1、第八章第八章 革兰氏阳性球菌革兰氏阳性球菌第一节第一节 葡萄球菌属葡萄球菌属(Staphylococcus)Staphylococcus)第二节第二节 链球菌属链球菌属(Streptococcus)Streptococcus)内容提要内容提要第一节第一节 葡萄球菌属葡萄球菌属(Staphylococcus)Staphylococcus)致病性葡萄球菌致病性葡萄球菌化脓性疾患化脓性疾患败血症败血症脓毒败血症脓毒败血症食物中毒食物中毒一、一般特征一、一般特征l形态排列：圆形（形态排列：圆形（0.5-1.5um），排列），排列葡萄串状，葡萄串状，革兰氏阳性革兰氏阳性l生长特性：需氧或兼性厌氧，生长要
2、求低，无运动力生长特性：需氧或兼性厌氧，生长要求低，无运动力l致病性菌株多能致病性菌株多能产生黄色或柠檬色素产生黄色或柠檬色素二、分类二、分类金黄色葡萄球菌金黄色葡萄球菌表皮葡萄球菌表皮葡萄球菌腐生葡萄球菌腐生葡萄球菌葡萄球菌照片葡萄球菌照片葡萄球菌电镜照片葡萄球菌电镜照片1.1.形态及染色特性形态及染色特性葡萄球菌照片葡萄球菌照片三、金黄色葡萄球菌三、金黄色葡萄球菌l典型形态：呈球形典型形态：呈球形不规则的葡萄串状不规则的葡萄串状固体培养基固体培养基不规则的葡萄串状不规则的葡萄串状液体培养基液体培养基单个、成对、短链状排列单个、成对、短链状排列l革染氏阳性菌；无鞭毛、芽孢、不形成荚膜革染氏阳
3、性菌；无鞭毛、芽孢、不形成荚膜2.2.培养及生化特性培养及生化特性普通肉汤普通肉汤：呈均匀混浊生长，产生菌膜，管底粘稠沉淀物：呈均匀混浊生长，产生菌膜，管底粘稠沉淀物普通肉汤培养物普通肉汤培养物血液琼脂平板：血液琼脂平板：形成的菌落较大，呈现明显的形成的菌落较大，呈现明显的溶血溶血（病原菌株）（病原菌株）血液琼脂平板培养物血液琼脂平板培养物普通琼脂平板普通琼脂平板：形成湿润、光滑、隆起的圆形菌落，直径形成湿润、光滑、隆起的圆形菌落，直径1-21-2mmmm，有时可达有时可达 4-5 4-5mmmm。菌落呈菌落呈金黄色金黄色普通琼脂平板培养物普通琼脂平板培养物对营养要求不高（加入血液、血清、葡萄
4、糖等时生长更佳）对营养要求不高（加入血液、血清、葡萄糖等时生长更佳）需氧或兼性厌氧菌，需氧或兼性厌氧菌，(20-30%(20-30%CO2CO2环境有利于环境有利于毒素的产生毒素的产生）最适生长温度为最适生长温度为3737，最适，最适PHPH为为7.47.4，耐盐性强耐盐性强（10-15%10-15%）。）。v培养特性培养特性v生化特性生化特性分解甘露醇试验分解甘露醇试验接触酶试验接触酶试验阴性阴性强阳性强阳性弱阳性弱阳性凝固酶试验：凝固酶试验：分解甘露醇试验：分解甘露醇试验：接触酶试验：接触酶试验：阳性（致病菌），阴性（非致病菌）阳性（致病菌），阴性（非致病菌）阳性（致病菌），阴性（非致病菌
5、）阳性（致病菌），阴性（非致病菌）阳性阳性3.3.抗原及变异抗原及变异l蛋白质抗原：蛋白质抗原：葡萄球菌蛋白葡萄球菌蛋白A(Staphylococcal protein A,SPA)l多糖抗原多糖抗原:具有型特异性具有型特异性*具有种属具有种属特异性，一种单链多肽，位于细胞壁表面特异性，一种单链多肽，位于细胞壁表面*人源人源菌株都含有菌株都含有SPA，来自动物源菌株则少见来自动物源菌株则少见*SPA SPA能与能与哺乳动物的哺乳动物的免疫球蛋白免疫球蛋白的的 Fc端结合端结合，用于免疫学及诊断技术（用于免疫学及诊断技术（协同凝集试验协同凝集试验）SPASPA葡萄球菌葡萄球菌IgGSPASPA葡
6、萄球菌葡萄球菌IgG4.4.抵抗力及药物敏感性抵抗力及药物敏感性*葡萄球菌葡萄球菌的的抵抗力较强抵抗力较强温度温度8030min才能杀死才能杀死干燥干燥干燥的脓汁或血液中可存养干燥的脓汁或血液中可存养2-3个月个月耐盐性强耐盐性强 10-15%NaCl能生长能生长对一般消毒剂敏感对一般消毒剂敏感龙胆紫、消毒净、新洁尔灭等龙胆紫、消毒净、新洁尔灭等对抗生素敏感对抗生素敏感青霉素、红霉素、磺胺类等青霉素、红霉素、磺胺类等易产生耐药性易产生耐药性细菌抑菌试验细菌抑菌试验抑菌环抑菌环药敏纸片药敏纸片5.5.致病性及毒力因子致病性及毒力因子v致病性致病性感染、脓肿、乳腺炎、败血症、脓毒败血症等感染、脓肿
7、、乳腺炎、败血症、脓毒败血症等污染食物或饲料可引起污染食物或饲料可引起食物中毒食物中毒性疾病性疾病 化脓性疾病化脓性疾病：毒素性疾病：毒素性疾病：v毒力因子毒力因子毒力因子毒力因子葡萄球菌葡萄球菌蛋白蛋白A A、荚膜荚膜、毒素毒素及及酶酶。外毒素外毒素溶解红细胞溶解红细胞白细胞崩解白细胞崩解血管收缩血管收缩感染部位组感染部位组织发生坏死织发生坏死 引致人类食物中毒引致人类食物中毒（耐热抗酸、抗胃蛋白酶）耐热抗酸、抗胃蛋白酶）胃肠炎胃肠炎家兔或人的血浆凝固家兔或人的血浆凝固致病株（凝固酶阳性）致病株（凝固酶阳性）毒素：毒素：（溶血素）溶血素）肠毒素：肠毒素：凝固酶：凝固酶：6.6.微生物学诊断微
8、生物学诊断 采病料采病料革染氏阳性球菌革染氏阳性球菌 病料病料血液琼脂平板血液琼脂平板菌落菌落金黄色金黄色溶血圈溶血圈凝固酶试验（凝固酶试验（+）甘露醇试验（甘露醇试验（+）分离菌株分离菌株实验动物实验动物（兔、小鼠）（兔、小鼠）局部皮肤溃疡坏死局部皮肤溃疡坏死静脉静脉24-48h死亡死亡发生食物中毒发生食物中毒材料中检查材料中检查肠毒素肠毒素（1 1）涂片染色镜检：）涂片染色镜检：（2 2）分离培养鉴定）分离培养鉴定:（3）动物实验：）动物实验：（4）肠毒素检查：）肠毒素检查：肠毒素检查程序：肠毒素检查程序：检样检样（食物、呕吐物）（食物、呕吐物）分离培养分离培养筛选可疑菌株筛选可疑菌株产毒
9、素培养产毒素培养（肉汤，（肉汤，CO2CO2）离心沉淀离心沉淀取取上清夜上清夜热处理热处理（100100，3030min)min)幼猫腹腔或幼猫腹腔或静脉接种静脉接种临床症状临床症状（胃肠炎）（胃肠炎）肠毒素肠毒素试验阳性试验阳性v分类：分类：马马腺疫链球菌腺疫链球菌：致马驹腺疫，下颌淋巴结的肿胀及炎症。：致马驹腺疫，下颌淋巴结的肿胀及炎症。无乳链球菌无乳链球菌：致牛乳房炎。：致牛乳房炎。化脓链球菌化脓链球菌：致化脓性疾病（化脓、猩红热、扁桃体腺炎等：致化脓性疾病（化脓、猩红热、扁桃体腺炎等兽医链球菌兽医链球菌：致炎症及白血病（子宫炎、乳房炎、关节炎）：致炎症及白血病（子宫炎、乳房炎、关节炎）
10、猪链球菌猪链球菌：引起：引起2-6周龄仔猪的菌血症、脑膜炎、关节炎等周龄仔猪的菌血症、脑膜炎、关节炎等肺炎链球菌肺炎链球菌：致人类的大叶性肺炎、脑膜炎。：致人类的大叶性肺炎、脑膜炎。在菌落周围形成不透明的草绿色溶在菌落周围形成不透明的草绿色溶血环（血环（1-2mm)，此菌致病力不强，多为条件性菌。此菌致病力不强，多为条件性菌。型溶血型溶血血液琼脂培养基血液琼脂培养基菌落菌落溶血环溶血环第二节第二节 链球菌属链球菌属(Streptococcus)Streptococcus)致病性链球菌致病性链球菌各种化脓性疾病各种化脓性疾病肺炎肺炎乳腺炎乳腺炎败血症败血症根据溶血能力分类：根据溶血能力分类：型溶
11、血链球菌：型溶血链球菌：型溶血链球菌：型溶血链球菌：型溶血链球菌：型溶血链球菌：菌落周围形成完全透明的溶血环，菌落周围形成完全透明的溶血环，红细胞完全溶解。红细胞完全溶解。这类这类菌致病力强菌致病力强，常引起人及动物，常引起人及动物各种疾病。各种疾病。型溶血型溶血菌落菌落溶血环溶血环菌落周围无溶血现象，为菌落周围无溶血现象，为非致病菌非致病菌。型溶血型溶血1.1.形态及染色特性形态及染色特性l链球菌呈链球菌呈圆形圆形或或卵圆形卵圆形，直径小于，直径小于2.02.0umum，l常排列常排列成链状或成双成链状或成双。肉汤内生长的链球菌常呈长链排列，。肉汤内生长的链球菌常呈长链排列，l革兰氏阳性菌，
12、多有荚膜，无芽孢、多数无鞭毛。革兰氏阳性菌，多有荚膜，无芽孢、多数无鞭毛。链球菌电镜照片链球菌电镜照片链球菌油镜照片链球菌油镜照片2.2.培养及生化特性培养及生化特性v培养特性培养特性 多为兼性厌氧菌。致病菌营养要求较高，普通培养基中多为兼性厌氧菌。致病菌营养要求较高，普通培养基中生长不良，需添加血液、血清、葡萄糖等。生长不良，需添加血液、血清、葡萄糖等。血清肉汤血清肉汤：易成长链，管底呈絮状或颗粒状沉淀；：易成长链，管底呈絮状或颗粒状沉淀；有的均匀混浊，菌链较短。有的均匀混浊，菌链较短。血清琼脂：血清琼脂：3737，培养，培养2424h h，形成灰白色，圆形，凸起，透明，形成灰白色，圆形，凸
13、起，透明，闪光，表面光滑，闪光，表面光滑，露珠状菌落露珠状菌落（直径（直径0.1-1.00.1-1.0mm)mm)血液琼脂：血液琼脂：长成直径长成直径0.1-1.00.1-1.0mmmm，灰白色，表面光滑，边缘整齐灰白色，表面光滑，边缘整齐 的小菌落。多数致病菌株有溶血性（的小菌落。多数致病菌株有溶血性（或或溶血）溶血）。抗原构造比较复杂，包括抗原构造比较复杂，包括属特异属特异、群特异群特异及及型特异型特异三种抗原。三种抗原。3.3.抗原构造抗原构造l 群特异抗原群特异抗原：又称：又称C抗原，抗原，链球菌细胞壁中的多糖成分（半抗原）链球菌细胞壁中的多糖成分（半抗原）有群特异，根据该抗原，将链球
14、菌分为有群特异，根据该抗原，将链球菌分为19个血清群个血清群A A群群链球菌具有链球菌具有M M、R R、T T三种蛋白质抗原三种蛋白质抗原，其中，其中M M抗原与致病性抗原与致病性有关有关，抗吞噬作用、与组织成分（心肌、肾小球）具有交叉反应，抗吞噬作用、与组织成分（心肌、肾小球）具有交叉反应引起风湿性心脏病及肾炎等。引起风湿性心脏病及肾炎等。l 型特异抗原：型特异抗原：又称又称表面抗原表面抗原，细胞壁的，细胞壁的蛋白质抗原蛋白质抗原4.4.免疫性：免疫性：*链球菌链球菌的抗原结构比较复杂的抗原结构比较复杂*抗抗M M蛋白蛋白的抗体具有保护作用的抗体具有保护作用，M蛋白有多种抗原型，各型间蛋白
15、有多种抗原型，各型间 缺乏有效的交叉保护缺乏有效的交叉保护5.5.致病性致病性 致病性链球菌可产生多种致病性链球菌可产生多种毒素或酶毒素或酶，可致人及多种动物的，可致人及多种动物的很多疾病，化脓感染、肺炎、乳房炎、肾炎、心内膜炎、脑膜很多疾病，化脓感染、肺炎、乳房炎、肾炎、心内膜炎、脑膜炎、败血症等。炎、败血症等。v致病因子致病因子可产生链激酶（溶纤维蛋白酶），透明质酸酶等可产生链激酶（溶纤维蛋白酶），透明质酸酶等旧名旧名红疹毒素红疹毒素（A群链球菌产生），致人猩红热，群链球菌产生），致人猩红热，小剂量皮内注射家兔可引起局部红疹小剂量皮内注射家兔可引起局部红疹大剂量注射可致全身红疹大剂量注射可
16、致全身红疹溶血素溶血素：致热外毒素：致热外毒素：其他其他：对氧敏感溶血素对氧敏感溶血素O(SLO)O(SLO)对氧稳定溶血素对氧稳定溶血素S(SLS)S(SLS)呈溶血性呈溶血性6.6.抵抗力抵抗力 本属细菌的抵抗力不强。对热较敏感（本属细菌的抵抗力不强。对热较敏感（6060，3030分钟杀分钟杀死），对干燥有一定的抵抗力（存活数周）。对青霉素、磺胺死），对干燥有一定的抵抗力（存活数周）。对青霉素、磺胺类药物敏感，类药物敏感，易产生耐药性易产生耐药性。7.7.微生物学诊断微生物学诊断*病料病料脓汁、乳汁、血液、组织等脓汁、乳汁、血液、组织等*涂片染色镜检涂片染色镜检革兰氏阳性、具荚膜、成对或链
17、状排列的革兰氏阳性、具荚膜、成对或链状排列的 球菌，可作初步诊断。球菌，可作初步诊断。（1）涂片染色镜检：）涂片染色镜检：*培养特性观察培养特性观察血液琼脂分离培养，观察菌落、溶血等特征血液琼脂分离培养，观察菌落、溶血等特征*生化试验生化试验常规生化试验常规生化试验*血清学试验血清学试验对病原菌定群或定型。对病原菌定群或定型。（2）分离培养及鉴定：）分离培养及鉴定：第八章第八章 复习思考题复习思考题1.1.试述葡萄球菌的形态特征和培养特征。试述葡萄球菌的形态特征和培养特征。2.2.何谓何谓SPASPA，其其生物学特性及用途。生物学特性及用途。3.3.试述葡萄球菌的致病性及毒力因子。试述葡萄球菌的致病性及毒力因子。4.4.试述葡萄球菌的微生物学诊断。试述葡萄球菌的微生物学诊断。5.5.试述链球球菌的形态特征和培养特征。试述链球球菌的形态特征和培养特征。
