结核病细菌学检查的概要课件.pptx

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1、SNRLSNRL:跨国参比实验室:跨国参比实验室NRLNRL:国家参比实验室:国家参比实验室PRLPRL:省级参比实验室:省级参比实验室PLLPLL:地市级实验室:地市级实验室CLLCLL:县级实验室:县级实验室SNRLNRLPRLPLLCLL承诺承诺痰检痰检督导督导药药品品监测监测 我国结核病疫情 目前有5.5亿的人口感染了结核菌(44.5%)估算全国现有活动性肺结核病人450万,其中传染性肺结核病人(涂阳肺结核)150万 据WHO估算,我国每年新发活动性肺结核病人145万,其中传染性肺结核65万例 每年因结核病死亡13万痰膜朝上静置自然干燥后(一般约需要30分钟)进行染色。合计 223 3

2、4 257用于AFB检查的玻片要求:病人是否需要化疗,首先应以痰结果为准,如不查痰或查痰不对,就只能凭X线判断有无活动性,这样就可能将本来没有活动性、不需治疗的病人进行长期治疗。闫氏(99年)76.过去常以X线病变变化为考核治疗效果的指标,当前认为以痰菌阴转考核化疗效果更为合适。粘液痰:标本外观以白色、粘稠度较高的肺部和支气管分泌物为主,制片时需仔细涂抹;10三)操作过程中造成的污染-2:作为诊断手段,对传染性肺结核的诊断比x线准 确性高.取染色完毕且已干燥的玻片,痰膜向上放置在玻片台上并以卡尺固定。一条结核杆菌在体内的繁殖情况闫氏(99年)76.实验序号和编号:初诊病人的3个标本,随访病人的

3、2个痰标本,要在玻片上注明每个痰标本的序号和编号,例如:实验序号为18,3个痰标本的编号分别为 18-1、18-2、18-3,涂片染色后镜检时,镜下可见支气管内膜纤毛柱状上皮细胞,伴有少量肺上皮脱落细胞、脓性炎症细胞、口腔脱落细胞及口腔寄生菌。+-必须清楚的告诉病人唾液和鼻咽部的分泌物不是痰,不适合于检查。每个工作日,连续阅读10-12张涂片后应休息20分钟左右。抗酸染色注意事项:痰涂片保存-1:一、结核病细菌学检查要有独立的实验室,不得 与其他实验室混用;我省结核病疫情一、结核病细菌学检查要有独立的实验室,不得 与其他实验室混用;二、培养基制备、洗刷等相对洁净的操作与涂片镜检、培养前处理、药

4、敏试验等污染操作要有独立分开的场所,最好分别在专用的房间进行;三、基层只从事涂片镜检的实验室只拥有一间独立房舍的情况下,相对洁净区(镜检区、登记区)与污染区(涂片、染色区)要有明显区分。染色池染色池收集标本收集标本用的桌子用的桌子工作台工作台采采光光用用窗窗户户(固定)(固定)实验室门实验室门试试剂剂柜柜显微镜显微镜记录用记录用的桌子的桌子可以开关的窗户可以开关的窗户NRL:国家参比实验室5亿的人口感染了结核菌(44.SNRL:跨国参比实验室结核病细菌学实验室登记本二、培养法:鸡蛋固体培养基法一)一些抗酸颗粒-1:做一个好涂片,痰标本的收集以及痰块的选择是基本要求,应予以特别注意。对当日不能进

5、行涂片检查的痰标本,须置于4冰箱保存,注意防止痰液干涸或污染。这些红色颗粒有时与结核菌相象,这些颗粒包括:2、痰菌检查较X线更客观,误差较小,在各地、各人前后之间比较容易标准一致,可比性大。对疑似肺结核病者,临床医护人员应通过解释,使其充分了解标本质量对相应检查项目的重要性,示范并指导其掌握从肺部深处咳痰的方法;脱色的特征,具有其染色特征的细菌习惯上称32涂片抗酸染色检查方法-37(74/847)2.使用高质量染料,严格按照配方配制染液;宋氏(97年)72 (36/50)30(8/60)26.2、非结核分枝杆菌涂片抗酸染色检查方法-6严格按照操作程序完成染色过程;当玻片移动至痰膜一端时,纵向向

6、下转换一个视野,然后从右向左观察,依此类推。ZN 法 5 0%ZN 法 5 0%荧光法5 5%荧光法5 5%集菌法6 9%集菌法6 9%培养法7 8%培养法7 8%PCR80%PCR80%空白区2 0%空白区2 0%ZN 法 5 0%荧光法5 5%集菌法6 9%培养法7 8%PCR80%空白区2 0%但是结核病防治工作并不尽如人意,疫情下降缓慢,结核病人的发现率低、耐药率高、治疗管理工作仍处于较低水平。用于AFB检查的玻片要求:粘液痰:标本外观以白色、粘稠度较高的肺部和支气管分泌物为主,制片时需仔细涂抹;1976年Yeager报告对痰菌阳性病人在化疗前后做结核杆菌培养的定量分析:此类标本的AF

7、B检出率较唾液高。涂片染色后镜检,可发现大量脓性炎症细胞、肺上皮脱落细胞。此类标本的AFB检出率较唾液高。我国结核病疫情 目前有5.涂片染色后镜检时,镜下可见支气管内膜纤毛柱状上皮细胞,伴有少量肺上皮脱落细胞、脓性炎症细胞、口腔脱落细胞及口腔寄生菌。闫氏(99年)76.2、痰菌检查较X线更客观,误差较小,在各地、各人前后之间比较容易标准一致,可比性大。4、阅读上的错误,由于视觉和心理上的原因造成的,也称之为“人的因素”。4396 800106疗效评价:在常用的罗氏(Lowenstein-Jensen)培养基上生长的菌落粗糙、凸起、致密,有表面皱折,呈颗粒、结节或菜花样,乳白色或米色,不透明。作

8、为实验方法,AFB镜检方法技术相对简单.排菌量1ml痰液中含菌量为1000-10.二)痰标本和痰涂片的保存不善:7(74/847)2.用蒸馏水或煮沸过的水就可以避免。在国家参比实验室的管理和监督之下,以省级参比室为中心实验室,采用自上而下质量保证体系与同级实验室室间质控相结合的方式,建立我国实验室质量控制网络。疗效评价:0%)11初治涂阳患者在疗程满2、5、6个月时,复治涂阳患者在疗程满2、5、8个月时,按期送检两份痰(当日即时痰、当或次日晨痰)。结核病细菌实验室布局原则分枝杆菌生物学基础 简介痰涂片检查的意义5%)估算全国现有活动性肺结核病人450万,其中传染性肺结核病人(涂阳肺结核)150

9、万 据WHO估算,我国每年新发活动性肺结核病人145万,其中传染性肺结核65万例 每年因结核病死亡13万二)痰标本和痰涂片的保存不善:涂片抗酸染色检查方法-3判断结果为“阴性”前,须阅读规定要求的视野数。晨痰:患者晨起立即用清水漱口后,咳粘液痰:标本外观以白色、粘稠度较高的肺部和支气管分泌物为主,制片时需仔细涂抹;7(74/847)2.2、痰容器的标签弄错;结核分枝杆菌是1882年郭霍(Rober-tKoch)从肺结核病人痰标本中发现,是人类结核病的主要病原菌。一)一些抗酸颗粒-1:痰标本来源:初诊病人门诊序号以门诊登记本为据;随访病人登记号以病人登记本为据.据报道,对于这样一个问题,“这个涂

10、片的抗酸杆菌是阴性还是阳性”一致率是93%。这些红色颗粒有时与结核菌相象,这些颗粒包括:集菌法判断结果为“阴性”前,须阅读规定要求的视野数。我国结核病疫情 目前有5.对国家结核病措施的执行产生影响。结核菌检验实验室安全操作规则4、实验室所有带毒废弃物应灭菌及无害化处理;闫氏(99年)76.三)操作过程中造成的污染-2:2 048涂片保存与实验室登记本记录应保持一致。排菌量结核病细菌实验室布局原则抗酸染色注意事项:痰涂片保存-1:涂片染色后镜检,可发现大量脓性炎症细胞、肺上皮脱落细胞。标本的性状-1容器:粘液痰:标本外观以白色、粘稠度较高的肺部和支气管分泌物为主,制片时需仔细涂抹;二、培养法:鸡

11、蛋固体培养基法车氏(87年)65.各种方法可检出结核杆菌数量(个/ml7(74/847)2.涂涂痰痰膜膜自自然然干干燥燥复复红红加加热热初初染染5 5分分钟钟自自然然干干燥燥镜镜检检流流水水冲冲洗洗美美兰兰复复染染3030秒秒5%5%盐盐酸酸酒酒精精脱脱色色1-31-3分分钟钟流流水水冲冲洗洗流流水水冲冲洗洗如使用的载玻片一端有磨砂面,可使用2B铅笔在磨砂面上直接书写)。用于AFB检查的玻片要求:取染色完毕且已干燥的玻片,痰膜向上放置在玻片台上并以卡尺固定。涂片上的6微米的细长杆状,直或稍弯,镜下常堆积成团、成束、排列杂乱无章,也有呈串珠样、链状、索状者。在结核病控制工作中痰结核菌检查对于发现

12、传染源、确定诊断和化疗方案、考核疗效、评价防治效果具有重要意义。四、化疗方案的选择需以查痰作为实验方法,AFB镜检方法技术相对简单.患者留取的痰标本,应由检验人员或经培训的专人目视检查标本质量(特别是用于初次诊断的痰标本):标本量一般在3-5 ml,标本性状属于干酪痰、褐色血痰或含少量新鲜血液的血痰、粘液痰者为合格的标本;粘液痰:标本外观以白色、粘稠度较高的肺部和支气管分泌物为主,制片时需仔细涂抹;我国结核病疫情 目前有5.抗酸杆菌阳性(4):10条抗酸杆菌/每视野。用于AFB检查的玻片要求:10涂片抗酸染色检查方法-4必须清楚的告诉病人唾液和鼻咽部的分泌物不是痰,不适合于检查。实验序号和编号:初诊病人的3个标本,随访病人的2个痰标本,要在玻片上注明每个痰标本的序号和编号,例如:实验序号为18,3个痰标本的编号分别为 18-1、18-2、18-3,治疗方案因此痰涂片镜检的结果报告,不仅是对疾病的定性,也是对疾病严重程度的半定量。使用双目显微镜10目镜读片。1、抗酸杆菌可因标本受到日光照射、紫外线辐射、过热,在干、热的条件下储存而失掉 抗酸性。

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