1、微生物基础微生物基础 知识培训知识培训目的目的l无菌定义l微生物污染的相关知识l药品微生物污染的来源和预防药典对无菌保证定量标准l没有任何活的微生物lFo不小于8分钟l经灭菌后，产品中污染菌存活的概率不大于百万分之一。l无菌保证值：污染菌存活概率负对数，经灭菌后，产品的无菌保证值不小于6不同工艺无菌保证比较表过度杀过度杀灭法灭法Fo1210-6热稳定性好的产品热稳定性好的产品以杀灭微生物作为实现无菌的手段以杀灭微生物作为实现无菌的手段残存概残存概率法率法Fo810-6热稳定性较差产品热稳定性较差产品工艺过程将防止产品被耐热菌污染放在首位，而工艺过程将防止产品被耐热菌污染放在首位，而不是仅依赖最
2、终灭菌去消除污染不是仅依赖最终灭菌去消除污染 流通蒸流通蒸汽法汽法不计算不计算Fo0.1%热不稳定产品热不稳定产品加热是无菌生产工艺（除菌过滤）的补充手段加热是无菌生产工艺（除菌过滤）的补充手段除菌除菌过滤法过滤法LRV70.1%不能加热的产品不能加热的产品LRV=log reduction value 过滤对数下降值，一般过滤对数下降值，一般上游为上游为107下游为下游为1，则，则LRV=7由于后续无菌操作较多，最终产品达到的无菌保由于后续无菌操作较多，最终产品达到的无菌保证水平远低于除菌过滤的本身的能力证水平远低于除菌过滤的本身的能力什么是微生物什么是微生物 l它们是非常小的单细胞或多细胞
3、生物，肉眼无法看到。l它们对营养的要求非常低。l它们是一类繁殖非常快的生物。l它们非常容易发生变异。l它们无处不在。l大多数微生物对人类有益。l有些微生物对人类有害。微生物存在微生物存在l水l空气l衣服l地面l废水l排水口l洗手池l嘴l头发l皮肤l鼻子l肠道l食物l昆虫l动物l等等微生物的主要类群：杆菌微生物的主要类群：杆菌(大肠杆菌大肠杆菌)大肠杆菌大肠杆菌(带鞭毛带鞭毛)微生物的主要类群：杆菌微生物的主要类群：杆菌(碳疽碳疽)沙门氏菌沙门氏菌 微生物的主要类群：葡萄球菌微生物的主要类群：葡萄球菌 微生物的主要类群：链球菌微生物的主要类群：链球菌 微生物的主要类群：弧状菌微生物的主要类群：弧
4、状菌 微生物的主要类群：四叠球菌微生物的主要类群：四叠球菌 细菌的繁殖：二分裂繁殖细菌的繁殖：二分裂繁殖 微生物的主要类群：黑曲霉菌微生物的主要类群：黑曲霉菌 微生物的主要类群：丝状真菌微生物的主要类群：丝状真菌 真菌的繁殖：分生孢子真菌的繁殖：分生孢子 微生物的益处微生物的益处l啤酒，葡萄酒的生产l面包酵母的生产l奶酪的生产l醋的生产l酸奶的生产l维生素的生产l类固醇的生产l抗菌素、干扰素的生产l分解废物，循环利用l帮助肠道中的食物消化l除虫微生物的害处微生物的害处l导致伤口感染l导致胃肠不适l引起感冒，咳嗽l尿道感染l败血症l癌症l脑脊膜炎l破伤风l艾滋病药品生产中微生物控制药品生产中微生
5、物控制l 为什么要对药品生产进行微生物控制？微生物可以致病。特别是注射剂的危害。l如果细菌得到了必要的养料、一定量的水份和合适的温度，它们就能迅速繁殖，它们繁殖的速度快得惊人。通常一个细菌在仅仅24小时后可产生出281兆(百万)个的细菌。主要的微生物污染源主要的微生物污染源l 空气l 水l 设备l 原辅料l 人员微生物的污染途径微生物的污染途径l 自身污染：由于患者和员工自身携带微生 物而污染。l 接触污染：由于和非无菌的用具、器械或 人的接触而污染。l 空气污染：由于空气中所含微生物的沉降、附着或被吸入而污染。l 其他污染：由于其他因素（如昆虫）而污染。控制微生物的污染途径控制微生物的污染途
6、径l 有效地阻止室外的污染侵入室内。l 迅速有效地排除室内已发生的污染。l 控制污染源，减少污染发生量。控制微生物污染途径控制微生物污染途径污染途径及解决措施l人、机、料、法、环控制微生物污染途径控制微生物污染途径一、人在洁净室中人体是主要菌源之一，不仅皮肤带有细菌(其中约l为病原性的)，人通过呼吸、讲话、操作也会散布细菌。控制微生物污染途径控制微生物污染途径根据国外实验资料，可以认为人员的发菌量有以下数据可供参考。洁净室内当工作人员穿无菌服时：静止时的发菌量一般为10300 个(min人)；躯体一般活动时的发菌量为1501000 个(min人)；快步行走时的发菌量为9002500 个(min
7、人)。咳嗽一次的发菌量一般为70700 个(min人)，喷嚏一次的发菌量一般为400060000 个(min人)。穿平常衣服时发菌量为330062000 个(min人)。无口罩发菌量：有口罩发菌量为(1：7)(1：14)。人员不良行为所产生的污染人员不良行为所产生的污染:当有如下行为时将相应增加微粒的产生量:-吸烟者的呼吸 500%-喷嚏 2000%-搓手 200%-行走 200%-跺脚 5000%控制微生物污染途径控制微生物污染途径人员需要规范或注意的部分：净化工作服穿戴净化工作服穿戴更衣更衣更衣更衣标准更衣程序：一更：脱衣换鞋洗手二更：穿洁净服/戴帽子/戴口罩缓冲：消毒双手 洁净区.更衣更
8、衣着衣种类着衣种类 测定日期测定日期 细菌数细菌数/100CM/100CM上衣内侧 使用五日后 300 外侧 使用五日后 200裤子内侧 使用五日后 450 外侧 使用五日后 70帽子内侧 使用五日后 100 外侧 使用五日后 150口罩内侧 使用一日后 22000 使用一日后 100更衣的目的：更衣的目的：想混进去，没门！想混进去，没门！操作幅度操作幅度洁净区行为要控制，要缓慢移动，保持好的身体姿势，轻声谈话，减少交谈频率等。人的行为是维持洁净区平衡不可或缺的。个人卫生（洗手消毒）个人卫生（洗手消毒）手的卫生手的卫生l每只手可携带40万个细菌；刚洗过的手，每平方厘米也可检验出3200个细菌。
9、l110万个细菌/1cm2 皮肤表面!洗手的重要性洗手的重要性:l用流水（如自来水）洗手，能使手上的致病微生物减少80%；l用皂液充分洗手，再用自来水冲洗能使致病微生物减少95%。l洗手后正确使用消毒剂能使致病微生物减少到99%。洗手的正确方法手的细菌对照实验手的细菌对照实验未洗的手未洗的手 漂洗的手漂洗的手(只用清水只用清水)洗净的手洗净的手(用皂液用皂液)洗净的手洗净的手(用消毒剂用消毒剂)正确洗手的步骤：正确洗手的步骤：1.手心搓手心；2.手心搓手背；3.手指交叉；4.手心搓拇指；5.手心搓手腕。其它其它净化工作服处理运送方式、无菌手套的处理及穿戴、消毒剂更换配制、维修人员操作。控制微生
10、物污染途径控制微生物污染途径二、环二、环洁净度测定包括：l 悬浮粒子l 微生物 -浮游菌 -沉降菌 洁净区空气洁净度等级洁净区空气洁净度等级:欧盟GMP2002微粒指标A级风速为：级风速为：0.36-0.54m/s（指导值）（指导值）级别分动态及静态；级别分动态及静态；5m：1 应视作不检出；应视作不检出；2005年年9月月21日修改，考日修改，考虑光散射及电子噪声等可能误报，标准为虑光散射及电子噪声等可能误报，标准为20个个/m3应对应对A级区的空气粒子进行连续测定，并建议对级区的空气粒子进行连续测定，并建议对B级区也连续测定级区也连续测定级别级别静态静态动态动态尘粒最大允许数尘粒最大允许数
11、/m30.5m5m0.5m5mA3500135001B350013500002000C3500002000350000020000D350000020000不作规定不作规定不作规定不作规定USP28洁净级别标准表药典标准中有关键区提法。药典标准中有关键区提法。FDA无菌制造工艺生产的无菌药品无菌制造工艺生产的无菌药品CGMP指南要求：关键区正常情况指南要求：关键区正常情况不得检出菌。不得检出菌。表中均为动态；关键区指标包括地面；表中均为动态；关键区指标包括地面；*接触碟或擦拭法接触碟或擦拭法 24-30cm2区域区域级别级别浮游菌浮游菌cfu/m3表面菌表面菌*手套手套*衣服衣服*关键区关键区
12、M3.5100 3 3 3 5控制区控制区M5.510 000 20 5 10 地地 10 20控制区控制区100 000 100控制微生物污染途径控制微生物污染途径环需要注意或控制的部分A、粒子指标的控制；B、微生物指标的控制。生产车间、公用工程分别应该注意的部分控制微生物污染途径控制微生物污染途径三、料三、料A、原辅料；B、内包材；C、与药品接触的其它部分（气体、活性炭）注射用水WFI对产品质量的重要性微生物指标法定：10个/100ml CFU 内控：8个/100ml CFU WFI微生物指标控制 生产车间、公用工程分别应该注意的部分控制微生物污染途径控制微生物污染途径四、机四、机l设备和
13、器具与药品直接接触l特别是设备或设施的卫生死角（胶塞机、配制罐及其相关工艺联接输送管道）控制微生物污染途径控制微生物污染途径设备和器具的清洗l清洁程序必须经过验证l严格按清洗周期清洗l清洗和存放设备、器具处应与生产区域洁净等级相同l注重与物料接触设施及部件处理（特别是F0低品种）控制微生物污染途径控制微生物污染途径五、法五、法上述各种控制方法应该已相关SOP形式存在。SOP执行基础管理人员作用。GMP的信条:GMP照章办事照章办事有据可有据可查查有章可循有章可循其它需要注意部分其它需要注意部分特殊情况下处理SOP空调系统停电、联动线（冻干机）、制水机系统出现故障处理流程、注意点分车间、重点是微生物控制思考题：思考题：通过本次学习，你岗位有哪些过程通过本次学习，你岗位有哪些过程控制需要完善控制需要完善（微生物）（微生物）分别从“人、机、料、法、环”五方面分工序排查。祝您成功！
