1、激素在奶牛繁殖中应用新进展激素在奶牛繁殖中应用新进展 报告提纲报告提纲l 激素应用的误区与注意事项激素应用的误区与注意事项l 吻肽及其在奶牛繁殖上的应用吻肽及其在奶牛繁殖上的应用一、激素应用的误区与注意事项一、激素应用的误区与注意事项l 误区误区不准用（饲料和繁殖的区别）不准用（饲料和繁殖的区别）不敢用（繁殖紊乱）不敢用（繁殖紊乱）不会用（滥用）不会用（滥用）l 注意事项注意事项生理时期生理时期剂量剂量配伍配伍原因原因激素作用的信号传导激素作用的信号传导l 由一种形式转换成另一种形式由一种形式转换成另一种形式Electric signalChemicall 配体或刺激原配体或刺激原胞外信息胞外
2、信息化学信号化学信号(激素激素)电信号电信号 l 受体受体细胞接收器细胞接收器l 第二信使第二信使信号胞内接收、放大、传导信号胞内接收、放大、传导l 分泌分泌产生新分子产生新分子激素作用的细胞信号传导激素作用的细胞信号传导配体类型配体类型l 化学结构化学结构Steriods类固醇激素类固醇激素Cholesterol C27Glucocorticoids C21Mineralocorticoids C21Androgens C19Estrogens C18(Figure 9-39)各种激素血液中半寿期各种激素血液中半寿期%in Blood After InjectioneCG 8%CarbGnR
3、HOxytocinTime required to remove or clear half of the dose from the blood30%Carb45%CarbEndocrine TissueTissue 1Tissue 2Tissue 3+-+Long LoopShort LoopOpen Loop(Figure 9-12)反馈调节反馈调节二、吻肽及其在奶牛繁殖上的应用二、吻肽及其在奶牛繁殖上的应用（一）概述（一）概述l Kisspeptin，肽类激素，多种类，肽类激素，多种类l Lee et al,1996最先发现最先发现l KiSS-1（恶性黑素细胞瘤转移抑制）基因表达产物
4、（恶性黑素细胞瘤转移抑制）基因表达产物l 表达部位：弓状核（表达部位：弓状核（Arc）、前腹侧室周核）、前腹侧室周核（AVPV）l 吻肽神经元精确定位尚不清楚，只知在视前区和正吻肽神经元精确定位尚不清楚，只知在视前区和正中隆起，紧邻中隆起，紧邻GnRH神经元神经元（一）概述（续）（一）概述（续）l前体物有前体物有145个氨基酸，个氨基酸，N端降解至端降解至54个个aa，进一步降解至进一步降解至14、13或或10个个aa（一）概述（续）（一）概述（续）l 各种吻肽羧基端均含各种吻肽羧基端均含ArgPheArgPheNHNH2 2结构，属于结构，属于RFRF氨氨基化合物家族基化合物家族l 脊椎动物
5、间保守性强，说明在所有脊椎动物中均具脊椎动物间保守性强，说明在所有脊椎动物中均具有重要作用有重要作用l 受体：孤儿受体：孤儿G G蛋白偶联受体（蛋白偶联受体（G protein-coupled G protein-coupled receptorreceptor，GPCR)GPCR)，即，即gpr-54gpr-54（大鼠）或（大鼠）或AXOR12AXOR12（人）（人）l gpr-54gpr-54和和KiSS-1 KiSS-1 基因在下丘脑、脑干、脊索、垂体、基因在下丘脑、脑干、脊索、垂体、卵巢、前列腺和胎血中均有分布卵巢、前列腺和胎血中均有分布（二）生物学作用与作用机制（二）生物学作用与作用
6、机制l 促进促进GnRH分泌分泌de Roux et al.（2003）;Seminara et al.（2003）：）：Kiss-1基因突变，先天性性腺机能减退症（人）基因突变，先天性性腺机能减退症（人）Teles et al.（2008）：）：R386P突变引起女孩性早熟突变引起女孩性早熟（8岁）岁）gpr-54基因敲除鼠，睾丸、卵巢、子宫较小，初情基因敲除鼠，睾丸、卵巢、子宫较小，初情期延迟，性行为异常，卵巢上无卵泡发育，不育期延迟，性行为异常，卵巢上无卵泡发育，不育或不孕，促性腺激素水平较低或不孕，促性腺激素水平较低Kiss-1基因敲除鼠，症状更严重基因敲除鼠，症状更严重(Lapatt
7、o et al.,2007)（二）生物学作用与作用机制（二）生物学作用与作用机制l 下丘脑中下丘脑中KiSS-1 mRNA和和gpr-54的敏感性随性发育而提高的敏感性随性发育而提高l 促进促进LH 和和FSH的分泌的分泌急性提供外源急性提供外源Kp-54和和 Kp-10，外周血中，外周血中LH水平迅速升高水平迅速升高（小鼠，（小鼠，Gottsch et al.,2004)、大鼠、大鼠(Navarro et al.,2004a)、绵辜绵辜(Arreguin-Arevalo et al.,2006)、牛、牛(Kadokawa et al.,2008)、灵长类、灵长类(Plant et al.,2
8、006)和人和人(Dhillo et al.,2005,2007)，并有剂量依赖关系，并有剂量依赖关系剂量低到剂量低到1 fmol 仍然有效仍然有效(Navarro et al.,2005）中枢和外周给药均有效中枢和外周给药均有效(Thompson et al.,2004;Navarro et al.,2005b).（二）生物学作用与作用机制（二）生物学作用与作用机制l 持续给药（静脉注射，连续持续给药（静脉注射，连续4天），开始时刺激天），开始时刺激LH分泌，分泌，34小时后刺激作用减弱，小时后刺激作用减弱，24小时时，与对照小时时，与对照没有差异没有差异l 原因：受体脱敏（原因：受体脱敏（
9、Ramaswamy et al.,2007;dAnglemont de Tassigny et al.,2008）吻肽调节类固醇激素的负反馈作用吻肽调节类固醇激素的负反馈作用l 吻肽神经元表达吻肽神经元表达ERaERa,PR,PR和和AR AR l 调节调节KiSS-1KiSS-1基因表达，参与类固醇激素负反馈调节基因表达，参与类固醇激素负反馈调节 l 雌激素对雌激素对GnRHGnRH神经元的负反馈调节降低弓状体吻肽神经元的负反馈调节降低弓状体吻肽活性活性l 雌、雄动物去势后，雌、雄动物去势后，KiSS-1 mRNA KiSS-1 mRNA 水平升高水平升高吻肽参与的下丘脑垂体性腺轴吻肽参与的
10、下丘脑垂体性腺轴l 雌激素抑制弓状核雌激素抑制弓状核Kiss1Kiss1基因表达，负基因表达，负反馈作用反馈作用GnRHGnRH/LH/LHl 排卵前排卵前E E2 2 水平升高，水平升高，刺激刺激 Kiss1Kiss1基因表达、基因表达、激活孕酮受体，引进激活孕酮受体，引进排卵前排卵前LHLH峰峰l E E2 2提高提高GnRHGnRH神经元对神经元对吻肽的敏感性吻肽的敏感性 (Roa(Roa et al.,2008et al.,2008Gpr-54受体灭活和激活突变对生受体灭活和激活突变对生殖的影响殖的影响GPR54基因突变人临床症状基因突变人临床症状Kiss1Kiss1基因是季节性繁殖动
11、物基因是季节性繁殖动物MLTMLT激素的调节中枢激素的调节中枢 LD=长日照长日照SD=短日照短日照Simonneaux V等，Peptides 30(2009)146-153褪黑激素对褪黑激素对Kiss-1基因表达的调节基因表达的调节(A)成年仓鼠，长光照条件下，成年仓鼠，长光照条件下，每天注射每天注射MLT 50 mg，连续，连续8周，弓状核周，弓状核Kiss-1基因原位基因原位杂交，未出现放射活性杂交，未出现放射活性(B)弓状核中单个神经元的弓状核中单个神经元的Kiss1 mRNA量量(C)睾丸重睾丸重(D)血中睾酮量血中睾酮量光照对吻肽分泌的影响光照对吻肽分泌的影响l 仓鼠弓状核仓鼠弓
12、状核(Arc)和前腹侧室周和前腹侧室周核（核（AVPV）中长（）中长（LD）短）短（SD）光照条件下的）光照条件下的Kiss1 基基因表达量因表达量l Top：Non-radioactive in situ hybridization of Kiss1 mRNA in the Arc of Siberian hamsters raised under long day(LD)and short day(SD)conditions(scale bar=100 mM)l Bottom：Number of Kiss1 mRNA containing cells in the AVPV and Arc of Siberian hamsters raised under LD and SD作用机制作用机制phospholipase-C(PLC)non-selective cation(NSC)channels欢迎到华农做客欢迎到华农做客
