1、由NordriDesign提供医学免疫学实验医学免疫学实验 Page 2 实验二实验二n(一)沉淀反应(一)沉淀反应 1、单向琼脂扩散试验(示教)、单向琼脂扩散试验(示教)2、双向琼脂扩散试验、双向琼脂扩散试验 3、对流免疫电泳试验、对流免疫电泳试验n(二)补体参与的免疫反应(二)补体参与的免疫反应 1、溶血反应、溶血反应 2、补体结合试验(原理)、补体结合试验(原理)Page 3一定条件一定条件Ag、Ab比例合适比例合适AgAbAgAgAgAg浓度浓度沉淀环直径沉淀环直径2(一)(一)沉淀反应沉淀反应可溶性可溶性Ag +Ab 沉淀物沉淀物凝胶内沉淀反应凝胶内沉淀反应1、单向琼脂扩散试验、单向
2、琼脂扩散试验 (定量)(定量)AgPage 4Page 5(一)(一)2 2、双向琼脂扩散试验、双向琼脂扩散试验 (定性或半定量)(定性或半定量)AgAbAb?AgAb?AgAb?Ag:标本中无:标本中无Ag:标本中有:标本中有Ag(相同抗原(相同抗原?)(在(在Ag、Ab比例合适处形成沉淀线)比例合适处形成沉淀线)标本标本阳性对照阳性对照Page 6Page 7(fusion)(cross)(spur)R1R2R1,2Page 8Ab?AgAb?AgAb?Ag:标本中无:标本中无Ag:标本中有:标本中有Ag(相同抗原)(相同抗原)标本标本阳性对照阳性对照(一)(一)2 2、双向琼脂扩散试验(
3、定性)、双向琼脂扩散试验(定性)(请按照实验指导讲义方法进行操作)Page 9AbAgAg?Ab?Ag1.Make a agar plate (without Ab or Ag)2.Punch wells3.Add samples:Anti-AFP positive control(AFP)Test sample(AFP?)AbAg?Page 10Ab?AgAb?Ag:no Ag(AFP)in sample serum :same Ag(AFP)in sample serumResult(1):4.incubation and observe resultsPage 11:no Ag(AFP)
4、in sample serum :same Ag(AFP)in sample serumAbAgAgAgAg?AbResult(2):Page 12sample serum(AFP?)AFP,(positive control)Anti-AFPAbAgAg?sample serum(AFP?)Anti-AFPResult(3):Ab?AgAFP,(positive control)由NordriDesign提供明天下午看结果,明天下午看结果,Page 14(一)(一)3 3、对流免疫电泳、对流免疫电泳 原理图:原理图:AbAgpH 8.6电泳力:电泳力:电渗力:电渗力:合力:合力:运动方向:运
5、动方向:Page 1515Page 16 对流免疫电泳检测方法对流免疫电泳检测方法:Ab 阳性对照(阳性对照(Ag)待测标本(?待测标本(?Ag)(有沉淀线:有(有沉淀线:有Ag;无沉淀线:无无沉淀线:无Ag)?Page 17 对流免疫电泳检测方法对流免疫电泳检测方法(加样图):(加样图):Ab(抗(抗AFP)阳性对照(阳性对照(Ag)(阳性血清,含(阳性血清,含AFP)待测标本待测标本(?(?Ag,?AFP)(有沉淀线:有(有沉淀线:有Ag,AFP;无沉淀线:无无沉淀线:无Ag,无无AFP)?Page 18(二)补体参与的免疫反应(二)补体参与的免疫反应 1 1、溶血反应、溶血反应 补体补体
6、SRBC +Ab SRBC-Ab SRBC +Ab SRBC-Ab 溶血溶血 (溶血素)(溶血素)Page 19 n(二)(二)1 1、溶血反应、溶血反应n 请按照实验指导讲义方法进行操作请按照实验指导讲义方法进行操作n 2 2人人/组组n 注意观察溶血现象注意观察溶血现象n 请分析:为何第请分析:为何第3 3、4 4管不溶血,分别缺什么成分?管不溶血,分别缺什么成分?Page 20(二)(二)2、补体结合试验(检测原理)、补体结合试验(检测原理)?补体补体Ab?Ab补体补体反应系统(待测系统)反应系统(待测系统)指示系统指示系统溶血素溶血素溶血素溶血素SRBCSRBC有有Ag无无Ag不溶血不溶血溶血溶血(标本中有(标本中有 Ag)(标本中无(标本中无 Ag)