急性白血病的诊断分型实用课件.ppt

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资源描述

1、急性白血病的诊断分型中等危险AML:不符合以上快速、简便、重复性好病理及免疫组织化学的优缺点细胞较成熟时,难以鉴别良恶性病例4 NK细胞白血病移植后40天,骨髓涂片8%的幼稚细胞日本两个移植中心进行异基因造血干细胞移植的AML和MDS共183例患者,显示MK组患者4年的OS最短为0%对无基因异常的疾病难以诊断免疫标志异常表达:跨系表达、早晚期同时表达、罕见细胞大量存在等与染色体及FISH分析比较,对检测人员的经验依赖程度低或一条常染色体为单体,另一条染色体是结构异常亚二倍体,近二倍体外周(成熟)细胞:无以上前体细胞标记一些形态上的原始细胞可以是正常造血细胞(尤其见于儿童感染后,G-CSF,GM

2、-CSF等刺激或化疗后或移植后)快速、简便、重复性好有-7、5q-、t(3;3)、t(4;11)、t(9;22)、复杂染色体等的急性白血病预后不好染色体单体异常、Inv(3)/t(3;3)、3个的复杂染色体异常、-5、5q-、-7、7q-、T(9;22)(BCR-ABL)、-17、伴其它改变的17p异常、除t(9;11)MLL-AF9以外的累及11q23/MLL基因的异常、t(1;22)(p13;q13)RBM15-MKL1、t(6;9)(p23;q34)DEK-NUP214增加的血液细胞是良性还是恶性外周(成熟)细胞:无以上前体细胞标记摘自 Flow Cytometry:First Prin

3、ciple对无基因异常的疾病难以诊断形态形态M 标本直接固定,不容易损失信息,恶性细胞比例更客观,对一些标本直接固定,不容易损失信息,恶性细胞比例更客观,对一些抽不出或少见细胞,仍可诊断。如伴骨髓纤维化、抽不出或少见细胞,仍可诊断。如伴骨髓纤维化、MM、淋巴瘤、淋巴瘤、转移癌、转移癌、等等 可以直接观察到组织结构,容易确定恶性细胞的组织部位可以直接观察到组织结构,容易确定恶性细胞的组织部位形态形态M摘自摘自 Flow Cytometry:First Principle流式流式I流式流式I流式流式IR8R8:幼稚细胞群,正常骨髓中此群细胞数量极低或空缺:幼稚细胞群,正常骨髓中此群细胞数量极低或空

4、缺流式流式I流式细胞术判断急性白血病:流式细胞术判断急性白血病:20%20%或者或者25%25%以上细胞表达早期标志以上细胞表达早期标志(CD34CD34、HLA-DRHLA-DR、TdTTdT)或者不表达成)或者不表达成熟标志熟标志系别标志:系别标志:髓系髓系 B B系系 T T系系流式流式I流式流式I流式流式IFCM 的优缺点的优缺点流式流式I流式幼稚流式幼稚B B淋巴细胞增生,未见异常表型淋巴细胞增生,未见异常表型病例病例4 NK4 NK细胞白血病移植后细胞白血病移植后4040天,骨髓涂片天,骨髓涂片8%8%的幼稚细胞的幼稚细胞与染色体及FISH分析比较,对检测人员的经验依赖程度低中等危

5、险AML:不符合以上DEK/CAN(1)CBF/MYH11(8)判断恶性细胞的比例不如形态准确,对M6、MDS的诊断不如形态如伴骨髓纤维化、MM、淋巴瘤、转移癌、组织细胞、巨噬细胞、树突细胞、何杰金细胞等-AML,MDS 中的预后价值DEK/CAN(1)对试验设计、试验质控要求高急性白血病按照细胞遗传学亚型的预后分级一些染色体有诊断价值:如重现性染色体异常,如t(8;21),inv(16)、t(16;增殖失控 原始和幼稚细胞增生累积恶性前体与外周(成熟)淋巴细胞疾病的鉴别inv(3),t(3;3)一次可检测数万至数十万个细胞上的数十种标记,可同时检测每个细胞的六个以上参数,敏感性高,分析全面-

6、5,5q-,-7,7q-CD19强阳性并同时有以下标志中的至少1项阳性:CD79a、cCD22、CD10因此对HL等难以确诊。有-7、5q-、t(3;3)、t(4;11)、t(9;22)、复杂染色体等的急性白血病预后不好TEL/ABL(2)MLL/AF6(4)流式流式:未见表型异常细胞,未见表型异常细胞,CD34CD34阳性细胞阳性细胞为幼稚为幼稚B B淋巴细胞淋巴细胞细胞遗传学细胞遗传学C细胞遗传学细胞遗传学C可以对既往的骨髓片回顾分析,进一步明确或排除诊断ALL:L1、L2、L3因此对HL等难以确诊。对一些组织结构无破坏、细胞形态改变不大的细胞,难以鉴定良恶性及成熟度CD34+、TdT+、

7、CD10+NPM/RAR(2)一些染色体和/或基因有辅助诊断价值,如5q31、CEP7、7q31、CEP8、20q、CEPY、P53 高度疑似MDS等;与染色体及FISH分析比较,对检测人员的经验依赖程度低C:染色体、荧光标记探针的原位杂交(FISH)急性白血病按照细胞遗传学亚型的预后分级不能提供太多的预后信息AML:50%90%的患者细胞遗传学可检出异常克隆16)、t(15;17)(q22;q12),t(5;14)(q31;q32),t(3;3),t(4;11)可直接诊断急性白血病;MLL/AF10(18)恶性前体与外周(成熟)淋巴细胞疾病的鉴别染色体单体异常、Inv(3)/t(3;3)、3

8、个的复杂染色体异常、-5、5q-、-7、7q-、T(9;22)(BCR-ABL)、-17、伴其它改变的17p异常、除t(9;11)MLL-AF9以外的累及11q23/MLL基因的异常、t(1;22)(p13;q13)RBM15-MKL1、t(6;9)(p23;q34)DEK-NUP214CD19强阳性并同时有以下标志中的至少1项阳性:CD79a、cCD22、CD10C:染色体、荧光标记探针的原位杂交(FISH)病例3 儿童B-ALL,化疗3年后停药,来我院复查,骨髓涂片8%的幼稚细胞PML/RAR(5)等的等的急性白血病预后不好急性白血病预后不好细胞遗传学细胞遗传学C有丝分裂相少或缺如有丝分裂

9、相少或缺如染色体质量低劣,显带不佳染色体质量低劣,显带不佳染色体异常复杂染色体异常复杂细胞遗传学细胞遗传学C荧光原位杂交(荧光原位杂交(FISH)利用已知核酸序列作为探针,以荧光素直利用已知核酸序列作为探针,以荧光素直接标记后与靶接标记后与靶DNADNA进行杂交,最后在荧光进行杂交,最后在荧光显微镜下观察杂交信号,从而对标本中待显微镜下观察杂交信号,从而对标本中待测核酸进行定性、定位和定量分析测核酸进行定性、定位和定量分析细胞遗传学细胞遗传学CBCR/ABL双色双融合双色双融合探针探针BCR/ABL额外信号探针日本两个移植中心进行异基因造血干细胞移植的AML和MDS共183例患者,显示MK组患

10、者4年的OS最短为0%正常造血受到抑制:乏力、面色苍白、发热、出血正常核型,+8,t(9;11),其它急性白血病特有的染色体和/或基因诊断慢、受诊断者个人经验及知识水平影响大B:除了B细胞标志外,CD45dim/-、NPM/RAR(2)如有2 系或以上的特异性标志,可诊断为急性混合性白血病免疫标志异常表达:跨系表达、早晚期同时表达、罕见细胞大量存在等-AML,MDS 中的预后价值(122种变异体)筛查与染色体及FISH分析比较,对检测人员的经验依赖程度低MICM整合诊断对恶性血液病进行诊断和分型重复性更好、更客观指导制定治疗方案及策略,监测疗效正常核型,+8,t(9;11),其它复杂异常(累及

11、三条以上染色体异常)对无基因异常的疾病难以诊断染色体单体异常、Inv(3)/t(3;3)、3个的复杂染色体异常、-5、5q-、-7、7q-、T(9;22)(BCR-ABL)、-17、伴其它改变的17p异常、除t(9;11)MLL-AF9以外的累及11q23/MLL基因的异常、t(1;22)(p13;q13)RBM15-MKL1、t(6;9)(p23;q34)DEK-NUP214CD19强阳性并同时有以下标志中的至少1项阳性:CD79a、cCD22、CD10CBF/MYH11(8)细胞遗传学细胞遗传学C急性白血病按照细胞遗传学亚型的预后分级急性白血病按照细胞遗传学亚型的预后分级单体核型(单体核型

12、(monosomal karyotype,MK)-AML,MDS -AML,MDS 中的预后价值中的预后价值定义:有两条以上的常染色体为单体;定义:有两条以上的常染色体为单体;或一条常染色体为单体,另一条染色或一条常染色体为单体,另一条染色体是结构异常体是结构异常细胞遗传学细胞遗传学C日本两个移植中心进行异基因造血干细胞移植的AML和MDS共183例患者,显示MK组患者4年的OS最短为0%细胞遗传学细胞遗传学CEBMTEBMT登记的在登记的在CR1CR1进行异基因造血干细胞移进行异基因造血干细胞移植的初发植的初发AML4119AML4119例例MK-的的2yrOS:61.163.3%MK+的的

13、2yrOS:31.743%细胞遗传学细胞遗传学C分子生物学分子生物学M分子生物学分子生物学M 增加的血液细胞是良性还是恶性增加的血液细胞是良性还是恶性 细胞形态:急性白血病原始细胞明显增加,细胞形态:急性白血病原始细胞明显增加,一些白血病有明显的特征,如一些白血病有明显的特征,如auers小体;小体;APL的异常早幼粒细胞有外浆、大量的颗粒的异常早幼粒细胞有外浆、大量的颗粒等等 免疫标志异常表达:跨系表达、早晚期同时免疫标志异常表达:跨系表达、早晚期同时表达、罕见细胞大量存在等表达、罕见细胞大量存在等 单克隆轻链表达、克隆性单克隆轻链表达、克隆性TCR基因重排、基因重排、DNA异常异常 急性白

14、血病特有的染色体和急性白血病特有的染色体和/或基因或基因PML/RAR(5)简单快速,有显微镜即可完成报告50 超二倍体 t(12;21)可以对既往的骨髓片回顾分析,进一步明确或排除诊断因此对HL等难以确诊。急性白血病按照细胞遗传学亚型的预后分级急性白血病按照细胞遗传学亚型的预后分级正常造血受到抑制:乏力、面色苍白、发热、出血或CD19弱阳性并同时有以下标志中的至少2项阳性:CD79a、cCD22、CD10前体与外周(成熟)恶性淋巴瘤/白血病的区别,也就是急性和慢性白血病的区别CD19强阳性并同时有以下标志中的至少1项阳性:CD79a、cCD22、CD10FLT3-ITD基因突变同时合并以下指

15、标至少一种:TET2、DNMT3A、MLL-PTD突变或+8染色体异常,3年总生存率为14.一些染色体有诊断价值:如重现性染色体异常,如t(8;21),inv(16)、t(16;诊断时间比染色体及FISH短原始和幼稚细胞外周(成熟)细胞:无以上前体细胞标记难以鉴别细胞的成熟阶段,B、T等系列的恶性细胞SIL/TAL1(1)增加的血液细胞是良性还是恶性BCR/ABL双色双融合探针 高危险高危险:低危险低危险AML:染色体正常且无染色体正常且无FLT3-ITD基因突变,但有基因突变,但有NPM1+及及IDH1或或IDH2突变者突变者 无无c-KIT基因突变及基因突变及-Y的的 t(8;21)(q2

16、2;q22)/AML1-RUNX1(AML1-ETO)AML、inv(16)(p13q22)/t(16;16)(p13;q22)/CBF-MYH11 AML 中等危险中等危险AML:不符合以上:不符合以上摘自:摘自:Patel JP,2012 AML1/MDS1(2)恶性前体与外周(成熟)淋巴细胞疾病的鉴别EBMT登记的在CR1进行异基因造血干细胞移植的初发AML4119例或单核细胞(至少有以下标志中的2项阳性:NSE、CD11c、CD14、CD64、CD36*、溶酶体CBF/MYH11(8)单体核型(monosomal karyotype,MK)摘自 Flow Cytometry:First Principle更容易区分良恶性,恶性细胞的系列及成熟度CD19强阳性并同时有以下标志中的至少1项阳性:CD79a、cCD22、CD10难以鉴别细胞的成熟阶段,B、T等系列的恶性细胞I:免疫学,包括免疫组化、流式细胞分析有独立的诊断及预后价值FL:3-10多种(荧光素耦联的单克隆抗体)TEL/PDGFR(1)荧光原位杂交(FISH)增加的血液细胞是良性还是恶性FIP1L1/PDGFR(4)-5,5q-,-7,7q-增殖失控 原始和幼稚细胞增生累积正常造血受到抑制:乏力、面色苍白、发热、出血流式:未见表型异常细胞,CD34阳性细胞为幼稚B淋巴细胞微小残留肿瘤(微小残留肿瘤(MRD)MRD)

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