1、自身免疫性皮肤病自身免疫性皮肤病的抗体检测的抗体检测张宏杰订货号订货号靶抗原靶抗原基质基质种属种属FA 1501-60 表皮基底膜、棘细胞桥粒类天疱疮抗原移行上皮桥粒芯糖蛋白1桥粒芯糖蛋白3BP230gCVII型胶原NC1 BP180-NC16A-4X食管盐裂皮肤膀胱转染细胞转染细胞转染细胞转染细胞转染对照细胞转染对照细胞BP180-NC16A-4X EUROPLUS猴猴大鼠EU 90EU 90EU 90EU 90EU 90EU 90-IIFT已经上市产品已经上市产品订货号订货号靶抗原靶抗原抗原来源抗原来源EA 1502-4801-1 GBP230-CFrecombinant,expressi
2、on in E.coliEA 1502-4801-2 GBP180-NC16A-4Xrecombinant,expression in E.coli,tetramer of the NC16A domainEA 1495-4801 Gdesmoglein 1recombinant,expression inmammalian cells,extracellular domainEA 1496-4801 Gdesmoglein 3recombinant,expression inmammalian cells,extracellular domainELISA已经上市产品*能够实现定量检测，抗体
3、滴度与疾病活动度、严重度相关.自身免疫性大疱性皮肤病u产生多种抗皮肤结构蛋白的自身抗体产生多种抗皮肤结构蛋白的自身抗体u靶抗原：介导表皮内棘细胞间的细胞靶抗原：介导表皮内棘细胞间的细胞-细胞连接以及表皮细胞连接以及表皮 和真皮层间的粘附和真皮层间的粘附 u产生的自身抗体破坏连接产生的自身抗体破坏连接u表皮内或表皮下水疱形成表皮内或表皮下水疱形成皮肤结构真皮真皮表皮表皮皮下组织皮下组织自身免疫性大疱性皮肤病 天疱疮天疱疮:抗桥粒抗体（桥粒芯糖蛋白1和3）细胞与细胞间粘连 类天疱疮类天疱疮:抗半桥粒抗体（BP180和230)细胞与基底膜粘连获得性大疱性表皮松解症获得性大疱性表皮松解症:抗VII型胶
4、原蛋白抗体 疱疹样皮炎疱疹样皮炎:抗tTG与抗醇溶蛋白抗体 表皮内水疱表皮内水疱 表皮下水疱表皮下水疱自身免疫性皮肤病的诊断流程初步诊断初步诊断组织学组织学病史及临床症状病史及临床症状直接免疫荧光直接免疫荧光间接免疫荧光间接免疫荧光确认确认ELISA/免疫印迹法（免疫印迹法（IB）/免疫沉淀（免疫沉淀（IP）监测监测诊断诊断ELISA/IB/IP组织学组织学水疱水疱*Zillikens 07,special print out of Derm组织学活检组织学活检活检部位活检部位DIFIgG/C3天疱疮疾病类型:寻常型天疱疮落叶型天疱疮副肿瘤性天疱疮IgA天疱疮循环自身抗体：抗桥粒芯糖蛋白（Ds
5、g 3,Dsg 1）、plakines,plectin 表皮粘连受损疾病疾病寻常型寻常型天疱疮天疱疮落叶型落叶型天疱疮天疱疮副肿瘤性副肿瘤性天疱疮天疱疮IgA天疱疮天疱疮自身抗体的靶抗原是桥粒自身抗体的靶抗原是桥粒DIFDIF细胞间细胞间IgG 和和 C3细胞间细胞间IgG 和和 C3细胞间细胞间IgG 和和 C3(基底膜基底膜出现线性出现线性IgG和和C3)细胞间细胞间IgA 和和 C3IIFIIF细胞间细胞间 IgG（猴食管猴食管）90%细胞间细胞间 IgG（猴食管猴食管）90%细胞间细胞间 IgG（猴食管猴食管,大鼠膀胱大鼠膀胱）90%细胞间细胞间 IgA（猴食管猴食管）50%靶抗原靶抗
6、原Dsg3,Dsg1Dsg1Dsg3,Dsg1,Plakines,PlectinDesmocollin1(IgA),Dsg3Mihai,Sitaru 2007寻常型天疱疮l最常见的表皮内形成水疱的自身免疫性皮肤病最常见的表皮内形成水疱的自身免疫性皮肤病l发病率发病率:0.1-1.6/100,000 居民居民l常见于中年和老年人常见于中年和老年人l约约70%的水疱的水疱最早出现于口腔黏膜最早出现于口腔黏膜（仅抗桥粒芯糖蛋白（仅抗桥粒芯糖蛋白3抗体阳性）抗体阳性）l蔓延至其他黏膜与皮肤蔓延至其他黏膜与皮肤（抗桥粒芯糖蛋白（抗桥粒芯糖蛋白3和和1阳性）阳性）副肿瘤性天疱疮l危及生命的水疱形成性皮肤病
7、危及生命的水疱形成性皮肤病l可发生于任何年龄人群可发生于任何年龄人群l皮肤病变常伴随恶性肿瘤皮肤病变常伴随恶性肿瘤l抗包斑蛋白自身抗体可作为诊断的标志物抗包斑蛋白自身抗体可作为诊断的标志物l保守治疗或手术摘除肿瘤成功后抗包斑蛋白抗体水平明显保守治疗或手术摘除肿瘤成功后抗包斑蛋白抗体水平明显下降下降类天疱疮类型:大疱性类天疱疮妊娠性类天疱疮粘膜类天疱疮线状IgA皮肤病循环自身抗体：BP180,BP230,Laminin 5,64整合素表皮下粘连缺失疾病疾病DIF大疱性类天疱疮大疱性类天疱疮基底膜线性基底膜线性 IgG（IgA）和和 C3 妊娠性妊娠性类天疱疮类天疱疮基底膜线性基底膜线性 IgG粘
8、膜类天疱疮粘膜类天疱疮基底膜线性基底膜线性 IgG 和和/或或 IgA 和和/或或 C3 线性线性 IgAIgA皮肤病皮肤病基底膜线性基底膜线性 IgA（和和 C3）获得性大疱性表皮松解获得性大疱性表皮松解症症基底膜线性基底膜线性 IgG（或（或 IgA）和和C3 自身抗体的靶抗原是半桥粒自身抗体的靶抗原是半桥粒靶抗原靶抗原BP180,BP230BP180,BP230BP180,Laminin 5,64-整合蛋白整合蛋白LAD-1VII型胶原蛋白型胶原蛋白Mihai,Sitaru 2007IIF表皮表皮侧侧IgG（盐裂皮肤）（盐裂皮肤）90%表皮表皮侧侧IgG（盐裂皮肤）（盐裂皮肤）90%表皮
9、表皮侧和侧和/或或真皮真皮侧侧 IgG（或或 IgA）（）（盐裂皮肤盐裂皮肤）50%表皮表皮侧侧,真皮真皮侧侧 IgA（盐裂皮（盐裂皮肤）肤）60%真皮侧真皮侧IgG（or IgA）（）（SSS）50%大疱性类天疱疮l最常见的表皮下水疱形成自身免疫性皮肤病l发病率:0.3-4.3/100,000 人l常见于老年人（平均发病年龄：74岁），男性多于女性l黏膜极少受累l张力性水疱获得性大疱性表皮松解症l累及皮肤和黏膜的慢性自身免疫性表皮下水疱性疾病l两种临床类型:-类似于大疱性类天疱疮的炎症类型-水疱及糜烂，愈合后常形成疤痕或粟丘疹l抗VII型胶原蛋白抗体IIFT 产品产品-皮肤相关抗体皮肤相关抗
10、体-抗半桥粒抗体抗半桥粒抗体抗桥粒抗体抗桥粒抗体抗皮肤结构蛋白自身抗体抗皮肤结构蛋白自身抗体-猴食管猴食管-表皮表皮食管食管（猴猴）BP230 gC盐裂皮肤盐裂皮肤（猴）（猴）BP180-NC16A-4XHEK Dsg1HEK Dsg3抗皮肤抗原自身抗体抗皮肤抗原自身抗体-皮肤病马赛克皮肤病马赛克7-抗抗EBM抗体（抗体（BP180/BP230）Oesophagus epid.BM pos.Saltsplit skin epid.BM pos.BP230 gC pos.BP180 pos.Desmoglein 1 neg.Desmoglein 3 neg.抗皮肤结构蛋白自身抗体抗皮肤结构蛋白自
11、身抗体-大鼠膀胱大鼠膀胱-抗移形上皮抗体抗移形上皮抗体(基底膜或桥粒基底膜或桥粒).抗抗DSG1和和DSG3抗体抗体抗皮肤结构蛋白自身抗体抗皮肤结构蛋白自身抗体-盐裂皮肤盐裂皮肤-抗基底膜抗体抗基底膜抗体盐裂皮肤表皮侧或真皮侧可见细线性荧光盐裂皮肤表皮侧或真皮侧可见细线性荧光表皮侧表皮侧:BP230,BP180 和和 LAD97真皮侧真皮侧:Laminin 5,VII型胶原蛋白和致密层成分型胶原蛋白和致密层成分表皮表皮真皮真皮Anti-BP180-NC16A-4X ELISA和和Anti-BP230-CF ELISA自身抗体靶抗原结构自身抗体靶抗原结构-BP180（XVII型胶原蛋白）型胶原蛋
12、白）-NC16A结构域的多聚体ELISAAnti-BP180-NC16A-4X ELISA-灵敏度和特异性灵敏度和特异性-研究组研究组 n EUROIMMUN anti-BP180 阳性阳性大疱大疱性性类天疱疮类天疱疮118106(89.8%)妊娠性类天疱疮妊娠性类天疱疮2020(100.0%)类风湿性关节炎类风湿性关节炎1072(1.9%)进行性系统性硬化症进行性系统性硬化症502(4.0%)系统性红斑狼疮系统性红斑狼疮721(1.4%)健康献血者健康献血者49410(2.0%)灵敏度灵敏度11889.8%特异性特异性72397.9%Anti-BP230-CF ELISA-灵敏度和特异性灵敏
13、度和特异性-研究组研究组nEUROIMMUNanti-BP230-CF 阳性阳性 大疱性类天疱疮大疱性类天疱疮11867(56.8%)妊娠性类天疱疮妊娠性类天疱疮201(5.0%)线线性性IgA皮肤病皮肤病201(5.0%)类风湿性关节炎类风湿性关节炎1703(1.8%)系统性红斑狼疮系统性红斑狼疮565(8.9%)健康献血者健康献血者48310(2.1%)灵敏度灵敏度11856.8%特异性特异性72997.4%疾病活动度得分疾病活动度得分水疱水疱 糜烂糜烂31021-1010患者患者 1监测大疱性类天疱疮疾病活动度监测大疱性类天疱疮疾病活动度-ELISA法检测法检测BP180-NC16A-4
14、X-患者患者 2在大疱性类天疱疮病程中，在大疱性类天疱疮病程中，NC16A四聚体结合的自身抗体与疾病活动度相关。四聚体结合的自身抗体与疾病活动度相关。Anti-BP180&Anti-BP230大疱性类天疱疮n=118Anti-BP230 ELISA(EUROIMMUN)positivenegativeAnti-BP180ELISA(EUROIMMUN)positive6243negative5889%57%联合检测提高阳性率 抗桥粒芯糖蛋白抗桥粒芯糖蛋白1 ELISA和和 抗桥粒芯糖蛋白抗桥粒芯糖蛋白3 ELISA 抗桥粒芯糖蛋白抗桥粒芯糖蛋白1 ELISA-灵敏度和特异性灵敏度和特异性-研究
15、组研究组nEUROIMMUN抗桥粒芯糖蛋白抗桥粒芯糖蛋白1 ELISA阳性阳性寻常型天疱疮寻常型天疱疮7133(46.5%)落叶型天疱疮落叶型天疱疮5048(96.0%)线性线性 IgA皮肤病皮肤病210大疱性类天疱疮大疱性类天疱疮481(2.1%)健康健康献血献血者者4013(0.7%)特异性特异性47099.1%抗桥粒芯糖蛋白抗桥粒芯糖蛋白3 ELISA-灵敏度和特异性灵敏度和特异性-研究组研究组nEUROIMMUN抗桥粒芯糖蛋白抗桥粒芯糖蛋白3 ELISA阳性阳性寻常型天疱疮寻常型天疱疮7171(100%)落叶型天疱疮落叶型天疱疮500线性线性 IgA皮肤病皮肤病210大疱性类天疱疮大疱
16、性类天疱疮481(2.1%)健康健康献血献血者者4011(0.2%)特异性特异性47099.6%Patient 1Patient 2抗桥粒芯糖蛋白抗桥粒芯糖蛋白 ELISA-治疗监测治疗监测-抗桥粒芯糖蛋白抗桥粒芯糖蛋白1抗桥粒芯糖蛋白抗桥粒芯糖蛋白3小结小结-1-抗抗BP180-NC16A-4X ELISA 对大疱性类天疱疮特异性自对大疱性类天疱疮特异性自身抗体检测具有敏感和高特异性。身抗体检测具有敏感和高特异性。治疗期间重复检测抗体水平可评估疗效。治疗期间重复检测抗体水平可评估疗效。.小结小结-2-抗桥粒芯糖蛋白抗桥粒芯糖蛋白 1 ELISA 和抗桥粒芯糖蛋白和抗桥粒芯糖蛋白3 ELISA 是检测是检测抗天疱疮自身抗体抗天疱疮自身抗体IgG的高灵敏度和特异性检测系统的高灵敏度和特异性检测系统。抗桥粒芯糖蛋白抗桥粒芯糖蛋白1和和3抗体水平与疾病的严重程度和活动性及抗体水平与疾病的严重程度和活动性及治疗效果相关。治疗效果相关。
