1、1实验室生物性危害实验室生物性危害 生物简介 传播途径与健康危害 生物安全等级 实验室操作技术 安全设备 实验室设计 动物实验2生物植物:不具运动性行光合作用微生物:运动性?光合作用?动物:具运动性无光合作用3微生物 病毒(VIRUS)细菌(BACTERIA)真菌(FUNGI)藻类(ALGAE)原生动物(PROTOZOA)4病毒(Virus)20-300 nm (1 nm=10-9 m)滤过性 无完整细胞结构 核酸+蛋白质外壳 绝对寄生5细菌(Bacteria)细胞结构 0.5-1um x 2-5 um (1 um=10-6 m)独立自主6细菌型态 球菌(coccus)7细菌型态 杆菌与螺旋菌
2、杆菌螺旋菌8真菌(Fungi)似植物体 缺乏叶绿素 本身酵素分解有机物 包括：霉菌(mold)、酵母菌(yeast)与蕈类(mushrooms)多细胞或单细胞结构9疾病传播方式：叮咬或吸入排泄物常以哺乳类动物为宿主(如：鼠如：鼠)节肢动物10高等植物花粉热11高等动物实验动物鼠兔猫狗猴等动物咬伤皮屑人畜共同传染病节肢动物12生物性危害(Biohazards)植物、动物、微生物或是其产物植物、动物、微生物或是其产物 可影响人类健康或是造成不舒适具潜在风险可影响人类健康或是造成不舒适具潜在风险 生物性危害：感染感染 过敏过敏 中毒中毒13生物性危害生物性危害 感染（感染（InfectionInfe
3、ction）：生物体在人体内繁殖生长所致：生物体在人体内繁殖生长所致(如：流行性如：流行性感冒、痲疹、肺结核感冒、痲疹、肺结核)过敏（过敏（AllergyAllergy）：生物体以过敏原角色经重复暴露致使人体免生物体以过敏原角色经重复暴露致使人体免疫系统过度反应所致疫系统过度反应所致(如：过敏性肺炎、气喘、过敏性鼻炎如：过敏性肺炎、气喘、过敏性鼻炎)中毒（中毒（ToxicityToxicity）：暴露于生物体所产生之毒素（细菌内毒素、暴露于生物体所产生之毒素（细菌内毒素、细菌外毒素、真菌毒素）所致细菌外毒素、真菌毒素）所致(如：发烧、发冷、肺功能受损如：发烧、发冷、肺功能受损)14传播方式传播
4、方式血液体液-伤口空气-离心、气悬、搅拌、实验动物喷嚏动物咬伤与接触实验室中：15入门须知入门须知 接触的生物、产物、附着物接触的生物、产物、附着物 潜在潜在危害危害 暴露的可能途径暴露的可能途径 正确操作方式正确操作方式 预防预防措施措施16实验室危害研究 1974丹麦Shinhoj：实验室人员肝炎发生率为一般人倍 1974英国Harrington&Shainnon：肺结核为一般人倍 二次传染：传染至其他亲人或朋友等 1973&1978英国-人感染天花17生物安全等级生物安全等级 考虑因素：人体健康危害、传播能力、控制措施、治疗方法考虑因素：人体健康危害、传播能力、控制措施、治疗方法 其他：
5、环境与社会冲击、政治考虑其他：环境与社会冲击、政治考虑 现有分类：美国现有分类：美国 、欧盟、世界卫生组织、其他国家、欧盟、世界卫生组织、其他国家(如：加拿大如：加拿大与澳洲与澳洲)等级低等级低 危害低危害低18美国生物安全等级美国生物安全等级 Biosafety in microbiological and biomedical laboratories,Biosafety in microbiological and biomedical laboratories,(CDC)93-8395(CDC)93-8395 第一级：一般操作下无第一级：一般操作下无 (最低最低)危害者危害者 第二级：
6、实验室中意外感染时具有中等程度健康危害者，如：第二级：实验室中意外感染时具有中等程度健康危害者，如：influenza influenza virusvirus19美国生物安全等级美国生物安全等级(续续)第三级：临床诊断教学研究生产等单位使用本土或外来物质时，第三级：临床诊断教学研究生产等单位使用本土或外来物质时，可造成严重或致命疾病者，如：可造成严重或致命疾病者，如：HantaanHantaan virusvirus 第四级：具有极度危险并可造成大流行者，如：第四级：具有极度危险并可造成大流行者，如：Ebola Ebola virusvirus20生物危害管理生物危害管理 防范措施：降低或避
7、免实验室工作人员、其他人员防范措施：降低或避免实验室工作人员、其他人员与外面环境之暴露与外面环境之暴露 初级防范措施：初级防范措施：避免工作人员及实验环境的暴露避免工作人员及实验环境的暴露 二级防范措施：二级防范措施：保护实验室外的环境保护实验室外的环境 (含小区环境含小区环境)21生物危害管理方法生物危害管理方法 实验室操作程序实验室操作程序 安全设备：操作柜、密安全设备：操作柜、密闭式容器、个人防护具闭式容器、个人防护具 实验室设计实验室设计90%操作10%硬件设计与设备实验室安全22实验室操作程序实验室操作程序 标准微生物操作程序：所有生物等级标准微生物操作程序：所有生物等级 其他操作管
8、理要求：其他操作管理要求：第二级至第四级第二级至第四级 高等级涵盖低等级高等级涵盖低等级 人员训练人员训练23标准微生物操作程序标准微生物操作程序实验进行中的门禁管制实验进行中的门禁管制 避免污染实验产品避免污染实验产品 非该实验室人员的暴露非该实验室人员的暴露 避免生物物质外泄避免生物物质外泄实验进行中24标准微生物操作程序标准微生物操作程序(续续)洗手洗手 接触具感染性物质、接触具感染性物质、脱掉手套后、离开实脱掉手套后、离开实验室前验室前 使用具杀菌效果之洗使用具杀菌效果之洗手乳液手乳液25标准微生物操作程序标准微生物操作程序(续续)禁止饮食、抽烟、处禁止饮食、抽烟、处理隐形眼镜、化妆理
9、隐形眼镜、化妆 可以喝水吗？可以喝水吗？NONO 一般常识一般常识 最易违反最易违反26标准微生物操作程序标准微生物操作程序(续续)消毒工作台面消毒工作台面 每天每天至少一次至少一次 发生生物物质泄漏或喷溅后发生生物物质泄漏或喷溅后27标准微生物操作程序标准微生物操作程序(续续)禁止以口吸取液体28标准微生物操作程序标准微生物操作程序(续续)减少喷溅及气雾的产减少喷溅及气雾的产生生29标准微生物操作程序标准微生物操作程序(续续)耐用、防漏密闭、可灭菌之容器耐用、防漏密闭、可灭菌之容器30标准微生物操作程序标准微生物操作程序(续续)高温高压灭菌处理所高温高压灭菌处理所有培养物、储存物及有培养物、
10、储存物及其他具感染废弃物其他具感染废弃物15 pounds 121 C 30 min31标准微生物操作程序标准微生物操作程序(续续)以防穿刺、防泄漏、可密封的容器运送尖锐物品与检体32其他操作管理要求其他操作管理要求(第二级第二级)严格门禁：特殊训练人严格门禁：特殊训练人员进出员进出 标示：警告标志、负责标示：警告标志、负责人姓名电话、进出特殊人姓名电话、进出特殊要求要求 工作人员免疫接种与定工作人员免疫接种与定期检验期检验 特殊危险物安全手则特殊危险物安全手则 定期训练、意外通报定期训练、意外通报 无关动物无关动物管制管制 小心操作尖锐物品 不脱针、不折断针头、不折断针头、不回套、单手回套、
11、防不回套、单手回套、防穿刺泄漏的收集筒穿刺泄漏的收集筒 不徒手处理破碎玻璃不徒手处理破碎玻璃33其他操作管理要求(第三级)随时关闭实验室门 确认工作人员熟悉标准操作程序与相关设施 须在生物安全操作柜中处理感染性物质，并宜使用抗污纸垫 所有可能遭感染物品(含：实验衣)均须经消毒后才丢弃、使用或送洗 不可有与工作无关之动植物存在34其他操作管理要求(第四级)特殊门禁：上锁、多人管制、进出时间、登记、紧急应变措施 必须经由更衣室(更换所有衣物、手套、鞋)及淋浴室才得进出实验区域、紧急应变措施 物品运送：双门设备(如：高温高压消毒器)自实验室或生物安全操作柜中移出具活性第四级物质时：放入两层密闭防破裂
12、容器中再经消毒处理(如：消毒槽浸泡)35其他操作管理要求(第四级)(续)除须保持活性生物外，其他物质移出前均须高温高压灭菌或消毒 不得有不相关的动植物与衣物 完善通报系统：意外、相关疾病与医疗处理、检疫、隔离等36安全设备：生物安全操作柜 避免暴露于处理微生物过程中所产生的喷溅或气悬物质 依是否具人员保护、产品保护、以及完全隔离等分为 I、II、III级37安全设备：生物安全操作柜(续)物理性阻隔 金属或玻璃板 固定式手套 空气阻隔 空气过滤系统 紫外线灭菌灯38安全设备：生物安全操作柜(续)I 级：未过滤向内气流(75ft/min)人员保护 手套或无手套设计 操作物未受保护 离心器等之置放
13、多被 II 级取代39安全设备：生物安全操作柜(续)II 级：过滤内向气流(75ft/min)人员与操作物保护IIA/B340安全设备：生物安全操作柜(续)II 级：分为Type A、B1、B2、B3(循环气流与排出气流比例、最小表面风速)41安全设备：生物安全操作柜(续)II 级应用：生物安全等级第二级：气雾或喷溅、高浓度 生物安全等级第三级 生物安全等级第四级+连身正压工作服IIB242安全设备：生物安全操作柜(续)III级：完全气密式 内在负压 手套操作 高效率滤材双层过滤排出物 人员、外界环境与操作物的最高保护 生物安全等级第三、四级43其他安全设备 密闭式容器 如：安全离心器(防止离
14、心时气雾的外泄)个人防护设备 实验衣物、安全眼镜、呼吸防护具、手套、面具、鞋44安全设备(第一级)无须特殊防护设备 建议穿着实验衣，以免污染外出服 皮肤受伤或出疹时，须戴手套 预期喷溅时，使用安全眼镜或面罩45安全设备(第二级)II 级生物安全操作柜使用情形：可能产生气雾或喷溅的操作步骤，如：离心、研磨、搅拌、剧烈摇荡或混合、超音波震荡、开启内外压差大之感染源容器 使用高浓度或大量感染源 穿着实验衣，不可穿至其他非实验区域，工作单位清洗或丢弃 接触感染源时须戴手套，建议穿戴双层手套，且不得穿离实验室 操作柜外有喷溅可能时，须保护脸部46安全设备(第三级)必须使用手套，并穿着实验衣(同第二级要求
15、)使用 II 或 III 级生物安全操作柜 在操作柜外作业时，务必使用个人防护设备(如：特殊防护衣物、呼吸防护具、手套、面具)与物理性防护设备(如：安全离心器)47 所有活动必须在：III级生物安全操作柜 II级生物安全操作柜，并穿戴连身式具支持生命系统通风设备之正压工作服 例外，如：设施内已完全消毒 未使用第四级生物更衣室内更换实验衣物，离开更衣室前除去个人防护设备安全设备(第四级)48实验室设计 目的：保护实验室内与实验室外的工作人员 不慎外泄病源时不会导致小区民众或动物的感染 设计：将实验室与其他公用场所分开 消毒设备，如：高温高压灭菌锅 洗手设备 定向气流通风系统 净化空气处理系统 气
16、闸式入口设计 警示区出入控制 独栋实验室49实验动物 以动物替代人类为研究对象进行实验 鼠、兔、猴、猩猩等 实验动物房：动物培育、管理 实验室的延伸 传染：生成的气雾、皮肤黏膜接触、动物咬伤、动物抓伤、实验后组织或器官切片处理、尸体处理50实验动物房的设计原则 向内开启的自动门 易于清洗建材与动线规划(无死角)干净/污染缓冲区：减少交互感染 非必要不设地板排水口 排水口下U型管放置消毒剂 专用电梯51实验动物的标准操作策略 与标准微生物操作程序类似 洗手：操作动物后、脱除手套后、离开动物房前 禁止饮食、抽烟、处理隐形眼镜、化妆 小心操作以减少气雾的产生 如：清除动物笼中铺垫物时52实验动物的标
17、准操作策略(续)消毒工作台面 保持关闭大门 动物房内废弃物在丢弃前须高温高压灭菌消毒 感染性动物尸体：装入密闭防漏容器后予以焚化53实验动物的特殊操作策略 制订生物安全守则与遵行步骤 严格门禁：具备生物危害知识 符合特殊规定(如：免疫接种)遵循出入步骤 无免疫疾病 第三级以上(含)：限制小孩、孕妇进入 第四级：门锁 非相关之动植物管制54实验动物的特殊操作策略(续)穿着实验衣或制服，离开时换掉 第三级以上(含)：前扣式实验衣不适当 小心使用以及丢弃尖锐物品 不可用手直接处理破碎的玻璃器皿 运送感染性动物、废弃物等：置于耐用、防漏容器中55实验动物的特殊操作策略(续)人工或机器清洗饲养笼 机器清
18、洗：最后冲洗水温82 C 第二级以上(含)：先须高温高压灭菌消毒 第三级以上(含)：饲养笼内铺垫材料在移除或清洗前须先高温高压灭菌消毒 第三级以上(含)：半封闭式饲养(如：开放式动物笼于抽气柜中)56实验动物的特殊操作策略(续)第四级：仅能经更衣室与沐浴室进入动物房 更换所有衣物 不洗头者使用头罩 佩戴个人防护设备 离开时须沐浴并更换衣物 实验衣物须先灭菌处理再清洗57实验动物的安全设备 第二级以上(含)生物安全操作柜、物理性防护措施、个人防护设备 非人类之灵长类动物房：佩戴脸部、眼睛及呼吸道保护设备 处置感染性动物：佩戴手套58实验动物的安全设备(续)第三级：I、II级生物安全操作柜饲养感染
19、动物 依需要配置安全鞋与消毒洗脚池 第四级：III级生物安全操作柜饲养感染动物 穿着具通气维生系统之连身式正压装59动物房设施 洗手设备 第三级以上(含)：脚动、肘动或自动 高温高压灭菌设备 动物房内废气：应排至户外 不得循环至其他房间 第三级以上(含)：双门设计 窗户封死 门自动关闭 气体单向流入室内 高效率过滤滤材 可完全密封式建筑以便于熏烟消毒60动物房设施 第四级：所有物品须经双门灭菌室、烟熏室及气密装置进出 水槽、生物安全操作柜、地面排水口、灭菌器等排放液体须先以热消毒后始可排入下水道61傳染性病原生物安全等級管理摘要表生物安全等級操 作 程 序 安 全 裝 置(初級防範設備)實 驗
20、 設 施(二級防範設備)一標準微生物操作 無開放式實驗檯及洗手槽 二生物安全等級一的操作程序外加：出入限制 生物危險警告標示“尖銳物”防範 生物安全手冊含廢棄物消毒或醫學監視初級防護設備：I級或II級生物安全操作櫃或其他物理性防範措施，適用於處理會引起濺灑或氣霧之病原使用個人防護具：實驗衣，手套，面部保護裝備生物安全等級一設施外加：高溫高壓滅菌器62傳染性病原生物安全等級管理摘要表(續)生物安全等級操 作 程 序 安 全 裝 置(初級防範設備)實 驗 設 施(二級防範設備)三生物安全等級一之操作程序外加：出入控制 消毒所有廢棄物 洗衣前實驗衣先消毒處理初級防護設備：I級或II級生物安全操作櫃或
21、其他物理性防範措施處理病原使用個人防護具：保護性之實驗衣，手套，呼吸保護裝備生物安全等級二設施外加：物理隔離之迴廊 封閉式；雙門 廢氣不循環 四生物安全等級一的操作程序外加：進入前更衣 出口沐浴 在設施出口處消毒所有物質初級防護設備：所有操作均在I級或II級生物安全操作櫃內實施穿著全身充氣之正壓工作服生物安全等級二設施外加：獨立建築物或隔離區 精密供應/排氣系統63使用實驗或自然感染脊椎動物之生物安全等級管理摘要表生物安全等級操 作 程 序安 全 裝 置(初級防範設備)實 驗 設 施(二級防範設備)一標準動物照顧及管理操作動物之正常照顧標準動物設施：廢氣不循環 定向氣流 二動物生物安全等級一操
22、作程序外加：接觸限制 生物危險警告標示 小心使用尖銳物品 生物安全手冊 所有感染性廢棄物及動物籠清洗前需消毒處理動物生物安全等級一的設備外加初級防護設備：在操作櫃中操作可能產生氣霧之步驟個人防護具：實驗衣，手套，備用之面部及呼吸保護裝備動物生物安全等級一的設施外加：高溫高壓滅菌器 動物室內洗手槽64使用實驗或自然感染脊椎動物之生物安全等級管理摘要表（續）生物安全等級操 作 程 序安 全 裝 置(初級防範設備)實 驗 設 施(二級防範設備)三動物生物安全等級二操作程序外加：出入控制 實驗衣送洗前先消毒 獸籠在舖墊清除前先消毒 當有需要時進行消毒腳浴動物生物安全等級二的設備外加：動物住所及籠子廢棄之防範消毒措施 備用之I級及II級之生物安全操作櫃以操作會產生氣霧之步驟(接種、驗屍)呼吸保護裝置動物生物安全等級二的設施外加：與出入迴廊隔離 雙層自動門 接縫完全密閉 密閉式窗戶 高溫高壓滅菌器 四動物生物安全等級三操作程序外加：進入前於更衣室更換實驗衣 出口沐浴 於設施出口處進行所有廢棄物消毒動物生物安全等級三的設備外加：最多防範措施之設備(如III級生物安全操作櫃或穿著全身充氣正壓工作服的部份防範措施)，並應用於所有程序及活動動物生物安全等級三的設施外加：獨立之建築物或隔離區 精密供氣/排氣系統 真空及消毒系統
