1、第八章疾病与人类健康与优选第八章疾病与人类健康与生物学性状生物学性状形态结构形态结构核衣壳核衣壳 核酸核酸：两条两条ssRNAssRNA与核衣壳蛋白与核衣壳蛋白(P7)(P7)结合形成双体结构结合形成双体结构 衣壳衣壳：双层壳膜：双层壳膜 内层为衣壳蛋白（内层为衣壳蛋白（P24)P24)外层为内膜蛋白（外层为内膜蛋白（P17)P17)包包 膜膜 脂质双层脂质双层刺刺 突突 gp120,gp41gp120,gp41 生物学性状生物学性状形态结构形态结构 病毒基因组全长约病毒基因组全长约9200bp，其其5端和端和3端各有一段相同的端各有一段相同的核苷酸序列，是长末端重复序核苷酸序列，是长末端重复
2、序列列(LTR)，中间含有，中间含有env、pol、gag 3个结构基因和个结构基因和tat、rev、nef、vif、vpu、vpr等等6个调节个调节基因。基因。生物学性状生物学性状基因组结构与功能基因组结构与功能结构基因结构基因 envenv基因：编码基因：编码gp41gp41：介导病毒包膜与宿主胞膜的融合；：介导病毒包膜与宿主胞膜的融合；gp120gp120：有病毒颗粒与：有病毒颗粒与NTNT抗体及宿主细胞表面抗体及宿主细胞表面 的的CD4CD4分子结合的部位。分子结合的部位。polpol基因：编码产生逆转录酶基因：编码产生逆转录酶(p66/p53)(p66/p53)和整合酶和整合酶(p3
3、1)(p31)，与，与 病毒的复制有关。病毒的复制有关。gaggag基因：编码产生蛋白前体，经酶解后形成基因：编码产生蛋白前体，经酶解后形成3 3种蛋白种蛋白(P17(P17、P24P24、P15)P15)。调节基因：调节基因：tat、rev、nef、vif、vpu、vpr tat tat、revrev和和nefnef的产物对的产物对HIVHIV表达的正、负调节以及对维持表达的正、负调节以及对维持 HIVHIV在细胞中复制平衡和控制在细胞中复制平衡和控制HIVHIV潜伏有重要意义。潜伏有重要意义。长末端重复序列长末端重复序列(LTR)：对病毒转录的调控起关键作用。对病毒转录的调控起关键作用。生
4、物学性状生物学性状基因组结构与功能基因组结构与功能 HIV病毒体的包膜糖蛋白病毒体的包膜糖蛋白刺突与细胞上的特异受体结合，刺突与细胞上的特异受体结合，然后病毒包膜与细胞膜发生融然后病毒包膜与细胞膜发生融合。核衣壳进入细胞质内脱壳，合。核衣壳进入细胞质内脱壳，释放其核心释放其核心RNA进行复制。进行复制。病毒的复制病毒的复制生物学性状生物学性状病毒变异性病毒变异性 HIVHIV基因组可发生变异，最易变异的是编码包膜糖基因组可发生变异，最易变异的是编码包膜糖蛋白的蛋白的envenv基因和调节基因基因和调节基因nefnef。估计病毒估计病毒envenv基因核苷酸变异概率每年每个位点约基因核苷酸变异概
5、率每年每个位点约0.1%0.1%，其变异率与流感病毒相似。，其变异率与流感病毒相似。根据根据nefnef基因序列的异同将基因序列的异同将HIV-1HIV-1分为分为M M、O O、N N等等3 3组组(group)12(group)12个亚型个亚型(subtype)(subtype)；HIV-2HIV-2型为型为A AF F等等6 6个亚型。个亚型。在非洲主要流的是在非洲主要流的是HIV-1HIV-1的的 A A、C C、D D、和、和E E亚型，我亚型，我国云南省感染者主要为国云南省感染者主要为B B和和C C亚型。全球流行将以亚型。全球流行将以C C和和E E亚亚型为主，另外各亚型的流行时
6、间和传播情况也不同。型为主，另外各亚型的流行时间和传播情况也不同。生物学性状生物学性状 HIV仅感染表面有仅感染表面有CD4受受体的细胞。实验室中常用正体的细胞。实验室中常用正常人常人T细胞分离病毒。感染细胞分离病毒。感染病毒的细胞出现病毒的细胞出现CPE。动物。动物模型可用模型可用HIV感染恒河猴和感染恒河猴和黑猩猩。黑猩猩。培养特性培养特性生物学性状生物学性状56加热加热 30min；冻干血制品需冻干血制品需68 72h方能保证污染病毒的灭活；方能保证污染病毒的灭活；高压蒸气灭菌（高压蒸气灭菌（103.4kpa/121.3）20min可被灭活；可被灭活；1)10%漂白粉液、漂白粉液、0.5
7、%次氯酸钠、次氯酸钠、50%乙醇、乙醇、35%异丙醇、异丙醇、0.3%H2O2、0.5%来苏等消毒液中室温来苏等消毒液中室温10min保证完全保证完全被灭活。被灭活。抵抗力抵抗力HIV的抵抗力不强，以下条件可被灭活：的抵抗力不强，以下条件可被灭活：生物学性状生物学性状HBV的发现源于表面抗原的研究。全球流行将以C和E亚型为主，另外各亚型的流行时间和传播情况也不同。WHO和包括我国在内的许多国家都制定了控制HIV感染的措施：tat、rev和nef的产物对HIV表达的正、负调节以及对维持HIV进入机体后病毒开始复制，约在812w时出现病毒血症，此期病毒在体内广泛播散，并开始在淋巴样器官种植，36w
8、在许多病人（50%70%）体内发展成急性单核细胞增多症样表现，其后大多数病毒以前病毒的形式整合于宿主细胞染色体内，进入长期的、无症状的潜伏感染期。检测的项目主要是HBsAg和抗HBs、HBeAg和抗HBe、以及抗HBcIgM和抗HBcIgG，必要时也可检测PHSA、PreS1和PreS2的抗原和抗体。S区基因：包括S基因、PreS1与PreS2基因，分别编有此细胞株可持续地产生Dane颗粒。WHO和包括我国在内的许多国家都制定了控制HIV感染的措施：传染源 a）HIV无症状携带者 b）艾滋病患者病毒分离：取新鲜分离的正常人淋巴细胞或脐血淋巴细胞接种病人的 血液单个核细胞、骨髓细胞、血浆或脑脊液
9、等标本。断HBV与肝细胞的结合而起抗病毒作用。HBcAg抗原很强，能刺激机体产生抗HBc，但无中和作用。抗HBs：NT抗体，免疫力（+）；合并各种条件致病菌(如分枝杆菌、念珠菌、卡氏肺孢菌等)或其他病毒(如EBV，CMV、HHV-8型等)感染；3）20min可被灭活；致病性与免疫性致病性与免疫性传染源和传播途径传染源和传播途径传染源传染源 a）HIVHIV无症状携带者无症状携带者 b）艾滋病患者艾滋病患者 2）血液传播：医源性）血液传播：医源性 吸毒者吸毒者 1）性传播：性传播：STD之一之一 同性恋同性恋 异性恋异性恋传播途径传播途径 3）母母致病性与免疫性致病性与免疫性婴传播：胎盘婴传播：
10、胎盘 产道产道 哺乳哺乳临床表现临床表现 1)1)原发感染原发感染致病性与免疫性致病性与免疫性 HIV进入机体后病毒开始复制，进入机体后病毒开始复制，约在约在812w时出现病毒血症，此期时出现病毒血症，此期病毒在体内广泛播散，并开始在淋巴病毒在体内广泛播散，并开始在淋巴样器官种植，样器官种植，36w在许多病人在许多病人（50%70%）体内发展成急性单核）体内发展成急性单核细胞增多症样表现，其后大多数病毒细胞增多症样表现，其后大多数病毒以前病毒的形式整合于宿主细胞染色以前病毒的形式整合于宿主细胞染色体内，进入长期的、无症状的潜伏感体内，进入长期的、无症状的潜伏感染期。染期。2)2)潜伏感染潜伏感
11、染致病性与免疫性致病性与免疫性 此期可长达此期可长达6 6个月至个月至1010年。年。临床无症状，有些病人可出现无临床无症状，有些病人可出现无痛性淋巴结肿大。当机体受到各痛性淋巴结肿大。当机体受到各种因素的激发使潜伏感染的病毒种因素的激发使潜伏感染的病毒再次大量增殖而引致免疫损害时，再次大量增殖而引致免疫损害时，才出现临床症状，进入才出现临床症状，进入AIDSAIDS相关相关综合征期。综合征期。临床表现临床表现 3)AIDS3)AIDS相关综合征相关综合征致病性与免疫性致病性与免疫性临床表现临床表现(AIDS-rilated complex,ARC)(AIDS-rilated complex,
12、ARC)早期有发热、盗汗、全身倦早期有发热、盗汗、全身倦怠、体重下降、皮疹及慢性怠、体重下降、皮疹及慢性腹泻等胃肠道症状，并有进腹泻等胃肠道症状，并有进行性淋巴结病及舌上白斑等行性淋巴结病及舌上白斑等口腔损害。口腔损害。4)4)典型典型AIDSAIDS致病性与免疫性致病性与免疫性临床表现临床表现 出现中枢神经系统疾患出现中枢神经系统疾患;合并各种条件致病菌合并各种条件致病菌(如如分枝杆菌、念珠菌、卡氏肺孢分枝杆菌、念珠菌、卡氏肺孢菌等菌等)或其他病毒或其他病毒(如如EBVEBV，CMVCMV、HHV-8HHV-8型等型等)感染；感染；并发卡波济肉瘤并发卡波济肉瘤(Kaposi(Kaposi s
13、arcoma)sarcoma)。在感染后在感染后1010年内约有年内约有50%50%的人会发展为的人会发展为AIDSAIDS。AIDSAIDS的的5 5年间死亡率约为年间死亡率约为90%90%，多于临，多于临床症状出现后床症状出现后2 2年内死亡。年内死亡。感染病毒的细胞出现CPE。大球形颗粒，即Dane颗粒，直径42nm。传染源 a）HIV无症状携带者 b）艾滋病患者HIV的gp120与细胞膜上的MHC类分子有一同源区，抗gp120抗体能与这类故表明机体的免疫力不足以清除病毒，HIV一经感染便终生携带病毒。用HBVDNA探针与肝癌组织进行Southern 印迹核酸杂交时，获得阳性结果，说明肝
14、癌细胞染色体上整合有HBVDNA。在非洲主要流的是HIV-1的 A、C、D、和E亚型，我国云南省感染者主要为B和C亚型。合成寡肽疫苗 根据gp120分子中的主要中和决定簇（V3区）、与CD4受体结合区（C4区）和部分T细胞决定簇（C1、C4区）的氨基酸顺序，合成各种HIV的寡肽疫苗。S区基因：包括S基因、PreS1与PreS2基因，分别编HIV的gp120与细胞膜上的MHC类分子有一同源区，抗gp120抗体能与这类HBcAg：DNA复制标志，血清中（-），肝细胞核内 （+）；外壳（包膜）：厚7nm。检出高效价抗HBc，特别是抗HBc IgM则表示HBV在肝内故表明机体的免疫力不足以清除病毒，H
15、IV一经感染便终生携带病毒。tat、rev和nef的产物对HIV表达的正、负调节以及对维持并发卡波济肉瘤(Kaposi sarcoma)。病毒包膜糖蛋白插入细胞膜或病毒的出芽释放，增加了细胞膜的通透性；机体对HIV感染的免疫应答冻干血制品需68 72h方能保证污染病毒的灭活；HIVHIV的致病机制的致病机制1 1）选择性地侵犯）选择性地侵犯CD4CD4+T T 细胞，细胞，CD4/CD8CD4/CD8比例倒置，导致免疫功能比例倒置，导致免疫功能紊乱。紊乱。2 2）HIVHIV感染后感染后B B细胞多克隆活化，出现高丙球蛋白血症，循环血细胞多克隆活化，出现高丙球蛋白血症，循环血中免疫复合物及自身
16、抗体含量增高，但对新抗原刺激的应答中免疫复合物及自身抗体含量增高，但对新抗原刺激的应答受到很大阻碍。受到很大阻碍。3 3）单核巨噬细胞也表达少量）单核巨噬细胞也表达少量CD4CD4分子，受分子，受HIVHIV感染后通常不被感染后通常不被杀死，成为感染后较长时期的病毒储存者。杀死，成为感染后较长时期的病毒储存者。4 4）HIVHIV感染所致神经细胞损害：约有感染所致神经细胞损害：约有40409090的的AIDSAIDS患者出现患者出现不同程度的神经异常，包括不同程度的神经异常，包括HIVHIV脑病、脊髓病变、周围神经炎脑病、脊髓病变、周围神经炎和严重的和严重的AIDSAIDS痴呆综合征。痴呆综合
17、征。致病性与免疫性致病性与免疫性HIVHIV对对CD4CD4+T T 细胞损害的机制细胞损害的机制 1）病毒感染对细胞的直接杀伤作用病毒感染对细胞的直接杀伤作用a.a.病毒包膜糖蛋白插入细胞膜或病毒的出芽释放，增加了细胞膜的通透性；病毒包膜糖蛋白插入细胞膜或病毒的出芽释放，增加了细胞膜的通透性；b.HIVb.HIV增殖时可产生大量未整合的病毒增殖时可产生大量未整合的病毒cDNA,cDNA,干扰细胞的正常生物合成；干扰细胞的正常生物合成；c.c.感染感染T T细胞表面细胞表面gp120gp120与非感染细胞的与非感染细胞的CD4CD4结合，细胞融合死亡，结合，细胞融合死亡，T T细胞减少。细胞减
18、少。2)免疫病理所引起的细胞损伤：免疫病理所引起的细胞损伤：a.受染细胞膜上表达病毒的包膜糖蛋白，可激活特异性受染细胞膜上表达病毒的包膜糖蛋白，可激活特异性CTL的识别，或与特异的识别，或与特异 性抗体结合后通过性抗体结合后通过ADCC作用而破坏细胞；作用而破坏细胞；b.HIV的的gp120与细胞膜上的与细胞膜上的MHC类分子有一同源区，抗类分子有一同源区，抗gp120抗体能与这抗体能与这类类 T细胞起交叉反应，即病毒诱导的自身免疫使细胞造成免疫病损害或功能障碍。细胞起交叉反应，即病毒诱导的自身免疫使细胞造成免疫病损害或功能障碍。3)HIV感染诱导细胞凋亡：感染诱导细胞凋亡：病毒激活病毒激活T
19、细胞凋亡基因，表达细胞凋亡基因，表达FAS受体，当其与细胞表面受体，当其与细胞表面FAS结合后最终导致结合后最终导致感染细胞死亡。感染细胞死亡。致病性与免疫性致病性与免疫性3.3.机体对机体对HIVHIV感染的免疫应答感染的免疫应答 机体感染机体感染HIV后产生多种抗体，包括抗后产生多种抗体，包括抗gp120等中和抗体。等中和抗体。HIV感染也可刺激机体细胞产生免疫应答，包括感染也可刺激机体细胞产生免疫应答，包括CTL细胞、细胞、NK细胞及细胞及ADCC的杀伤活性，但细胞免疫依然不能清除有的杀伤活性，但细胞免疫依然不能清除有HIV潜潜伏感染的细胞，这与病毒能逃逸免疫作用有关，如伏感染的细胞，这
20、与病毒能逃逸免疫作用有关，如:HIV损伤损伤CD4细胞，使整个免疫系统的功能失效；细胞，使整个免疫系统的功能失效；病毒基因整合于宿主细胞染色体中，细胞不表达或少表达病毒病毒基因整合于宿主细胞染色体中，细胞不表达或少表达病毒结构蛋白，使宿主长期呈结构蛋白，使宿主长期呈“无抗原状态；无抗原状态；病毒包膜糖蛋白的一些区段的高变异性，致使不断出现新抗原病毒包膜糖蛋白的一些区段的高变异性，致使不断出现新抗原而逃逸免疫系统的识别；而逃逸免疫系统的识别；1)HIV对各种免疫细胞均有损害。故表明机体的免疫力不足以清对各种免疫细胞均有损害。故表明机体的免疫力不足以清除病毒，除病毒，HIV一经感染便终生携带病毒。
21、一经感染便终生携带病毒。致病性与免疫性致病性与免疫性 HIV感染早期呈病毒血症时，从病人血液、脑脊液感染早期呈病毒血症时，从病人血液、脑脊液和骨髓细胞中能分离到病毒，从血清中查到和骨髓细胞中能分离到病毒，从血清中查到HIV抗原；抗原；无症状的潜伏期内一般不能或很少从外周血中检测无症状的潜伏期内一般不能或很少从外周血中检测到到HIV抗原；抗原；进入进入AIDS相关综合征或典型相关综合征或典型AIDS期，于外周血中期，于外周血中均可查到病毒抗原、核酸及抗体。均可查到病毒抗原、核酸及抗体。微生物学检查法微生物学检查法检测抗体检测抗体 ELISA、IFA、RIA:敏感性好，应用方便。尤其敏感性好，应用
22、方便。尤其ELISA法目前最为常用。但由于法目前最为常用。但由于HIV的全病毒抗原与其的全病毒抗原与其他逆转录病毒（他逆转录病毒（HTLV）有交叉反应，而且病毒系芽生）有交叉反应，而且病毒系芽生释放，病毒包膜中常带有细胞成分，故有一定的假阳释放，病毒包膜中常带有细胞成分，故有一定的假阳性。因此，这类试验仅适用于筛查性。因此，这类试验仅适用于筛查HIV抗体抗体.Western Blot（WB）:HIV抗体阳性者进一步用抗体阳性者进一步用WB法予以确认。法予以确认。微生物学检查法微生物学检查法 检测病毒及其组分检测病毒及其组分病毒分离病毒分离：取新鲜分离的正常人淋巴细胞或脐血淋巴细胞接种：取新鲜分
23、离的正常人淋巴细胞或脐血淋巴细胞接种病人的病人的 血液单个核细胞、骨髓细胞、血浆或脑脊液等标本。培血液单个核细胞、骨髓细胞、血浆或脑脊液等标本。培养养24周，细胞病变出现后，可用间接免疫荧光法检测培养细周，细胞病变出现后，可用间接免疫荧光法检测培养细胞中的病毒抗原，或用生化方法检测培养液中的逆转录酶活性。胞中的病毒抗原，或用生化方法检测培养液中的逆转录酶活性。检测病毒抗原检测病毒抗原：常用：常用ELISA法检测衣壳蛋白。法检测衣壳蛋白。P24多出现于多出现于HIV感染的急性期，而在潜伏期中为阴性，到出现典型的艾滋病症感染的急性期，而在潜伏期中为阴性，到出现典型的艾滋病症状时，状时，p24 又可
24、重新升高。又可重新升高。检测病毒核酸：检测病毒核酸：应用核酸杂交法检测整合在细胞中的前病毒应用核酸杂交法检测整合在细胞中的前病毒DNA片段，可确定细胞中片段，可确定细胞中HIV潜伏感染的情况。应用潜伏感染的情况。应用PCR检测检测HIV的前病毒的前病毒DNA，或用逆转录，或用逆转录-PCR法检测病毒的法检测病毒的RNA。微生物学检查法微生物学检查法防治原则防治原则 WHO和包括我国在内的许多国家都制定了控制和包括我国在内的许多国家都制定了控制HIV感染的措施：感染的措施：建立建立HIV感染和感染和AIDS的监测网络，控制疾病的流行蔓的监测网络，控制疾病的流行蔓延；延；进行广泛的宣传教育，取缔娼
25、妓，防止性传播疾病的进行广泛的宣传教育，取缔娼妓，防止性传播疾病的流行，抵制吸毒等社会弊病；流行，抵制吸毒等社会弊病；检测高危险人群包括供血员、同性恋、静脉注射毒品检测高危险人群包括供血员、同性恋、静脉注射毒品成瘾者、血友病患者，国外旅游者和外事使馆人员等；成瘾者、血友病患者，国外旅游者和外事使馆人员等；禁止进口血液制品，如凝血因子禁止进口血液制品，如凝血因子等；等；加强国境检疫、留检等。加强国境检疫、留检等。疫苗研究疫苗研究 尚缺乏理想的疫苗尚缺乏理想的疫苗,目前研究得最多的是：目前研究得最多的是：1.基因工程亚单位疫苗基因工程亚单位疫苗:HIV的包膜糖蛋白的包膜糖蛋白gp160,gp120
26、和和gp41已在细菌、酵母和真核细胞系统表达成功，免疫人和动物后已在细菌、酵母和真核细胞系统表达成功，免疫人和动物后可诱生特异性中和抗体和激发特异性可诱生特异性中和抗体和激发特异性T细胞免疫反应，在黑猩猩实细胞免疫反应，在黑猩猩实验中已证明有保护作用。验中已证明有保护作用。2.合成寡肽疫苗合成寡肽疫苗 根据根据gp120分子中的主要中和决定簇（分子中的主要中和决定簇（V3区）、与区）、与CD4受体结合区（受体结合区（C4区）和部分区）和部分T细胞决定簇（细胞决定簇（C1、C4区）的氨基酸顺序，合成各种区）的氨基酸顺序，合成各种HIV的寡肽疫苗。在实验中已证明的寡肽疫苗。在实验中已证明V3肽可以
27、刺激动物和人产生抗肽可以刺激动物和人产生抗HIV的中和抗体和细胞毒的中和抗体和细胞毒T细胞反应。细胞反应。3.重组病毒载体活疫苗重组病毒载体活疫苗 用痘苗病毒、腺病毒和脊髓灰质炎用痘苗病毒、腺病毒和脊髓灰质炎病毒疫苗株作载体，将病毒疫苗株作载体，将HIV基因插入构建成重组病毒载体疫苗。动基因插入构建成重组病毒载体疫苗。动物试验已证明能产生特异性细胞免疫和中和抗体。用表达物试验已证明能产生特异性细胞免疫和中和抗体。用表达HIVgp160、gp120蛋白的重组疫苗病毒接种志愿者后，可以产生蛋白的重组疫苗病毒接种志愿者后，可以产生较强的较强的T细胞免疫反应，但体液免疫相对较弱。细胞免疫反应，但体液免
28、疫相对较弱。防治原则防治原则2)免疫病理所引起的细胞损伤：如欧美主要是adr型，为A基因型；HBcAg：DNA复制标志，血清中（-），肝细胞核内 （+）；机体对HIV感染的免疫应答病毒包膜糖蛋白插入细胞膜或病毒的出芽释放，增加了细胞膜的通透性；病毒包膜糖蛋白插入细胞膜或病毒的出芽释放，增加了细胞膜的通透性；传染源 a）HIV无症状携带者 b）艾滋病患者近年来，临床上也常采用PCR技术对乙型肝炎进行辅助诊断。近年来应用基因克隆技术，可使HBV基因转移给小鼠或转染细胞株。1细胞介导的免疫病理损伤种族有关。传染源 a）HIV无症状携带者 b）艾滋病患者抗HBc：无中和作用，包括直至1968年确定这种
29、抗原与血清型肝炎密切相关，称为肝炎相关抗原（hepatitis associated antigen，HAA）；1963年Blumberg首先在澳大利亚土著人血清中发现一种新抗原，称为澳大利亚抗原（Australia antigen）；冻干血制品需68 72h方能保证污染病毒的灭活；并发卡波济肉瘤(Kaposi sarcoma)。加强国境检疫、留检等。大球形颗粒，即Dane颗粒，直径42nm。故表明机体的免疫力不足以清除病毒，HIV一经感染便终生携带病毒。尿液、鼻液、汗液和粪-口传播的可能性很小。AIDSAIDS的治疗的治疗阻止阻止HIVHIV吸附穿入的重组可溶性吸附穿入的重组可溶性CD4CD
30、4分子分子(rsCD4)(rsCD4)的使用；的使用；给予抑制病毒逆转录酶活性的核苷类似物如叠氮胸苷给予抑制病毒逆转录酶活性的核苷类似物如叠氮胸苷(azidothymidine,AZT),(azidothymidine,AZT),双脱氧肌苷双脱氧肌苷(2(2，,3,3，-dideoxyinosine,DDI)-dideoxyinosine,DDI)与与2 2，,3,3，-双脱氧肌苷双脱氧肌苷(2(2，,3,3，-dideoxyinosine,DDC)-dideoxyinosine,DDC)等；等；非核苷类逆转录酶抑制剂，如德拉维拉丁非核苷类逆转录酶抑制剂，如德拉维拉丁(Delaviradine
31、)(Delaviradine)和耐维和耐维拉平拉平(Nevirapine)(Nevirapine)等，国内多用施多宁；等，国内多用施多宁；近年来研制的蛋白酶抑制剂，如佳息患、赛科纳瓦近年来研制的蛋白酶抑制剂，如佳息患、赛科纳瓦(sapuinavir)(sapuinavir)、瑞托纳瓦瑞托纳瓦(ritonavir)(ritonavir)以及英迪纳瓦以及英迪纳瓦(indinavir)(indinavir)等；等；免疫调节剂，如免疫调节剂，如IFN-IFN-，IL-2IL-2和胸腺素等。和胸腺素等。“鸡尾酒疗法鸡尾酒疗法”：联合交替使用：联合交替使用2 2种种HIVHIV逆转录酶抑制剂和逆转录酶抑制
32、剂和1 1种种HIVHIV蛋白酶抑制剂，可有效地把血液中的蛋白酶抑制剂，可有效地把血液中的HIVHIV含量减少到最低含量减少到最低(外周血中外周血中测不出测不出HIVHIV或其或其RNA)RNA)，因而能减轻症状及延缓生命。但无法清除整，因而能减轻症状及延缓生命。但无法清除整合在合在CD4CD4+细胞染色体上的前病毒，因此仍不能从体内彻底清除细胞染色体上的前病毒，因此仍不能从体内彻底清除HIVHIV。防治原则防治原则第第2 2节节 乙型肝炎病毒乙型肝炎病毒 乙型肝炎病毒（乙型肝炎病毒（hepatitis B virus，HBV）属嗜肝）属嗜肝DNA病毒科（病毒科（hepadnaviridae）
33、。）。HBV的发现源于表面抗原的研究。的发现源于表面抗原的研究。1963年年Blumberg首先在澳首先在澳大利亚土著人血清中发现一种新抗原，称为澳大利亚抗原大利亚土著人血清中发现一种新抗原，称为澳大利亚抗原（Australia antigen）；直至）；直至1968年确定这种抗原与血清型肝炎密年确定这种抗原与血清型肝炎密切相关，称为肝炎相关抗原（切相关，称为肝炎相关抗原（hepatitis associated antigen，HAA）；）；1970年年D.S.Dane在肝炎患者血清中发现具有传染性的颗粒，即在肝炎患者血清中发现具有传染性的颗粒，即Dane颗粒（颗粒（Danes partic
34、le）。从而）。从而HBV被确认。被确认。HBVHBV是乙型肝炎病原体，主要经输血、注射、性行为是乙型肝炎病原体，主要经输血、注射、性行为和母婴传播。起病徐缓，部分患者可转为慢性，少数还可和母婴传播。起病徐缓，部分患者可转为慢性，少数还可导致肝硬化和肝癌。导致肝硬化和肝癌。形态与结构形态与结构 完整的完整的HBV颗粒亦称颗粒亦称Dane颗粒，直径为颗粒，直径为42nm，具，具有双层核壳结构：有双层核壳结构：核心颗粒：直径为核心颗粒：直径为28nm。颗粒内部：颗粒内部：DNA和和DNA多聚酶。多聚酶。颗粒表面（内衣壳）：含有颗粒表面（内衣壳）：含有HBcAg 和和HBeAg。外壳（包膜）：厚外壳
35、（包膜）：厚7nm。脂质双层：含有脂质双层：含有HBsAg、PHSAr 和和PreSAg 蛋白质蛋白质生物学性状小球形颗粒，小球形颗粒，直径直径22nm；管形颗粒，直管形颗粒，直径径22nm，长度在，长度在50700nm之间；之间；大球形颗粒，大球形颗粒，即即Dane颗粒，直径颗粒，直径42nm。生物学性状形态与结构形态与结构HBVHBV基因结构及复制基因结构及复制HBV基因结构基因结构 HBV DNA是由长链是由长链L(负链负链)和短链和短链S(正链正链)组组成的不完全双链环状成的不完全双链环状DNA(cccDNA)，短链的长度，短链的长度相当于长链的相当于长链的50%85%。HBV DNA
36、长链载有病毒蛋白质的全部密码，有长链载有病毒蛋白质的全部密码，有4个开放读码框架个开放读码框架(ORF)，分别称为，分别称为S、C、P和和X区区。生物学性状HBV基因结构基因结构S区基因：包括区基因：包括S基因、基因、PreS1与与PreS2基因，分别编基因，分别编 码码HBsAg、PreS1和和PreS2 Ag。C区基因：编码区基因：编码HBcAg，还有一个，还有一个PreC区可能在病毒核区可能在病毒核 心和外壳的附着及结合中起作用。心和外壳的附着及结合中起作用。P区基因：最长，编码区基因：最长，编码HBV DNA多聚酶、逆转录酶以及多聚酶、逆转录酶以及 RNaseH。X区基因：编码区基因：
37、编码X 蛋白，可反式激活一些细胞的癌基因蛋白，可反式激活一些细胞的癌基因 及病毒的基因等，可能与肝癌的发生有关。及病毒的基因等，可能与肝癌的发生有关。生物学性状HBV的复制的复制生物学性状抗原组成抗原组成 生物学性状外壳：外壳：HBsAg：是机体受是机体受HBV感染的主要标志之一。感染的主要标志之一。具有抗原性，能刺激机体产生保护性抗体，即抗具有抗原性，能刺激机体产生保护性抗体，即抗HBs。根据根据HBsAg抗原性差异，抗原性差异，HBV可分为可分为adr、adw、ayr、ayw 等等4种血清型。血清型分布有明显的地区差异，并与种血清型。血清型分布有明显的地区差异，并与 种族有关。如欧美主要是
38、种族有关。如欧美主要是adr型，为型，为A基因型；我国以基因型；我国以 adr、ayw为多见。为多见。PreS1和和PreS2：存在吸附肝细胞受体的表位；存在吸附肝细胞受体的表位；其抗原性比其抗原性比HBsAg 更强，抗更强，抗PreS1和抗和抗PreS2通过阻通过阻 断断HBV与肝细胞的结合而起抗病毒作用。与肝细胞的结合而起抗病毒作用。生物学性状衣壳衣壳HBcAg：HBcAg主要定位于感染细胞核内，不易从患者血清中检出。主要定位于感染细胞核内，不易从患者血清中检出。但但HBcAg也可在肝细胞膜表面表达，宿主也可在肝细胞膜表面表达，宿主CTL作用的主要作用的主要 靶抗原。靶抗原。HBcAg抗原
39、很强，能刺激机体产生抗抗原很强，能刺激机体产生抗HBc，但无中和作用。，但无中和作用。检出高效价抗检出高效价抗HBc，特别是抗，特别是抗HBc IgM则表示则表示HBV在肝内在肝内 处于复制状态。处于复制状态。HBeAg：HBeAg可作为可作为HBV复制及血清具有传染性的标志。复制及血清具有传染性的标志。急性乙型肝炎进入恢复期时急性乙型肝炎进入恢复期时HBeAg消失，抗消失，抗HBe阳性；但阳性；但 抗抗HBe亦见于携带者及慢性乙型肝炎血清中。亦见于携带者及慢性乙型肝炎血清中。抗原组成抗原组成易感动物和细胞培养易感动物和细胞培养只有黑猩猩对只有黑猩猩对HBV易感，接种后可发生与人类相易感，接种
40、后可发生与人类相似的急慢性感染。似的急慢性感染。体外细胞培养尚未成功。近年来应用基因克隆技术，体外细胞培养尚未成功。近年来应用基因克隆技术，可使可使HBV基因转移给小鼠或转染细胞株。将病毒基因转移给小鼠或转染细胞株。将病毒DNA导入肝癌细胞后，病毒可复制并在细胞中表达导入肝癌细胞后，病毒可复制并在细胞中表达HBsAg、HBcAg和和HBeAg。有此细胞株可持续地产生。有此细胞株可持续地产生Dane颗颗粒。这些细胞培养可用于抗粒。这些细胞培养可用于抗HBV药物的筛选、疫苗制药物的筛选、疫苗制备及备及HBV致病机制研究等。致病机制研究等。生物学性状抵抗力抵抗力 HBV 对理化因素的抵抗力相当强：对
41、理化因素的抵抗力相当强：对低温、干燥、紫外线、醚、氯仿、酚等均有抵对低温、干燥、紫外线、醚、氯仿、酚等均有抵抗性。抗性。高压灭菌高压灭菌(12115min)、0.5%过氧乙酸、过氧乙酸、5%次次氯酸钠、氯酸钠、3%漂白粉液、漂白粉液、0.2%新洁尔灭等均可使新洁尔灭等均可使HBV失活。失活。但应指出，但应指出，HBV的感染性与的感染性与HBsAg的抗原活性的抗原活性并非一致。如并非一致。如10010min或或pH2.4处理处理6h均可使均可使HBV失去感染性，但仍保持失去感染性，但仍保持HBsAg的抗原活性。的抗原活性。生物学性状传染源和传播途径传染源和传播途径 传染源传染源 急性、慢性乙肝患
42、者及急性、慢性乙肝患者及HBsAg无症状携带者均为无症状携带者均为传染源，特别是无症状的传染源，特别是无症状的HBsAg携带者做为传染源携带者做为传染源危害性更大。危害性更大。致病性和免疫性致病性和免疫性 乙型肝炎主要是经血液或注射途径传播即非胃肠道的感染乙型肝炎主要是经血液或注射途径传播即非胃肠道的感染(parenteral infection)：1.血液、血制品传播：有少数血液、血制品传播：有少数HBsAg阴性、而阴性、而HBV DNA阳阳 性的性的血液仍可引起感染。血液仍可引起感染。2.医源性传播：通过注射、手术、采血、拔牙、内窥镜检查、预医源性传播：通过注射、手术、采血、拔牙、内窥镜检
43、查、预防接种、针刺、纹身、各种医疗器具、甚至工作人员的手，均可防接种、针刺、纹身、各种医疗器具、甚至工作人员的手，均可传播乙型肝炎。传播乙型肝炎。3.母婴传播主要是在围产期，分娩时新生儿经产道接触或吸吞入母婴传播主要是在围产期，分娩时新生儿经产道接触或吸吞入含含HBV的母血、羊水、或分泌物所致，少数可由于宫内感染的母血、羊水、或分泌物所致，少数可由于宫内感染(10%)，也可通过母乳、体液或密切接触而传播。，也可通过母乳、体液或密切接触而传播。4.接触传播：日常生活中如共用牙刷、洗澡刷子、剃须刀等可引接触传播：日常生活中如共用牙刷、洗澡刷子、剃须刀等可引起起HBV感染。通过唾液传播的可能性也应受
44、到重视。性交，尤其感染。通过唾液传播的可能性也应受到重视。性交，尤其男性同性恋亦可传播男性同性恋亦可传播HBV。因此，在西方国家将乙肝列为性传播。因此，在西方国家将乙肝列为性传播疾病疾病(STD)之一。尿液、鼻液、汗液和粪之一。尿液、鼻液、汗液和粪-口传播的可能性很小。口传播的可能性很小。致病性和免疫性致病性和免疫性传播途径传播途径致病机制致病机制 乙型肝炎的临床表现呈多样性，可表现为无症状乙型肝炎的临床表现呈多样性，可表现为无症状病毒携带者、急性肝炎、慢性肝炎及重症肝炎等。病毒携带者、急性肝炎、慢性肝炎及重症肝炎等。HBVHBV的致病机制，除了的致病机制，除了HBVHBV对肝细胞直接损害外，
45、对肝细胞直接损害外，主要是通过宿主的免疫应答引起肝细胞的病理改变的主要是通过宿主的免疫应答引起肝细胞的病理改变的临床表现。临床表现。致病性和免疫性致病性和免疫性1 1细胞介导的免疫病理损伤细胞介导的免疫病理损伤 2 2体液免疫所致的免疫损伤体液免疫所致的免疫损伤 3 3自身免疫所致的损伤自身免疫所致的损伤 致病性和免疫性致病性和免疫性免疫性免疫性 体液免疫：体液免疫：抗抗HBs：中和体液中：中和体液中HBV，使其失去感染性。，使其失去感染性。抗抗PreS2：封闭病毒与肝细胞表面的：封闭病毒与肝细胞表面的PHSA受体，阻止受体，阻止 病毒吸附于肝细胞。病毒吸附于肝细胞。抗抗Hbe：可通过与肝细胞
46、表面：可通过与肝细胞表面HBeAg结合后，通过补结合后，通过补体体 介导而参与破坏病毒感染的肝细胞。介导而参与破坏病毒感染的肝细胞。细胞免疫细胞免疫：主要依靠：主要依靠CTL。CTL对对HBV感染的肝细胞感染的肝细胞(靶细靶细 胞胞)有直接杀伤作用。据认为，针对有直接杀伤作用。据认为，针对HBcAg的的CTL在在清清 除除HBV感染的靶细胞中有较重要的作用。感染的靶细胞中有较重要的作用。致病性和免疫性致病性和免疫性NT抗体抗体HBV与原发性肝癌与原发性肝癌 HBV感染与原发性肝癌的发生有密切关系，其依据是：感染与原发性肝癌的发生有密切关系，其依据是：经流行病学调查表明，乙型肝炎患者及经流行病学
47、调查表明，乙型肝炎患者及HBsAg携带携带者的原发性肝癌发生率明显高于未感染人群（危险性高者的原发性肝癌发生率明显高于未感染人群（危险性高217倍）；倍）；用与用与HBV分子生物学相似的土拨鼠肝炎病毒分子生物学相似的土拨鼠肝炎病毒(WHV)可诱发土拨鼠原发性肝癌。而未感染鼠则无一只发生肝癌；可诱发土拨鼠原发性肝癌。而未感染鼠则无一只发生肝癌；用用HBVDNA探针与肝癌组织进行探针与肝癌组织进行Southern 印迹核印迹核酸杂交时，获得阳性结果，说明肝癌细胞染色体上整合有酸杂交时，获得阳性结果，说明肝癌细胞染色体上整合有HBVDNA。致病性和免疫性致病性和免疫性 最常用的是采用血清学方法检测患
48、者血清中最常用的是采用血清学方法检测患者血清中HBVHBV抗原、抗体，并根据这些标志进行分析判断。抗原、抗体，并根据这些标志进行分析判断。近年来，临床上也常采用近年来，临床上也常采用PCRPCR技术对乙型肝炎进技术对乙型肝炎进行辅助诊断。行辅助诊断。微生物学检查法微生物学检查法检测检测HBV抗原、抗体抗原、抗体 常用的方法有常用的方法有RIA、ELISA法，间接血凝、反向间接血凝，法，间接血凝、反向间接血凝，对流免疫电泳、双向琼脂扩散法等，其中最敏感的方法是对流免疫电泳、双向琼脂扩散法等，其中最敏感的方法是RIA、ELISA。检测的项目主要是检测的项目主要是HBsAg和抗和抗HBs、HBeAg
49、和抗和抗HBe、以及抗以及抗HBcIgM和抗和抗HBcIgG，必要时也可检测，必要时也可检测PHSA、PreS1和和PreS2的抗原和抗体。上述各项检查组成一套乙型肝炎病毒的抗原和抗体。上述各项检查组成一套乙型肝炎病毒抗原抗体检测系统抗原抗体检测系统(HBV血清标志血清标志)。微生物学检查法微生物学检查法tat、rev和nef的产物对HIV表达的正、负调节以及对维持外壳（包膜）：厚7nm。血液、血制品传播：有少数HBsAg阴性、而HBV DNA阳 性的血液仍可引起感染。这些细胞培养可用于抗HBV药物的筛选、疫苗制备及HBV致病机制研究等。近年来，临床上也常采用PCR技术对乙型肝炎进行辅助诊断。
50、核衣壳 核酸：两条ssRNA与核衣壳蛋白(P7)结合形成双体结构其抗原性比HBsAg 更强，抗PreS1和抗PreS2通过阻培养24周，细胞病变出现后，可用间接免疫荧光法检测培养细胞中的病毒抗原，或用生化方法检测培养液中的逆转录酶活性。5%过氧乙酸、5%次氯酸钠、3%漂白粉液、0.病毒吸附于肝细胞。断HBV与肝细胞的结合而起抗病毒作用。HBcAg抗原很强，能刺激机体产生抗HBc，但无中和作用。吸毒者4）HIV感染所致神经细胞损害：约有4090的AIDS患者出现不同程度的神经异常，包括HIV脑病、脊髓病变、周围神经炎和严重的AIDS痴呆综合征。检测病毒抗原：常用ELISA法检测衣壳蛋白。乙型肝炎
