1、自动血凝仪自动血凝仪（automated coagulation analyzer）的检测原理的检测原理第三章第三章（一）凝固法（一）凝固法定量加取试剂、提供定量加取试剂、提供370.5的反应温度的反应温度血浆血浆血浆凝固（反应终止）血浆凝固（反应终止）试剂试剂反反应应槽槽用于测定血浆凝固时间用于测定血浆凝固时间散射比浊：散射比浊：散射光强度散射光强度透射比浊：透射比浊：吸光度大小吸光度大小1.比浊法比浊法均增大均增大2.电流法电流法(钩法钩法)连通连通断开断开连通连通3.3.磁珠法磁珠法(粘度法粘度法)电钩法与磁珠法的优点？电钩法与磁珠法的优点？（二）生物化学法：（二）生物化学法：（过量）（
2、过量）产色物质产色物质-底物底物+酶酶 产色物质产色物质（显色）（显色）水解水解1.酶（活化凝血因子）的检测：酶（活化凝血因子）的检测：用于测定凝血因子（酶原）、活化凝血因子用于测定凝血因子（酶原）、活化凝血因子（酶）及酶抑制物（酶）及酶抑制物（AT、抗纤溶酶）的活性。、抗纤溶酶）的活性。2.酶原（凝血因子）的检测：酶原（凝血因子）的检测：3.酶抑制物的检测：酶抑制物的检测：（过量）（过量）激活剂激活剂+酶原酶原 （过量）（过量）产色物质产色物质-底物底物+酶酶 产色物质产色物质（显色）（显色）水解水解 酶抑制物酶抑制物+（过量、定量）（过量、定量）酶酶 （过量）（过量）产色物质产色物质-底物
3、底物+（剩余）（剩余）酶酶产色物质产色物质（显色）（显色）水解水解（三）免疫学方法（三）免疫学方法1 1透射比浊法透射比浊法2 2散射比浊法散射比浊法3 3胶乳比浊法胶乳比浊法抗原抗原 +抗体抗体 抗原抗体复合物抗原抗体复合物 浊度增加浊度增加散射光、吸光度增加散射光、吸光度增加胶乳颗粒胶乳颗粒用于检测凝血因子、酶抑制物的含量。用于检测凝血因子、酶抑制物的含量。凝血功能检测试验的检测前质量控制：凝血功能检测试验的检测前质量控制：停用有影响的药物一周以上停用有影响的药物一周以上(抗凝治疗监测者除外抗凝治疗监测者除外)抗凝剂：抗凝剂：109mmol/L109mmol/L的枸橼酸钠；抗凝比：的枸橼酸
4、钠；抗凝比：1 19 9止血带使用时间要短，采血应顺利，无凝血、溶血止血带使用时间要短，采血应顺利，无凝血、溶血容器：真空采血管、塑料管、硅化玻璃管及注射器容器：真空采血管、塑料管、硅化玻璃管及注射器标本储存：标本储存：4 41010，2h2h；(常温、不超过常温、不超过2h)2h)凝血功能检测试验的检测前质量控制：凝血功能检测试验的检测前质量控制：凝血弹性图仪第四章凝血弹性图（凝血弹性图（Thrombelastography,TEG）（Thrombelastograph Coagulation Analyzer，TEG）一种能够动态监测整个凝血一种能够动态监测整个凝血过程的分析仪。主要用于对
5、过程的分析仪。主要用于对凝血和纤溶全过程及血小板凝血和纤溶全过程及血小板功能进行全面检测（功能进行全面检测（特别是特别是术中能简化凝血功能障碍的术中能简化凝血功能障碍的诊断）诊断），并指导成份输血。，并指导成份输血。19481948年由德国人年由德国人HarterHarter发明发明19801980年代，开始广泛用于临床年代，开始广泛用于临床指导术中输血指导术中输血取得取得了良好效果，现已成为当今了良好效果，现已成为当今围术期监测凝血功能围术期监测凝血功能的最重要指标。的最重要指标。1995-19961995-1996年，开始在心脏外科使用。目前以年，开始在心脏外科使用。目前以TEGTEG为主
6、要监测手段的为主要监测手段的体外循环术中凝血监测体外循环术中凝血监测方方案已经在世界上案已经在世界上4040多个国家使用。多个国家使用。20042004年，抗血小板药物疗效监测的年，抗血小板药物疗效监测的血小板图试验血小板图试验PlateletMappingPlateletMapping上市，为临床带来了快速、准确上市，为临床带来了快速、准确的的监测血小板聚集功能监测血小板聚集功能的技术。的技术。承载血标本的测试杯以承载血标本的测试杯以445的角度和的角度和每每10秒一周的速度均速转动，一旦血栓秒一周的速度均速转动，一旦血栓形成，置于血标本检测杯中的金属探针形成，置于血标本检测杯中的金属探针受
7、到标本形成的切应力作用，随之出现受到标本形成的切应力作用，随之出现左右旋动，金属针在旋动过程中由于切左右旋动，金属针在旋动过程中由于切割磁力线而产生电流，给电脑软件处理割磁力线而产生电流，给电脑软件处理后，便形成后，便形成TEG曲线。曲线。（一）（一）R时间时间1、从检测开始到第一块纤维蛋白凝块形成之间的、从检测开始到第一块纤维蛋白凝块形成之间的一段潜伏期，是凝血因子依次激活的时间，反映一段潜伏期，是凝血因子依次激活的时间，反映凝血因子（凝血因子（Fg除外）除外）与与血小板血小板PF3的活性。的活性。2、R时间因使用时间因使用抗凝剂抗凝剂或或凝血因子、血小板异常凝血因子、血小板异常而延长，因血
8、液呈高凝状态而缩短。而延长，因血液呈高凝状态而缩短。（二）（二）K时间时间 （R+K正常为正常为1012min）1.从从R时间终点至描记图幅度达时间终点至描记图幅度达20mm所需的时间；所需的时间；2.主要与主要与Fg、其它凝血因子和、其它凝血因子和PF3活性活性有关，抑制有关，抑制它们活性的抗凝剂能延长它们活性的抗凝剂能延长K。（三）（三）角度角度1.从血凝块形成点至描记图最大曲线弧度作切线与从血凝块形成点至描记图最大曲线弧度作切线与水平线的夹角，正常为水平线的夹角，正常为50 60。2.角度与角度与K时间密切相关，影响因素相同。时间密切相关，影响因素相同。3.角度不受极其低凝状态的影响，较
9、角度不受极其低凝状态的影响，较K时间更全面时间更全面（四）（四）A（A30）1、是任一时刻曲线两点间的扫描宽度，是血凝块、是任一时刻曲线两点间的扫描宽度，是血凝块强度或弹性函数，强度或弹性函数，A值用单位值用单位mm来计量；来计量；2、MA值在确定前与值在确定前与A值相等；值相等；3、MA值确定后值确定后A值测量血凝块溶解的信息。值测量血凝块溶解的信息。（五）最大幅度（五）最大幅度MA1.正常值为正常值为5060mm。2.MA反映了正在形成的血凝块的最大强度或硬反映了正在形成的血凝块的最大强度或硬度及血凝块形成的稳定性；度及血凝块形成的稳定性；3.主要受主要受PLT及及Fg、F活性的影响，活性
10、的影响，PLT的作用要比的作用要比Fg大。大。（六）（六）TMA时间（时间（time to MA）1.从凝血开始至从凝血开始至MA值确定所需用的时间值确定所需用的时间2.TMA包含血凝块的形成速率，评估形成稳定包含血凝块的形成速率，评估形成稳定血凝块所需用的时间。血凝块所需用的时间。（七）（七）CL301.测量在测量在MA值确定后值确定后30分钟内血凝块溶解剩余分钟内血凝块溶解剩余的百分比。的百分比。2.CL30=（A30/MA）100%3.CL3085%意示处于高纤溶状态，即纤溶亢意示处于高纤溶状态，即纤溶亢进；应使用抗纤溶药来纠正。进；应使用抗纤溶药来纠正。（八）（八）LY301.MA值后
11、值后30分钟血凝块幅度减少的区域面积；分钟血凝块幅度减少的区域面积；2.LY307.5%意示处于高纤溶状态，应使用抗意示处于高纤溶状态，应使用抗纤溶药来纠正。纤溶药来纠正。LY30上=85%LY30下=15%（九）（九）TTL1、TTL=Time to lysis 溶解时间溶解时间2、指从、指从MA确定后，曲线幅宽收窄至确定后，曲线幅宽收窄至2mm时所时所经过的时间经过的时间 高岭土高岭土高岭土高岭土 ACT其它凝血因子其它凝血因子+PF3凝血因子凝血因子+PF3+FgFb+F+PLTFb+F+PLT纤溶期纤溶期R凝血反应时间凝血反应时间K血细胞凝集块形成时间血细胞凝集块形成时间血细胞凝集块形
12、成速率血细胞凝集块形成速率MA最大振幅最大振幅A30最大振幅后最大振幅后30min的振幅的振幅LY30MA后后30min振幅减小百分率振幅减小百分率CL30MA后后30min血凝块溶解剩余血凝块溶解剩余%TEG常用参数常用参数方法方法R(r)K(k)TMA(m)MA(ma)EMX(m)minminminmm自然自然全血全血1016 5103545455580130全血全血复钙复钙48242535455580135血浆血浆复钙复钙481320305065105180正常正常TEG图图凝血因子缺乏与低凝血因子缺乏与低Fg的的TEG高凝状态高凝状态TEG纤溶亢进纤溶亢进TEGTEG检测与常规实验室检
13、测的区别检测与常规实验室检测的区别 操作方便性操作方便性简单，易学。一个样本，简单，易学。一个样本，同种试剂，床边可完成。同种试剂，床边可完成。操作复杂，多种样本，不同的操作复杂，多种样本，不同的试剂，必须在实验室进行。试剂，必须在实验室进行。监测范围监测范围凝血和纤溶连续的全过程凝血和纤溶连续的全过程 凝血或纤溶过程中的一个点或凝血或纤溶过程中的一个点或部分时程部分时程 血样形式血样形式不须处理，全血、血浆、不须处理，全血、血浆、富血小板血浆等都可富血小板血浆等都可须处理血样，以血浆或特定血须处理血样，以血浆或特定血样为主样为主 结果结果定性伴定量的结果，电脑定性伴定量的结果，电脑可自动生成多种结果。可自动生成多种结果。多为定量结果，仪器自动生成多为定量结果，仪器自动生成部分结果，结果单一。部分结果，结果单一。报告报告有初步诊断功能，提示医有初步诊断功能，提示医师治疗方案师治疗方案 多为数值，没有诊断建议，医多为数值，没有诊断建议，医师需要自行判断师需要自行判断时间时间15-2015-20分钟分钟 每个指标的检测时间不一样每个指标的检测时间不一样 参数参数为国际标准化参数为国际标准化参数 多数非国际标准化多数非国际标准化DIC诊断诊断快速，早期，有诊断提示快速，早期，有诊断提示需较多实验室指标，不能提供需较多实验室指标，不能提供诊断提示，需医师综合判断诊断提示，需医师综合判断
