1、广州华鑫科技广州华鑫科技 孔华檀孔华檀 浅谈血液常规分析的风险控制分析前分析前-分析中分析中-分析后分析后分析前注意问题 抗凝管的选择？雾化还是烘干沉淀？预稀释还是末梢全血？刮血还是毛细管吸血？混匀是否充分？采血后立刻上机还是放置几分钟后上机？末梢血采血方式 通过挤或刮的方式采血导致细胞聚集和破坏，散点图异常在散点图右上方有大量异常散点（非IG），引起IG假性报警解决方法：用毛细管采集末梢血标本混匀不充分会对结果有什么影响轻轻地混匀，散点图杂乱，不分类 用力混匀，散点图正常用力混匀：左手抓住试管上部，右手食指弹试管底部，让标本产生上下翻滚的效果轻轻混匀：一手抓住试管上部，通过碗关节摇动试管混匀
2、标本。混匀不充分，抗凝效果不好采集末梢血混匀后立即上机检测，血小板会偏低是怎么回事？因为血液抗凝需要一个过程，混匀后大概放置5分钟，再次混匀检测，结果就会比较准确且稳定了1分钟5分钟10分钟直方图粗糙血小板聚集直方图光滑直方图光滑现象：仪器：XS某病人静脉血与末梢血结果相差较远：静脉血PLT为4，而末梢血反复测定PLT均在70左右？分析分析：1）WBC、PLT结果：相差很大（OO）2）DIFF散点图：末梢血NEU上方有大量异常散点，静脉血无（OO）3）PLT直方图：末梢血不平滑且翘尾，静脉血无（OO）4）PLT报警信息：末梢血报“血小板聚集”，静脉血无（OO）静脉血静脉血末梢血末梢血一例很明显
3、的末梢血采集不良，以至一例很明显的末梢血采集不良，以至WBCWBC破碎（破碎（WBCWBC降低、降低、DIFFDIFF图中异常散图中异常散点），从而误算成聚集的血小板（点），从而误算成聚集的血小板（PLTPLT高了、且有聚集报警和图形）。高了、且有聚集报警和图形）。案例标本如何混匀，检测才能得到比较好的结果？轻轻地混匀，往往导致抗凝不充分；用力混匀后马上检测，重复性又不太好 比较合理的混匀方式是：1、采血后，立即用力混匀，让抗凝剂与血液成分充分接触 2、放置5分钟后（让标本充分抗凝），再次用力混匀，然后用手轻轻搓动试管半分钟，让细胞颗粒均匀分布（标本在大幅度运动时，其中的颗粒分布不是很均匀）。
4、3、然后再上机检测，就可以得到较好的结果分析中分析中 做好室内质控：原装质控结合Westgard多规则控制程序 购买重复性好的血液分析仪 做好保养 定时校准血液检查最需解决的三大问题血常规的要求：快速为临床提供可靠的可用依据异常细胞的检出率白细胞计数的干扰血小板计数的干扰三大问题的困扰三分群存在的问题？白细胞分类四大干扰：三分群仪器无异常细胞报警功能半导体激光+核酸荧光染色+流式细胞技术半导体激光照射标本，并依据每个细胞产生的三种信号来相互区分，即前向散射光(FSC)，侧向射散光（SSC）和侧向荧光(SFL)。核酸荧光染色分析机理 成熟红细胞成熟红细胞:无荧光特性无荧光特性 血血 小小 板板:
5、微弱荧光特性微弱荧光特性 成熟白细胞成熟白细胞:高荧光特性高荧光特性 幼幼 稚稚 细细 胞胞:极高荧光特性极高荧光特性 原原 始始 细细 胞胞:极高荧光特性极高荧光特性早期诊断真的很重要核酸荧光染色查异常细胞灵敏度为核酸荧光染色查异常细胞灵敏度为0.7%0.7%*普通血液分析仪最多只能达到普通血液分析仪最多只能达到5%-8%5%-8%激光束激光束 (=633nm)=633nm)侧向荧光侧向荧光:DNA/RNADNA/RNA信息信息侧向散射光：侧向散射光：细胞内结构信息细胞内结构信息前向散射光：前向散射光：细胞体积信息细胞体积信息DNA/RNADNA/RNA技术为基础的深度颗粒三维分析技术为基础
6、的深度颗粒三维分析背 景 血液自动分析仪已经基本普及，全血细胞计数(complete blood count,CBC)和白细胞分类计数(differential count,DC)的结果精密度和准确度明显提高。血液自动分析仪可向临床提供数十个参数。15是不是购买一台好的血液分析仪就可以了？中毒颗粒中毒颗粒Dohe体体核固缩核固缩核溶解核溶解空泡变性空泡变性血小板血小板聚集聚集异形红异形红细胞细胞仪器的局限性仪器傻了仪器傻了国内环境鸭梨山大！这么大的工作量怎么这么大的工作量怎么办呢办呢!?郁郁闷闷呐呐！19仪器检测的结果复检规则正常报告异常分析仪质控/状态的确认样本重测涂片镜检报告注释人工分类标
7、本检查自动自动CBC和和DC的复检流程图的复检流程图失控复检程序筛选不是取消镜检而是为了更好的镜检筛选不是取消镜检而是为了更好的镜检解放军总医院 丛玉隆教授 国际41条复检规则All laboratories should have a protocol for the examination of a laboratory-initiated blood smear,which can reasonably be based on the criteria of the International Society for Laboratory Hematology.所有实验室都应该在国际实验
8、血液学委员会制定的标准基础上，建立自己实验室检查血液涂片的规则。ISLHISLH的建议复检的定义 复检的定义：复检是指自动血细胞分析仪的结果（包括数据、直方图或散点图）出现报警（flag）信号或与临床不符等情况下所采取得措施和行为。23差值（Delta）的定义24n 差值检验：是通过对照辨认以前确认的异常结差值检验：是通过对照辨认以前确认的异常结果来减少血液学检测的行为。果来减少血液学检测的行为。n 差值范围：本次实验结果比较前一次结果的差差值范围：本次实验结果比较前一次结果的差值超过了某一范围就必须用涂片或其他的方式值超过了某一范围就必须用涂片或其他的方式来证实分析结果。那么这个范围就是这一
9、特定来证实分析结果。那么这个范围就是这一特定实验的差值范围。实验的差值范围。n 国际协作组并没有建立一个统一的差值范围，国际协作组并没有建立一个统一的差值范围，而是认为应该每一个实验室根据所用仪器的特而是认为应该每一个实验室根据所用仪器的特性来建立适合本实验室的差值范围。性来建立适合本实验室的差值范围。25n 检验通过：是本次检验的结果与上次的差值不大于本实检验通过：是本次检验的结果与上次的差值不大于本实验室该项目的差值范围。验室该项目的差值范围。n 检验败绩：是本次检验的结果与上次的差值大于本实验检验败绩：是本次检验的结果与上次的差值大于本实验室该项目的差值范围室该项目的差值范围差值（Del
10、ta）的定义n 阳性差值：是本次检测的结果比较上次结果的差值是呈阳性差值：是本次检测的结果比较上次结果的差值是呈正性方向的，而不考虑差值是否超出了差值范围。例如，正性方向的，而不考虑差值是否超出了差值范围。例如，比上次的结果要大一些等。比上次的结果要大一些等。n 阴性差值：是本次检测的结果比较上次结果的差值是呈阴性差值：是本次检测的结果比较上次结果的差值是呈负性方向的。例如，比上次的结果要小一些等。负性方向的。例如，比上次的结果要小一些等。.1、根据该仪器对细胞形态的识别能力，决定复检标准的宽严程度：识别越差,标准越严。2、假阴性是制定复检规则的关键参数，具有诊断意义的重要参数不能出现假阴性，
11、其他参数的假阴假阴性率性率5%30.0 x109/L:计数200个白细胞 WBC 0.5x109/L-1.0 x109/L:每1.0 x109/L计数10白细胞 WBC 0.5x109/L:不进行显微镜计数4.血小板形态分析和数量判断，有无凝聚 1个血小板/油镜读片视野 10 x109/L 如果数量判断结果与仪器计数结果差距较大，需复检仪器结果或进行血小板人工显微镜计数 血小板计数减低，显微镜见聚集存在时，需要重新采集标本测定。标本持续凝集，要用枸橼酸钠抗凝重新测定。显微镜检经验理想的血液检查流程 理想的血液检查流程：1、对异常细胞优秀识别能力的血液分析仪2、合适的复检规则筛选 3、镜检观察形态谢 谢！
