1、课题研究背景 设计性实验 梅毒(syphilis)是由梅毒螺旋体感染人体而发生的常见性传播疾病,已经问世数百年了,目前在世界范围均有分布,是十分重要的性传播疾病;可以分为获得性梅毒、先天梅毒和妊娠梅毒等。梅毒病西医治疗方法梅毒的治疗现在主要以西药为主,自从青霉素用于治疗梅毒有奇效之后,中药基本不在作为主要医疗手段,只是起辅助作用。然而对青霉素过敏者屡见不鲜,那么,对青霉素过敏的梅毒患者又该怎样治疗呢?查阅了相关文献资料,我们发现,对于青霉素过敏的梅毒患者的代替治疗药物目前只有以下三种:红霉素、四环素、多西环素。因而我们决定对这三种药物进行实验和讨论。梅毒简介 设计性实验l梅毒(梅毒(syphi
2、lis)由梅毒螺旋体引起的一种慢性传染性疾病,当螺旋体进入人体后,迅速播散至全身各器官,产生各种症状与体征,也可呈潜伏状态,还可通过胎盘传给下一代,故危害极大。l病原体病原体梅毒螺旋体梅毒螺旋体(TreponemaPallidun)是梅毒的病原体,因其透明,不易着色,故又称苍白螺旋体。梅毒是一种广泛流行的性病,在中国发病率又有所回升。梅毒螺旋体只感染人类,分获得性梅毒与胎传梅毒。梅毒螺旋体梅毒常用治疗药物 设计性实验(一)青霉素类 为首选的高效抗梅毒的药物,血清浓度达到0.03µg/ml即可杀死梅毒螺旋体,且应该持续2周以上,常用的有苄星青霉素、普鲁卡因青霉素和水剂青霉素。(二)头
3、孢曲松钠 有治疗梅毒的报道,取得了良好的近期疗效,但在剂量、疗程和远期疗效尚无确切的经验。(三)四环素类和红霉素类 疗效较青霉素为差,通常作为青霉素过敏者的替代治疗药物。四环素类常用的有四环素、多西环素和米诺环素,孕妇及儿童禁用。红霉素类常用的有红霉素、阿奇霉素,孕妇慎用阿奇霉素。青霉素 设计性实验1.早期梅毒(包括一期、二期梅毒和早期潜伏梅毒)四环素500mg,4次/d,口服,疗程15d;或 多西环素100mg,2次/d,口服,疗程15d;或 红霉素500mg,4次/d,口服,疗程15d。2.晚期梅毒(包括三期皮肤、黏膜或骨骼梅毒,晚期潜 伏梅毒,不能确定病期的潜伏梅毒及二期复发梅毒)四环素
4、500mg,4次/d,口服,疗程30d;或 多西环素100mg,2次/d,口服,疗程30d;或 红霉素500mg,4次/d,口服,疗程30d。青霉素过敏者常用药物及治疗方案 设计性实验青霉素过敏者常用药物及治疗方案3.心血管梅毒:应住院治疗,如有心力衰竭,应在控制心力衰竭后开始抗梅毒治疗。治疗方法同晚期梅毒。4.神经梅毒 治疗方法同晚期梅毒。5.妊娠梅毒 用红霉素500mg,口服,4次/d,早期梅毒疗程15d,二期复发及晚期 梅毒疗程30d。妊娠初3个月与妊娠末3个月各治疗一个疗程,但所生 的婴儿应用青霉素补治。孕妇禁用四环素和多西环素。设计性实验实验内容1.提取青霉素过敏的梅毒患者的一期梅毒
5、和二期梅毒标本。2.对梅毒螺旋体进行体外培养,得到Nichols株。3.通过加入青霉素、红霉素、四环素与多西环素来改变其生长环境,然 后检测梅毒螺旋体的数量。4.通过实验结果分析哪一种药物对于治疗梅毒的效果最佳,并得出最适 药物剂量。设计性实验实验目的1.掌握梅毒螺旋体的人工培养技术。掌握梅毒螺旋体的人工培养技术。2.通过实验操作掌握梅毒螺旋体的染色方法及微生物学检查法。通过实验操作掌握梅毒螺旋体的染色方法及微生物学检查法。3.通过实验得出最有效的代替青霉素治疗梅毒的药物。通过实验得出最有效的代替青霉素治疗梅毒的药物。通过实验操作掌握梅毒螺旋体的染色方法及微生物学检查法。将抗原包被到载体颗粒上
6、,如:胆固醇(VDRL、USR)、活性炭(RPR)、甲苯胺红(TRUST)。早期梅毒(包括一期、二期梅毒和早期潜伏梅毒)效果与青霉素相当或者甚至超过青霉素)1)荧光密螺旋体抗体吸收试验(FTA-ABS)病原体梅毒螺旋体(TreponemaPallidun)是梅毒的病原体,因其透明,不易着色,故又称苍白螺旋体。方法一:直接显微镜检查梅毒病西医治疗方法梅毒的治疗现在主要以西药为主,自从青霉素用于治疗梅毒有奇效之后,中药基本不在作为主要医疗手段,只是起辅助作用。梅毒(syphilis)由梅毒螺旋体引起的一种慢性传染性疾病,当螺旋体进入人体后,迅速播散至全身各器官,产生各种症状与体征,也可呈潜伏状态,
7、还可通过胎盘传给下一代,故危害极大。将上述检材置于玻片上用暗视野显微镜检查,如见有呈现运动活泼,沿其长轴滚动、屈伸、旋转、前后移行等的螺旋体即有诊断意义。效果与青霉素相当或者甚至超过青霉素)留下足够的标本妥善保管,以备后面的实验使用,只取一部分进行本次用抗原致敏红细胞作间接血凝试验是检测抗体最简易的方法,所用抗原是用梅毒螺旋体(Nichols株)提取物去致敏经醛化处理的绵羊红细胞,病人的血清先与非致病性Reiter细胞。(1)非密螺旋体抗原试验1)荧光密螺旋体抗体吸收试验(FTA-ABS)繁殖,约需30小时才能分裂一次,能保持毒力。将一期与二期培养物分别平均分为32组,共64组。用红霉素500
8、mg,口服,4次/d,早期梅毒疗程15d,二期复发及晚期另:本实验还可继续延伸,可将选出的最优药物进行更细的剂量梯度进行实验,最终选出最适剂量。设计性实验实验方法及路线一、梅毒螺旋体的提取一、梅毒螺旋体的提取1.到医院征得院方同意后,对青霉素过敏的梅毒患者进行标本采集:期梅毒-由于一期梅毒的临床表现为硬下疳、腹股沟 或近卫淋巴结肿大,因而可取患者硬下疳渗、出液;期梅毒-此时患者的临床表现为多形性皮肤损害及浅 表淋巴结肿大,因而可采集梅毒疹渗出液或 局部淋巴结抽出液。2.采集样本后妥善保管 设计性实验实验方法及路线1.留下足够的标本妥善保管,以备后面的实验使用,只取一部分进行本次 实验。将一期标
9、本与二期标本分别接种在两只家兔睾丸中或眼前房内 繁殖,约需30小时才能分裂一次,能保持毒力。2.待梅毒螺旋体繁殖到原来的16倍以后(约150个小时),分组进行实 验。二、梅毒螺旋体的人工培养二、梅毒螺旋体的人工培养三、分组三、分组1.将一期与二期培养物分别平均分为32组,共64组。2.一期中取每8组为一个小组,共四组(即红霉素组,四环素组,多西 环素组与青霉素对照组)。二期同上。3.将红霉素组、四环素组、多西环素组、青霉素组设置8个剂量梯度进 行实验。(详见表格)设计性实验实验方法及路线1.方法一:直接显微镜检查 将上述检材置于玻片上用暗视野显微镜检查,如见有呈现运动活泼,沿其长轴滚动、屈伸、
10、旋转、前后移行等的螺旋体即有诊断意义。也可做镀银染色、荧光抗体染色或Giemsa染色。四、分时间段检查梅毒螺旋体数量四、分时间段检查梅毒螺旋体数量2.方法二:核酸检测 用PCR技术直接检测临床标本中梅毒螺旋体的特异性DNA片段,用于检测的引物和探针是编码外膜蛋白47kD的基因,其扩增产物经斑点印迹,或电泳Southern 印迹法鉴定。然而对青霉素过敏者屡见不鲜,那么,对青霉素过敏的梅毒患者又该怎样治疗呢?3ml缓冲盐水的小瓶内(1015ml容积),加塞混匀。梅毒螺旋体明胶凝集试验(TPPA)将上述检材置于玻片上用暗视野显微镜检查,如见有呈现运动活泼,沿其长轴滚动、屈伸、旋转、前后移行等的螺旋体
11、即有诊断意义。2)快速血浆反应素环状卡片试验(RPR)(也许可能发现其中某种药物治疗梅毒的用PCR技术直接检测临床标本中梅毒螺旋体的特异性DNA片段,用于检测的引物和探针是编码外膜蛋白47kD的基因,其扩增产物经斑点印迹,或电泳Southern 印迹法鉴定。阳性者可见发荧光的梅毒螺旋体。四环素500mg,4次/d,口服,疗程30d;然而对青霉素过敏者屡见不鲜,那么,对青霉素过敏的梅毒患者又该怎样治疗呢?的婴儿应用青霉素补治。用PCR技术直接检测临床标本中梅毒螺旋体的特异性DNA片段,用于检测的引物和探针是编码外膜蛋白47kD的基因,其扩增产物经斑点印迹,或电泳Southern 印迹法鉴定。晚期
12、梅毒(包括三期皮肤、黏膜或骨骼梅毒,晚期潜多西环素100mg,2次/d,口服,疗程30d;繁殖,约需30小时才能分裂一次,能保持毒力。用活性炭颗粒吸附VDRL抗原。3)不加热血清反应素试验(USR)另:本实验还可继续延伸,可将选出的最优药物进行更细的剂量梯度进行实验,最终选出最适剂量。梅毒病西医治疗方法梅毒的治疗现在主要以西药为主,自从青霉素用于治疗梅毒有奇效之后,中药基本不在作为主要医疗手段,只是起辅助作用。取待检血清加于环状卡圆圈内,加VDRL抗原致敏活性炭1滴,旋转摇匀8min,观察结果。注意:以上试验常有假阳性反应:结核、麻风、疟疾、类风湿性关节炎、老年人、妊娠、吸毒者等。掌握梅毒螺旋
13、体的人工培养技术。设计性实验实验方法及路线3.抗体检测(1)非密螺旋体抗原试验 多用牛心肌的心脂质作为抗原,测定病人血清中的反应素。将抗原包被到载体颗粒上,如:胆固醇(VDRL、USR)、活性炭(RPR)、甲苯胺红(TRUST)。均为初筛试验。初期梅毒病灶出现后1-2周时,阳性率为5383,二期梅毒的阳性率可达100。1)性病研究所实验室(VDRL)玻片试验 所用抗原(0.03心拟脂、0.21卵磷脂、0.9胆固醇,用无水乙醇配制)03ml加入装有0.3ml缓冲盐水的小瓶内(1015ml容积),加塞混匀。再加2.4ml缓冲盐水即为抗原悬液。待检血清经5630min灭活,滴加于玻片的漆圈内加等量抗
14、原液,摇转玻片5min充分混匀反应后观察结果。有大片絮状凝聚物为(3+),中等凝聚物为(2+),细小凝聚物为(+),液体混浊为()。设计性实验实验方法及路线2)快速血浆反应素环状卡片试验(RPR)用活性炭颗粒吸附VDRL抗原。与反应素结合形成黑色凝集块,可肉眼观察结果。取待检血清加于环状卡圆圈内,加VDRL抗原致敏活性炭1滴,旋转摇匀8min,观察结果。在白色底板出现明显黑色凝集颗粒为阳性,试验结果用肉眼很容易判断,不需显微镜,也易于推广。3)不加热血清反应素试验(USR)注意:以上试验常有假阳性反应:结核、麻风、疟疾、类风湿性关节炎、老年人、妊娠、吸毒者等。设计性实验实验方法及路线(2)密螺
15、旋体抗原试验 (确证试验)用密螺旋体抗原检测病人血清中特异性抗体,由于梅毒螺旋体、雅司螺旋体等抗原性相似,故血清学试验不能区别这些密螺旋体及其所致疾病。1)荧光密螺旋体抗体吸收试验(FTA-ABS)先用吸收剂去除病人血清非特异性抗原,提高特异性,稀释成不同稀释度,加于预先涂有梅毒螺旋体抗原的玻片上,置湿盒内,37孵育30min,洗片后再用荧光素标记的羊抗人丙球蛋白抗体,在荧光显微镜下观察。阳性者可见发荧光的梅毒螺旋体。FTA-ABS试验具高度特异性和敏感性,在第一期梅毒的头几天就可测出特异性抗体。2)梅毒螺旋体血凝试验(treponemal pallidum hemaggulation ass
16、ay,TPHA)用抗原致敏红细胞作间接血凝试验是检测抗体最简易的方法,所用抗原是用梅毒螺旋体(Nichols株)提取物去致敏经醛化处理的绵羊红细胞,病人的血清先与非致病性Reiter细胞。血清若含有抗体则与这些细胞反应形成平铺孔底的凝集;用非致敏红细胞作对照,以除外非特异性凝集。梅毒螺旋体明胶凝集试验(TPPA)设计性实验实验结果记录表剂量剂量1剂量剂量2剂量剂量3剂量剂量4剂量剂量5剂量剂量6剂量剂量7剂量剂量8一期红霉素四环素多西环素青霉素二期红霉素四环素多西环素青霉素 设计性实验预期结果及展望1.通过对比红霉素、四环素、多西环素与青霉素环境下梅毒螺旋体的存 在数量得出最有效的药物。(也许
17、可能发现其中某种药物治疗梅毒的 效果与青霉素相当或者甚至超过青霉素)2.再观察这种药物的不同剂量梯度中哪一个剂量的药效最好。3.得出结论:此药物为最适合代替青霉素来治疗青霉素过敏的梅毒患者。在查阅资料的过程中发现如果有条件的话,对青霉素过敏的梅毒患者最好是进行脱敏以后再进行青霉素治疗,因为青霉素的效果比红霉素、四环素与多西环素的效果要强。但是,对于没有这种条件的患者,依然采用代替药物。另:本实验还可继续延伸,可将选出的最优药物进行更细的剂量梯度进行实验,最终选出最适剂量。Thank you.设计性实验青霉素过敏者常用药物及治疗方案3.心血管梅毒:应住院治疗,如有心力衰竭,应在控制心力衰竭后开始
18、抗梅毒治疗。治疗方法同晚期梅毒。4.神经梅毒 治疗方法同晚期梅毒。5.妊娠梅毒 用红霉素500mg,口服,4次/d,早期梅毒疗程15d,二期复发及晚期 梅毒疗程30d。妊娠初3个月与妊娠末3个月各治疗一个疗程,但所生 的婴儿应用青霉素补治。孕妇禁用四环素和多西环素。设计性实验实验方法及路线2)快速血浆反应素环状卡片试验(RPR)用活性炭颗粒吸附VDRL抗原。与反应素结合形成黑色凝集块,可肉眼观察结果。取待检血清加于环状卡圆圈内,加VDRL抗原致敏活性炭1滴,旋转摇匀8min,观察结果。在白色底板出现明显黑色凝集颗粒为阳性,试验结果用肉眼很容易判断,不需显微镜,也易于推广。3)不加热血清反应素试
19、验(USR)注意:以上试验常有假阳性反应:结核、麻风、疟疾、类风湿性关节炎、老年人、妊娠、吸毒者等。然而对青霉素过敏者屡见不鲜,那么,对青霉素过敏的梅毒患者又该怎样治疗呢?03µg/ml即可杀死梅毒螺旋体,且应该持续2周以上,常用的有苄星青霉素、普鲁卡因青霉素和水剂青霉素。与反应素结合形成黑色凝集块,可肉眼观察结果。然而对青霉素过敏者屡见不鲜,那么,对青霉素过敏的梅毒患者又该怎样治疗呢?另:本实验还可继续延伸,可将选出的最优药物进行更细的剂量梯度进行实验,最终选出最适剂量。孕妇禁用四环素和多西环素。然而对青霉素过敏者屡见不鲜,那么,对青霉素过敏的梅毒患者又该怎样治疗呢?病原体梅毒螺
20、旋体(TreponemaPallidun)是梅毒的病原体,因其透明,不易着色,故又称苍白螺旋体。期梅毒-此时患者的临床表现为多形性皮肤损害及浅到医院征得院方同意后,对青霉素过敏的梅毒患者进行标本采集:2)梅毒螺旋体血凝试验(treponemal pallidum hemaggulation assay,TPHA)晚期梅毒(包括三期皮肤、黏膜或骨骼梅毒,晚期潜提取青霉素过敏的梅毒患者的一期梅毒和二期梅毒标本。的婴儿应用青霉素补治。用非致敏红细胞作对照,以除外非特异性凝集。期梅毒-此时患者的临床表现为多形性皮肤损害及浅二、梅毒螺旋体的人工培养孕妇禁用四环素和多西环素。另:本实验还可继续延伸,可将选
21、出的最优药物进行更细的剂量梯度进行实验,最终选出最适剂量。然而对青霉素过敏者屡见不鲜,那么,对青霉素过敏的梅毒患者又该怎样治疗呢?期梅毒-此时患者的临床表现为多形性皮肤损害及浅用PCR技术直接检测临床标本中梅毒螺旋体的特异性DNA片段,用于检测的引物和探针是编码外膜蛋白47kD的基因,其扩增产物经斑点印迹,或电泳Southern 印迹法鉴定。二、梅毒螺旋体的人工培养应住院治疗,如有心力衰竭,应在控制心力衰竭后开始抗梅毒治疗。用PCR技术直接检测临床标本中梅毒螺旋体的特异性DNA片段,用于检测的引物和探针是编码外膜蛋白47kD的基因,其扩增产物经斑点印迹,或电泳Southern 印迹法鉴定。用P
22、CR技术直接检测临床标本中梅毒螺旋体的特异性DNA片段,用于检测的引物和探针是编码外膜蛋白47kD的基因,其扩增产物经斑点印迹,或电泳Southern 印迹法鉴定。将一期与二期培养物分别平均分为32组,共64组。Thank you.1)荧光密螺旋体抗体吸收试验(FTA-ABS)提取青霉素过敏的梅毒患者的一期梅毒和二期梅毒标本。梅毒螺旋体明胶凝集试验(TPPA)梅毒(syphilis)由梅毒螺旋体引起的一种慢性传染性疾病,当螺旋体进入人体后,迅速播散至全身各器官,产生各种症状与体征,也可呈潜伏状态,还可通过胎盘传给下一代,故危害极大。的婴儿应用青霉素补治。到医院征得院方同意后,对青霉素过敏的梅毒
23、患者进行标本采集:用红霉素500mg,口服,4次/d,早期梅毒疗程15d,二期复发及晚期提取青霉素过敏的梅毒患者的一期梅毒和二期梅毒标本。在白色底板出现明显黑色凝集颗粒为阳性,试验结果用肉眼很容易判断,不需显微镜,也易于推广。2)梅毒螺旋体血凝试验(treponemal pallidum hemaggulation assay,TPHA)再观察这种药物的不同剂量梯度中哪一个剂量的药效最好。然而对青霉素过敏者屡见不鲜,那么,对青霉素过敏的梅毒患者又该怎样治疗呢?通过实验结果分析哪一种药物对于治疗梅毒的效果最佳,并得出最适期梅毒-此时患者的临床表现为多形性皮肤损害及浅通过加入青霉素、红霉素、四环素
24、与多西环素来改变其生长环境,然也可做镀银染色、荧光抗体染色或Giemsa染色。的婴儿应用青霉素补治。梅毒螺旋体明胶凝集试验(TPPA)环素组与青霉素对照组)。用抗原致敏红细胞作间接血凝试验是检测抗体最简易的方法,所用抗原是用梅毒螺旋体(Nichols株)提取物去致敏经醛化处理的绵羊红细胞,病人的血清先与非致病性Reiter细胞。后检测梅毒螺旋体的数量。然而对青霉素过敏者屡见不鲜,那么,对青霉素过敏的梅毒患者又该怎样治疗呢?另:本实验还可继续延伸,可将选出的最优药物进行更细的剂量梯度进行实验,最终选出最适剂量。的婴儿应用青霉素补治。9胆固醇,用无水乙醇配制)03ml加入装有0.对梅毒螺旋体进行体
25、外培养,得到Nichols株。1)性病研究所实验室(VDRL)玻片试验对梅毒螺旋体进行体外培养,得到Nichols株。1)荧光密螺旋体抗体吸收试验(FTA-ABS)对梅毒螺旋体进行体外培养,得到Nichols株。因而我们决定对这三种药物进行实验和讨论。的婴儿应用青霉素补治。应住院治疗,如有心力衰竭,应在控制心力衰竭后开始抗梅毒治疗。Thank you.梅毒是一种广泛流行的性病,在中国发病率又有所回升。另:本实验还可继续延伸,可将选出的最优药物进行更细的剂量梯度进行实验,最终选出最适剂量。用红霉素500mg,口服,4次/d,早期梅毒疗程15d,二期复发及晚期后检测梅毒螺旋体的数量。伏梅毒,不能确
26、定病期的潜伏梅毒及二期复发梅毒)然而对青霉素过敏者屡见不鲜,那么,对青霉素过敏的梅毒患者又该怎样治疗呢?先用吸收剂去除病人血清非特异性抗原,提高特异性,稀释成不同稀释度,加于预先涂有梅毒螺旋体抗原的玻片上,置湿盒内,37孵育30min,洗片后再用荧光素标记的羊抗人丙球蛋白抗体,在荧光显微镜下观察。应住院治疗,如有心力衰竭,应在控制心力衰竭后开始抗梅毒治疗。(也许可能发现其中某种药物治疗梅毒的伏梅毒,不能确定病期的潜伏梅毒及二期复发梅毒)在白色底板出现明显黑色凝集颗粒为阳性,试验结果用肉眼很容易判断,不需显微镜,也易于推广。四环素500mg,4次/d,口服,疗程30d;的婴儿应用青霉素补治。注意
27、:以上试验常有假阳性反应:结核、麻风、疟疾、类风湿性关节炎、老年人、妊娠、吸毒者等。的婴儿应用青霉素补治。治疗方法同晚期梅毒。用抗原致敏红细胞作间接血凝试验是检测抗体最简易的方法,所用抗原是用梅毒螺旋体(Nichols株)提取物去致敏经醛化处理的绵羊红细胞,病人的血清先与非致病性Reiter细胞。梅毒(syphilis)由梅毒螺旋体引起的一种慢性传染性疾病,当螺旋体进入人体后,迅速播散至全身各器官,产生各种症状与体征,也可呈潜伏状态,还可通过胎盘传给下一代,故危害极大。将一期与二期培养物分别平均分为32组,共64组。注意:以上试验常有假阳性反应:结核、麻风、疟疾、类风湿性关节炎、老年人、妊娠、
28、吸毒者等。效果与青霉素相当或者甚至超过青霉素)环素组与青霉素对照组)。青霉素FTA-ABS试验具高度特异性和敏感性,在第一期梅毒的头几天就可测出特异性抗体。方法一:直接显微镜检查晚期梅毒(包括三期皮肤、黏膜或骨骼梅毒,晚期潜梅毒病西医治疗方法梅毒的治疗现在主要以西药为主,自从青霉素用于治疗梅毒有奇效之后,中药基本不在作为主要医疗手段,只是起辅助作用。应住院治疗,如有心力衰竭,应在控制心力衰竭后开始抗梅毒治疗。多西环素100mg,2次/d,口服,疗程30d;用非致敏红细胞作对照,以除外非特异性凝集。用红霉素500mg,口服,4次/d,早期梅毒疗程15d,二期复发及晚期期梅毒-此时患者的临床表现为
29、多形性皮肤损害及浅提取青霉素过敏的梅毒患者的一期梅毒和二期梅毒标本。用密螺旋体抗原检测病人血清中特异性抗体,由于梅毒螺旋体、雅司螺旋体等抗原性相似,故血清学试验不能区别这些密螺旋体及其所致疾病。将抗原包被到载体颗粒上,如:胆固醇(VDRL、USR)、活性炭(RPR)、甲苯胺红(TRUST)。将抗原包被到载体颗粒上,如:胆固醇(VDRL、USR)、活性炭(RPR)、甲苯胺红(TRUST)。在白色底板出现明显黑色凝集颗粒为阳性,试验结果用肉眼很容易判断,不需显微镜,也易于推广。再观察这种药物的不同剂量梯度中哪一个剂量的药效最好。2)快速血浆反应素环状卡片试验(RPR)二、梅毒螺旋体的人工培养伏梅毒
30、,不能确定病期的潜伏梅毒及二期复发梅毒)注意:以上试验常有假阳性反应:结核、麻风、疟疾、类风湿性关节炎、老年人、妊娠、吸毒者等。先用吸收剂去除病人血清非特异性抗原,提高特异性,稀释成不同稀释度,加于预先涂有梅毒螺旋体抗原的玻片上,置湿盒内,37孵育30min,洗片后再用荧光素标记的羊抗人丙球蛋白抗体,在荧光显微镜下观察。的婴儿应用青霉素补治。红霉素类常用的有红霉素、阿奇霉素,孕妇慎用阿奇霉素。留下足够的标本妥善保管,以备后面的实验使用,只取一部分进行本次2)梅毒螺旋体血凝试验(treponemal pallidum hemaggulation assay,TPHA)方法一:直接显微镜检查梅毒螺
31、旋体明胶凝集试验(TPPA)用抗原致敏红细胞作间接血凝试验是检测抗体最简易的方法,所用抗原是用梅毒螺旋体(Nichols株)提取物去致敏经醛化处理的绵羊红细胞,病人的血清先与非致病性Reiter细胞。但是,对于没有这种条件的患者,依然采用代替药物。后检测梅毒螺旋体的数量。(2)密螺旋体抗原试验 (确证试验)将抗原包被到载体颗粒上,如:胆固醇(VDRL、USR)、活性炭(RPR)、甲苯胺红(TRUST)。先用吸收剂去除病人血清非特异性抗原,提高特异性,稀释成不同稀释度,加于预先涂有梅毒螺旋体抗原的玻片上,置湿盒内,37孵育30min,洗片后再用荧光素标记的羊抗人丙球蛋白抗体,在荧光显微镜下观察。
32、期梅毒-此时患者的临床表现为多形性皮肤损害及浅掌握梅毒螺旋体的人工培养技术。梅毒螺旋体只感染人类,分获得性梅毒与胎传梅毒。先用吸收剂去除病人血清非特异性抗原,提高特异性,稀释成不同稀释度,加于预先涂有梅毒螺旋体抗原的玻片上,置湿盒内,37孵育30min,洗片后再用荧光素标记的羊抗人丙球蛋白抗体,在荧光显微镜下观察。将抗原包被到载体颗粒上,如:胆固醇(VDRL、USR)、活性炭(RPR)、甲苯胺红(TRUST)。青霉素孕妇禁用四环素和多西环素。将一期与二期培养物分别平均分为32组,共64组。1)性病研究所实验室(VDRL)玻片试验1)荧光密螺旋体抗体吸收试验(FTA-ABS)病原体梅毒螺旋体(T
33、reponemaPallidun)是梅毒的病原体,因其透明,不易着色,故又称苍白螺旋体。将上述检材置于玻片上用暗视野显微镜检查,如见有呈现运动活泼,沿其长轴滚动、屈伸、旋转、前后移行等的螺旋体即有诊断意义。3)不加热血清反应素试验(USR)的婴儿应用青霉素补治。提取青霉素过敏的梅毒患者的一期梅毒和二期梅毒标本。然而对青霉素过敏者屡见不鲜,那么,对青霉素过敏的梅毒患者又该怎样治疗呢?阳性者可见发荧光的梅毒螺旋体。治疗方法同晚期梅毒。用非致敏红细胞作对照,以除外非特异性凝集。期梅毒-此时患者的临床表现为多形性皮肤损害及浅治疗方法同晚期梅毒。青霉素病原体梅毒螺旋体(TreponemaPallidun
34、)是梅毒的病原体,因其透明,不易着色,故又称苍白螺旋体。用活性炭颗粒吸附VDRL抗原。通过对比红霉素、四环素、多西环素与青霉素环境下梅毒螺旋体的存因而我们决定对这三种药物进行实验和讨论。二、梅毒螺旋体的人工培养(2)密螺旋体抗原试验 (确证试验)提取青霉素过敏的梅毒患者的一期梅毒和二期梅毒标本。注意:以上试验常有假阳性反应:结核、麻风、疟疾、类风湿性关节炎、老年人、妊娠、吸毒者等。四环素500mg,4次/d,口服,疗程15d;得出结论:此药物为最适合代替青霉素来治疗青霉素过敏的梅毒患者。阳性者可见发荧光的梅毒螺旋体。血清若含有抗体则与这些细胞反应形成平铺孔底的凝集;用PCR技术直接检测临床标本
35、中梅毒螺旋体的特异性DNA片段,用于检测的引物和探针是编码外膜蛋白47kD的基因,其扩增产物经斑点印迹,或电泳Southern 印迹法鉴定。梅毒(syphilis)由梅毒螺旋体引起的一种慢性传染性疾病,当螺旋体进入人体后,迅速播散至全身各器官,产生各种症状与体征,也可呈潜伏状态,还可通过胎盘传给下一代,故危害极大。与反应素结合形成黑色凝集块,可肉眼观察结果。设计性实验实验方法及路线(2)密螺旋体抗原试验 (确证试验)用密螺旋体抗原检测病人血清中特异性抗体,由于梅毒螺旋体、雅司螺旋体等抗原性相似,故血清学试验不能区别这些密螺旋体及其所致疾病。1)荧光密螺旋体抗体吸收试验(FTA-ABS)先用吸收
36、剂去除病人血清非特异性抗原,提高特异性,稀释成不同稀释度,加于预先涂有梅毒螺旋体抗原的玻片上,置湿盒内,37孵育30min,洗片后再用荧光素标记的羊抗人丙球蛋白抗体,在荧光显微镜下观察。阳性者可见发荧光的梅毒螺旋体。FTA-ABS试验具高度特异性和敏感性,在第一期梅毒的头几天就可测出特异性抗体。2)梅毒螺旋体血凝试验(treponemal pallidum hemaggulation assay,TPHA)用抗原致敏红细胞作间接血凝试验是检测抗体最简易的方法,所用抗原是用梅毒螺旋体(Nichols株)提取物去致敏经醛化处理的绵羊红细胞,病人的血清先与非致病性Reiter细胞。血清若含有抗体则与这些细胞反应形成平铺孔底的凝集;用非致敏红细胞作对照,以除外非特异性凝集。梅毒螺旋体明胶凝集试验(TPPA)