1、第九章第九章 甾体化合物甾体化合物第一节第一节 概述概述 环戊烷骈多环戊烷骈多氢菲的甾体氢菲的甾体母核母核 一、甾体化合物的结构与分类一、甾体化合物的结构与分类C17侧链结构的不同侧链结构的不同 结构特点结构特点甾核的四个环可以有不同的稠合方式：甾核的四个环可以有不同的稠合方式：B/C反式，反式，C/D多反式多反式 A/B顺式正系顺式正系 A/B反式别系反式别系甾核的甾核的C10和和C13位有角甲基取代，位有角甲基取代，C17位有侧位有侧链，它们均为链，它们均为构型。构型。C3上有羟基，多为上有羟基，多为构型构型甾核上其他位置还有甾核上其他位置还有双键、羟基、羰基等双键、羟基、羰基等19181
2、716151413121110987654321DCBAR由甲戊二羟酸的生由甲戊二羟酸的生物合成途径转化物合成途径转化 三、甾体类化合物的颜色反应三、甾体类化合物的颜色反应 Liebermann-Burchard反应反应 红紫红紫 蓝绿褪色蓝绿褪色 甾体甾体 黄红紫黄红紫 蓝褪色蓝褪色 三萜三萜氯仿氯仿-浓硫酸反应（浓硫酸反应（Salkowski反应）反应）在硫酸层呈现红或蓝色，氯仿层显绿色荧光在硫酸层呈现红或蓝色，氯仿层显绿色荧光冰醋酸冰醋酸-乙酰氯反应（乙酰氯反应（Tschugaeff反应）反应）紫红蓝绿紫红蓝绿 甾类甾类 红或紫色红或紫色 三萜三萜三氯醋酸反应（三氯醋酸反应（Rosen-
3、Heimer反应）反应）60显红色至紫色显红色至紫色 甾类甾类 100显红色至紫色显红色至紫色 三萜三萜五氯化锑反应（五氯化锑反应（Kahlenberg反应）反应）灰蓝、蓝、灰紫等灰蓝、蓝、灰紫等 强心苷（cardiac glycosides）是存在植物中具有强心作用的甾体苷类化合物。是治疗心力衰竭不可缺少的重要药物。主要用以治疗充血性心力衰竭及节律障碍等心脏疾患如：西地兰、地高辛、毛地黄毒苷等。分布：主要有十几个科几百种植物中含有强心苷，特别以玄参科、夹竹桃科植物最普遍。第二节第二节 强心苷类化合物强心苷类化合物二、强心苷的结构与分类二、强心苷的结构与分类 苷元部分的结构苷元部分的结构 苷元
4、是由甾体母核及其在苷元是由甾体母核及其在C17位连有不饱和内位连有不饱和内酯环的侧链组成酯环的侧链组成 主要依据主要依据C17位上的取代基即内酯环的大小分位上的取代基即内酯环的大小分成二类：成二类：甲型强心苷元：甲型强心苷元：C17侧链是五元不饱和内酯环。侧链是五元不饱和内酯环。乙型强心苷元：乙型强心苷元：C17侧链为六元不饱和内酯环。侧链为六元不饱和内酯环。甲型强心苷元母核称为强心甾烯 OORHOH202122231819甲型内酯20(22)五元内酯()甲型强心苷元OOHOHOH毛地黄毒苷元3,14-二羟基-5-强心甾-20（22）-烯3,14-dihydroxy-5-card-20(22)
5、-enolide乙型强心苷元母核称为海葱甾二烯OORHOH202122231819乙型 内酯20,22六元内酯,()乙型强心苷元OOOHOH海葱苷元3,14-二羟基海葱甾4,20,22-三烯3,14-dihydroxy-acilla-4,20,22-trienolideC3-OH少数为-构型，命名时冠以表(epi)字，如：OOHOHOHOOHOHOH毛地黄毒苷元3-表毛地黄毒苷元digitoxigenin3-epidigitoxigenin糖部分的结构糖部分的结构 20多种，与强心苷元多种，与强心苷元C3-OH结合成苷结合成苷 C2位上有无羟基位上有无羟基 -羟基糖（羟基糖（2-羟基糖）羟基糖
6、）-去氧糖（去氧糖（2-去氧糖）去氧糖）-羟基糖：葡萄糖、羟基糖：葡萄糖、6-去氧糖、去氧糖、6-去氧糖甲醚去氧糖甲醚-去氧糖：去氧糖：2,6-二去氧糖、二去氧糖、2,6-二去氧糖甲醚二去氧糖甲醚OMeOMeOMeD-洋地黄毒糖D-加拿大麻糖261苷元和糖的连接方式苷元和糖的连接方式 糖的种类以及和苷元的连接方式糖的种类以及和苷元的连接方式 I 型：苷元型：苷元-（2，6-去氧糖）去氧糖）x（D-葡萄糖）葡萄糖）y II 型：苷元型：苷元-（6-去氧糖）去氧糖）x（D-葡萄糖）葡萄糖）y III型：苷元型：苷元-（D-葡萄糖）葡萄糖）y 三、强心苷的结构与活性的关系三、强心苷的结构与活性的关系
7、甾体母核甾体母核 C/D环须顺式稠合环须顺式稠合：14-羟基羟基 A/B顺式稠合的甲型，顺式稠合的甲型，3-羟基羟基不饱和内酯环：不饱和内酯环：取代基取代基 10位角甲基转化为醛基或羟甲基后活性增强，位角甲基转化为醛基或羟甲基后活性增强，转化为羧基或无角甲基后则活性减弱转化为羧基或无角甲基后则活性减弱糖部分糖部分：数目、种类与毒性的关系：数目、种类与毒性的关系 甲型：三糖苷甲型：三糖苷二糖苷二糖苷苷元苷元 葡萄糖苷葡萄糖苷甲氧基糖苷甲氧基糖苷6-去氧糖苷去氧糖苷2,6-二二去氧糖苷去氧糖苷 乙型乙型:苷元苷元单糖苷单糖苷二糖苷二糖苷乙型乙型甲型甲型四、强心苷的理化性质四、强心苷的理化性质（一）
8、性状（一）性状 无定形粉末或无色结晶无定形粉末或无色结晶 有旋光性有旋光性 C17位侧链为位侧链为构型者味苦构型者味苦 刺激性刺激性（二）溶解性（二）溶解性 亲水性强亲水性强 羟基数越多，亲水性则越强羟基数越多，亲水性则越强（三）脱水反应（三）脱水反应5-OH和和14-OH均系叔羟基，极易脱水，均系叔羟基，极易脱水，故含此取代基的苷类在酸水解时，常得次故含此取代基的苷类在酸水解时，常得次生的脱水苷元生的脱水苷元（四）水解反应（四）水解反应 强心苷中苷键由于糖的结构不同，水解难强心苷中苷键由于糖的结构不同，水解难易有区别，水解产物也有差异易有区别，水解产物也有差异水解方法主要有酸催化水解、酶催化
9、水解、水解方法主要有酸催化水解、酶催化水解、碱水解碱水解酸催化水解：酸催化水解：(1)温和酸水解温和酸水解 (2)强烈酸水解强烈酸水解 (3)氯化氢丙酮法氯化氢丙酮法1.酸水解酸水解 温和酸水解温和酸水解 采用稀酸采用稀酸H2SO4、HCl等（等（0.020.05mol/L）反应条件反应条件含水醇短时间加热回流含水醇短时间加热回流(30min 数小时数小时)水解对象水解对象2-去氧糖苷，去氧糖苷，I 型型不适用于不适用于2-羟基糖苷羟基糖苷水解过程如下：水解过程如下：2-羟基糖易产生下式互变，阻挠了水解反应羟基糖易产生下式互变，阻挠了水解反应的进行，故在此条件下不能水解的进行，故在此条件下不能
10、水解2-OH糖。糖。OHOROHOROHOHOHH3O-HOROH2HH3O+2-去氧糖苷2-去氧糖苷原子质子化阳碳离子OHOROHOHOROHH3OHOHOROHH+互变2-羟基糖苷阻扰了水解反应的进行强烈酸水解强烈酸水解 酸的浓度酸的浓度35%水解条件水解条件延长水解时间；同时加压延长水解时间；同时加压反应特点反应特点引起苷元脱水；引起苷元脱水；可得到定量糖可得到定量糖氯化氢氯化氢-丙酮法丙酮法 反应试剂反应试剂HCl、丙酮溶液、丙酮溶液反应条件反应条件室温条件下与氯化氢长时间反应室温条件下与氯化氢长时间反应反应物条件反应物条件糖分子中有糖分子中有C2-OH和和C3-OH原原 理理邻二邻二
11、-OH与丙酮反应，生成丙酮化物与丙酮反应，生成丙酮化物进而水解进而水解特特 点点可得到可得到原苷元原苷元和糖的衍生物和糖的衍生物注意：注意：1、苷元的邻二羟基也能生产丙酮化物；、苷元的邻二羟基也能生产丙酮化物；2、多糖苷难溶于丙酮，则此反应不易或不能进行；、多糖苷难溶于丙酮，则此反应不易或不能进行；3、不是所有能溶于丙酮的强心苷都可用此法。、不是所有能溶于丙酮的强心苷都可用此法。OHOROHOHOHOHOOOHOROHOOOHOOCCH3CH3乌本苷苷元乌本苷苷元 H+2.酶水解酶水解 在含强心苷的植物中，含有水解葡萄糖的在含强心苷的植物中，含有水解葡萄糖的酶，但无水解酶，但无水解2去氧糖的酶
12、。去氧糖的酶。其他生物来源的酶，如蜗牛消化酶，几乎其他生物来源的酶，如蜗牛消化酶，几乎可以水解所以苷键。可以水解所以苷键。一般来说，乙型强心苷较甲型强心苷易被一般来说，乙型强心苷较甲型强心苷易被酶水解。酶水解。糖基上有乙酰基的强心苷较糖基上无乙酰糖基上有乙酰基的强心苷较糖基上无乙酰基的水解速度慢。基的水解速度慢。3.碱水解碱水解 强心苷的苷键不被碱水解，但分子中的酰强心苷的苷键不被碱水解，但分子中的酰基、内酯环能发生水解或裂解，双键移位，基、内酯环能发生水解或裂解，双键移位，苷元异构化等反应苷元异构化等反应酰基的水解酰基的水解 -去氧糖：碳酸氢钠、碳酸氢钾去氧糖：碳酸氢钠、碳酸氢钾 羟基糖或苷
13、元：氢氧化钙、氢氧化钡羟基糖或苷元：氢氧化钙、氢氧化钡 上述四种碱只水解酰基，不影响内酯环上述四种碱只水解酰基，不影响内酯环内酯环的水解内酯环的水解 用用KOH或或NaOH水水溶液处理溶液处理内酯开环内酯开环H+环合环合用用KOH或或NaOH醇醇溶液处理，内酯环异构溶液处理，内酯环异构化，遇酸不能复原化，遇酸不能复原五、强心苷的颜色反应五、强心苷的颜色反应 强心苷颜色反应是由强心苷颜色反应是由苷元甾核苷元甾核、不饱和内不饱和内酯环酯环、2-去氧糖去氧糖三部分产生。三部分产生。作用于甾体母核的反应作用于甾体母核的反应 与甾体皂苷元反应类同，如与甾体皂苷元反应类同，如L-B反应、三氯醋反应、三氯醋
14、酸反应（酸反应（Rosen-Heimer反应）、三氯化锑（或五反应）、三氯化锑（或五氯化锑）反应等。氯化锑）反应等。全饱和甾类、全饱和甾类、C3为酮基为酮基(无羟基无羟基)的化合物呈阴性的化合物呈阴性作用于不饱和内酯环的反应作用于不饱和内酯环的反应 （活性亚甲基显色反应）（活性亚甲基显色反应）适用对象适用对象主要用于主要用于甲型强心苷甲型强心苷 （作用于五元不饱和内酯环）（作用于五元不饱和内酯环）反应原理反应原理不饱和五元内酯环，在碱性溶液不饱和五元内酯环，在碱性溶液中双键转位能形成活性亚甲基，中双键转位能形成活性亚甲基，从而能够与某些试剂反应而显色。从而能够与某些试剂反应而显色。反应名称反应
15、名称 试试 剂剂 颜色颜色 max(nm)Legal 反应反应 亚硝酰铁氰化钠亚硝酰铁氰化钠 深红深红 470 Kedde 反应反应 3,5-二硝基苯甲酸二硝基苯甲酸 紫红或红紫红或红 590 Raymond 反应反应 间间-二硝基苯二硝基苯 紫红紫红 620 Baljet 反应反应 苦味酸苦味酸 橙或橙红橙或橙红 490Keller-Kiliani反应：（反应：（K-K反应）反应）强 心 苷Fe3+(FeCl3 or Fe2(SO4)3冰 醋 酸 液+浓 硫 酸蓝 色 或 蓝 绿 色（滴 加）（醋 酸 层）作用于作用于2-去氧糖的反应去氧糖的反应应用对象应用对象具有游离的具有游离的2-去氧糖
16、、能水解出去氧糖、能水解出 2-去氧糖的强心苷去氧糖的强心苷呫吨氢醇（呫吨氢醇（Xanthydrol）反应）反应样品样品+试剂试剂 水浴加热水浴加热3分钟分钟 试剂试剂10mg呫吨氢醇溶于呫吨氢醇溶于100ml冰醋酸，加入冰醋酸，加入1ml浓硫酸浓硫酸对二甲氨基苯甲醛反应：对二甲氨基苯甲醛反应：（作为显色剂）（作为显色剂）样品点于滤纸上，喷试剂，样品点于滤纸上，喷试剂，90加热加热30秒，显秒，显灰红色灰红色斑点斑点试剂试剂1%对对-二甲氨基苯甲醛乙醇液二甲氨基苯甲醛乙醇液-浓盐酸浓盐酸4:1过碘酸过碘酸-对硝基苯胺反应：（对硝基苯胺反应：（作为显色剂）作为显色剂）强心苷强心苷+试剂试剂 黄色
17、黄色六、强心苷的提取与分离六、强心苷的提取与分离注意的问题注意的问题防止植物中的酶对成分进行酶解防止植物中的酶对成分进行酶解提取原生苷提取原生苷必须抑制酶的活性，原料要新鲜，必须抑制酶的活性，原料要新鲜，采集后低温快速干燥采集后低温快速干燥1提取提取 常用甲醇或常用甲醇或70-80%乙醇为溶剂进行提取乙醇为溶剂进行提取 优点：提取效率高、使酶失去活性优点：提取效率高、使酶失去活性提取提取原生苷的提取：原生苷的提取：70%EtOH提提药材药材 烘干烘干 加入等量加入等量(NH4)2SO4 EtOH提提次生苷的提取次生苷的提取 药材药材 加水湿润加水湿润 3040C保温保温612h 次生苷次生苷
18、70%EtOH或或EtOAc提提脂类杂质：石油醚脂类杂质：石油醚叶绿素：醇提液浓缩静止，胶状沉淀叶绿素：醇提液浓缩静止，胶状沉淀活性炭活性炭叶绿素等脂溶性杂质可被吸附除去叶绿素等脂溶性杂质可被吸附除去Al2O3或聚酰胺或聚酰胺糖类、水溶性色素、鞣质、糖类、水溶性色素、鞣质、皂苷、酚性及酸性成分等可被吸附皂苷、酚性及酸性成分等可被吸附 注意：强心苷亦有可能被吸附而损失注意：强心苷亦有可能被吸附而损失2.分离溶剂萃取法、逆流分溶法溶剂萃取法、逆流分溶法 分配系数的不同分配系数的不同色谱分离法色谱分离法 分离亲脂性单糖苷、次级苷和苷元分离亲脂性单糖苷、次级苷和苷元 选择吸附层析（硅胶等）选择吸附层析
19、（硅胶等）对弱亲脂性成分对弱亲脂性成分 选择分配层析选择分配层析(硅胶、纤维素等为支硅胶、纤维素等为支持剂持剂)含量较高的组分含量较高的组分 反复结晶反复结晶 两相溶剂萃取法两相溶剂萃取法 例：毛花洋地黄苷甲、乙、丙的分离：例：毛花洋地黄苷甲、乙、丙的分离：P284甲乙丙三者在水（几不溶）和甲醇（甲乙丙三者在水（几不溶）和甲醇（1：20）中的）中的溶解度相似。但在氯仿中的溶解度分别为溶解度相似。但在氯仿中的溶解度分别为 苷甲（苷甲（1：125）苷乙（苷乙（1：550）苷丙（苷丙（1：1750）氯仿氯仿-甲醇甲醇-水水(5:1:5)逆流分配法逆流分配法例如：黄花夹竹桃苷甲、乙的分离例如：黄花夹竹
20、桃苷甲、乙的分离(286页页)以氯仿：乙醇（以氯仿：乙醇（2：1）750ml和水和水150ml为两相溶为两相溶剂，氯仿为流动相，水为固定相，逆流分配。剂，氯仿为流动相，水为固定相，逆流分配。水层：黄花夹竹桃苷甲水层：黄花夹竹桃苷甲氯仿层：黄花夹竹桃苷乙氯仿层：黄花夹竹桃苷乙七、强心苷的检识七、强心苷的检识 理化检识理化检识 纸色谱纸色谱 亲水性苷：水为固定相亲水性苷：水为固定相 亲脂性苷或苷元：甲酰胺为固定相亲脂性苷或苷元：甲酰胺为固定相薄层色谱薄层色谱 亲水性强的苷：分配色谱，硅胶为支持剂亲水性强的苷：分配色谱，硅胶为支持剂 亲脂性强的苷和苷元：吸附色谱，硅胶亲脂性强的苷和苷元：吸附色谱，硅
21、胶显色剂：三氯化锑等显色剂：三氯化锑等八、强心苷的结构研究八、强心苷的结构研究UV光谱：主要是由不饱和内酯环引起的光谱：主要是由不饱和内酯环引起的吸收吸收 甲型：甲型：217220nm（log4.204.24）乙型：乙型：295300nm（Log3.93）IR光谱光谱 不饱和内酯环上的羰基不饱和内酯环上的羰基 特征：在特征：在18001700 cm-1皆产生两个羰基吸收峰皆产生两个羰基吸收峰-内酯内酯(甲型甲型)两个羰基峰两个羰基峰,-内酯内酯(乙型乙型)峰位向低波数移峰位向低波数移40cm-13-乙酰毛花洋地黄毒苷元乙酰毛花洋地黄毒苷元（甲型）（甲型）1783cm-1、1756cm-1、17
22、38cm-1 嚏根草苷元嚏根草苷元（乙型）（乙型）1740cm-1、1718cm-1 低波数为正常峰；高波数为非正常峰低波数为正常峰；高波数为非正常峰（在极性大的溶剂中，吸收强度减弱甚至消（在极性大的溶剂中，吸收强度减弱甚至消失）失）应用：应用：根据根据IR可区别甲型和乙型强心苷可区别甲型和乙型强心苷依非正常峰因溶剂的极性增强而吸收强度减弱依非正常峰因溶剂的极性增强而吸收强度减弱甚至消失的现象，可指示不饱和内酯环的存在。甚至消失的现象，可指示不饱和内酯环的存在。1H-NMR苷元1.00左右（二个叔甲基单峰C10、C13角甲基峰）C3-H3.90左右，为多重峰191817161514131211
23、10987654321DCBAR内酯环中的质子-甲型OOHHH20212223甲型5.606.00宽单峰4.505.00宽单峰或三重峰J=18 HzAB型四重峰型四重峰内酯环中的质子乙型OOHHH20212223乙型7.2单峰7.86.3烯氢双峰J=6 12 Hz13C-NMR MS 九、含强心苷的中药及蟾酥强心成分的举例九、含强心苷的中药及蟾酥强心成分的举例 毛花洋地黄毛花洋地黄 地高辛地高辛 去乙酰去乙酰 西地兰西地兰 黄花夹竹桃黄花夹竹桃强心灵强心灵 蟾酥蟾酥 OHOOOOHC(CH2)nCONHCH-(CH2)3NH=NHONH2蟾毒灵-3-辛二酰精氨酸酯第三节第三节 甾体皂苷甾体皂苷
24、螺甾烷（螺甾烷（spirostane）类化合物与糖结合）类化合物与糖结合而成的甾体苷类而成的甾体苷类 水溶液经振摇后多能产生大量肥皂水溶液水溶液经振摇后多能产生大量肥皂水溶液样的泡沫，故称为甾体皂苷样的泡沫，故称为甾体皂苷 分布分布六七十年代，用于合成甾体避孕药和激素六七十年代，用于合成甾体避孕药和激素类药物的原料。九十年代发现了新的生物类药物的原料。九十年代发现了新的生物活性，特别是防治心脑血管疾病、抗肿瘤、活性，特别是防治心脑血管疾病、抗肿瘤、降血糖和免疫调节等作用。降血糖和免疫调节等作用。例如：地奥心血康胶囊地奥心血康胶囊是由黄山药植物中提是由黄山药植物中提取的甾体皂苷制成的，内含取的甾
25、体皂苷制成的，内含8种甾体皂苷种甾体皂苷（含量在（含量在90%以上），对冠心病心绞痛发以上），对冠心病心绞痛发作疗效显著。作疗效显著。薤白皂苷薤白皂苷经体外试验显示具有较强的抑制经体外试验显示具有较强的抑制ADP诱导的人血小板聚集作用。诱导的人血小板聚集作用。心脑舒通心脑舒通为蒺藜为蒺藜Tribulus terres tres果实中提果实中提取的总皂苷制剂，临床用于心脑血管病的防治。取的总皂苷制剂，临床用于心脑血管病的防治。二、甾体皂苷的结构与分类二、甾体皂苷的结构与分类 1 甾体皂苷的结构特征甾体皂苷的结构特征 27个碳原子个碳原子 基本碳架是螺甾烷的衍生物基本碳架是螺甾烷的衍生物 六个环六
26、个环，E环和环和F环以螺缩酮形式相连接环以螺缩酮形式相连接 A/B环顺、反，环顺、反，B/C、C/D环均为反式环均为反式 20E或或20F S 22F R 结构中不含羧基，结构中不含羧基，中性皂苷中性皂苷 2甾体皂苷的结构类型甾体皂苷的结构类型 依螺甾烷结构中依螺甾烷结构中C25的构型的构型和和F环环的环合状态的环合状态，将其分为四种类型：将其分为四种类型：1螺甾烷醇类（螺甾烷醇类（spirostanols）2异螺甾烷醇类（异螺甾烷醇类（isospirostanols）3呋甾烷醇类（呋甾烷醇类（furostanols）4变形螺甾烷醇类（变形螺甾烷醇类（pseudo-spirostanols）O
27、OEF251螺甾烷醇类（螺甾烷醇类（spirostanols）2异螺甾烷醇类（异螺甾烷醇类（isospirostanols）O2225261013O2017OH27O2225261013O2017OH27EFEF螺甾烷醇异螺甾烷醇RSC25C25易转化差向异构体C25位甲基二种差向异构体：位甲基二种差向异构体：C25位上甲基位于位上甲基位于F环平面上的直立键时环平面上的直立键时为为定向，绝对构型为定向，绝对构型为S型型螺甾烷螺甾烷醇醇 又称又称L型或型或neo型（型（25S、25L、25F、neo）OOEF25C25位甲基二种差向异构体：位甲基二种差向异构体：C25位上甲基位于位上甲基位于F环
28、平面下的平伏键时环平面下的平伏键时定向，绝对构型为定向，绝对构型为R型型异螺甾烷醇异螺甾烷醇 又称又称D型或型或iso型（型（25R、25D、25F、iso）OOEF25例如：剑麻皂苷元(sisalagenin),是合成激素的原料化学名:3-羟基5,20F,22F,25F螺旋甾12-酮简 称:3羟基，5-螺旋甾12-酮OOOHOH剑麻皂苷元例如：薯蓣皂苷元(diosgenin)制药工业中重要原料化学名:5-20F，22F，25F螺旋甾烯-3-醇简 称:5-异螺旋甾烯-3-醇OOOH薯蓣皂苷元3呋甾烷醇类（呋甾烷醇类（furostanols）由环裂环而衍生的皂苷由环裂环而衍生的皂苷称为呋甾烷醇皂
29、苷称为呋甾烷醇皂苷F环裂解的双糖链皂苷不具有某些皂苷的通性：环裂解的双糖链皂苷不具有某些皂苷的通性：没有溶血作用 不能与胆甾醇形成复合物 没有抗菌活性4变形螺甾烷醇类变形螺甾烷醇类F环为五元四氢呋喃环。天然产物中尚不多见。环为五元四氢呋喃环。天然产物中尚不多见。OOCH2OHOH纽替皂苷元三、甾体皂苷的理化性质三、甾体皂苷的理化性质 性状性状 苷大多为白色无定形粉末苷大多为白色无定形粉末，皂苷元有较好的，皂苷元有较好的结晶结晶 熔点常随羟基数目增加而升高熔点常随羟基数目增加而升高 有旋光性有旋光性 溶解性溶解性沉淀反应沉淀反应 可用于纯化皂苷和检查是否有皂苷类成分存在 反应条件：甾醇需有C3-
30、OH三萜皂苷与甾醇形成的分子复合物不及甾体皂苷稳定甾体皂苷EtOH甾醇沉沉淀淀分子复合物乙醚回流提取乙醚皂苷（甾醇）（不溶乙醚）+（如胆甾醇）甾体皂苷/水 +碱式醋酸铅 沉淀 或Ba(OH)2等 碱性盐表面活性表面活性 F F环开裂的皂苷多不具溶血作用，且表面活性环开裂的皂苷多不具溶血作用，且表面活性降低。降低。显色反应显色反应 在无水条件下，遇某些酸可产生与三在无水条件下，遇某些酸可产生与三萜皂苷相类似的显色反应。萜皂苷相类似的显色反应。L-B（醋酐（醋酐-浓硫酸）反应：浓硫酸）反应：甾体皂苷甾体皂苷颜色变化中颜色变化中出现绿色出现绿色 三萜皂苷三萜皂苷产生红色（产生红色（无绿色无绿色）三氯
31、醋酸反应：三氯醋酸反应：甾体皂苷甾体皂苷加热至加热至60显色显色三萜皂苷三萜皂苷加热至加热至100显色显色F环裂解的双糖链皂苷产生的显色反应：环裂解的双糖链皂苷产生的显色反应：E试剂试剂盐酸对二甲氨基苯甲醛试剂盐酸对二甲氨基苯甲醛试剂 A试剂试剂茴香醛试剂茴香醛试剂F环裂解的双糖链皂苷环裂解的双糖链皂苷黄色黄色红色红色A试剂试剂E试剂试剂F环闭环的单糖链皂苷环闭环的单糖链皂苷和螺旋甾烷衍生皂苷元和螺旋甾烷衍生皂苷元黄色黄色A试剂试剂不显色不显色E试剂试剂四、甾体皂苷的提取与分离四、甾体皂苷的提取与分离提取提取-溶剂法溶剂法 甲醇或稀乙醇作溶剂甲醇或稀乙醇作溶剂；丙酮、乙醚沉淀或正；丙酮、乙醚沉
32、淀或正丁醇萃取或大孔树脂，得到粗皂苷丁醇萃取或大孔树脂，得到粗皂苷 粗皂苷加酸加热水解粗皂苷加酸加热水解，有机溶剂提取得苷元，有机溶剂提取得苷元（实验室）（实验室）分离分离 分段沉淀法（溶剂沉淀法）分段沉淀法（溶剂沉淀法）乙醚、丙酮或乙醚乙醚、丙酮或乙醚:丙酮丙酮(1:1)的混合溶剂的混合溶剂 胆甾醇沉淀法胆甾醇沉淀法 胆甾醇复合物乙醚回流提取胆甾醇复合物乙醚回流提取铅盐沉淀法铅盐沉淀法 酸性皂苷：中性醋酸铅酸性皂苷：中性醋酸铅 中性皂苷：碱性醋酸铅中性皂苷：碱性醋酸铅色谱分离法色谱分离法 吸附柱色谱法吸附柱色谱法 分配柱色谱法：硅胶为支持剂，分配柱色谱法：硅胶为支持剂，3%草酸草酸水溶液为固
33、定相，流动相为氯仿水溶液为固定相，流动相为氯仿-甲醇甲醇-水水 高效液相色谱法高效液相色谱法 大孔树脂柱色谱大孔树脂柱色谱 凝胶色谱法凝胶色谱法：Sephadex LH-20 五、甾体皂苷的检识五、甾体皂苷的检识 理化检识理化检识 显色反应、泡沫试验、溶血试验显色反应、泡沫试验、溶血试验 色谱检识色谱检识 亲水性强的苷：分配色谱，硅胶为支持剂亲水性强的苷：分配色谱，硅胶为支持剂 亲脂性强的苷和苷元：吸附色谱，硅胶亲脂性强的苷和苷元：吸附色谱，硅胶1.紫外光谱紫外光谱饱和的甾体化合物在饱和的甾体化合物在200400nm无吸收无吸收不饱和的甾体：不饱和的甾体：孤立双键孤立双键205225 nm 共
34、轭二烯共轭二烯235 nm C=O285 nm(弱吸收弱吸收),不饱和酮基不饱和酮基240nm(特征吸收特征吸收)六、甾体皂苷的结构研究六、甾体皂苷的结构研究制备成衍生物。制备成衍生物。如：含如：含-OH化合物，经脱化合物，经脱-OH 后在结构中产后在结构中产生双键。借此判断生双键。借此判断-OH位置。位置。(4)甾体皂苷元与浓硫酸作用后，甾体皂苷元与浓硫酸作用后，220260nm出现吸收峰；出现吸收峰；E、F环：环：270275nm2.红外光谱红外光谱 甾体皂苷元含有螺缩酮结构的侧链，在甾体皂苷元含有螺缩酮结构的侧链，在IR中有中有四个特征吸收谱带四个特征吸收谱带：A980 B920 C90
35、0 D860 cm-1最强最强 区别区别C25的两种立体异构体的构型的两种立体异构体的构型C25Me-取代取代 吸收强度：吸收强度：C25-S B带带 C带带 （螺甾烷）（螺甾烷）C25-R C带带 B带带（异螺甾烷）（异螺甾烷）C25CH2OH取代取代 （无法用上述四条谱带来区别）（无法用上述四条谱带来区别）C25-S有有995强吸收强吸收 C25-R有有 1010强吸收强吸收(若若F环开裂即无螺缩酮结构，则无环开裂即无螺缩酮结构，则无995或或1010吸收吸收)3.质谱质谱 甾体皂苷元由于分子中有螺缩酮结构甾体皂苷元由于分子中有螺缩酮结构，在，在EI质质谱中均出现：谱中均出现：m/z：13
36、9（强，基峰）（强，基峰）115（中强）（中强）126（弱）（弱）辅助离子峰辅助离子峰 这些峰的裂解途径如下：这些峰的裂解途径如下：（主要是由（主要是由F环产生）环产生）OOOOHOOOOOOHOOOOOH+.+.+.+.+.转位+m/z 139+.+.或m/z 126麦氏重排+.m/z 115取代基对三个峰的影响：取代基对三个峰的影响：O222613O20EF2527155,131,142+16-OH137,113,124峰强减弱 为基峰并出现155、153的二个峰126139-OH139-2m/z：139 115 126或2317-OHC23C17峰消失FAB-MS七、含甾体皂苷的中药实例
37、七、含甾体皂苷的中药实例-麦冬麦冬 第四节第四节 C21甾体化合物甾体化合物 含有含有21个碳原子的个碳原子的甾体衍生物甾体衍生物 以孕甾烷或其异构以孕甾烷或其异构体为基本骨架的羟体为基本骨架的羟基衍生物基衍生物抗炎、抗肿瘤、抗抗炎、抗肿瘤、抗生育生育分布分布CH220CH321H孕甾烷第五节第五节 植物甾醇植物甾醇 C17位侧链是位侧链是810个碳原子链状侧链个碳原子链状侧链 游离状态、苷、高级脂肪酸酯游离状态、苷、高级脂肪酸酯 分布分布第六节第六节 胆汁酸类化合物胆汁酸类化合物C17连有一个戊酸连有一个戊酸胆烷酸的衍生物胆烷酸的衍生物动物胆汁动物胆汁HHCOOHHH胆烷酸胆烷酸 各种胆汁酸
38、的区别在于各种胆汁酸的区别在于羟基数目、位置及羟基数目、位置及构型构型游离型或结合型游离型或结合型（侧链的羧基与甘氨酸或（侧链的羧基与甘氨酸或牛磺酸结合成甘氨胆汁酸或牛磺胆汁酸牛磺酸结合成甘氨胆汁酸或牛磺胆汁酸，钠盐）钠盐）二、胆汁酸的化学性质二、胆汁酸的化学性质1、酸性、酸性2、酯化反应、酯化反应3、羟基和羰基的反应、羟基和羰基的反应4、颜色反应、颜色反应q Pettenkofer反应：反应：10蔗糖和浓硫酸蔗糖和浓硫酸-紫色环紫色环q Gregory Pascoe反应：反应：45硫酸和硫酸和0.3%糠醛糠醛-蓝色，可定量蓝色，可定量q Hammertoe反应：反应：20铬酸溶解，温热铬酸溶
39、解，温热-紫色紫色三、胆汁酸的检识三、胆汁酸的检识1、化学反应、化学反应2、纸色谱和薄层色谱、纸色谱和薄层色谱3、高效液相色谱、高效液相色谱 制备成具有紫外吸收基团或荧光生色团的制备成具有紫外吸收基团或荧光生色团的衍生物。衍生物。酶学方法的联用（酶学方法的联用（3羟基甾体氧化酶）羟基甾体氧化酶）五、含胆汁酸的中药实例五、含胆汁酸的中药实例牛黄：干燥胆结石牛黄：干燥胆结石 胆红素，胆汁酸，胆固醇，肽类等胆红素，胆汁酸，胆固醇，肽类等 去氧胆酸去氧胆酸 人工牛黄人工牛黄 熊胆：引流胆汁的干燥品熊胆：引流胆汁的干燥品 熊去氧胆酸熊去氧胆酸 第七节第七节 昆虫变态激素昆虫变态激素 17侧链为侧链为8-10个碳原子的多元醇个碳原子的多元醇 甾醇的衍生物或甾醇类的代谢产物甾醇的衍生物或甾醇类的代谢产物促蜕皮活性促蜕皮活性
