1、实验：培养液中酵母菌种群数量的变化 实验原理：实验原理：探究问题：探究问题：提出假设：提出假设：酵母菌可以用液体培养基来培养酵母菌可以用液体培养基来培养,培养液成分、空间、培养液成分、空间、pHpH、温度、温度等因素等因素会影响酵母菌种群的增长会影响酵母菌种群的增长培养液中酵母菌种群的数量是怎样随时间变化的？培养液中酵母菌种群的数量是怎样随时间变化的？在资源和空间有限的环境中，在资源和空间有限的环境中，酵母菌的种群酵母菌的种群呈呈“S”型增长型增长需要准备的材料及用具探究所需要的菌种和无菌马铃薯培养液探究所需要的菌种和无菌马铃薯培养液或肉汤培养液、试管、或肉汤培养液、试管、血细胞计数板血细胞计
2、数板、滴管、滴管、显微镜显微镜等，都是由老师提供等，都是由老师提供目的要求目的要求1、学习使用血细胞计数板进行微生物计数、学习使用血细胞计数板进行微生物计数2、实验探究培养液中酵母菌种群数量的变化、实验探究培养液中酵母菌种群数量的变化3、体会影响种群数量变化的因素、体会影响种群数量变化的因素血细胞计数板血细胞计数板的结构 血细胞计数板是一种专门用于计算较血细胞计数板是一种专门用于计算较大单细胞微生物数量的仪器，由一块比大单细胞微生物数量的仪器，由一块比普通载玻片厚的特制玻片制成的玻片中普通载玻片厚的特制玻片制成的玻片中有四条下凹的槽，构成三个平台。中间有四条下凹的槽，构成三个平台。中间的平台较
3、宽，其中间又被一短横槽隔为的平台较宽，其中间又被一短横槽隔为两半，每半边上面刻有一个两半，每半边上面刻有一个方格网方格网。大方格中方格小方格 方格网上刻有方格网上刻有9个个大方格，其中只有大方格，其中只有中间的一个大方格中间的一个大方格为为计数室计数室，供微生，供微生物计数用物计数用。大方格的长和宽各为大方格的长和宽各为1mm，深度，深度为为0.1mm，即，即1mm1mm0.1mm，其容积为其容积为0.1mm3；大方格的长和宽各为大方格的长和宽各为2mm，深度为，深度为0.1mm，即，即2mm2mm0.1mm，其，其容积为容积为0.4mm3计数室通常也有两种规格计数室通常也有两种规格1625型
4、：即大方格内分为16中格，每一中格又分为25小格2516型：即大方格内分为25中格，每一中格又分为16小格。不管计数室是哪一种构造，其每一大方格都是由1625=2516=400个小方格组成。2、计数1625型：一般取四角的一般取四角的四个中方格（四个中方格（100个小方格）计数个小方格）计数2516型：一般计数四个角一般计数四个角和中央的五个中方和中央的五个中方格（格（80个小方格）个小方格）的细胞数。的细胞数。盖玻片下的培养液厚度为盖玻片下的培养液厚度为0.1mm，请推算出将一个，请推算出将一个小方格范围内的酵母菌数，换算成小方格范围内的酵母菌数，换算成10ml培养液中酵培养液中酵母菌总数的
5、公式母菌总数的公式。（大方格的长和宽各为大方格的长和宽各为1mm，深度为，深度为0.1mm，即，即1mm1mm0.1mm，其容积为，其容积为0.1mm3；)（1ml=1cm3=1000mm3）每每1ml菌液中所含的酵母菌个数计算公式菌液中所含的酵母菌个数计算公式 （1）16格格25格的血细胞计数板计算公式格的血细胞计数板计算公式 酵母细胞数酵母细胞数/ml=一小方格内酵母菌个数一小方格内酵母菌个数 4 106（稀释倍数）稀释倍数）（2）25格格x16格的血细胞计数板计算公式格的血细胞计数板计算公式 酵母细胞数酵母细胞数/ml=一小方格内酵母菌个数一小方格内酵母菌个数 4 106（稀释倍数）稀释
6、倍数）大方格的长和宽各为大方格的长和宽各为2mm，深度为，深度为0.1mm，其容积为，其容积为0.4mm3。则：每则：每1ml菌液中所含的酵母菌个数计算公菌液中所含的酵母菌个数计算公式（式（2mm 2mm）：（1）16格格25格的血细胞计数板计算公式格的血细胞计数板计算公式 酵母细胞数酵母细胞数/ml=一小方格内酵母菌个数一小方格内酵母菌个数106（稀释倍数）稀释倍数）（2）25格格x16格的血细胞计数板计算公式格的血细胞计数板计算公式:酵母细胞数酵母细胞数/ml=一小方格内酵母菌个数一小方格内酵母菌个数106（稀释倍数）稀释倍数）1.通常用血球计数板对培养液中酵母菌进行计数，若计数室为1mm
7、1mm0.1mm方格，由400个小方格组成，若多次重复计数后，算得每个小方格中平均有5个酵母菌，则10mL该培养液中酵母菌总数有 个。540010000102108 2 2、检测员将、检测员将1 mL1 mL水样稀释水样稀释1010倍后，用抽样检测的方法检倍后，用抽样检测的方法检测每毫升蓝藻的数量；将盖玻片放在计数室上，用吸管吸测每毫升蓝藻的数量；将盖玻片放在计数室上，用吸管吸取少许培养液使其自行渗入计数室，并用滤纸吸去多余液取少许培养液使其自行渗入计数室，并用滤纸吸去多余液体。已知每个计数室由体。已知每个计数室由25251616400400个小格组成，容纳液个小格组成，容纳液体的总体积为体的
8、总体积为0.1mm0.1mm3 3。现观察到图中该计数室所示现观察到图中该计数室所示a a、b b、c c、d d、e 5e 5个中格个中格8080个个小格内共有蓝藻小格内共有蓝藻n n个，则上述水样中约有蓝藻多少个个，则上述水样中约有蓝藻多少个。n/80n/80400400100001000010105n5n10105 5 怎样进行酵母菌的计数？怎样进行酵母菌的计数？提示：对一支试管中的培养液提示：对一支试管中的培养液(可定为可定为10ml)中的酵母菌逐个计数是非常困难的，可以采用中的酵母菌逐个计数是非常困难的，可以采用抽样检测抽样检测的方法：先将盖玻片放在计数室上，的方法：先将盖玻片放在计
9、数室上，用吸管吸取培养液，滴于用吸管吸取培养液，滴于盖玻片盖玻片边缘，让边缘，让培养培养液液自行渗入，多余培养液用滤纸吸去，稍待片自行渗入，多余培养液用滤纸吸去，稍待片刻，待酵母菌细胞全部刻，待酵母菌细胞全部沉降到计数室底部沉降到计数室底部，将，将计数板计数板放在载物台的中央，放在载物台的中央，计数计数一个小方格内一个小方格内的酵母菌数的酵母菌数 量，再以此为根据，量，再以此为根据，估算估算试管中试管中的酵母菌总数。的酵母菌总数。注意事项 从试管中吸出培养液进行计数之前，建议将试从试管中吸出培养液进行计数之前，建议将试管震荡几次，目的是什么？管震荡几次，目的是什么？本实验需要设置对照吗？本实验
10、需要设置对照吗？本实验需要做重复实验吗？本实验需要做重复实验吗？目的：使培养液中酵母菌分布均匀，以保证目的：使培养液中酵母菌分布均匀，以保证 估算准确，减少误差估算准确，减少误差不需要，因为本实验在时间上形成自身前后对照不需要，因为本实验在时间上形成自身前后对照需要，提高实验数据的准确性需要，提高实验数据的准确性注意事项 如果计数时，一个小方格中酵母菌过多，难以如果计数时，一个小方格中酵母菌过多，难以计数，应该采取什么措施？计数，应该采取什么措施？对于压在小方格界线上的酵母菌，应当怎样计对于压在小方格界线上的酵母菌，应当怎样计数？数？计相邻两边及其夹角上的酵母菌计相邻两边及其夹角上的酵母菌计数
11、方法：方格内部及相邻两边及其夹角上的酵母菌血细胞计数板的如何清洁？血细胞计数板的如何清洁？怎样记录结果？怎样表怎样设计？首先通过显微镜观察，估算出首先通过显微镜观察，估算出10ml培养液中酵母菌的初始数培养液中酵母菌的初始数量（量（N0）,在此之后，每天同一时间，取出各组试管，用血细胞在此之后，每天同一时间，取出各组试管，用血细胞计数板计数酵母菌个数，并作记录，连续观察计数板计数酵母菌个数，并作记录，连续观察7天。天。（4）计数）计数计数：首先取样，每计数：首先取样，每 天取样时间大体一致，并要遵守无天取样时间大体一致，并要遵守无菌操作规范。菌操作规范。每次取样前要试管振荡摇匀每次取样前要试管
12、振荡摇匀，正确地使用，正确地使用1mL刻度吸管将刻度吸管将lmL酵母菌培养液移入酵母菌培养液移入1支干净的试管里，支干净的试管里，然后然后用滴管吸取用滴管吸取1滴培养液滴在已盖在血球计数板网格上滴培养液滴在已盖在血球计数板网格上的盖玻片的边缘，待培养液自行渗入并充满网格后的盖玻片的边缘，待培养液自行渗入并充满网格后，再放，再放在显微镜下进行细胞计数，后立即将数据填到记录表格中在显微镜下进行细胞计数，后立即将数据填到记录表格中。如。如 记数时发现，细胞数较多，不易分辨，吸取的样液应记数时发现，细胞数较多，不易分辨，吸取的样液应当稀释。当稀释。参考参考1：一次实验数据记录表：一次实验数据记录表 参
13、考参考2：出：出A、B、C各个处理的曲线图各个处理的曲线图 酵母菌的种群数量在资酵母菌的种群数量在资源和空间有限的情况下是呈源和空间有限的情况下是呈S型增长。但型增长。但之后会下降。之后会下降。1、探究酵母菌的种群数量实验中，某学生的部分操作、探究酵母菌的种群数量实验中，某学生的部分操作过程如下：过程如下：（1）把）把酵母菌培养液放置于冰箱中培养，酵母菌培养液放置于冰箱中培养，（2）从静置试管中吸取酵母菌培养液计数，（）从静置试管中吸取酵母菌培养液计数，（3）到）到第七天取样计数，请纠正其错误第七天取样计数，请纠正其错误：（1）_（2）_（3）_.该同学用该同学用25格格x16格格,其中其中长和宽各为长和宽各为2mm,深度为深度为0.1mm的血球计数板计数的血球计数板计数,取五取五个中格读取酵母菌有个中格读取酵母菌有40个个,其中稀释了其中稀释了10倍倍,则则1ml菌液菌液中所含的酵母菌个数为中所含的酵母菌个数为_将静置改为轻轻振荡几次将静置改为轻轻振荡几次.放在适宜温度下培养放在适宜温度下培养.连续七天取样计数连续七天取样计数.5 106
