1、菊花组织培养和月季花药培养扦插扦插嫁接嫁接压条压条 是指在人工培养是指在人工培养基上，离体培养植物的器基上，离体培养植物的器官、组织、细胞和原生质官、组织、细胞和原生质体，并使其生长、增殖、体，并使其生长、增殖、分化以及再生植株的技术。分化以及再生植株的技术。组织培养组织培养（一）植物组织培养的基本过程（一）植物组织培养的基本过程植物细胞具有全能性，即已分化的植物细胞具有全能性，即已分化的细胞，具有使后代细胞形成完整个细胞，具有使后代细胞形成完整个体的潜能。体的潜能。离体的植物离体的植物器官、组织、器官、组织、细胞细胞脱分化脱分化愈愈伤伤组组织织再分化再分化根根芽芽植植物物体体植物组织培养的基
2、本过程植物组织培养的基本过程愈伤组织愈伤组织（二）影响植物组织培养的因素（二）影响植物组织培养的因素1.不同的植物组织，培养的难易程度差别很大。不同的植物组织，培养的难易程度差别很大。例如，烟草和胡萝卜的组织培养较为容易，例如，烟草和胡萝卜的组织培养较为容易，而枸杞愈伤组织的芽诱导就比较难。因此，植物而枸杞愈伤组织的芽诱导就比较难。因此，植物材料的选择直接关系到实验的成败。对于同一种材料的选择直接关系到实验的成败。对于同一种植物材料，材料的年龄、保存时间的长短等也会植物材料，材料的年龄、保存时间的长短等也会影响实验结果。菊花的组织培养，一般选择未开影响实验结果。菊花的组织培养，一般选择未开花植
3、株的茎上部新萌生的侧枝。花植株的茎上部新萌生的侧枝。2.离体的植物组织和细胞，对营养、环境等条件离体的植物组织和细胞，对营养、环境等条件的要求相对特殊，需要配制适宜的培养基。的要求相对特殊，需要配制适宜的培养基。常用的一种培养基是常用的一种培养基是MS培养基。其主要培养基。其主要成分包括大量元素，如成分包括大量元素，如N、P、K、Ca、Mg、S;微量元素，如微量元素，如B、Mn、Cu、Zn、Fe、Mo、I、Co；有机物，如甘氨酸、烟酸、肌醇、维；有机物，如甘氨酸、烟酸、肌醇、维生素，以及蔗糖等。在配制好的生素，以及蔗糖等。在配制好的MS培养基中，培养基中，常常需要添加植物激素。常常需要添加植物
4、激素。与培养细菌的培养基有何不同？与培养细菌的培养基有何不同？MS固体培养基成分及比例固体培养基成分及比例微生物培养基以有机营养为主。与微生物的培养不微生物培养基以有机营养为主。与微生物的培养不同，同，MS培养基则需提供大量无机营养，无机盐混合物包培养基则需提供大量无机营养，无机盐混合物包括植物生长必须的大量元素和微量元素两大类。括植物生长必须的大量元素和微量元素两大类。阅读课文，思考以下问题阅读课文，思考以下问题1.1.同微生物培养基相比，同微生物培养基相比，MSMS培养基的配方有哪些明显的不培养基的配方有哪些明显的不同？同？2 2、你认为组织培养过程中，成功的关键有哪些？这些步骤的、你认为
5、组织培养过程中，成功的关键有哪些？这些步骤的适宜条件是什么？适宜条件是什么？组织的脱分化及愈伤组织的再分化。组织的脱分化及愈伤组织的再分化。植物组织培养过程中，影响植物细胞脱分化、再分植物组织培养过程中，影响植物细胞脱分化、再分化的最重要因素是植物激素，细胞分裂素与生长素之间化的最重要因素是植物激素，细胞分裂素与生长素之间的浓度比可以调控植株组培过程中芽和根的形成。的浓度比可以调控植株组培过程中芽和根的形成。3.3.植物激素浓度、使用的先后顺序以及用量的比植物激素浓度、使用的先后顺序以及用量的比例等，会影响实验结果。例等，会影响实验结果。植物激素中生长素和细胞分裂素是启动细胞植物激素中生长素和
6、细胞分裂素是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键性激素。按照分裂、脱分化和再分化的关键性激素。按照不同的顺序使用这两类激素，会得到不同的不同的顺序使用这两类激素，会得到不同的实验结果。实验结果。4.除了上述因素外，除了上述因素外，PH、温度、光照等条件也很重要。、温度、光照等条件也很重要。不同的植物对各种条件的要求往往不同。进行不同的植物对各种条件的要求往往不同。进行 菊花的菊花的组织培养，一般将组织培养，一般将PHPH值控制在值控制在5.85.8左右，温度控制在左右，温度控制在18-18-2222，并且每日用日光灯照射，并且每日用日光灯照射12h12h。生长素生长素/细胞分裂素细胞分裂素高高
7、有利于根的分化、抑制芽的形成有利于根的分化、抑制芽的形成低低 有利于芽的分化、抑制根的形成有利于芽的分化、抑制根的形成选择单核期以前的花药接种，质地幼嫩，极易破碎；微生物培养基以有机营养为主。（一）植物组织培养的基本过程选择合适的花粉发育时期是提高诱导成功率的重要因素除了上述因素外，PH、温度、光照等条件也很重要。最适合花药培养的小孢子发育时期为单核靠边期（一）制备MS固体培养基与培养细菌的培养基有何不同？培养温度控制在18-22，并且脱分化形成愈伤组织后，每日用日光灯光照12h。月季花药培养时的花粉粒最好是（）花粉是小孢子母细胞经过减数分裂而形成的，因此，花粉是单倍体的生殖细胞在个体发育中，
8、相同细胞的后代在形态、结构、生理功能上发生稳定性差异的过程幼苗移栽后，每天观察并记录幼苗的生长情况，适时浇水、施肥，直至开花（一）制备MS固体培养基某些植物的花粉细胞核不易着色，需采用焙花青-铬矾法，这种方法能将花粉细胞核染成蓝黑色。实例：玉米、大豆、梨、杏接种后的锥形瓶最好放在无菌箱中培养，培养期间应定期消毒。课堂2 月季的花药培养一般月季的花药培养时间选在五月初到五月的中旬，即月季的初花期。二、被子植物花粉粒的形成接种后的锥形瓶最好放在无菌箱中培养，培养期接种后的锥形瓶最好放在无菌箱中培养，培养期间应定期消毒。培养温度控制在间应定期消毒。培养温度控制在18-2218-22，并且脱，并且脱分
9、化形成愈伤组织后，每日用日光灯光照分化形成愈伤组织后，每日用日光灯光照12h12h。课堂课堂2 2 月季的花药培养月季的花药培养珍珠岩：固体基质型，含水量高、蓄水性强、透性好，适合栽培选材是否成功是花药培养成功的关键同微生物培养基相比，MS培养基的配方有哪些明显的不同？最适合花药培养的小孢子发育时期为单核靠边期最常用的方法有醋酸洋红法植物组织培养过程中，影响植物细胞脱分化、再分化的最重要因素是植物激素，细胞分裂素与生长素之间的浓度比可以调控植株组培过程中芽和根的形成。（一）植物组织培养的基本过程选择完全未开放花蕾的原因离体的植物器官、组织、细胞实例：玉米、大豆、梨、杏取材为花药，培养的为单倍体
10、幼苗，植株弱小，高度不育，必须用秋水仙素处理，使染色体加倍，恢复正常植株的染色体数，而且为纯种。因为并不是任何时期的花粉都可以经过培养产生愈伤组织或胚状体，花粉发育的过程中，只有某一个时期对离体刺激敏感。课堂2 月季的花药培养低 利于芽的分化，抑制根的形成课堂2 月季的花药培养药隔：花药中部，由薄壁细胞构成，内有维管束不同的植物组织，培养的难易程度差别很大。将无水酒精与冰醋酸按体积比为3：1的比例混匀立即将花药接种于培养基上，通常每瓶接种花药7-10个。注意花药离体培养和单倍体育种的区别月季花药培养时的花粉粒最好是（）某些植物的花粉细胞核不易着色，需采用焙花青-铬矾法，这种方法能将花粉细胞核染
11、成蓝黑色。操作要在酒精灯火焰旁完成，每次使用器械后，都需要用火焰灼烧灭菌，接种后立即盖好瓶盖。高 有利于根的分化、抑制芽的形成用70的酒精喷雾使空气消毒，酒精或新洁尔灭搽洗工作台并用紫外线照射20分钟焙花青铬钒溶液的配制方法将无水酒精与冰醋酸按体积比为3：1的比例混匀最适合花药培养的小孢子发育时期为单核靠边期课堂2 月季的花药培养阅读课文，思考以下问题高 利于根的分化，抑制芽的形成除了上述因素外，PH、温度、光照等条件也很重要。为了挑选到单核期的花药，通常选择完全未开放的花蕾。放入质量分数为0.同微生物培养基相比，MS培养基的配方有哪些明显的不同？将花药放在载玻片上，加一滴质量分数1的醋酸洋红，用镊柄将花药捣碎，盖上盖玻片在显微镜下检查。用70的酒精喷雾使空气消毒，酒精或新洁尔灭搽洗工作台并用紫外线照射20分钟一般月季的花药培养时间选在五月初到五月的中旬，即月季的初花期。完全未开放的花蕾，可挑选到单核期的花药，菌少、易消毒作用：能迅速穿透细胞作用：能迅速穿透细胞,将其固定并维持染色体结构的完整将其固定并维持染色体结构的完整性性,还要能够增强染色体的嗜碱性还要能够增强染色体的嗜碱性,达到优良染色效果。达到优良染色效果。注意花药离体培养和单倍体育种的区别注意花药离体培养和单倍体育种的区别
