最新基因表达与蛋白质纯化技术探讨课件.ppt

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资源描述

1、 可生产分泌型蛋白;有天然立体结构,可生产分泌型蛋白;有天然立体结构,有加糖修饰功能;可进行染色体整合型有加糖修饰功能;可进行染色体整合型基因表达基因表达;糖链与哺乳动物加工的不一致,培养上糖链与哺乳动物加工的不一致,培养上清多糖浓度高清多糖浓度高;商品化表达体系:商品化表达体系:酿酒酵母酿酒酵母(Saccharomyce cerevisiae);毕氏酵母毕氏酵母 (Pichia pastoris);裂殖酵母裂殖酵母(Schizosaccharomyce pombe)可以病毒感染的型式在成虫中生产,可以病毒感染的型式在成虫中生产,也可在体外培养细胞中生产蛋白也可在体外培养细胞中生产蛋白;适合分

2、泌型和膜蛋白的表达,有加适合分泌型和膜蛋白的表达,有加糖修饰;糖修饰;糖链有所区别,表达量有限;糖链有所区别,表达量有限;作为药物宿主细胞未被作为药物宿主细胞未被FDA认可认可 可进行分泌表达,有天然可进行分泌表达,有天然立体结构,加糖方式与人立体结构,加糖方式与人体蛋白质完全一致;体蛋白质完全一致;表达量不够高,培养成本表达量不够高,培养成本较高较高 植物可大面积种植,可以廉植物可大面积种植,可以廉价大规模生产;价大规模生产;转基因植物制作费时,表达转基因植物制作费时,表达的组织特异性较难控制;的组织特异性较难控制;表达量较难提高,分离纯化表达量较难提高,分离纯化不方便不方便 分泌生产有天然

3、立体结构和分泌生产有天然立体结构和活性的蛋白质至乳汁,产量活性的蛋白质至乳汁,产量高,分离纯化方便,特别适高,分离纯化方便,特别适合药用蛋白的生产;合药用蛋白的生产;转基因动物制作花费巨大,转基因动物制作花费巨大,实验周期长实验周期长分泌生产有天然立体结构的分泌生产有天然立体结构的蛋白质到蛋清,产量高,容蛋白质到蛋清,产量高,容易贮存和运输,分离纯化方易贮存和运输,分离纯化方便;便;实验成本低,饲养费用低;实验成本低,饲养费用低;加糖方式可能与人有所不同加糖方式可能与人有所不同帮助可溶化帮助可溶化帮助分泌到周质帮助分泌到周质可用亲和层析纯化可用亲和层析纯化纯化方便纯化方便:先用先用 溶液处理溶液处理,然后然后 洗出洗出41 结束语结束语

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