1、第十四章第十四章 生药质量标准的生药质量标准的制订与控制制订与控制1第一节第一节 影响生药品质的自然因素影响生药品质的自然因素?生药品种对品质的影响生药品种对品质的影响?植物生长发育对品质的影响植物生长发育对品质的影响?植物的遗传与变异因素对品质的影响植物的遗传与变异因素对品质的影响?环境因素对品质的影响环境因素对品质的影响2第一节第一节 影响生药品质的自然因素影响生药品质的自然因素?生药品种对品质的影响生药品种对品质的影响?HPLC对国产对国产 23 种种 61 个样品柴胡中个样品柴胡中柴胡皂苷柴胡皂苷 a、c、d 的测定结果表明，的测定结果表明，19 个产地的柴胡中柴胡皂苷个产地的柴胡中柴
2、胡皂苷 a、c、d 之和在之和在 0.62 3.04，两个产地的狭叶柴胡，两个产地的狭叶柴胡为为 0.86 0.91，产于云南会泽的多枝柴胡为，产于云南会泽的多枝柴胡为7.44%，产于云南昆明的韭叶柴胡为，产于云南昆明的韭叶柴胡为 4.39%，产于四，产于四川汶川的汶川柴胡为川汶川的汶川柴胡为 4.45，产于云南会泽的川滇柴，产于云南会泽的川滇柴胡仅含痕量的柴胡皂苷胡仅含痕量的柴胡皂苷 a、c、d。3?植物生长发育对品质的影响植物生长发育对品质的影响?HPLC法分析日本和朝鲜的法分析日本和朝鲜的 1 6 年生年生 100 多个多个人参样品，结果表明，人参皂苷的含量随着生长人参样品，结果表明，人
3、参皂苷的含量随着生长年限的增加而不断升高，年限的增加而不断升高，第第 5 年夏末年夏末为人参的最为人参的最佳采收期。在生长第佳采收期。在生长第 1 年，朝鲜和日本产的人参年，朝鲜和日本产的人参中人参总皂苷含量分别为中人参总皂苷含量分别为 1.32%和和 1.54%，随着，随着生长年限的增加，第生长年限的增加，第 6 年总皂苷含量分别增至年总皂苷含量分别增至3.11%和和 1.90%。?人参根重也随生长年限的增加而增加，特别是在人参根重也随生长年限的增加而增加，特别是在第第 4 和第和第 5 年间变化非常明显，根重增加了年间变化非常明显，根重增加了 1 倍。倍。4?植物的遗传与变异因素对品质的影
4、响植物的遗传与变异因素对品质的影响?UV法和法和 HPLC 法对在山西、新疆两个生态法对在山西、新疆两个生态地区栽培的地区栽培的 22 个红花品种中红花总黄酮及个红花品种中红花总黄酮及其中的芦丁、山柰酚其中的芦丁、山柰酚-3-O-芸香糖苷的含芸香糖苷的含量测定。结果表明，不同红花品种间总黄酮量测定。结果表明，不同红花品种间总黄酮及芦丁、山柰酚及芦丁、山柰酚-3-O-芸香糖苷的含量存芸香糖苷的含量存在显著差异，总黄酮含量为在显著差异，总黄酮含量为 1.62%7.82%，其中以合肥红花、亳州红花、鱼台，其中以合肥红花、亳州红花、鱼台红花含量较高；山柰酚红花含量较高；山柰酚-3-O-芸香糖苷的芸香糖
5、苷的含量为含量为 0.085%0.895%，其中以合肥红，其中以合肥红花、亳州红花、鱼台红花含量较高。花、亳州红花、鱼台红花含量较高。5?环境因素对品质的影响环境因素对品质的影响?光、温度、降水量、土壤、海拔、纬度光、温度、降水量、土壤、海拔、纬度6第二节第二节 生药质量的控制与生药质量的控制与生药质量标准的制订生药质量标准的制订一、生药质量控制的依据一、生药质量控制的依据?生药质量控制依据三级标准：生药质量控制依据三级标准：国家药典标准；国家药典标准；局（部）颁标准；局（部）颁标准；地方标准。地方标准。7?1.国家药典国家药典?中华人民共和国药典由国家食品药品监中华人民共和国药典由国家食品药
6、品监督管理局药典委员会编纂出版，经国务院同督管理局药典委员会编纂出版，经国务院同意由国家食品药品监督管理局颁布执行。意由国家食品药品监督管理局颁布执行。?现版药典为现版药典为2019年版，分一部、二部和三部。年版，分一部、二部和三部。其中一部收载中药，包括药材及饮片、植物其中一部收载中药，包括药材及饮片、植物油脂和提取物、成方制剂和单味制剂等。油脂和提取物、成方制剂和单味制剂等。?国家药典标准具有法律约束力，是我国药品国家药典标准具有法律约束力，是我国药品生产和经营的一级标准。生产和经营的一级标准。?2019年版药典：一部载中药材、油脂等年版药典：一部载中药材、油脂等571种，种，成方制剂成方
7、制剂575种，共种，共1146种。种。8?部颁标准：收录药典尚未收载的常用而有部颁标准：收录药典尚未收载的常用而有一定疗效的药品，作为药典的补充。一定疗效的药品，作为药典的补充。?局颁标准：由药典委员会编纂出版，由国局颁标准：由药典委员会编纂出版，由国家食品药品监督管理局颁布执行。包括中家食品药品监督管理局颁布执行。包括中药材局颁标准，蒙、藏、维药局颁标准等。药材局颁标准，蒙、藏、维药局颁标准等。?亦有药典的性质，具有法律约束力。亦有药典的性质，具有法律约束力。9?地方标准：各省、直辖市、自治区卫生厅局地方标准：各省、直辖市、自治区卫生厅局审批的药品标准，具有审批的药品标准，具有地区地区性约束
8、力。性约束力。但在保证执行此两种标准的原则下，报经上但在保证执行此两种标准的原则下，报经上级同意可补充制定某些规定。级同意可补充制定某些规定。?地方标准不能同药典或部颁标准相抵触，地方标准不能同药典或部颁标准相抵触，?市场上经销的药材必须经各省、市、县市场上经销的药材必须经各省、市、县药检药检所所鉴定才有效，各级卫生行政部门和市场管鉴定才有效，各级卫生行政部门和市场管理部门只有监督权，而无鉴定权，各地研究理部门只有监督权，而无鉴定权，各地研究机构和大专院校只能帮助鉴定，也无决定权。机构和大专院校只能帮助鉴定，也无决定权。10二、生药质量控制的主要内容及方法二、生药质量控制的主要内容及方法?生药
9、检查的生药检查的内容内容：性状，鉴别（显微鉴别、：性状，鉴别（显微鉴别、理化鉴别、色谱鉴别），检查（杂质、干理化鉴别、色谱鉴别），检查（杂质、干燥失重、水分、灰分、重金属及有害元素燥失重、水分、灰分、重金属及有害元素和农药残留），浸出物，含量测定（指标和农药残留），浸出物，含量测定（指标成分、挥发油）。成分、挥发油）。?限量检查和定量检查限量检查和定量检查11?生药检验的生药检验的方法方法：药材取样法、性状鉴别：药材取样法、性状鉴别法、显微鉴别法、分光光度法、色谱法、法、显微鉴别法、分光光度法、色谱法、重金属检查法、农药残留量检查法、挥发重金属检查法、农药残留量检查法、挥发油测定法、水分测定法
10、、灰分测定法、浸油测定法、水分测定法、灰分测定法、浸出物测定法、杂质检查法和铅、镉、砷、出物测定法、杂质检查法和铅、镉、砷、汞、铜测定法等汞、铜测定法等。12水分测定法水分测定法?生药在测定水分时一般先破碎成直径不超过生药在测定水分时一般先破碎成直径不超过3mm 的颗粒或碎片；直径和长度在的颗粒或碎片；直径和长度在 3mm 以下的可不破碎；减压干燥法需通过二号筛。以下的可不破碎；减压干燥法需通过二号筛。?中国药典（中国药典（2019 年版）共有四种标准年版）共有四种标准的水分测定方法，的水分测定方法，即烘干法、甲苯法、减压即烘干法、甲苯法、减压干燥法和气相色谱法。干燥法和气相色谱法。13?烘干
11、法烘干法?适用于不含或少含挥发性成分的药品。适用于不含或少含挥发性成分的药品。?测定法测定法取供试品取供试品 2 5g，平铺于干燥至，平铺于干燥至恒重的扁形称量瓶中，厚度不超过恒重的扁形称量瓶中，厚度不超过 5mm，疏松供试品不超过疏松供试品不超过 10mm，精密称定，打开，精密称定，打开瓶盖，在瓶盖，在 100 105 干燥干燥 5 小时，将瓶盖小时，将瓶盖盖好，移置干燥器中，冷却盖好，移置干燥器中，冷却 30 分钟，精密分钟，精密称定，再在上述温度干燥称定，再在上述温度干燥 1 小时，冷却，称小时，冷却，称重，至连续两次称重的差异不超过重，至连续两次称重的差异不超过 5mg 为止。为止。根
12、据减失的重量，计算供试品中的含水量根据减失的重量，计算供试品中的含水量14?甲苯法甲苯法?适用于含挥发性成分的药品。适用于含挥发性成分的药品。?测定法测定法取供试品适量（约相当于含水量取供试品适量（约相当于含水量 1 4ml），精密称定，置），精密称定，置 A 瓶中，加甲苯约瓶中，加甲苯约 200ml，必要时加入干燥、洁净的沸石或玻璃珠数粒，将仪必要时加入干燥、洁净的沸石或玻璃珠数粒，将仪器各部分连接，自冷凝管顶端加入甲苯，至充满器各部分连接，自冷凝管顶端加入甲苯，至充满 B 管的狭细部分。将管的狭细部分。将 A 瓶置电热套中或用其他适宜方瓶置电热套中或用其他适宜方法缓缓加热，待甲苯开始沸腾时
13、，调节温度，使每法缓缓加热，待甲苯开始沸腾时，调节温度，使每秒钟馏出秒钟馏出 2 滴。待水分完全馏出，即测定管刻度部滴。待水分完全馏出，即测定管刻度部分的水量不再增加时，将冷凝管内部先用甲苯冲洗，分的水量不再增加时，将冷凝管内部先用甲苯冲洗，再用饱蘸甲苯的长刷或其他适宜的方法，将管壁上再用饱蘸甲苯的长刷或其他适宜的方法，将管壁上附着的甲苯推下，继续蒸馏附着的甲苯推下，继续蒸馏 5 分钟，放冷至室温，分钟，放冷至室温，拆卸装置，如有水黏附在拆卸装置，如有水黏附在 B 管的管壁上，可用蘸甲管的管壁上，可用蘸甲苯的铜丝推下，放置，使水分与甲苯完全分离（可苯的铜丝推下，放置，使水分与甲苯完全分离（可加
14、亚甲蓝粉末少量，使水染成蓝色，以便分离观加亚甲蓝粉末少量，使水染成蓝色，以便分离观察）。检读水量，并计算供试品中的含水量察）。检读水量，并计算供试品中的含水量15?减压干燥法减压干燥法?适用于含挥发性成分的贵重药品。适用于含挥发性成分的贵重药品。?测定法测定法取供试品取供试品 2 4g，混合均匀，分，混合均匀，分取约取约 0.5 1g，置于已在供试品同样条件，置于已在供试品同样条件下干燥并称重的称量瓶中，精密称定，打开下干燥并称重的称量瓶中，精密称定，打开瓶盖，放入上述减压干燥器中，减压至瓶盖，放入上述减压干燥器中，减压至2.67kPa(20mmHg)以下持续半小时，室温以下持续半小时，室温放
15、置放置 24 小时。在减压干燥器出口连接无水小时。在减压干燥器出口连接无水氯化钙干燥管，打开活塞，待内外压一致，氯化钙干燥管，打开活塞，待内外压一致，关闭活塞，打开干燥器，盖上瓶盖，取出称关闭活塞，打开干燥器，盖上瓶盖，取出称量瓶迅速精密称定重量，计算供试品中的含量瓶迅速精密称定重量，计算供试品中的含水量（水量（%）。）。16?气相色谱法气相色谱法?色谱条件与系统适用性试验色谱条件与系统适用性试验?测定法测定法取无水乙醇、对照溶液及供试品溶取无水乙醇、对照溶液及供试品溶液各液各 l 5 m l，注入气相色谱仪测定。，注入气相色谱仪测定。?外标法计算供试品中的含水量。方法如下：外标法计算供试品中
16、的含水量。方法如下：对照溶液中实际加入的水的峰面积对照溶液对照溶液中实际加入的水的峰面积对照溶液中总水峰面积中总水峰面积 K 对照溶液中乙醇峰面积对照溶液中乙醇峰面积供试品中水的峰面积供试品溶液中总水峰面供试品中水的峰面积供试品溶液中总水峰面积积 K 供试品溶液中乙醇峰面积。供试品溶液中乙醇峰面积。K A无水乙醇中水无水乙醇中水/A无水乙醇中乙醇无水乙醇中乙醇17灰分测定法灰分测定法?总灰分测定法总灰分测定法?供试品须粉碎，使能通过二号筛，混合均匀后，取供试供试品须粉碎，使能通过二号筛，混合均匀后，取供试品品 2 3g(如须测定酸不溶性灰分，可取供试品如须测定酸不溶性灰分，可取供试品 3 5g
17、)，置炽灼至恒重的坩埚中，称定重量，置炽灼至恒重的坩埚中，称定重量(准确至准确至0.0lg)，缓缓炽热，注意避免燃烧，至完全炭化时，逐，缓缓炽热，注意避免燃烧，至完全炭化时，逐渐升高温度至渐升高温度至 500 600，使完全灰化并至恒重。，使完全灰化并至恒重。根据残渣重量，计算供试品中总灰分的含量根据残渣重量，计算供试品中总灰分的含量()。?如供试品不易灰化，可将坩埚放冷，加热水或如供试品不易灰化，可将坩埚放冷，加热水或 10 硝硝酸铵溶液酸铵溶液 2ml，使残渣湿润，然后置水浴上蒸干，残，使残渣湿润，然后置水浴上蒸干，残渣照前法炽灼，至坩埚内容物完全灰化。渣照前法炽灼，至坩埚内容物完全灰化。
18、18?酸不溶性灰分测定法酸不溶性灰分测定法?取上项所得的灰分，在坩埚中小心地加入取上项所得的灰分，在坩埚中小心地加入稀盐酸约稀盐酸约 l0ml，用表面皿覆盖坩埚，置水，用表面皿覆盖坩埚，置水浴上加热浴上加热 10 分钟，表面皿用热水分钟，表面皿用热水 5ml 冲洗，冲洗，洗液并入坩埚中，用无灰滤纸滤过，坩埚洗液并入坩埚中，用无灰滤纸滤过，坩埚内的残渣用水洗于滤纸上，并洗涤至洗液内的残渣用水洗于滤纸上，并洗涤至洗液不显氯化物反应为止。滤渣连同滤纸移置不显氯化物反应为止。滤渣连同滤纸移置同一坩埚中，干燥，炽灼至恒重。根据残同一坩埚中，干燥，炽灼至恒重。根据残渣重量，计算供试品中酸不溶性灰分的含渣重
19、量，计算供试品中酸不溶性灰分的含量量()。19浸出物测定法浸出物测定法?水溶性浸出物测定法水溶性浸出物测定法?冷浸法冷浸法取供试品约取供试品约 4g，精密称定，置，精密称定，置250 300ml 的锥形瓶中，精密加水的锥形瓶中，精密加水l00ml，密塞，冷浸，前，密塞，冷浸，前 6 小时内时时振摇，小时内时时振摇，再静置再静置 18 小时，用干燥滤器迅速滤过，精小时，用干燥滤器迅速滤过，精密量取续滤液密量取续滤液 20ml，置已干燥至恒重的蒸，置已干燥至恒重的蒸发皿中，在水浴上蒸干后，于发皿中，在水浴上蒸干后，于 105 干燥干燥 3 小时，置干燥器中冷却小时，置干燥器中冷却 30 分钟，迅速
20、精密分钟，迅速精密称定重量。除另有规定外，以干燥品计算供称定重量。除另有规定外，以干燥品计算供试品中水溶性浸出物的含量试品中水溶性浸出物的含量()。20?热浸法热浸法 取供试品约取供试品约 2 4g，精密称定，精密称定，置置 100 250ml 的锥形瓶中，精密加水的锥形瓶中，精密加水50 l00ml，密塞，称定重量，静置，密塞，称定重量，静置 1 小时小时后，连接回流冷凝管，加热至沸腾，并保持后，连接回流冷凝管，加热至沸腾，并保持微沸微沸 l 小时。放冷后，取下锥形瓶，密塞，小时。放冷后，取下锥形瓶，密塞，再称定重量，用水补足减失的重量，摇匀，再称定重量，用水补足减失的重量，摇匀，用干燥滤器
21、滤过，精密量取滤液用干燥滤器滤过，精密量取滤液 25ml，置，置已干燥至恒重的蒸发皿中，在水浴上蒸干后，已干燥至恒重的蒸发皿中，在水浴上蒸干后，于于 105 干燥干燥 3 小时，置干燥器中冷却小时，置干燥器中冷却 30 分钟，迅速精密称定重量。除另有规定外，分钟，迅速精密称定重量。除另有规定外，以干燥品计算供试品中水溶性浸出物的含量以干燥品计算供试品中水溶性浸出物的含量()。21?醇溶性浸出物测定法醇溶性浸出物测定法?照水溶性浸出物测定法测定。除另有规定外，照水溶性浸出物测定法测定。除另有规定外，以各品种项下规定浓度的乙醇代替水为溶剂。以各品种项下规定浓度的乙醇代替水为溶剂。?挥发性醚浸出物测
22、定法挥发性醚浸出物测定法?取供试品取供试品(过四号筛过四号筛)2 5g，精密称定，精密称定，置五氧化二磷干燥器中干燥置五氧化二磷干燥器中干燥 12 小时，置索小时，置索氏提取器中，加乙醚适量，除另有规定外，氏提取器中，加乙醚适量，除另有规定外，加热回流加热回流 8 小时，取乙醚液，置干燥至恒重小时，取乙醚液，置干燥至恒重的蒸发皿中，放置，挥去乙醚，残渣置五氧的蒸发皿中，放置，挥去乙醚，残渣置五氧化二磷干燥器中干燥化二磷干燥器中干燥18 小时，精密称定，小时，精密称定，缓缓加热至缓缓加热至 105，并于，并于 105 干燥至恒重。干燥至恒重。其减失重量即为挥发性醚浸出物的重量。其减失重量即为挥发
23、性醚浸出物的重量。22农药残留农药残留?重点检查有机氯类、有机磷类和拟除虫重点检查有机氯类、有机磷类和拟除虫菊酯类。菊酯类。?GC23杂质杂质?指基源与规定相符，但其性状或部位与指基源与规定相符，但其性状或部位与规定不符的药材；来源与规定不同的物规定不符的药材；来源与规定不同的物质；无机杂质如砂石、泥块、尘土等。质；无机杂质如砂石、泥块、尘土等。24药用部分比例药用部分比例?为保证生药质量，有的生药需规定药用为保证生药质量，有的生药需规定药用部位的比例。例如穿心莲中穿心莲叶不部位的比例。例如穿心莲中穿心莲叶不得少于得少于35。25酸败度酸败度?酸败是指油脂或含油脂的种子类生药，在贮酸败是指油脂
24、或含油脂的种子类生药，在贮藏过程中，与空气、光线接触，发生复杂的藏过程中，与空气、光线接触，发生复杂的化学变化，产生特异的刺激气味（俗称化学变化，产生特异的刺激气味（俗称“哈哈喇味喇味”），即产生低分子化合物醛类、酮类），即产生低分子化合物醛类、酮类和游离脂肪酸，从而影响了生药的感观和内和游离脂肪酸，从而影响了生药的感观和内在质量。在质量。?本检查系通过酸值、羰基值或过氧化值的测本检查系通过酸值、羰基值或过氧化值的测定，以控制含油脂种子类的酸败程度。定，以控制含油脂种子类的酸败程度。26含量测定含量测定?以有效成分为对象：有效成分和总成分以有效成分为对象：有效成分和总成分?测定方法：经典分析法
25、、分光光度法、色测定方法：经典分析法、分光光度法、色谱法谱法?方法学验证内容有：线性、范围、准确度、方法学验证内容有：线性、范围、准确度、精密度（包括重复性和重现性）、检测限、精密度（包括重复性和重现性）、检测限、定量限和耐用性等。定量限和耐用性等。27?含量限（幅）度的制定含量限（幅）度的制定幅度幅度：毒剧药必须规定幅度，如中国：毒剧药必须规定幅度，如中国药典（药典（2019 年版）规定马钱子中含士年版）规定马钱子中含士的宁为的宁为 1.20 2.20。限度限度：如中国药典（：如中国药典（2019 年版）规年版）规定黄连中含生物碱以盐酸小檗碱计不得定黄连中含生物碱以盐酸小檗碱计不得少于少于
26、3.6。28指纹图谱（指纹图谱（Fingerprint）?中药材指纹图谱：中药材经适当处理后，采中药材指纹图谱：中药材经适当处理后，采用一定的分析手段，得到能够标示该生药特用一定的分析手段，得到能够标示该生药特性的性的共有峰共有峰的图谱。的图谱。?建立生药指纹图谱的目的是为了全面反映生建立生药指纹图谱的目的是为了全面反映生药所含内在化学成分的药所含内在化学成分的种类和相对含量种类和相对含量，进，进而反映生药的而反映生药的整体整体质量。质量。?是国际公认的控制天然产物质量的有效方法。是国际公认的控制天然产物质量的有效方法。29?中药材指纹图谱必须同时具有系统性、特征中药材指纹图谱必须同时具有系统
27、性、特征性和重现性。性和重现性。?系统性系统性是指指纹图谱反映的化学成分应包是指指纹图谱反映的化学成分应包括括有效组分群中的主要成分有效组分群中的主要成分，或指标成分的，或指标成分的全部。全部。?特征性特征性是指指纹图谱中反映的化学成分信是指指纹图谱中反映的化学成分信息（具体表现为保留时间或位移值）是具有息（具体表现为保留时间或位移值）是具有高度选择性高度选择性的，这些信息的综合结果能特征的，这些信息的综合结果能特征地区分中药的真伪与优劣。地区分中药的真伪与优劣。?重现性重现性指在规定的方法和条件下，不同的指在规定的方法和条件下，不同的操作者和不同的实验室所建立的指纹图谱的操作者和不同的实验室
28、所建立的指纹图谱的误差应在允许的范围之内。误差应在允许的范围之内。30指纹图谱检测标准指纹图谱检测标准1、名称、汉语拼音、名称、汉语拼音按中药命名原则制定按中药命名原则制定如：黄芪如：黄芪【名称名称】黄芪【汉语拼音汉语拼音】Huangqi312 2、来源、来源?原植、动物：科名、中文名、拉丁学原植、动物：科名、中文名、拉丁学名、药用部位、产地、名、药用部位、产地、采收季节、产采收季节、产地加工、炮制方法等。地加工、炮制方法等。?矿物药：矿物的类、族、矿石名或岩矿物药：矿物的类、族、矿石名或岩石名、主要成分、产地、产地加工、石名、主要成分、产地、产地加工、炮制方法等。炮制方法等。32?动、植物药
29、材：应固定品种、药用部位、动、植物药材：应固定品种、药用部位、产地、采收期、产地加工和炮制方法。产地、采收期、产地加工和炮制方法。?矿物药：固定产地和炮制、加工方法。矿物药：固定产地和炮制、加工方法。?供试品的取样：保证供试品的代表性和均供试品的取样：保证供试品的代表性和均一性。一性。33如：黄芪如：黄芪【来来 源源】本本 品品 为为 豆豆 科科 植植 物物 蒙蒙 古古 黄黄 芪芪AstragalusAstragalus membranaceusmembranaceus(Fisch.)(Fisch.)Bge.Bge.var.var.mongholicusmongholicus(Bge.)(Bg
30、e.)HsiaoHsiao的干燥根。的干燥根。【产地】山西、内蒙古、甘肃。【产地】山西、内蒙古、甘肃。【采收期】【采收期】1010月中旬至月中旬至1111月中旬。月中旬。【产地加工】除去须根及根头，晒干。【产地加工】除去须根及根头，晒干。34【炮制方法】除去杂质，大小分开，洗净，【炮制方法】除去杂质，大小分开，洗净，润透，切厚片，干燥。润透，切厚片，干燥。其其性状、鉴别、检查、含量测定、浸性状、鉴别、检查、含量测定、浸出物出物等项应符合中国药典等项应符合中国药典 20192019年版年版一部一部212212页黄芪项下的各项规定。页黄芪项下的各项规定。353 3、供试品的制备、供试品的制备?应根
31、据中药材中所含化学成分的理化性应根据中药材中所含化学成分的理化性质和检测方法的需要，选择适宜的方法质和检测方法的需要，选择适宜的方法进行制备。进行制备。?制备方法必须确保该中药材的主要化学制备方法必须确保该中药材的主要化学成分在指纹图谱中的体现。成分在指纹图谱中的体现。?目前仅要求按注射剂制备工艺制备供试目前仅要求按注射剂制备工艺制备供试品。品。364 4、参照物的制备、参照物的制备?制定指纹图谱必须设立参照物。制定指纹图谱必须设立参照物。?应根据供试品中所含成分的性质，选择适宜应根据供试品中所含成分的性质，选择适宜的的对照品对照品作为参照物，如果没有适宜的对照作为参照物，如果没有适宜的对照品
32、，可选择适宜的品，可选择适宜的内标物内标物作为参照物。作为参照物。?参照物的制备应根据检测方法的需要，选择参照物的制备应根据检测方法的需要，选择适宜的方法进行制备。适宜的方法进行制备。375 5、测定方法、测定方法包括测定方法、仪器、试剂、测定条件等。包括测定方法、仪器、试剂、测定条件等。根据中药材所含化学成分的理化性质，选择适宜的根据中药材所含化学成分的理化性质，选择适宜的测定方法，测定方法，优先考虑色谱方法优先考虑色谱方法。对于成分复杂的中药材，必要时可以考虑采用多种对于成分复杂的中药材，必要时可以考虑采用多种测定方法，测定方法，建立多张指纹图谱建立多张指纹图谱。以色谱方法制定指纹图谱所采
33、用的色谱柱、薄层板、以色谱方法制定指纹图谱所采用的色谱柱、薄层板、试剂、测定条件等必须固定；以光谱方法制定指试剂、测定条件等必须固定；以光谱方法制定指纹图谱，相应条件也必须固定。纹图谱，相应条件也必须固定。38稳定性试验稳定性试验?主要考察供试品的稳定性。主要考察供试品的稳定性。?取同一供试品，分别在不同时间检测，考察取同一供试品，分别在不同时间检测，考察色谱峰的相对保留时间、峰面积比值的一致色谱峰的相对保留时间、峰面积比值的一致性，确定检测时间。性，确定检测时间。?采用相似度软件进行评价，要求相似度大于采用相似度软件进行评价，要求相似度大于0.9。395、稳定性试验、稳定性试验肉苁蓉药材指纹
34、图谱研究的稳定性试验肉苁蓉药材指纹图谱研究的稳定性试验样品样品0h2h4h8h16h24h0.99880.99250.98540.99890.99270.9802相关系数相关系数(中位数）中位数）40精密度试验精密度试验?主要考察仪器的精密度。主要考察仪器的精密度。?取同一供试品，连续进样取同一供试品，连续进样5次以上，考察色次以上，考察色谱峰的相对保留时间、峰面积比值的一致性。谱峰的相对保留时间、峰面积比值的一致性。?采用相似度软件评价，要求相似度大于采用相似度软件评价，要求相似度大于0.9。?人工评价：人工评价：采用采用HPLC和和GC制定指纹图谱，制定指纹图谱，共有峰面积比值的共有峰面积
35、比值的RSD不得大于不得大于3，其他，其他方法不得大于方法不得大于5。414、精密度试验、精密度试验肉苁蓉药材指纹图谱研究的精密度试验肉苁蓉药材指纹图谱研究的精密度试验样品样品相关系数相关系数(中位数中位数)123450.99300.99280.98310.99290.996642重现性试验：重现性试验：?主要考察实验方法的重现性。主要考察实验方法的重现性。?取同一批号的供试品取同一批号的供试品5份以上，按照供试品份以上，按照供试品的制备方法制备供试品并进行检测，考察色的制备方法制备供试品并进行检测，考察色谱峰的相对保留时间、峰面积比值的一致性。谱峰的相对保留时间、峰面积比值的一致性。?采用相
36、似度软件评价，要求相似度大于采用相似度软件评价，要求相似度大于0.9。?人工评价：人工评价：采用采用HPLC和和GC制定指纹图谱，制定指纹图谱，共有峰面积比值的共有峰面积比值的RSD不得大于不得大于3，其他，其他方法不得大于方法不得大于5。43肉苁蓉药材指纹图谱研究的重现性试验肉苁蓉药材指纹图谱研究的重现性试验6、重现性实验、重现性实验样品样品12345相关系数（中位数）相关系数（中位数）0.99760.99940.99340.99540.9969446 6、指纹图谱及技术参数、指纹图谱及技术参数(1)(1)指纹图谱指纹图谱?采用采用HPLC和和GC制定指纹图谱，其记录时制定指纹图谱，其记录时
37、间根据样品所含成分的情况而定；采用间根据样品所含成分的情况而定；采用TLC制定指纹图谱，必须提供制定指纹图谱，必须提供从原点至溶从原点至溶剂前沿的图谱剂前沿的图谱；采用；采用光谱法光谱法制定指纹图谱，制定指纹图谱，必须按各种光谱的相应规定必须按各种光谱的相应规定提供全谱提供全谱。45化学成分类型复杂的品种，必要时可建立化学成分类型复杂的品种，必要时可建立多张指纹图谱多张指纹图谱。指纹图谱的建立指纹图谱的建立：根据根据10批次以上供试品批次以上供试品的检测结果所给出的相关参数，制定指纹的检测结果所给出的相关参数，制定指纹图谱。可以从图谱。可以从10批指纹图谱中选择其中批指纹图谱中选择其中 一一批
38、代表性较强的样品的指纹图谱批代表性较强的样品的指纹图谱 作为对照作为对照指纹图谱；也可以提取指纹图谱；也可以提取 计算机相似度评价计算机相似度评价软件得到的模式图谱软件得到的模式图谱作为对照指纹图谱作为对照指纹图谱。46(2)(2)共有指纹峰的标定共有指纹峰的标定?采用色谱方法制定指纹图谱，可采用保留采用色谱方法制定指纹图谱，可采用保留时间或相对保留时间标定指纹峰。时间或相对保留时间标定指纹峰。（相对（相对保留时间的计算：以参照物的保留时间，保留时间的计算：以参照物的保留时间，计算各色谱峰的相对保留时间。）计算各色谱峰的相对保留时间。）?光谱法采用光谱法采用波长或波数波长或波数标定指纹峰。标定
39、指纹峰。?根据根据10批次以上供试品的检测结果，标定批次以上供试品的检测结果，标定中药材的中药材的共有指纹峰共有指纹峰。47(3)指纹图谱的评价指纹图谱的评价?以指纹图谱相似度评价软件进行评价以指纹图谱相似度评价软件进行评价国家药典委员会中药色谱指纹图谱相国家药典委员会中药色谱指纹图谱相似度评价系统似度评价系统2019 A版版?以相对保留时间和峰面积比值进行评价以相对保留时间和峰面积比值进行评价48共有指纹峰面积比值的计算方法共有指纹峰面积比值的计算方法?以以对照品对照品作为参照物的指纹图谱，以参照物作为参照物的指纹图谱，以参照物峰面积作为峰面积作为1，计算各共有指纹峰面积与参照，计算各共有指
40、纹峰面积与参照物峰面积的比值；物峰面积的比值；?以以内标物内标物作为参照物的指纹图谱，则以共有作为参照物的指纹图谱，则以共有指纹峰中其中一个峰（指纹峰中其中一个峰（要求峰面积相对较大、要求峰面积相对较大、较稳定的共有峰较稳定的共有峰）的峰面积作为）的峰面积作为1，计算其他，计算其他各共有指纹峰面积的比值。各共有指纹峰面积的比值。?各共有指纹峰面积比值必须相对固定。各共有指纹峰面积比值必须相对固定。49峰面积比值的要求：峰面积比值的要求：?Ai 20At:SD20?10%At Ai 20%At:SD25%?Ai 10At：峰面积比值不作要求，但峰面积比值不作要求，但必须标定相对保留时间。必须标定
41、相对保留时间。?未达基线分离的共有峰，未达基线分离的共有峰，应计算该组峰的应计算该组峰的总峰面积作为峰面积，同时标定该组各峰总峰面积作为峰面积，同时标定该组各峰的相对保留时间。的相对保留时间。50非共有峰面积非共有峰面积中药材供试品的图谱与标准指纹图谱中药材供试品的图谱与标准指纹图谱比较，非共有峰总面积不得大于总峰面积比较，非共有峰总面积不得大于总峰面积的的10。51例：黄芪黄酮及其苷类成分的测定方法例：黄芪黄酮及其苷类成分的测定方法照高效液相色谱法测定。照高效液相色谱法测定。色谱条件和系统适用性试验色谱条件和系统适用性试验 色谱柱色谱柱以十八以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，烷基硅烷键合硅胶为
42、填充剂，型号型号为为Polaris5 C-18-A，2504.6mm（MetaChem公司公司产品）；产品）；流动相流动相为乙氰水（含为乙氰水（含 0.042磷酸）磷酸）(1:4)，流速流速0.8ml/分钟，分钟，检测波长检测波长225nm；理理论塔板数论塔板数 按毛蕊异黄酮按毛蕊异黄酮-7-O-D-吡喃葡萄糖吡喃葡萄糖苷计，应不低于苷计，应不低于3000。52测定法测定法分别精密吸取对照品溶液和供试品分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各溶液各10l，注入液相色谱仪中，注入液相色谱仪中，记录记录60分钟的色谱图分钟的色谱图，即得。，即得。以毛蕊异黄酮以毛蕊异黄酮-7-O-D-吡喃葡萄糖苷的色谱
43、峰吡喃葡萄糖苷的色谱峰(S峰峰)的相的相对保留时间和峰面积为对保留时间和峰面积为 1，计算相对保留，计算相对保留时间和峰面积比值。时间和峰面积比值。53黄芪所含主要成分的对照品黄芪所含主要成分的对照品色谱峰色谱峰毛蕊异黄酮苷芒柄花素苷异黄烷苷3毛蕊芒异柄黄花酮黄素芪甲苷-异黄烷苷1-54不同产地黄芪药材紫外检不同产地黄芪药材紫外检测器检测指纹图谱比较测器检测指纹图谱比较陕西甘肃山西黑龙江内蒙古其他河北辽宁辽宁55?中药注射剂指纹图谱系指中药注射剂指纹图谱系指中药注射剂中药注射剂经适当经适当处理后，采用一定的分析手段，得到的能够处理后，采用一定的分析手段，得到的能够标示该注射剂特性的共有峰的图谱
44、。标示该注射剂特性的共有峰的图谱。?要求：要求：以有效部位或中间体投料的中药注射以有效部位或中间体投料的中药注射剂，还需制定有效部位或中间体的指纹图谱。剂，还需制定有效部位或中间体的指纹图谱。567、注射剂用中药材指纹图谱检测、注射剂用中药材指纹图谱检测标准（草案）书写格式标准（草案）书写格式?中药材的名称、来源中药材的名称、来源?供试品制备供试品制备?对照品溶液或内标物溶液的制备对照品溶液或内标物溶液的制备?测定方法（包括仪器、试剂、测定条件和测定方法（包括仪器、试剂、测定条件和测定方法）测定方法）?指纹图谱及各项技术参数指纹图谱及各项技术参数?起草说明起草说明57三、生药质量标准的制定三、
45、生药质量标准的制定药典所载单味药材内容药典所载单味药材内容?名称：中文名、汉语拼音、拉丁学名。名称：中文名、汉语拼音、拉丁学名。?来源：原植物（动物）的科名、植物（动物）来源：原植物（动物）的科名、植物（动物）名、学名、药用部位（矿物药注明类、族、名、学名、药用部位（矿物药注明类、族、矿石名或岩石名）、采收、产地加工。矿石名或岩石名）、采收、产地加工。?性状：记载生药形状、大小、表面特征、颜性状：记载生药形状、大小、表面特征、颜色、断面特征、质地、气、味等方面的特征。色、断面特征、质地、气、味等方面的特征。58?鉴别：记载经验鉴别、显微鉴别（包括组织、鉴别：记载经验鉴别、显微鉴别（包括组织、粉
46、末、显微化学反应）、理化鉴别（化学试粉末、显微化学反应）、理化鉴别（化学试验、薄层色谱等）的方法及鉴别特征。验、薄层色谱等）的方法及鉴别特征。?检查：有效性、纯度、安全性，包括：杂质、检查：有效性、纯度、安全性，包括：杂质、水分、灰分、浸出物、重金属、农药残留量水分、灰分、浸出物、重金属、农药残留量等。等。?含量测定：某种成分的测定方法及含量标志。含量测定：某种成分的测定方法及含量标志。59?炮制：净制、切制、炮炙、炮制品。炮制：净制、切制、炮炙、炮制品。?性味与归经：四气五味，有无毒性，归经。性味与归经：四气五味，有无毒性，归经。?功能与主治：记载作用及医疗应用。功能与主治：记载作用及医疗应
47、用。?用法与用量：用法一般指水煎内服，用量指用法与用量：用法一般指水煎内服，用量指成人一日常用剂量。成人一日常用剂量。?注意：主要禁忌及副作用。注意：主要禁忌及副作用。?贮藏：贮藏最佳场所及应注意的问题。贮藏：贮藏最佳场所及应注意的问题。60浙贝母质量标准正文浙贝母质量标准正文浙浙 贝贝 母母ZhebeimuBULBUS FRITILLARIAE THUNBERGII 本品为百合科植物浙贝母本品为百合科植物浙贝母Fritillaria thunbergii Miq.的干燥鳞茎。初夏植株枯的干燥鳞茎。初夏植株枯萎时采挖，洗净。大小分开，大者除去芯芽，萎时采挖，洗净。大小分开，大者除去芯芽，习称习
48、称“大贝大贝”；小者不去芯芽，习称；小者不去芯芽，习称“珠贝珠贝”。分别撞擦，除去外皮，拌以煅。分别撞擦，除去外皮，拌以煅过的贝壳粉，吸去擦出的浆汁，干燥；或取过的贝壳粉，吸去擦出的浆汁，干燥；或取鳞茎，大小分开，洗净，除去芯芽，趁鲜切鳞茎，大小分开，洗净，除去芯芽，趁鲜切成厚片，洗净，干燥，习称成厚片，洗净，干燥，习称“浙贝片浙贝片”。61【性状】【性状】大贝大贝 为鳞茎外层的单瓣鳞叶，略呈新月为鳞茎外层的单瓣鳞叶，略呈新月形，高形，高 1-2 cm，直径，直径 2-3.5 cm。外表面类白色至淡。外表面类白色至淡易折断，断面白色至黄白色，富粉性。气微，味苦。易折断，断面白色至黄白色，富粉性
49、。气微，味苦。珠贝珠贝为完整的鳞茎，呈扁圆形，高为完整的鳞茎，呈扁圆形，高 1-1.5 cm，直径直径 1-2.5 cm。表面类白色，外层鳞叶。表面类白色，外层鳞叶 2 瓣，肥厚，瓣，肥厚，黄色，内表面白色或淡棕色，被有白色粉末。质硬而脆，黄色，内表面白色或淡棕色，被有白色粉末。质硬而脆，略似肾形，互相抱合，内有小鳞叶略似肾形，互相抱合，内有小鳞叶 2-3 枚及干缩的残茎。枚及干缩的残茎。浙贝片浙贝片 为鳞茎外层的单瓣鳞叶切成的片。椭圆形为鳞茎外层的单瓣鳞叶切成的片。椭圆形粉白色。质脆，易折断，断面粉白色，富粉性。粉白色。质脆，易折断，断面粉白色，富粉性。62或类圆形，直径或类圆形，直径 1-
50、2 cm，边缘表面淡黄色，切面平坦，边缘表面淡黄色，切面平坦，【鉴别】（【鉴别】（1）本品粉末淡黄白色。淀粉）本品粉末淡黄白色。淀粉粒甚多，单粒卵形、广卵形或椭圆形，直径粒甚多，单粒卵形、广卵形或椭圆形，直径6 56m，层纹不明显。表皮细胞类多角形，层纹不明显。表皮细胞类多角形或长方形，垂周壁连珠状增厚；气孔少见，副或长方形，垂周壁连珠状增厚；气孔少见，副卫细胞卫细胞 4 5 个。草酸钙结晶少见，细小，多个。草酸钙结晶少见，细小，多呈颗粒状，有的呈梭形、方形或细杆状。导管呈颗粒状，有的呈梭形、方形或细杆状。导管多为螺纹，直径至多为螺纹，直径至 18m。63淀粉粒淀粉粒草酸钙结晶草酸钙结晶导管导
