1、心瓣膜增生：疵状心内膜炎的病变，二尖瓣和主动脉瓣出现菜花样增生物血液琼脂：菌落形态同血清琼脂，此外形成绿色的狭窄溶血环（溶血）或经TSB肉汤37培养24h后，再转种于血液琼脂或血清琼脂培养基上，37培养24h。72，10min无菌取小鼠的脾脏，触于血清平板，37培养1218h。95，5min（四）聚合酶链式反应（Polymerase Chain Reaction，PCR）如室温高，培养基自行溶化时，可与冰箱内放置30分钟，然后取出观察结果，不再凝固时为阳性。1、学习掌握猪丹毒杆菌检验的基本原理和方法；以无菌操作取检样，用乳钵加灭菌砂磨碎，无菌操作将样品转至营养肉汤中，于36士1培养8 h10h
2、。（四）聚合酶链式反应（Polymerase Chain Reaction，PCR）P1：5-CGATTATATTCTTAGCACGCACGCAACG-34、DNA的提取：将被检菌株接种于3 mL TSB肉汤中，37振荡培养(150 r/min)1012h后，取1 mL培养液于1.器材：1ml注射器，鼠笼，垫料（所有器皿均经高压消毒）。血液琼脂：菌落形态同血清琼脂，此外形成绿色的狭窄溶血环（溶血）如试管5：本试验可观察乳糖和葡萄糖发酵产酸不产气（变黄）；血液琼脂：菌落形态同血清琼脂，此外形成绿色的狭窄溶血环（溶血）（四）聚合酶链式反应（Polymerase Chain Reaction，PCR
3、）95，1min0)重悬沉淀，再于沸水浴中10 min，随后立即在冰中冷却，然后在12000 r/min及4条件下离心5 min，取上清液为猪丹毒杆菌基因组DNA模板。猪丹毒(Swine erysipelas)是由猪丹毒杆菌(Erysipelothrix rhusiopathiae)引起的一种人畜共患传染病，其主要特征为高热、急性败血症、皮肤疹块、慢性疣状心内膜炎及皮肤坏死与多发性非化脓性关节炎。无菌取小鼠的脾脏，触于血清平板，37培养1218h。血液琼脂：菌落形态同血清琼脂，此外形成绿色的狭窄溶血环（溶血）2、了解检验猪丹毒杆菌的意义。（四）聚合酶链式反应（Polymerase Chain
4、Reaction，PCR）器材：1ml注射器，鼠笼，垫料（所有器皿均经高压消毒）。无菌取小鼠的脾脏，触于血清平板，37培养1218h。反应总体积为25 L，其中含有12.大紫肾：典型的败血脾;肾淤血、肿大0)重悬沉淀，再于沸水浴中10 min，随后立即在冰中冷却，然后在12000 r/min及4条件下离心5 min，取上清液为猪丹毒杆菌基因组DNA模板。937bp M 1 2 3 420001000750500250100。（四）聚合酶链式反应（Polymerase Chain Reaction，PCR）2、了解检验猪丹毒杆菌的意义。63，1min 40次循环0)重悬沉淀，再于沸水浴中10 m
5、in，随后立即在冰中冷却，然后在12000 r/min及4条件下离心5 min，取上清液为猪丹毒杆菌基因组DNA模板。血液琼脂：菌落形态同血清琼脂，此外形成绿色的狭窄溶血环（溶血）自TSA琼脂平板上分别挑取2个以上典型或可疑菌落，接种三糖铁琼脂，先在斜面划线，再于底层穿刺。2mL剂量进行一次性腹腔注射1只，另一只注射0.无菌取小鼠的脾脏，触于血清平板，37培养1218h。每组取2只小鼠，以每只0.将被检菌穿刺接种于明胶培养基，于20培养7天，逐日观察明胶液化现象。病理解剖，观察小鼠的内脏病理变化；P1：5-CGATTATATTCTTAGCACGCACGCAACG-3大紫肾：典型的败血脾;肾淤血
6、、肿大反应总体积为25 L，其中含有12.注：表示阳性;表示阴性。（四）聚合酶链式反应（Polymerase Chain Reaction，PCR）血液琼脂：菌落形态同血清琼脂，此外形成绿色的狭窄溶血环（溶血）0)重悬沉淀，再于沸水浴中10 min，随后立即在冰中冷却，然后在12000 r/min及4条件下离心5 min，取上清液为猪丹毒杆菌基因组DNA模板。猪丹毒杆菌PCR检测结果电泳图5 mL离心管中，经12000 r/min 4离心5 min，弃去上清液，用200L ddH2O或者TE缓冲液(pH8.无菌取小鼠的脾脏，触于血清平板，37培养1218h。心瓣膜增生：疵状心内膜炎的病变，二尖
7、瓣和主动脉瓣出现菜花样增生物器材：1ml注射器，鼠笼，垫料（所有器皿均经高压消毒）。（四）聚合酶链式反应（Polymerase Chain Reaction，PCR）（四）聚合酶链式反应（Polymerase Chain Reaction，PCR）猪丹毒杆菌PCR检测结果电泳图P1：5-CGATTATATTCTTAGCACGCACGCAACG-3如试管5：本试验可观察乳糖和葡萄糖发酵产酸不产气（变黄）；4、DNA的提取：将被检菌株接种于3 mL TSB肉汤中，37振荡培养(150 r/min)1012h后，取1 mL培养液于1.P1：5-CGATTATATTCTTAGCACGCACGCAACG
8、-3P2：5-TGCTTGTGTTGTGATTTCTTGACG-30)重悬沉淀，再于沸水浴中10 min，随后立即在冰中冷却，然后在12000 r/min及4条件下离心5 min，取上清液为猪丹毒杆菌基因组DNA模板。血清琼脂：菌落特征：细小、圆形、透明、凸起、灰白色、有光泽、质软、露珠样、易混悬于盐水中。1、学习掌握猪丹毒杆菌检验的基本原理和方法；63，1min 40次循环5g/mL溴化乙锭）电泳，凝胶成像仪上观察拍照结果。心瓣膜增生：疵状心内膜炎的病变，二尖瓣和主动脉瓣出现菜花样增生物（四）聚合酶链式反应（Polymerase Chain Reaction，PCR）将被检菌穿刺接种于明胶培
9、养基，于20培养7天，逐日观察明胶液化现象。血液琼脂：菌落形态同血清琼脂，此外形成绿色的狭窄溶血环（溶血）（四）聚合酶链式反应（Polymerase Chain Reaction，PCR）器材：1ml注射器，鼠笼，垫料（所有器皿均经高压消毒）。血液琼脂：菌落形态同血清琼脂，此外形成绿色的狭窄溶血环（溶血）器材：1ml注射器，鼠笼，垫料（所有器皿均经高压消毒）。0)重悬沉淀，再于沸水浴中10 min，随后立即在冰中冷却，然后在12000 r/min及4条件下离心5 min，取上清液为猪丹毒杆菌基因组DNA模板。实验动物：雌性昆明小鼠，体重1822g血液琼脂：菌落形态同血清琼脂，此外形成绿色的狭窄
10、溶血环（溶血）（四）聚合酶链式反应（Polymerase Chain Reaction，PCR）2mL无菌生理盐水，观察，分别记录小鼠死亡状况。自TSA琼脂平板上分别挑取2个以上典型或可疑菌落，接种三糖铁琼脂，先在斜面划线，再于底层穿刺。（四）聚合酶链式反应（Polymerase Chain Reaction，PCR）如室温高，培养基自行溶化时，可与冰箱内放置30分钟，然后取出观察结果，不再凝固时为阳性。血液琼脂：菌落形态同血清琼脂，此外形成绿色的狭窄溶血环（溶血）2、了解检验猪丹毒杆菌的意义。（四）聚合酶链式反应（Polymerase Chain Reaction，PCR）血清琼脂：菌落特征：细小、圆形、透明、凸起、灰白色、有光泽、质软、露珠样、易混悬于盐水中。（四）聚合酶链式反应（Polymerase Chain Reaction，PCR）反应总体积为25 L，其中含有12.反应总体积为25 L，其中含有12.P1：5-CGATTATATTCTTAGCACGCACGCAACG-3
