有血液、脑脊液、临床常见微生物学检验标本通常有血液、脑脊液、尿液、伤口的脓液、胸水、腹水、粪便、痰液及尿液、伤口的脓液、胸水、腹水、粪便、痰液及泌尿生殖系统的分泌物等，下面分别介绍各种标泌尿生殖系统的分泌物等，下面分别介绍各种标本的采集方法及检测出不同病原体的临床意义。本的采集方法及检测出不同病原体的临床意义。第二节第二节 血液血液一、一、标本采集标本采集1.皮肤消毒程序皮肤消毒程序 严格执行以下三步法严格执行以下三步法:(1)70%酒精擦拭静脉穿刺部位待酒精擦拭静脉穿刺部位待30秒以上。秒以上
4、。(2)1%2%碘酊作用碘酊作用60秒或秒或10%碘氟碘氟6090秒，秒，从穿刺点向外画圈消毒从穿刺点向外画圈消毒,至消毒区域直径达至消毒区域直径达3cm以上。以上。(3)70%酒精脱碘：对碘过敏的患者，用酒精脱碘：对碘过敏的患者，用70%酒精消酒精消 毒毒60秒，待酒精挥发干燥后采血。秒，待酒精挥发干燥后采血。2.采血部位采血部位 通常采血部位为肘静脉。通常采血部位为肘静脉。疑似细菌性心内膜炎时，以肘动脉或股动脉采血为宜。疑似细菌性心内膜炎时，以肘动脉或股动脉采血为宜。对疑为细菌性骨髓炎或伤寒患者，在病灶或者髂前（后）对疑为细菌性骨髓炎或伤寒患者，在病灶或者髂前（后）上棘处严格消毒后抽取骨髓
5、上棘处严格消毒后抽取骨髓1ml作增菌培养。作增菌培养。重点重点3.静脉穿刺和培养瓶接种程序静脉穿刺和培养瓶接种程序(1)在穿刺前或穿刺期间，为防止静脉滑动，可戴乳胶手在穿刺前或穿刺期间，为防止静脉滑动，可戴乳胶手 套固定静脉，不可接触穿刺点。套固定静脉，不可接触穿刺点。(2)用注射器无菌穿刺取血后，勿换针头直接注入血培养用注射器无菌穿刺取血后，勿换针头直接注入血培养 瓶，或严格按厂商推荐的方法采血。瓶，或严格按厂商推荐的方法采血。(3)血标本接种到培养瓶后，轻轻颠倒混匀以防血液凝固。血标本接种到培养瓶后，轻轻颠倒混匀以防血液凝固。立即送检，切勿冷藏。立即送检，切勿冷藏。（1:510）4.采血量
6、采血量 自动化仪器要求成人采血量是自动化仪器要求成人采血量是810 ml/瓶，儿童瓶，儿童15 ml/瓶。瓶。5.血培养次数和采血时间血培养次数和采血时间 只要怀疑血液细菌感染，应即刻采集。只要怀疑血液细菌感染，应即刻采集。采血培养应该尽量在使用抗菌药物之前进行，在采血培养应该尽量在使用抗菌药物之前进行，在1h内采集内采集23次做血培养。次做血培养。对间歇性寒战或发热应在寒战或体温高峰到来之前对间歇性寒战或发热应在寒战或体温高峰到来之前0.51h 采采集血液，或于寒战或发烧后集血液，或于寒战或发烧后1h进行。进行。入院前两周内接受抗菌药物治疗的患者，连续入院前两周内接受抗菌药物治疗的患者，连续
7、3d，每天采，每天采2 份。份。6.标本运送标本运送 采血后应该立即送检采血后应该立即送检,如不能立即送检，可室温保存，切勿冷藏。如不能立即送检，可室温保存，切勿冷藏。重点重点特殊性全身或局部感染患者采血特殊性全身或局部感染患者采血 可疑的急性原发菌血症、真菌血症、脑膜炎、关节炎或肺炎，应在不同部位采集2-3份血液样本 不明原因发热如阴性脓肿、伤寒热或波浪热，先采集2-3份样本，24-36hr估计体温升高前再采集2份以上。可疑菌血症或真菌血症，血培养持续阴性，应该变培养方法。重点重点二、血液中常见的病原体二、血液中常见的病原体 种种 类类病病 原原 菌菌革兰阳性球菌革兰阳性球菌金黄色葡萄球菌、
8、凝固酶阴性葡萄球菌、肺炎链球菌、化脓链球菌、草绿金黄色葡萄球菌、凝固酶阴性葡萄球菌、肺炎链球菌、化脓链球菌、草绿色链球菌、肠球菌色链球菌、肠球菌革兰阳性杆菌革兰阳性杆菌结核分枝杆菌、产单核李斯特菌、阴道加特纳菌结核分枝杆菌、产单核李斯特菌、阴道加特纳菌革兰阴性球菌革兰阴性球菌脑膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌、卡他布兰汉菌脑膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌、卡他布兰汉菌革兰阴性杆菌革兰阴性杆菌大肠埃希菌、铜绿假单胞菌、克雷伯杆菌、肠杆菌、变形杆菌、沙雷菌、大肠埃希菌、铜绿假单胞菌、克雷伯杆菌、肠杆菌、变形杆菌、沙雷菌、沙门菌、不动杆菌、嗜肺军团菌、嗜血杆菌沙门菌、不动杆菌、嗜肺军团菌、嗜血杆菌真菌真菌念球菌、曲霉
9、菌、隐球菌、球孢子菌念球菌、曲霉菌、隐球菌、球孢子菌厌氧菌厌氧菌拟杆菌、产气荚膜梭菌拟杆菌、产气荚膜梭菌三、临床意义三、临床意义 血液感染是一种危重的全身感染，对其进行病原菌的检验，血液感染是一种危重的全身感染，对其进行病原菌的检验，提供病原学的诊断极为重要。提供病原学的诊断极为重要。当少量细菌侵入血液循环，为一过性，不繁殖或很少繁殖，当少量细菌侵入血液循环，为一过性，不繁殖或很少繁殖，不引起或仅引起轻微的炎症反应者称为菌血症不引起或仅引起轻微的炎症反应者称为菌血症,若有全身若有全身性炎症反应的表现称为脓毒症。性炎症反应的表现称为脓毒症。血液标本的细菌培养是诊断菌血症的基本而重要的方法，血液标
10、本的细菌培养是诊断菌血症的基本而重要的方法，若从患者血液中检出细菌，一般视为病原菌感染，提示有若从患者血液中检出细菌，一般视为病原菌感染，提示有菌血症。菌血症。常见的菌血症或脓毒症有：常见的菌血症或脓毒症有：葡萄球菌菌血症葡萄球菌菌血症 由耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（由耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）及凝）及凝固酶阴性葡萄球菌引起的菌血症和脓毒症逐年增多，固酶阴性葡萄球菌引起的菌血症和脓毒症逐年增多，占菌血症的占菌血症的10%15%，临床表现明显，发病急，中，临床表现明显，发病急，中毒症状重。毒症状重。肠球菌菌血症肠球菌菌血症 近年来明显增多，约占菌血症的近年来明显增多，约占菌血症的10%。
11、常见泌。常见泌尿生殖道、消化道和腹腔感染的患者，易并发心内尿生殖道、消化道和腹腔感染的患者，易并发心内膜炎。此菌可对多种抗生素耐药，病情较重。膜炎。此菌可对多种抗生素耐药，病情较重。革兰阴性杆菌菌血症革兰阴性杆菌菌血症 主要侵犯危及机体免疫功能低下的患者。常可主要侵犯危及机体免疫功能低下的患者。常可引起泌尿生殖道、胃肠道、胆道及呼吸道感染。引起泌尿生殖道、胃肠道、胆道及呼吸道感染。厌氧菌菌血症厌氧菌菌血症 厌氧菌常寄居于口腔、肠道和泌尿生殖道，并引厌氧菌常寄居于口腔、肠道和泌尿生殖道，并引起相应部位的感染。起相应部位的感染。真菌血症真菌血症 常由条件致病性真菌引起，有假丝酵母菌、曲霉常由条件致
12、病性真菌引起，有假丝酵母菌、曲霉菌和毛霉菌等，以白假丝酵母菌最多见，多数伴菌和毛霉菌等，以白假丝酵母菌最多见，多数伴有细菌感染。有细菌感染。第三节第三节 脑脊液脑脊液一、标本采集一、标本采集 采集脑脊液一般用腰椎穿剌术获得，特殊情况可采用小采集脑脊液一般用腰椎穿剌术获得，特殊情况可采用小脑延髓池或脑室穿刺术。脑延髓池或脑室穿刺术。标本采集后要立即送检、化验，一般不能超过标本采集后要立即送检、化验，一般不能超过1小时。小时。腰穿法无菌取脑脊液腰穿法无菌取脑脊液35ml，置无菌管内立即送检。培，置无菌管内立即送检。培养脑膜炎奈瑟菌、流感嗜血杆菌等苛养菌时，应将标本养脑膜炎奈瑟菌、流感嗜血杆菌等苛养
13、菌时，应将标本置于置于35条件下保温送检，不可置冰箱保存。但做病毒条件下保温送检，不可置冰箱保存。但做病毒检查的脑脊液标本应放置冰块，可在检查的脑脊液标本应放置冰块，可在4保存保存72h。重点重点二、脑脊液中常见病原体二、脑脊液中常见病原体 革兰阴性菌革兰阴性菌病毒病毒真菌及其他真菌及其他肺炎链球菌肺炎链球菌脑膜炎奈瑟菌脑膜炎奈瑟菌乙型脑炎病毒乙型脑炎病毒新生隐球菌新生隐球菌B群链球菌群链球菌大肠埃希菌大肠埃希菌柯萨奇病毒柯萨奇病毒A白假丝酵母菌白假丝酵母菌A群链球菌群链球菌铜绿假单胞菌铜绿假单胞菌柯萨奇病毒柯萨奇病毒B钩端螺旋体钩端螺旋体消化链球菌消化链球菌卡他布兰汉菌卡他布兰汉菌脊髓灰质炎
14、病毒脊髓灰质炎病毒结核分枝杆菌结核分枝杆菌拟杆菌拟杆菌新肠道病毒新肠道病毒6871产单核细胞李斯特菌产单核细胞李斯特菌不动杆菌不动杆菌狂犬病毒狂犬病毒炭疽芽胞杆菌炭疽芽胞杆菌葡萄球菌葡萄球菌肺炎克雷白杆菌肺炎克雷白杆菌流感嗜血杆菌流感嗜血杆菌三、临床意义三、临床意义 细菌性脑膜炎：是中枢神经系统感染的常见类型，细菌性脑膜炎：是中枢神经系统感染的常见类型，其中以流行性脑脊髓膜炎为常见，有的呈暴发型，其中以流行性脑脊髓膜炎为常见，有的呈暴发型，病情严重，病死率较高；多发年龄在病情严重，病死率较高；多发年龄在529岁，岁，冬春季多发，可用青霉素类、磺胺类、头孢霉素冬春季多发，可用青霉素类、磺胺类、头
15、孢霉素类抗生素治疗。结核性脑膜炎最常见，近几年呈类抗生素治疗。结核性脑膜炎最常见，近几年呈回升趋势，为防治重点。回升趋势，为防治重点。真菌性脑膜炎：最常见于隐球菌脑膜炎，其他的真菌性脑膜炎：最常见于隐球菌脑膜炎，其他的真菌性脑膜炎如白假丝酵母菌、球孢子性脑膜炎真菌性脑膜炎如白假丝酵母菌、球孢子性脑膜炎日渐增多，特别是免疫功能低下和恶性疾病患者日渐增多，特别是免疫功能低下和恶性疾病患者易并发，如易并发，如AIDS、恶性肿瘤，严重糖尿病、恶性肿瘤，严重糖尿病、SLE等患者易发生。等患者易发生。常合并其他细菌感染，诊断较难常合并其他细菌感染，诊断较难 流行性乙型脑炎：是一种人兽共患的自然疫源性流行性
16、乙型脑炎：是一种人兽共患的自然疫源性疾病。传染源为患者和家禽、家畜及野生动物，疾病。传染源为患者和家禽、家畜及野生动物，蚊虫为传播媒介，经蚊虫叮咬、吸血而传播，人蚊虫为传播媒介，经蚊虫叮咬、吸血而传播，人群对本病普遍易感，感染后多数人无症状而成为群对本病普遍易感，感染后多数人无症状而成为隐性感染。但可获得持久免疫力，再次发病者极隐性感染。但可获得持久免疫力，再次发病者极少见。少数患者病情严重，病死率高（少见。少数患者病情严重，病死率高（10%），），可留有后遗症。可留有后遗症。肠道病毒对中枢神经系统的危害性已逐渐引起人肠道病毒对中枢神经系统的危害性已逐渐引起人们的关注和重视。除原有脊髓灰质炎常
17、见外，还们的关注和重视。除原有脊髓灰质炎常见外，还可见多种病毒引起脑膜炎或脑炎，还不断发现新可见多种病毒引起脑膜炎或脑炎，还不断发现新的肠道病毒（新肠道病毒的肠道病毒（新肠道病毒6871型）引起的脑膜型）引起的脑膜炎及脑炎。炎及脑炎。第四节第四节 脓脓 液液一、标本采集一、标本采集 先清洗，再采集。先清洗，再采集。脓性标本是用针和注射器抽吸采集，如果没有得到抽吸物，也可脓性标本是用针和注射器抽吸采集，如果没有得到抽吸物，也可以用拭子在伤口深部采集渗出物。对于皮肤或下表皮散播性感染以用拭子在伤口深部采集渗出物。对于皮肤或下表皮散播性感染搜集病灶边缘处组织送检。搜集病灶边缘处组织送检。脓肿标本以无
18、菌注射器抽取为好，也可由排液法取得，不能送检，脓肿标本以无菌注射器抽取为好，也可由排液法取得，不能送检，冰箱冷藏。冰箱冷藏。厌氧菌感染的脓液常有腐臭应予注意。特别要注意避免正常菌群厌氧菌感染的脓液常有腐臭应予注意。特别要注意避免正常菌群所污染以及由采集至接种前尽量避免接触空气，室温下送检。所污染以及由采集至接种前尽量避免接触空气，室温下送检。重点重点二、脓液中常见病原体二、脓液中常见病原体 细菌种类细菌种类 革兰阳性菌革兰阳性菌 革兰阴性菌革兰阴性菌 球菌球菌 金黄色葡萄球菌、凝固酶金黄色葡萄球菌、凝固酶阴性葡萄球菌、化脓链球阴性葡萄球菌、化脓链球菌、肺炎链球菌、肠球菌、菌、肺炎链球菌、肠球菌
19、、消化链球菌、四联球菌消化链球菌、四联球菌 肺炎克雷白杆菌、变形肺炎克雷白杆菌、变形杆菌、杆菌、脑膜炎奈瑟菌、脑膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌、卡他布兰汉淋病奈瑟菌、卡他布兰汉菌菌 杆菌杆菌 结核分枝杆菌、非结核分结核分枝杆菌、非结核分枝杆菌、枝杆菌、破伤风杆菌、破伤风杆菌、产气荚膜梭菌、炭疽芽胞产气荚膜梭菌、炭疽芽胞杆菌杆菌 大肠埃希菌、铜绿假单胞大肠埃希菌、铜绿假单胞菌、流感嗜血杆菌、拟杆菌、流感嗜血杆菌、拟杆菌、菌、梭杆菌梭杆菌 其他其他 放线菌（衣氏放线菌、诺放线菌（衣氏放线菌、诺卡菌）卡菌）三、临床意义三、临床意义 由创伤、手术、侵入性器械操作等外科治疗引起的感染最由创伤、手术、侵入性器械操
20、作等外科治疗引起的感染最为常见。细菌造成伤口感染一般认为需每克组织内细菌数为常见。细菌造成伤口感染一般认为需每克组织内细菌数量在量在105 106个以上。个以上。外伤性创伤感染以葡萄球菌和链球菌多见，且易发生混合外伤性创伤感染以葡萄球菌和链球菌多见，且易发生混合感染。感染。烧伤创面最常见革兰阴性杆菌感染，如铜绿假单胞菌等，烧伤创面最常见革兰阴性杆菌感染，如铜绿假单胞菌等，次为革兰阳性球菌感染，可单独也可混合细菌感染。次为革兰阳性球菌感染，可单独也可混合细菌感染。急性化脓性骨关节炎常由金黄色葡萄球菌、溶血急性化脓性骨关节炎常由金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌、淋病奈瑟菌、肺炎链球菌感染所致。性链球菌
21、、淋病奈瑟菌、肺炎链球菌感染所致。放线菌感染可发生在免疫功能下降时或由于拔牙、放线菌感染可发生在免疫功能下降时或由于拔牙、口腔黏膜损伤时。口腔黏膜损伤时。深部感染易引起破伤风与气性坏疽等厌氧菌感染深部感染易引起破伤风与气性坏疽等厌氧菌感染第五节第五节 痰液痰液一、标本采集一、标本采集 自然咳痰法自然咳痰法 以晨痰为佳，尽可能在用抗菌药物之前采集以晨痰为佳，尽可能在用抗菌药物之前采集标本。用力咳出呼吸道深部的痰，将痰液直接吐标本。用力咳出呼吸道深部的痰，将痰液直接吐入无菌、清洁、干燥、不渗漏、不吸水的广口带入无菌、清洁、干燥、不渗漏、不吸水的广口带盖的容器中，标本量应盖的容器中，标本量应1ml。
22、重点重点 支气管镜采集法、防污染毛刷采集法、环甲膜穿刺支气管镜采集法、防污染毛刷采集法、环甲膜穿刺经气管吸引法、经胸壁针穿刺吸引法和支气管肺泡经气管吸引法、经胸壁针穿刺吸引法和支气管肺泡灌洗法均由临床医生按相应操作规程采集，但必须灌洗法均由临床医生按相应操作规程采集，但必须注意采集标本时尽可能避免咽喉部正常菌群的污染。注意采集标本时尽可能避免咽喉部正常菌群的污染。重点重点 小儿取痰法小儿取痰法 用弯压舌板向后压舌，将拭子伸入咽部，小儿经压舌刺激咳用弯压舌板向后压舌，将拭子伸入咽部，小儿经压舌刺激咳痰时，可喷出肺部或气管分泌物粘在拭子上送检。幼儿还可痰时，可喷出肺部或气管分泌物粘在拭子上送检。幼
23、儿还可用手指轻叩胸骨柄上方，以诱发咳痰。用手指轻叩胸骨柄上方，以诱发咳痰。合格标本：鳞状细胞合格标本：鳞状细胞10/25/低倍视野低倍视野 注意：对可疑烈性呼吸道传染病（如注意：对可疑烈性呼吸道传染病（如SARS、肺炭疽、肺鼠疫、肺炭疽、肺鼠疫等）患者采集检验标本时必须注意生物安全防护。等）患者采集检验标本时必须注意生物安全防护。重点重点二、痰标本中常见病原体二、痰标本中常见病原体细菌细菌金黄色葡萄球菌、凝固酶阴性葡萄球菌、肺炎链球菌、金黄色葡萄球菌、凝固酶阴性葡萄球菌、肺炎链球菌、A群链球菌、肠球菌卡他莫拉菌、脑膜炎奈瑟菌、白喉棒群链球菌、肠球菌卡他莫拉菌、脑膜炎奈瑟菌、白喉棒状杆菌、类白喉
24、棒状杆菌、结核分枝杆菌、炭疽芽胞杆状杆菌、类白喉棒状杆菌、结核分枝杆菌、炭疽芽胞杆菌、流感嗜血杆菌、克雷伯杆菌、铜绿假单胞菌、大肠菌、流感嗜血杆菌、克雷伯杆菌、铜绿假单胞菌、大肠埃希菌、百日咳杆菌、军团菌、支原体和衣原体等埃希菌、百日咳杆菌、军团菌、支原体和衣原体等 真菌真菌 白假丝酵母菌、隐球菌、曲霉菌和毛霉菌等白假丝酵母菌、隐球菌、曲霉菌和毛霉菌等 病毒病毒 腺病毒、流感病毒、副流感病毒、呼吸道合胞病毒、巨腺病毒、流感病毒、副流感病毒、呼吸道合胞病毒、巨细胞病毒、单纯疱疹病毒、冠状病毒和麻疹病毒等。细胞病毒、单纯疱疹病毒、冠状病毒和麻疹病毒等。三、临床意义三、临床意义 下呼吸道感染是最常见
25、的呼吸道感染症，主要指下呼吸道感染是最常见的呼吸道感染症，主要指肺实质性炎症的肺炎和支气管黏膜炎症的支气管肺实质性炎症的肺炎和支气管黏膜炎症的支气管炎，是我国常见病和病死率高的感染性疾病。炎，是我国常见病和病死率高的感染性疾病。痰标本的细菌学检查对呼吸道感染的诊断有重要痰标本的细菌学检查对呼吸道感染的诊断有重要意义。意义。病毒性肺炎病毒性肺炎真菌性肺炎真菌性肺炎支原体肺炎支原体肺炎细菌性肺炎细菌性肺炎肺炎链球菌等革兰氏阳性菌多见，革兰氏阴性杆菌逐步升高，院感50%白色链珠菌等，合并感染，诊断与治疗难第六节第六节 粪便粪便一、标本采集一、标本采集 用药前自然排便，采集脓血、黏液部分用药前自然排便
26、，采集脓血、黏液部分23g。外观无异常的粪便应从粪便的表面不同部位取材。外观无异常的粪便应从粪便的表面不同部位取材。液体便取絮状物液体便取絮状物12ml,置无菌容器内送检。置无菌容器内送检。如排便困难或婴幼儿患者，可用直肠拭子法采集如排便困难或婴幼儿患者，可用直肠拭子法采集标本。标本。重点重点 粪便标本送检粪便标本送检 对住院的腹泻成人患者，应采集住院对住院的腹泻成人患者，应采集住院3日内日内粪便标本送检，标本采集后应尽快送检，有条件粪便标本送检，标本采集后应尽快送检，有条件的提倡使用运送培养基。的提倡使用运送培养基。重点重点 消化道溃疡、幽门螺杆菌标本可取胃窦和胃体等消化道溃疡、幽门螺杆菌标
27、本可取胃窦和胃体等部位各一块胃黏膜活检标本，置入无菌生理盐水部位各一块胃黏膜活检标本，置入无菌生理盐水中立即送检，或将标本放于运送培养基，于中立即送检，或将标本放于运送培养基，于4保保存，存，24h内送检。内送检。重点重点二、粪便中常见的病原体二、粪便中常见的病原体肠毒素为主的病原菌肠毒素为主的病原菌侵袭性为主的病原侵袭性为主的病原菌菌病毒病毒 霍乱弧菌、志贺菌霍乱弧菌、志贺菌（福氏、宋内）、大肠（福氏、宋内）、大肠埃希菌（埃希菌（ETECETEC、EHECEHEC、EAECEAEC）、金黄色葡萄球）、金黄色葡萄球菌、难辨梭菌、产气荚菌、难辨梭菌、产气荚膜梭菌膜梭菌 沙门菌、大肠沙门菌、大肠埃
28、希菌（埃希菌（EPECEPEC、EIECEIEC）、志贺菌）、志贺菌（鲍氏、志贺）、（鲍氏、志贺）、弯曲菌、副溶血弧弯曲菌、副溶血弧菌、小肠结肠炎耶菌、小肠结肠炎耶尔森菌、结核分枝尔森菌、结核分枝杆菌、白假丝酵母杆菌、白假丝酵母菌菌 轮状病毒、轮状病毒、埃可病毒、埃可病毒、NorwolkNorwolk病毒、病毒、甲型肝炎病毒、甲型肝炎病毒、戊型肝炎病毒、戊型肝炎病毒、腺病毒腺病毒三、临床意义三、临床意义 细菌性痢疾细菌性痢疾 （bacillary dysentery）简称菌痢，主要是指由志简称菌痢，主要是指由志贺菌引起的肠道传染病，贺菌引起的肠道传染病，是肠道感染性腹泻最常见是肠道感染性腹泻最
29、常见的病种。的病种。细菌、真菌、病毒引起的胃细菌、真菌、病毒引起的胃肠炎肠炎 此症最为常见，由多种病此症最为常见，由多种病原体感染所致，临床常表现原体感染所致，临床常表现为腹泻、呕吐、高热等症状。为腹泻、呕吐、高热等症状。胃肠炎的病毒感染常见于胃肠炎的病毒感染常见于轮状病毒等，常引起幼儿腹轮状病毒等，常引起幼儿腹泻。泻。细菌性食物中毒细菌性食物中毒 常可危及生命，常见于沙门菌、副溶血弧菌、常可危及生命，常见于沙门菌、副溶血弧菌、致病性大肠埃希菌、葡萄球菌、肉毒梭菌、腊致病性大肠埃希菌、葡萄球菌、肉毒梭菌、腊样芽胞杆菌食物中毒。多发生在夏秋季，以暴样芽胞杆菌食物中毒。多发生在夏秋季，以暴发和集体
30、发病为特征，是一种严重的病症。发和集体发病为特征，是一种严重的病症。致病性大肠埃希菌的肠道感染致病性大肠埃希菌的肠道感染 消化性溃疡幽门螺杆菌感染主要部位是消化性溃疡幽门螺杆菌感染主要部位是胃及十二指肠球部，大量研究及临床证胃及十二指肠球部，大量研究及临床证明胃炎、消化性溃疡主要是明胃炎、消化性溃疡主要是HP所引起，所引起，因此消化性溃疡经抗感染治疗取得很好因此消化性溃疡经抗感染治疗取得很好的疗效。的疗效。第七节第七节 尿液尿液一、标本采集一、标本采集 采集方法采集方法 采集清洁中段尿。采集清洁中段尿。必要时导尿或膀胱穿刺留尿标本，但要注意导必要时导尿或膀胱穿刺留尿标本，但要注意导尿容易引起逆
31、行性感染。尿容易引起逆行性感染。重点重点 采集容器的要求：洁净、无菌、加盖、封闭、防采集容器的要求：洁净、无菌、加盖、封闭、防渗漏、广口、容积应渗漏、广口、容积应 50 ml、盒盖易于开启，不、盒盖易于开启，不含防腐剂和抑菌剂。含防腐剂和抑菌剂。标本采集后应及时送检、及时接种，室温下保存标本采集后应及时送检、及时接种，室温下保存时间不得超过时间不得超过2小时（夏季保存时间应适当缩短小时（夏季保存时间应适当缩短或冷藏保存），或冷藏保存），4冷藏保存时间不得超过冷藏保存时间不得超过8小时。小时。但应注意淋病奈瑟菌培养时标本不能冷藏保存。但应注意淋病奈瑟菌培养时标本不能冷藏保存。重点重点二、常见病原
32、体二、常见病原体 尿液中常见病原体：尿液中常见病原体：80%为革兰阴性杆菌，其中以大肠埃希菌最为革兰阴性杆菌，其中以大肠埃希菌最为常见。为常见。20%为革兰阳性菌，其中以肠球菌为多见。为革兰阳性菌，其中以肠球菌为多见。三、临床意义三、临床意义 尿路感染尿路感染 urinary tract infection 是指大量微生物在尿路中生长繁殖而引起的尿路炎症。分是指大量微生物在尿路中生长繁殖而引起的尿路炎症。分为上尿路感染（主要有肾盂肾炎）和下尿路感染（主要有为上尿路感染（主要有肾盂肾炎）和下尿路感染（主要有膀胱炎和尿道炎）。膀胱炎和尿道炎）。为最常见的感染性疾病，发病率约占人口的为最常见的感染性
33、疾病，发病率约占人口的2%。多见于。多见于成年女性。成年女性。尿路感染主要经尿道口上行感染所致，极少数为血行尿路感染主要经尿道口上行感染所致，极少数为血行感染。感染。尿路感染常见肾盂肾炎（急性和慢性）、膀胱炎（急尿路感染常见肾盂肾炎（急性和慢性）、膀胱炎（急性为主）、尿道炎（细菌性尿道炎、淋菌性尿道炎、性为主）、尿道炎（细菌性尿道炎、淋菌性尿道炎、非淋菌性尿道炎）、前列腺炎（慢性常见）等。非淋菌性尿道炎）、前列腺炎（慢性常见）等。尿路感染需要明确部位和急性与慢性，主要依病原菌尿路感染需要明确部位和急性与慢性，主要依病原菌检测，还要紧密结合临床综合考虑做出诊断。检测，还要紧密结合临床综合考虑做出
34、诊断。第八节第八节 生殖道标本生殖道标本 一、标本采集一、标本采集 采集前清洁、消毒尿道口及外阴，尿道分泌物可将无菌采集前清洁、消毒尿道口及外阴，尿道分泌物可将无菌棉拭子伸入尿道棉拭子伸入尿道34cm捻转拭子采集。捻转拭子采集。阴道分泌物采集时可用无菌棉拭子自阴道深部或阴道穹阴道分泌物采集时可用无菌棉拭子自阴道深部或阴道穹隆后部，宫颈隆后部，宫颈23cm处，转动并停留处，转动并停留1030s取分泌取分泌物。物。淋球菌培养需保温及时送检，衣原体、支原体等培养淋球菌培养需保温及时送检，衣原体、支原体等培养无法及时送检时应无法及时送检时应4保存。保存。重点重点二、常见的病原体二、常见的病原体 生殖道
35、标本主要用以检查引起性传播疾病生殖道标本主要用以检查引起性传播疾病（sexually transmitted disease,STD）的病原）的病原体。性传播疾病是指以性行为为主要传播途径的体。性传播疾病是指以性行为为主要传播途径的一组传染病。一组传染病。STD有二十几种，有二十几种，1991年年8月我国卫生部确认月我国卫生部确认8种种STD为重要防治与监测的病种为重要防治与监测的病种 8种种STD分别是：艾滋病、淋病、梅毒、软下疳、分别是：艾滋病、淋病、梅毒、软下疳、性病淋巴肉芽肿、非淋菌性尿道炎、尖锐湿疣、性病淋巴肉芽肿、非淋菌性尿道炎、尖锐湿疣、生殖器疱疹。生殖器疱疹。其病原体分别为：人
36、类免疫缺陷病毒、淋病奈其病原体分别为：人类免疫缺陷病毒、淋病奈瑟菌、梅毒螺旋体、杜克雷嗜血杆菌、沙眼衣瑟菌、梅毒螺旋体、杜克雷嗜血杆菌、沙眼衣原体原体L1、L2、L3血清型、支原体和衣原体、人血清型、支原体和衣原体、人类乳头状病毒、人类单纯疱疹病毒类乳头状病毒、人类单纯疱疹病毒2。第九节第九节 厌氧培养标本的采集厌氧培养标本的采集一、一、标本采集与运送标本采集与运送 标本的采集与运送是否适当，对厌氧菌标本的采集与运送是否适当，对厌氧菌培养能否成功至关重要。培养能否成功至关重要。注意：注意：标本不能被正常菌群所污染。标本不能被正常菌群所污染。应尽量避免接触空气。应尽量避免接触空气。重点重点 标本
37、的采集方法标本的采集方法 一般情况下，应从无正常菌群寄居的部一般情况下，应从无正常菌群寄居的部位采取标本。位采取标本。重点重点 不宜做厌氧菌培养不宜做厌氧菌培养 鼻咽拭子；齿龈拭子；痰和气管抽取物；鼻咽拭子；齿龈拭子；痰和气管抽取物；胃和肠道内容物、肛拭；接近皮肤和黏膜的胃和肠道内容物、肛拭；接近皮肤和黏膜的分泌物；褥疮溃疡及黏膜层表面；排出的尿分泌物；褥疮溃疡及黏膜层表面；排出的尿或导尿；阴道或子宫拭子；前列腺分泌物。或导尿；阴道或子宫拭子；前列腺分泌物。重点重点 经皮肤黏膜组织采集标本时，皮肤表面需要经皮肤黏膜组织采集标本时，皮肤表面需要2%碘碘酒消毒，以防正常菌群的污染。酒消毒，以防正常
38、菌群的污染。采取标本时应尽量避免接触空气，多使用针筒抽采取标本时应尽量避免接触空气，多使用针筒抽取，减少标本与空气接触的机会。取，减少标本与空气接触的机会。重点重点二、临床常见的厌氧菌二、临床常见的厌氧菌 厌氧菌（厌氧菌（anaerobic bacteria）是指一大群在有氧条件下不能生长，必须在是指一大群在有氧条件下不能生长，必须在无氧条件下才能生长的细菌。无氧条件下才能生长的细菌。厌氧菌分为两大类：一类是有芽胞的革兰阳性梭厌氧菌分为两大类：一类是有芽胞的革兰阳性梭菌，另一类是无芽胞的革兰阳性及革兰阴性的杆菌，另一类是无芽胞的革兰阳性及革兰阴性的杆菌与球菌。菌与球菌。根据革兰染色性、形态、鞭
39、毛、芽胞、荚膜和代根据革兰染色性、形态、鞭毛、芽胞、荚膜和代谢产物等可将无芽胞厌氧菌分成谢产物等可将无芽胞厌氧菌分成40多个菌属，多个菌属，300多个菌种和亚种；有芽胞厌氧菌只有一个菌多个菌种和亚种；有芽胞厌氧菌只有一个菌属，即梭菌属，共属，即梭菌属，共130个种。个种。重要的厌氧菌种类及其在正常人体内的分布 菌 名皮肤上呼吸道口腔肠道尿道阴道芽胞菌 革兰阳性杆菌 梭状芽胞杆菌属00+无芽胞菌 革兰阳性杆菌 丙酸杆菌属 双歧杆菌属 乳杆菌属 优杆菌属 放线菌属 革兰阴性杆菌 类杆菌属 普雷沃菌属 紫单胞菌属 梭杆菌属 革兰阳性球菌 消化球菌属 消化链球菌属 革兰阴性球菌 韦荣菌属+000OO0
40、0+0+00+000+0+注.0：无或很少；+：常有；+：大量；：不规则；厌氧菌广泛分布于自然界和人体中。除梭状芽胞厌氧菌广泛分布于自然界和人体中。除梭状芽胞杆菌能以芽胞的形式在自然界中长期存活外，其杆菌能以芽胞的形式在自然界中长期存活外，其他绝大多数无芽胞厌氧菌均存在于人和动物体内。他绝大多数无芽胞厌氧菌均存在于人和动物体内。在人体正常菌群中，厌氧菌占有绝对优势。在人体正常菌群中，厌氧菌占有绝对优势。三、临床意义三、临床意义 正常情况下，厌氧菌同需氧菌及兼性厌氧菌之间正常情况下，厌氧菌同需氧菌及兼性厌氧菌之间保持着微生态的动态平衡。保持着微生态的动态平衡。如长期使用广谱抗生素、激素、免疫抑制
41、剂等，如长期使用广谱抗生素、激素、免疫抑制剂等，在发生菌群失调、机体免疫力下降或细菌进入非在发生菌群失调、机体免疫力下降或细菌进入非正常寄居部位时，这些厌氧菌即可作为条件致病正常寄居部位时，这些厌氧菌即可作为条件致病菌导致内源性感染。菌导致内源性感染。厌氧菌分布十分广泛，是体内正常菌群的组成成厌氧菌分布十分广泛，是体内正常菌群的组成成员，多为条件致病菌；厌氧菌的感染遍及临床各员，多为条件致病菌；厌氧菌的感染遍及临床各科，且多为混合感染；厌氧菌对常用的氨基糖甙科，且多为混合感染；厌氧菌对常用的氨基糖甙类抗生素耐药，而对甲硝唑普遍敏感。类抗生素耐药，而对甲硝唑普遍敏感。（一）（一）厌氧菌感染的条件
42、厌氧菌感染的条件 在正常情况下，人体组织的氧化还原电势（在正常情况下，人体组织的氧化还原电势（Eh）可阻止厌氧菌的繁殖。组织缺氧或氧化还原电势可阻止厌氧菌的繁殖。组织缺氧或氧化还原电势降低均可造成厌氧菌生长繁殖的适宜环境，易于降低均可造成厌氧菌生长繁殖的适宜环境，易于遭受厌氧菌感染。遭受厌氧菌感染。重点重点 机体免疫功能下降，易并发厌氧菌感染。如接受机体免疫功能下降，易并发厌氧菌感染。如接受免疫抑制剂、抗代谢药物、放射治疗、化学药物免疫抑制剂、抗代谢药物、放射治疗、化学药物治疗的患者，其全身免疫功能受损，厌氧菌感染治疗的患者，其全身免疫功能受损，厌氧菌感染率相当高。率相当高。重点重点 一旦厌氧
43、菌进入适合其生长繁殖的感染部位，即一旦厌氧菌进入适合其生长繁殖的感染部位，即可进行繁殖和损伤组织，由坏死组织吸收余氧，可进行繁殖和损伤组织，由坏死组织吸收余氧，进而降低进而降低Eh，更有利其大量繁殖，产生内毒素、，更有利其大量繁殖，产生内毒素、外毒素、侵袭性酶、酸类、气体及其他毒性产物，外毒素、侵袭性酶、酸类、气体及其他毒性产物，造成组织进一步损伤、坏死和全身中毒。造成组织进一步损伤、坏死和全身中毒。重点重点（二）（二）厌氧菌感染的临床特征厌氧菌感染的临床特征 凡有下列情况者应怀疑厌氧菌感染：凡有下列情况者应怀疑厌氧菌感染：感染组织局部产生大感染组织局部产生大量气体量气体 某些厌氧菌某些厌氧菌
44、可产生大量气体，造可产生大量气体，造成组织肿胀和坏死，成组织肿胀和坏死，皮下有捻发音，通常皮下有捻发音，通常是产气荚膜梭菌感染是产气荚膜梭菌感染的特征。的特征。感染部位多发生在黏感染部位多发生在黏膜附近膜附近 口腔、肠道、口腔、肠道、鼻咽腔、阴道等黏膜，鼻咽腔、阴道等黏膜，均有大量厌氧菌寄生，均有大量厌氧菌寄生，这些部位及其附近有这些部位及其附近有破损，极易发生厌氧破损，极易发生厌氧菌感染。菌感染。深部外伤如枪伤后，深部外伤如枪伤后，人或动物咬伤后的继人或动物咬伤后的继发感染，均可能是厌发感染，均可能是厌氧菌感染。氧菌感染。分泌物有恶臭，或为暗血分泌物有恶臭，或为暗血红色，并在紫外光下发出红色
45、，并在紫外光下发出红色荧光，均可能是厌氧红色荧光，均可能是厌氧菌感染。发红色荧光的分菌感染。发红色荧光的分泌物，可能有产黑色素普泌物，可能有产黑色素普鲁沃菌和不解糖紫单胞菌；鲁沃菌和不解糖紫单胞菌；分泌物或脓汁中有硫磺颗分泌物或脓汁中有硫磺颗粒，为放线菌感染。粒，为放线菌感染。长期应用氨基糖甙类长期应用氨基糖甙类抗生素治疗无效的病抗生素治疗无效的病例、新近有流产史者，例、新近有流产史者，以及胃肠手术后发生以及胃肠手术后发生的感染，均有可能是的感染，均有可能是厌氧菌感染。厌氧菌感染。分泌物涂片经革兰染分泌物涂片经革兰染色，镜检发现有细菌，色，镜检发现有细菌，而常规培养阴性者；而常规培养阴性者；或
46、在液体及半固体培或在液体及半固体培养基深部长的细菌，养基深部长的细菌，均可能为厌氧菌感染。均可能为厌氧菌感染。小结小结 血液、脑脊液血液、脑脊液为无菌性体液，采集标本时要注意为无菌性体液，采集标本时要注意无菌采集，血液标本还要注意采集的时间和采血无菌采集，血液标本还要注意采集的时间和采血量，若排除污染只要有细菌生长即视为致病菌；量，若排除污染只要有细菌生长即视为致病菌；有菌部位的标本有菌部位的标本如痰液、粪便等应了解该部位常如痰液、粪便等应了解该部位常见的正常菌群，采集标本时尽量避免污染，对于见的正常菌群，采集标本时尽量避免污染，对于分离的细菌应结合临床进行分析；分离的细菌应结合临床进行分析；尿液标本尿液标本因采集时常常会受到尿道口正常菌群的因采集时常常会受到尿道口正常菌群的污染，因此尿液细菌培养应进行活菌计数。污染，因此尿液细菌培养应进行活菌计数。小结小结 标本的正确选择、采集和运送是实验室工标本的正确选择、采集和运送是实验室工作准确和有效的前提，是保证实验室质量作准确和有效的前提，是保证实验室质量的重要环节。的重要环节。
