1、DIC实验室诊断 DIC改变几乎涉及到临床每一个专科，严改变几乎涉及到临床每一个专科，严重危及患者的生命。因此近数十年来国内外学重危及患者的生命。因此近数十年来国内外学者对于本病患者的血管、血小板、凝血及纤溶者对于本病患者的血管、血小板、凝血及纤溶功能进行了广泛、深入的研究，并在本症的诊功能进行了广泛、深入的研究，并在本症的诊断与防治方面取得了较大进展。目前有关断与防治方面取得了较大进展。目前有关DIC诊断的实验室检测甚多，但存在不少问题，如诊断的实验室检测甚多，但存在不少问题，如部分特异性强、敏感度高的实验其不能及时提部分特异性强、敏感度高的实验其不能及时提供为临床结果而且价格昂贵，反之则特
2、异性、供为临床结果而且价格昂贵，反之则特异性、敏感性较差。敏感性较差。一、一、DICDIC常用检测方法常用检测方法(一）一）2PT1血小板计数血小板计数3APTT5D-D4FbgDIC常用检测方法（二）常用检测方法（二）6.TT8.AT:A 9.3P 7.：C6.凝血酶时间（凝血酶时间（TT）测定）测定 原理原理 在血浆中加入在血浆中加入“标准化标准化”的凝血的凝血酶溶液后，血浆凝固所需的时间。酶溶液后，血浆凝固所需的时间。材料材料 0.13mol/L枸橼酸钠溶液；凝血酶溶枸橼酸钠溶液；凝血酶溶液；正常血浆；水浴箱、秒表等。液；正常血浆；水浴箱、秒表等。操作操作 血浆血浆0.1ml于试管中、于
3、试管中、37水浴，水浴，加加0.1ml“标准化标准化”的凝血酶溶液，计的凝血酶溶液，计时。连续测定两次或三次取平均值时。连续测定两次或三次取平均值。注意事项注意事项 稀释凝血酶溶液稀释凝血酶溶液4可保存可保存3天；血浆室温下天；血浆室温下3h；不宜；不宜EDTA和肝素和肝素抗凝；终点判断：出现混浊的初期凝固抗凝；终点判断：出现混浊的初期凝固为准。为准。参考值参考值 1618秒，受检者超过对照秒，受检者超过对照3秒以上为异常。秒以上为异常。临床意义临床意义 TT延长多见于肝素增多或类延长多见于肝素增多或类肝素抗凝物质存在，如系统性红斑狼疮、肝素抗凝物质存在，如系统性红斑狼疮、肝病或肾病等；低（无
4、）纤维蛋白原血肝病或肾病等；低（无）纤维蛋白原血症，异常纤维蛋白原血症；症，异常纤维蛋白原血症；FDP增多等。增多等。评价评价 过高、过低过高、过低Fg可影响结果；过多可影响结果；过多FDP和类肝素造成和类肝素造成TT延长，可用鱼精蛋延长，可用鱼精蛋白或蛇毒时间测定纠正及鉴别；白或蛇毒时间测定纠正及鉴别；TT可作可作为临床尿激酶等溶栓及肝素等抗凝治疗为临床尿激酶等溶栓及肝素等抗凝治疗的监护指标。的监护指标。7 7 血浆因子血浆因子促凝活性检测促凝活性检测原理原理 在缺乏因子在缺乏因子的血浆中，加入正的血浆中，加入正常血浆或病人的受检血浆，观察常血浆或病人的受检血浆，观察APTT的的结果值，依据
5、实验室制定的标准曲线，结果值，依据实验室制定的标准曲线，可以计算出病人受检血浆中凝血因子的可以计算出病人受检血浆中凝血因子的含量。含量。材料材料 乏因子乏因子基质、基质、APTT试剂、缓试剂、缓冲液、正常血浆、水浴箱、秒表等。冲液、正常血浆、水浴箱、秒表等。操作操作（一期法）（一期法）将乏因子基质血浆与经过倍比稀释成不同将乏因子基质血浆与经过倍比稀释成不同浓度的已知因子浓度的已知因子含量的标准血浆混合后测定含量的标准血浆混合后测定APTT，绘制标准曲线；测定患者血浆同乏因子，绘制标准曲线；测定患者血浆同乏因子基质血浆混合后的基质血浆混合后的APTT，通过曲线查结果。，通过曲线查结果。注意事项注
6、意事项 乏因子基质血浆活性乏因子基质血浆活性30人。人。参考值参考值 79%-128%临床意义临床意义 血浆中凝血因子血浆中凝血因子活性增活性增高，主要见于血栓前和血栓状态。高，主要见于血栓前和血栓状态。减低多见于血友病患者，对于诊断减低多见于血友病患者，对于诊断轻型血友病和血管性血友病以及判断血轻型血友病和血管性血友病以及判断血友病携带者有一定的意义。因子友病携带者有一定的意义。因子:C水水平减低也是协助诊断肝病伴发平减低也是协助诊断肝病伴发DIC者的重者的重要诊断指标（因子要诊断指标（因子：C活性活性50%）。）。评价评价 1.急性期反应中可明显升高；急性期反应中可明显升高；2.降低时需与
7、降低时需与VWF含量测定同时进行；含量测定同时进行；3.单纯单纯APTT延长时检测。延长时检测。4.受检标本可用缓冲液另行稀释。受检标本可用缓冲液另行稀释。8 8抗凝血酶活性（抗凝血酶活性（AT:AAT:A）检测）检测 原理原理 发色底物法发色底物法 在待测血浆中加入过量的凝血酶，在待测血浆中加入过量的凝血酶，凝血酶与血浆中的凝血酶与血浆中的AT形成形成1：1的复合物，的复合物，剩余的凝血酶作用于显色肽，裂解出显剩余的凝血酶作用于显色肽，裂解出显色基因对硝基苯胺（色基因对硝基苯胺（PNA），显色程度），显色程度与剩余凝血酶的量呈正相关，而与血浆与剩余凝血酶的量呈正相关，而与血浆AT：A呈负相关
8、。呈负相关。材料材料 缓冲液、凝血酶、发色底物、缓冲液、凝血酶、发色底物、标准血浆、终止液。标准血浆、终止液。操作操作 制备标准曲线：稀释标准血浆加制备标准曲线：稀释标准血浆加入酶标板；同时稀释待测血浆；加入过入酶标板；同时稀释待测血浆；加入过量凝血酶；混匀，量凝血酶；混匀，37湿盒湿盒30min；加；加入发色底物，混匀入发色底物，混匀3min后加终止液；酶后加终止液；酶标仪测定数据。标仪测定数据。注意事项注意事项 不能用肝素抗凝；标本不能不能用肝素抗凝；标本不能反复冻融，检测前应快速解冻；每次检反复冻融，检测前应快速解冻；每次检测均需做标准曲线。测均需做标准曲线。参考值参考值 108.5%5
9、.3。临床意义临床意义 AT水平降低：遗传性水平降低：遗传性AT缺乏是一种常染缺乏是一种常染色体显性遗传性疾病，患者常在手术、创伤、色体显性遗传性疾病，患者常在手术、创伤、感染、妊娠或产后发生静脉通栓，并可在多处感染、妊娠或产后发生静脉通栓，并可在多处反复发生血栓；获得性反复发生血栓；获得性AT缺乏分为三个方面：缺乏分为三个方面：AT合成降低（主要见于肝硬化、重症肝炎、肝合成降低（主要见于肝硬化、重症肝炎、肝癌晚期）；癌晚期）；AT丢失增加（见于肾病综合征）；丢失增加（见于肾病综合征）；AT消耗增加见于前血栓状态和血栓性疾病，如消耗增加见于前血栓状态和血栓性疾病，如心绞痛、心肌梗死、脑血管疾病
10、、弥散性血管心绞痛、心肌梗死、脑血管疾病、弥散性血管内凝血、外科手术后等）。内凝血、外科手术后等）。AT水平增高：见于血友病水平增高：见于血友病A和血友病和血友病B、口服抗凝药物、使用黄体酮类药等。口服抗凝药物、使用黄体酮类药等。评价评价 AT水平下降是高凝状态较好指标；水平下降是高凝状态较好指标；对疑难对疑难DIC具有诊断价值，急性白血病时具有诊断价值，急性白血病时DIC的危险信号；抗凝治疗中可对肝素治的危险信号；抗凝治疗中可对肝素治疗进行监测。疗进行监测。9 9 血浆硫酸鱼精蛋白副凝固试验（血浆硫酸鱼精蛋白副凝固试验（3P试验）试验）原理原理 在凝血酶作用下，纤维蛋白原释在凝血酶作用下，纤
11、维蛋白原释出纤维蛋白肽出纤维蛋白肽A、B后，转变为纤维蛋白后，转变为纤维蛋白单体（单体（FM）；纤维蛋白在纤溶酶降解下）；纤维蛋白在纤溶酶降解下产生（产生（FDP）。）。FM与与FDP形成可溶性纤形成可溶性纤维蛋白单体复合物（维蛋白单体复合物（SPMC）。硫酸鱼精）。硫酸鱼精蛋白可使该复合物中蛋白可使该复合物中FM游离，然后又自游离，然后又自行聚合呈肉眼可见的纤维状、絮状，反映行聚合呈肉眼可见的纤维状、絮状，反映FDP尤其碎片尤其碎片X的存在。的存在。材料材料 10g/L硫酸鱼精蛋白、阳性对照硫酸鱼精蛋白、阳性对照血浆、水浴等。血浆、水浴等。操作操作 贫血小板贫血小板0.5ml于试管中于试管中
12、37水浴水浴3min；加硫酸鱼精蛋白溶液；加硫酸鱼精蛋白溶液0.05ml混匀，混匀，3715min，立即观察结果。，立即观察结果。注意事项注意事项 1.本试验需用枸橼酸钠抗凝，不能用草酸盐、本试验需用枸橼酸钠抗凝，不能用草酸盐、肝素或肝素或EDTA盐等做抗凝剂。盐等做抗凝剂。2.抽血不顺利、抗凝不完全、标本保存于冰抽血不顺利、抗凝不完全、标本保存于冰箱、到时未立即观察结果等，均会导致假阴性箱、到时未立即观察结果等，均会导致假阴性结果。结果。3.若水浴温度太低或纤维蛋白原的含量过低，若水浴温度太低或纤维蛋白原的含量过低，都会造成假阴性结果。都会造成假阴性结果。参考值参考值 正常人正常人3P试验阴
13、性。试验阴性。临床意义临床意义 阳性见于阳性见于DIC的早期或中期；但的早期或中期；但本试验假阳性常见于大出血（创伤、手术、咯本试验假阳性常见于大出血（创伤、手术、咯血、呕血）和样品置冰箱后测定等。阴性见于血、呕血）和样品置冰箱后测定等。阴性见于正常人、正常人、DIC晚期和原发性纤溶症。如用连续晚期和原发性纤溶症。如用连续稀释硫酸鱼精蛋白副凝固试验（稀释硫酸鱼精蛋白副凝固试验（SDPST），），其结果较其结果较3P试验敏感。试验敏感。评价评价 方法简便，灵敏度较高，费用低，为方法简便，灵敏度较高，费用低，为早年临床诊断早年临床诊断DIC常用的确诊试验之一；但由常用的确诊试验之一；但由于于Fg含
14、量过低易导致含量过低易导致3P假阴性等因素，目前假阴性等因素，目前可以可以D二聚体代替。二聚体代替。二、分子标志物的检测及在二、分子标志物的检测及在DICDIC诊断中的意义诊断中的意义 血栓与止血分子标志物检测方法近血栓与止血分子标志物检测方法近1010余年来发展很快，其内容与方法颇多，余年来发展很快，其内容与方法颇多，且具有特异性强、敏感性高的特点，在且具有特异性强、敏感性高的特点，在研究血栓与止血性疾病与临床各类疾病研究血栓与止血性疾病与临床各类疾病特别是临床各类疾病引起的特别是临床各类疾病引起的DICDIC或前或前DIC(Pre-DIC)DIC(Pre-DIC)状态的发病机制，诊断和状态
15、的发病机制，诊断和防治方面有重要价值，现将较为常用的防治方面有重要价值，现将较为常用的方法介绍如下：方法介绍如下：（一）内皮细胞受损标志物检测（一）内皮细胞受损标志物检测1、内皮素、内皮素(ET-1)检测：检测：临床意义：内皮素是迄今为止最强的收缩临床意义：内皮素是迄今为止最强的收缩血管物质，血管物质，其在血浆中水平增高，反其在血浆中水平增高，反映血管内皮损伤。映血管内皮损伤。正常参考值：正常参考值：50.87.58pg/ml(放射免疫放射免疫法法)2、凝血酶调节蛋白（凝血酶调节蛋白（TM）测定：）测定：临床意义：临床意义：TM是血管损伤的分子标志物。是血管损伤的分子标志物。资料显示：资料显示
16、：90以上以上DIC患者患者TM升高。升高。正常参考值：正常参考值：2035g/L(放射免疫法放射免疫法)。（二）血小板激活分子标志物检测（二）血小板激活分子标志物检测1、血小板血小板颗粒释放物质的测定颗粒释放物质的测定 临床意义：血小板临床意义：血小板-TG及及PF4活性增高主要见于活性增高主要见于各类引起血小板过度激活及消耗性疾病如各类引起血小板过度激活及消耗性疾病如DIC时。时。正常参考值：正常参考值：-TG 25.33g/L，PF4 3.20.8g/L2、血小板膜及血浆血小板血小板膜及血浆血小板-颗粒膜蛋白测定颗粒膜蛋白测定临床意义：临床意义：DIC时由于体内凝血酶大量形成，激时由于体
17、内凝血酶大量形成，激活血小板使血浆中活血小板使血浆中GMP140明显增高。明显增高。正常参考值：正常参考值：GMP140 1.610.72X1010分子分子数数/ml。（三）凝血活化分子标志物检测（三）凝血活化分子标志物检测1、凝血酶原片段、凝血酶原片段1+2(F1+2)检测：检测：临床意义：临床意义：F1+2是凝血酶原转变为凝血酶是凝血酶原转变为凝血酶过程中释放出的片段，可反映凝血酶原过程中释放出的片段，可反映凝血酶原酶及凝血酶活性，是因子酶及凝血酶活性，是因子的分子标志的分子标志物，其增高多见于血栓前状态和物，其增高多见于血栓前状态和2550%易栓症患者。易栓症患者。正常参考值：正常参考值
18、：0.670.9nmol/L（ELISA法）法）2、纤维蛋白肽、纤维蛋白肽A（FPA）检测：）检测：临床意义：临床意义：FPA可以敏感地表明血液中有凝血可以敏感地表明血液中有凝血酶生成。华科大同济医学院报道酶生成。华科大同济医学院报道52例例DIC患者患者尿尿FPA明显高于正常组明显高于正常组(120.464.3ng/mg:Cr)。正常血浆参考值：正常血浆参考值：1.20.8g/L 正常尿液参考值：正常尿液参考值：25.410.3ng/mg。3、可溶性纤维蛋白单体复合物（、可溶性纤维蛋白单体复合物（SFMC）测定：）测定：临床意义：有报道该检查在前临床意义：有报道该检查在前DIC状态，阳性状态
19、，阳性诊断率为诊断率为87%，敏感性为，敏感性为91%，特异性为，特异性为83%。参考值参考值ELISA法：法：48.515.6g/L；凝集法：凝集法：阴性。阴性。4、凝血酶、凝血酶-抗凝血酶抗凝血酶复合物测定（复合物测定（TAT）：）：临床意义：可敏感反映凝血酶的生成，增高多临床意义：可敏感反映凝血酶的生成，增高多见于见于AMI、不稳定性心绞痛、妊高征等疾病以、不稳定性心绞痛、妊高征等疾病以及及DIC。正常参考值：正常参考值：1.04.5g/ml（ELISA法法）。）。5、组织因子（发色底物法）检测：组织因子（发色底物法）检测：临床意义：临床意义：凝血过程的主要启动因子，约有凝血过程的主要启
20、动因子，约有63.6%的的DIC病例病例TF抗原和活性增高。抗原和活性增高。正常参考值：正常参考值：97.7%16.7（发色底物法）（发色底物法）30220ng/L（ELISA法）法）（四）抗凝和纤溶活化分子标志物检测（四）抗凝和纤溶活化分子标志物检测 1 1、蛋白蛋白C C（PCPC）测定）测定 临床意义：先天性临床意义：先天性PCPC缺陷患者表现为反复原因缺陷患者表现为反复原因不明的血栓形成；不明的血栓形成；PC:AgPC:Ag及其活性增加多见于及其活性增加多见于冠心病、糖尿病、肾病综合征、妊娠后期等情冠心病、糖尿病、肾病综合征、妊娠后期等情况。况。正常参考值：正常参考值：（1 1）抗原（
21、）抗原（PC:AgPC:Ag）测定）测定 电电泳 法 为泳 法 为 1 0 2.51 0 2.5 2 0.1%2 0.1%，放 免 法 为，放 免 法 为3.13.10.5g/ml0.5g/ml。（2 2）活性测定）活性测定 发色底物法参考值发色底物法参考值(64(64147)%147)%。2 2、组织因子抑制物（组织因子抑制物（TFPITFPI）检测）检测 临床意义：有报道临床意义：有报道Pre-DICPre-DIC状态患者状态患者TFTF增高，增高，TFPITFPI水平正常，水平正常，TF/TFPITF/TFPI比率增高。比率增高。正常参考值：正常参考值：606080ug/L80ug/L（
22、ELISAELISA法）法）3 3、D D二聚体测定二聚体测定 临床意义：临床意义：909098%DIC98%DIC患者患者D D二聚体增高；是二聚体增高；是纤维蛋白降解产物中的聚合物，在原发性纤溶纤维蛋白降解产物中的聚合物，在原发性纤溶症为纤维蛋白原降解故呈阴性。症为纤维蛋白原降解故呈阴性。正常参考值：乳胶法为阴性正常参考值：乳胶法为阴性(小于小于0.5mg/L)0.5mg/L)；ELISAELISA法：法：0.5mg/L0.5mg/L三、三、DIC简易判断标准简易判断标准 1.Plt、PT、Fbg。2.TT、D-D、3P。上述上述1三项或两项加三项或两项加2一项结合临床可考一项结合临床可考
23、虑诊断。虑诊断。四、DIC一般诊断标准（全国第六届血栓与止血会议（全国第六届血栓与止血会议1999）1、存在易致、存在易致DIC的基础疾病：如感染、恶性肿的基础疾病：如感染、恶性肿瘤、病理产科、大型手术及创伤等。瘤、病理产科、大型手术及创伤等。2、有下列二项以上临床表现：、有下列二项以上临床表现：a严重或多发性出血。严重或多发性出血。b不能用原发病解释的微循环障碍或休克。不能用原发病解释的微循环障碍或休克。c广泛性皮肤、粘膜栓塞、灶性缺血性坏广泛性皮肤、粘膜栓塞、灶性缺血性坏死、脱落及溃疡形成，或不明原因的肺、肾、死、脱落及溃疡形成，或不明原因的肺、肾、脑等脏器功能衰竭。脑等脏器功能衰竭。d抗
24、凝治疗有效。抗凝治疗有效。3、实验检查符合下列条件、实验检查符合下列条件（1）同时有下列三项以上实验异常：）同时有下列三项以上实验异常：a.血 小 板 计 数 进 行 性 下 降血 小 板 计 数 进 行 性 下 降 1 0 0 1 09/L（白 血 病、肝 病（白 血 病、肝 病50109/L）。或下列二项以上血小板）。或下列二项以上血小板活化分子标志物血浆水平增高：活化分子标志物血浆水平增高：-TG；PF4；TXB2；GMP-140。b.血浆纤维蛋白原含量血浆纤维蛋白原含量1.5g/L（肝病（肝病1.0g/L，白血病，白血病4.0g/L，或呈进行性下降。或呈进行性下降。c.3P试验阳性，或
25、血浆试验阳性，或血浆FDP20mg/L（肝病（肝病60mg/L）或血浆）或血浆DD水平较正水平较正常增高常增高4倍以上（阳性）。倍以上（阳性）。d.PT延长或缩短延长或缩短3秒以上（肝病秒以上（肝病 5秒），秒），APTT延长延长10秒以上或缩短秒以上或缩短5秒以秒以上。上。e.AT-活性活性60%（不适用肝病）或蛋（不适用肝病）或蛋白（白（PC）活性降低。）活性降低。f.血浆纤溶酶原抗原（血浆纤溶酶原抗原（PLG：Ag）200ml/L。g.因子因子：C活性活性80pg/ml或凝血酶调节蛋白（或凝血酶调节蛋白（TM）较）较正常增高二倍以上。正常增高二倍以上。（2）疑难或特殊病例有下列二项以上异
26、常：）疑难或特殊病例有下列二项以上异常：a血浆凝血酶原碎片血浆凝血酶原碎片1+2（F1+2）、凝血）、凝血酶酶抗凝血酶复合物（抗凝血酶复合物（TAT）或纤维蛋白肽）或纤维蛋白肽A（FPA）水平增高。）水平增高。b.血浆可溶性纤维蛋白单体复合物（血浆可溶性纤维蛋白单体复合物（SFMC）水平增高。水平增高。c.血浆纤溶酶血浆纤溶酶纤溶酶抑制物复合物（纤溶酶抑制物复合物（PIC）水平增高。水平增高。d.血浆组织因子（血浆组织因子（TF）水平增高（阳性）或）水平增高（阳性）或组织因子途径抑制物（组织因子途径抑制物（TFPI）水平下降。）水平下降。此课件下载可自行编辑修改，仅供参考！此课件下载可自行编辑修改，仅供参考！感谢您的支持，我们努力做得更好！谢谢感谢您的支持，我们努力做得更好！谢谢
